KATA PENGANTAR

Puji syukur atas nikmat dan karunia Tuhan Yang Maha Esa, sehingga penulis dapat
menyelesaikan laporan praktikum Mikrobiologi peternakan ini dengan baik. Rasa terimakasih
yang sebesar-besarnya penulis sampaikan kepada seluruh jajaran dosen pengampu mata
kuliah mikrobiologi Universitas Brawijaya beserta tim asisten prakrikum yang telah
memberikan petunjuk dan membimbing dalam pelaksanaan praktikum sampai penulisan
laporan praktikum ini. Laporan praktikum ini penulis selesaikan dalam rangka memenuhi
tugas praktikum pada mata kuliah Mikrobiologi Akuakultur. Laporan praktikum ini disusun
berdasarkan hasil praktikum yang dilaksanakan di Laboratorium Universitas Brawijaya.
Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan laporan ini, masih terdapat kesalahan-kesalahan
dalam penulisannya. Oleh karena itu, penulis sangat mengharapkan kritik dan saran yang
membangun. Selain itu, dengan laporan penulis juga mengharapkan ada banyak manfaat bagi
kita semua untuk menambah ilmu pengetahuan.

i
DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR .......................................................................................................i
DAFTAR ISI ......................................................................................................................ii

TEKNIK ASEPTIK ..........................................................................................................1

BAB I MATERI ..................................................................................................................2
1.1 Teknik Aseptik ..................................................................................................2
1.2 Teknik Sterilisasi ............................................................................................... 2
1.3 Auto Klaf ...........................................................................................................2
BAB II HASIL PENGAMATAN .......................................................................................5
BAB III PEMBAHASAN ...................................................................................................6
BAB IV PENUTUP .............................................................................................................7
4.1Kesimpulan .........................................................................................................7
4.2 Saran ..................................................................................................................7
DAFTAR PUSTAKA ..........................................................................................................8
DOKUMENTASI ................................................................................................................9
LAMPIRAN ........................................................................................................................ 10

MEDIA PERTUMBUHAN MIKRO ...............................................................................12

BAB I MATERI ..................................................................................................................13
1.1 Pepton ................................................................................................................13
1.2 Agar ...................................................................................................................13
BAB II HASIL PENGAMATAN .......................................................................................14
BAB III PEMBAHASAN ...................................................................................................15
BAB IV PENUTUP .............................................................................................................16
4.1 Kesimpulan ........................................................................................................16
4.2 Saran ..................................................................................................................16
DAFTAR PUSTAKA ..........................................................................................................17
DOKUMENTASI ................................................................................................................18
LAMPIRAN ........................................................................................................................ 19

PENANAMAN INOKULAN ............................................................................................

BAB I MATERI ..................................................................................................................
1.1 Pour Plate (PP) ..................................................................................................
1.2 Spread Plate (SP) ...............................................................................................
1.3 Streak Plate (STP) .............................................................................................
1.4 Agar Tegak(AT) ................................................................................................
1.5 Agar Miring (AM) .............................................................................................
BAB II HASIL PENGAMATAN .......................................................................................
BAB III PEMBAHASAN ...................................................................................................
BAB IV PENUTUP .............................................................................................................
4.1 Kesimpulan ........................................................................................................
4.2 Saran ..................................................................................................................
DAFTAR PUSTAKA ..........................................................................................................
DOKUMENTASI ................................................................................................................
LAMPIRAN ........................................................................................................................
ii
SIFAT-SIFAT KOLONI BAKTERI ...............................................................................
BAB I MATERI ..................................................................................................................
1.1 Pengertian Bakteri .............................................................................................
1.2 Sifat Bakteri .......................................................................................................
1.3 Macam Macam Bentuk Koloni Bakteri .............................................................
BAB II HASIL PENGAMATAN .......................................................................................
BAB III PEMBAHASAN ...................................................................................................
BAB IV PENUTUP .............................................................................................................
4.1 Kesimpulan ........................................................................................................
4.2 Saran ..................................................................................................................
DAFTAR PUSTAKA ..........................................................................................................
DOKUMENTASI ................................................................................................................
LAMPIRAN ........................................................................................................................

MATERI SIFAT KOLONI KHAMR ..............................................................................

BAB I MATERI ..................................................................................................................
1.1 Pengertian Khamir .............................................................................................
1.2 Sifat Khamir ......................................................................................................
1.3 Ciri-Ciri Khamir Dan Contohnya ......................................................................
BAB II HASIL PENGAMATAN .......................................................................................
BAB III PEMBAHASAN ...................................................................................................
BAB IV PENUTUP .............................................................................................................
4.1 Kesimpulan ........................................................................................................
4.2 Saran ..................................................................................................................
DAFTAR PUSTAKA ..........................................................................................................
DOKUMENTASI ................................................................................................................
LAMPIRAN ........................................................................................................................

SIFAT KOLONI KAPANG..............................................................................................

BAB I MATERI ..................................................................................................................
1.1 Pengertian Kapang.............................................................................................
1.2 Sifat Kapang ......................................................................................................
1.3 Ciri Ciri Kapang Dan Contohnya ......................................................................
BAB II HASIL PENGAMATAN .......................................................................................
BAB III PEMBAHASAN ...................................................................................................
BAB IV PENUTUP .............................................................................................................
4.1 Kesimpulan ........................................................................................................
4.2 Saran ..................................................................................................................
DAFTAR PUSTAKA ..........................................................................................................
DOKUMENTASI ................................................................................................................
LAMPIRAN ........................................................................................................................

MATARI ENUMERASI ...................................................................................................

BAB I MATERI ..................................................................................................................

1.1 Enumerasi (Pengertian, Macam Macam, Syarat) ..............................................

iii
 1.2 Standart Plate Count (Pengertian, Syarat, Rumus) ............................................
1.3 Haemocytometer (Pengertian, Jenis, Rumus)....................................................
BAB II HASIL PENGAMATAN .......................................................................................
BAB III PEMBAHASAN ...................................................................................................
BAB IV PENUTUP .............................................................................................................
4.1 Kesimpulan ........................................................................................................
4.2 Saran ..................................................................................................................
DAFTAR PUSTAKA ..........................................................................................................
DOKUMENTASI ................................................................................................................
LAMPIRAN ........................................................................................................................

PEWARNAAN GRAM .....................................................................................................

BAB 1 MATERI..................................................................................................................
1.1 Pengertian Bakteri Gram Dan Tujuan ...............................................................
1.2 Perbedaan Gram Positif Dan Negatif ................................................................
1.3 Media Yang Digunakan (Pewarna Dan Fungsinya) ..........................................
BAB II HASIL PENGAMATAN .......................................................................................
BAB III PEMBAHASAN ...................................................................................................
BAB IV PENUTUP .............................................................................................................
4.1 Kesimpulan ........................................................................................................
4.2 Saran ..................................................................................................................
DAFTAR PUSTAKA ..........................................................................................................
DOKUMENTASI ................................................................................................................
LAMPIRAN ........................................................................................................................

SLIDE CULTURE.............................................................................................................
BAB I MATERI ..................................................................................................................
1.1 Pengertian Dan Tujuan Slide Culture ................................................................
1.2 Prosedur (Pda Padat Dan Cair) ..........................................................................
BAB II HASIL PENGAMATAN .......................................................................................
BAB III PEMBAHASAN ...................................................................................................
BAB IV PENUTUP .............................................................................................................
4.1 Kesimpulan ........................................................................................................
4.2 Saran ..................................................................................................................
DAFTAR PUSTAKA ..........................................................................................................
DOKUMENTASI ................................................................................................................
LAMPIRAN ........................................................................................................................

iv
TEKNIK ASEPTIK & STERILISASI

1
 BAB I
MATERI

1.1 TEKNIK ASEPTIK

Suatu usaha untuk mencegah kontaminasi silang mikroorganisme pada alat atau bahan.
Contoh: Alkhol 70%, gloves, masker, jas lab, Bunsen.

1.2 TEKNIK STERILISASI

Merupakan suatu proses untuk membunuh mikroorganisme pada alat dan bahan.
Metode sterilisasi :
1. Metode fisik, menggunakan pemanasan. Contohnya : autoklaf, sinar uv, laminar
air flow, dan oven.
2. Metode mekanik, menggunakan filtrasi. Contohnya filter porsilen berukuran 0,2
mm.
3. Secara kimia, contohnya disinfektan secara besar yaitu fungigasi dan secara kecil
menggunakan alcohol 70% untuk menghambat pertumbuhan mikroba.

1.3 AUTOKLAF
Adalah alat yang digunakan untuk sterilisasi secara fisik.

Prinsp kerja autoklaf menggunakan uap panas bertekanan tinggi yaitu1,5 hingga 2 ATM
dengan waktu 15-20 menit (1,5 ATM untuk 20 menit dan 2 ATM untuk 15 menit.)

Bagian-Bagian autoklaf:

1. Bagian Atas.(kepala)

a. Manometer : petunjuk penggunaan autoklaf

b. Thermometer : penunjuk suhu autoklaf
c. Pengatur tekanan : mengatur tekanan autoklaf
d. Katup uap manual : mengeluarkan uap dari dalam autoklaf selama proses
sterilisasi secara manual
e. Katup uap otomatis : mengeluarkan uap dari dalam autoklaf selama proses
sterilisasi secara otomatis.
f. Penutup autoklaf : menutup tabung autoklaf
g. Pegangan : untuk membuka atau menutup autoklaf

2. Bagian Tengah. (badan)

2
 a. Sarangan : tempat meletakkan alat dan bahan yang akan disterilisasi.
b. Heater : sumber panas autoklaf ( didalam autoklaf, dibawah sarangan) aquadest
untuk sterilisasi harus menutupi heater tapi dibawah sarangan.
c. Pengunci autoklaf : mengunci autoklaf jika siap dilakukan sterilisasi.
d. Ventilasi : menjaga suhu lapisan luar tabung autoklaf tetap dingin saat dipegang
dan mengatur sirkulasi udara.
e. Lampu indicator merah : indicator akan menyala jika listrik sudah masuk ke
autoklaf.
f. Lampu indicator hijau : indicator akan menyala jika sterilisasi sedang berlangsung.
g. Tombol darurat : digunakan saat keadaaan darurat. Ketika katup uap tidak
berfungsi.
h. Timer : mengatur waktu lama sterilisasi.
i. Saklar : menyalakan dan mematikan autoklaf
j. Kabel : penhubung autoklaf dengan sumber listrik.
k. Kran : tempat keluarnya aquadest
l. Tabung luar : untuk menjaga panas tabung
m. Tabung dalam : untuk tempat sterilisasi.
3. Bagian Bawah ( kaki).

a. Roda : mempermudah saat memindahkan autoklaf.

Cara penggunaan autoklaf:

1. Dipastikan autoklaf dalam keadaan mati, bersih dan siap digunakan.

2. Dibuka penutup autoklaf.
3. Dibuka/diangkat sarangan
4. Dituang aquadest hingga menutupi heater (posisi aquadest sedikit dibawah
sarangan)
5. Diletakkan kembali sarangan.
6. Diletakkan alat dan bahan yang akan disterilisasi di atas sarangan ( alat dan bahan
yang mempunyai luas permukaan besar dibawah)
7. Ditutup autoklaf dan dikunci.
8. Dirapatkan katup uap manual
9. Diatur pengatur tekanan 1,5 sampai 2 ATM
10. Dihubungkan kabel ke listrik
11. Diatur waktu 15-20 menit

3
12. Ditekan tombol on, lampu akan menyala berwarna merah
13. Autoklaf akan melakukan sterilisasi
14. Lampu indicator akan menyala berwarna merah dan hijau
15. Proses sterilisasi selesai, indicator lampu berwarna merah
16. Diangkat pengatur tekanan, dimatikan autoklaf
17. Dilonggarkan katup manual, ditunggu suhunya turun
18. Dibuka pengunci autoklaf, dibuka tutup autoklaf
19. Diambil alat dan bahan yang sudah disterilisasi
20. Dibuang aquadest melalui kran.

4
 BAB II
HASIL PENGAMATAN

GAMBAR AUTOKLAF NAMA BAGIAN AUTOKLAF

1. Tombol pengatur waktu mundur (timer)

2. Katup pengeluaran uap
3. pengukur tekanan
4. kelep pengaman
5. Tombol on-off
6. Termometer
7. Lempeng sumber panas
8. Aquades (dH2O)
9. Sekrup pengaman
10. batas penambahan air

TEKANAN (ATM) : 1 ATM

SUHU ( oC) : 121^C
WAKTU ( MENIT) : 15 menit

5
 BAB III
PEMBAHASAN

Autoklaf adalah alat untuk mensterilkan berbagai macam alat dan bahan yang
digunakan dalam mikrobiologi menggunakan uap air panas bertekanan. Tekanan yang
digunakan pada umumnya 15 Psi atau sekitar 2 atm dan dengan suhu 121 0C (250 0F). Jadi
tekanan yang bekerja ke seluruh permukaan benda adalah 15 pon tiap inchi2 (15 Psi = 15
pounds per square inch). Lama sterilisasi yang dilakukan biasanya 15 menit untuk 121 0C.
(Marinoand Benjamin, 1986). Dari sumber litelatur tersebut dapat disimpulakn bahwa
pengertian autoklaf sebanding dengan materi pada praktikum yang kami lakukan.
Berdasarkan litelatur jurnal internasional yang kami dapat, menyatakan bahwa suhu
dan tekanan adalah parameter paling penting dari proses sterilisasi menggunakan autoklaf.
Dengan ini sesuai dengan penjelasan materi yang diberikan pada praktikum yang kami
lakukan.

6
 BAB IV
PENUTUP

4.1 KESIMPULAN
1. Autoklaf adalah salah satu alat yang digunakan dalam metode sterilisasi alat dan
bahan pada laboratorium.
2. Autoklaf memiliki berbagai macam bagian- bagian yang fungsional.
3. Temperatur dan tekanan udara adalah prinsip kerja autoklaf.
4.2 SARAN
Dalam pelaksanaan praktikum, seharusnya di pragakan juga bagaimana proses
sterilisasi menggunakan autoklaf.

7
 DAFTAR PUSTAKA

Dippold, M., & Ruckdäschel, H. (2022). Influence of pressure-induced temperature drop on

the foaming behavior of amorphous polylactide (PLA) during Autoclave foaming with
supercritical CO2. The Journal of Supercritical Fluids, 190, 105734.
https://doi.org/10.1016/j.supflu.2022.105734

Kurniawansyah, I. (2016). Penentuan Tingkatan Jaminan Sterilitas pada Autoklaf dengan

Indikator Biologi Spore Strip. Farmaka, 14(1), 59-69.
doi:http://dx.doi.org/10.24198/jf.v14i1.8542

8
DOKUMENTASI

9
LAMPIRAN

10
11
MEDIA PERTUMBUHAN MIKRO

12
 BAB I
MATERI

1.1 PEPTON.
Pepton adalah produk hidrolisis protein hewani atau nabati seperti otot, liver, darah, susu,
casein, lactalbumin, gelatin dan kedelai. Komposisinya tergantung pada bahan asalnya dan
bagaimana cara memperolehnya.

1.2 AGAR.
Agar dapat diperoleh dalam bentuk batangan, granula, atau bubuk dan terbuat dari
beberapa jenis rumput liar. Kegunaannya adalah sebagai pemadat yang pertama kali
digunakan oleh Fraw &Walther Hesse untuk membuat media .
Komposisi PCA dan PDA yaitu :
1. PCA (plate count agar) komposisinya yaitu casein, enzymic hydrolite,yeast
extract, dextrose, dan agar.
2. PDA (Potato Dextrose Agar) komposisinya yaitu agar, dektrosa, dan ekstrak
kentang.

13
 BAB II
HASIL PENGAMATAN

NAMA MEDIA FUNGSI TAKARAN/GRAM

Pepton Sebagai media pengencer 1gram/ 1L aquadest

PCA (Plate Count Agar) Sebagai media 22,5 gram/ 1L aquadest

pertumbuhan bakteri
PDA (Potato Dextrose Agar) sebagai media 39 gram/ 1L aquadest
pertumbuhan kapang dan
khamir

14
 BAB III
PEMBAHASAN

Mempelajari sifat-sifat yang dimiliki oleh mikroorganisme seperti jamur, penelitian

dapat dilakukan dengan pembiakan melalui media pertumbuhan. Medium merupakan suatu
bahan yang terdiri atas campuran zat makanan (nutrient) yang berfungsi sebagai tempat
tumbuh mikroba. Suatu media dapat menumbuhkan mikroorganisme dengan baik harus
memenuhi persyaratan antara lain: media harus mempunyai pH yang sesuai, media tidak
mengandung zat-zat penghambat, media harus steril, dan media harus mengandung semua
nutrisi yang mudah digunakan mikroorganisme (Jutono, 1980). Berdasarkan kutipan dari
litelatur tersebut sudah sesuai dengan pengertian media yang dijelaskan oleh pemateri
praktikum.
Dari jurnal internasional “Journal of Microbiological Methods” menyatakan bahwa
bakteri tertentu dapat hidup dengan optimal sesuai dengan jenis media yang digunakan. Hal
tersebut membuktikan bahwa komposisi agar sangat penting sehingga bakteri yang ditanam
dapat tumbuh dengan optimal.

15
 BAB IV
PENUTUP

4.1 KESIMPULAN
1. Media adalah tempat untuk inokulan akan hidup setelah ditanamkan.
2. Ada berbagai macam media sesuai dengan takaran komposisi dan fungsi.
3. Tidak semua inokulan dapat hidup pada agar yang tidak sesuai
4.2 SARAN
Dalam prakatikum, seharusnya praktikan memperagakan untuk membuat dan menakar
komposisi yang ada dalam agar.

16
 DAFTAR PUSTAKA
Byrd, P. M., Fallico, V., Tang, P., & Wong, C. (2022). Novel microaerobic agar plate method
delivers highly selective and accurate enumeration of probiotic lactobacilli in freeze-
dried blends containing bifidobacteria. Journal of Microbiological Methods, 195,
106451. https://doi.org/10.1016/j.mimet.2022.106451

Wantini, S., & Octavia, A. (2018). Perbandingan Pertumbuhan Jamur Aspergillus flavus Pada
Media PDA (Potato Dextrose Agar ) dan Media Alternatif dari Singkong (Manihot
esculenta Crantz). Jurnal Analis Kesehatan, 6(2), 625 - 631.
doi:http://dx.doi.org/10.26630/jak.v6i2.788

17
DOKUMENTASI

18
LAMPIRAN

19
20
PENANAMAN INOKULAN

21
 BAB I
MATERI

1.1 POUR PLATE (PP)

Tujuan : menyebarkankan se-sel bakteri pada permukaan agar.
Prosedur :
1. Siapkan cawan steril, tabung pengenceran yang akan ditanam dan media padat yang
masih cair (>45oC).
2. Teteskan 1 ml secara aseptis. Suspensi sel kedalam cawan kosong.
3. Tuangkan media yang masih cair kedalam cawan diputar kemudian dihomogentakan.
1.2 SPREAD PLATE (SP)
Tujuan :untuk menyebarkan suspense bakteri di permukaan agar diperoleh kultur murni.
Prosedur :
1. Ambil suspense cairan sebanyak 0,1 ml dengan pipet ukur kemudian teteskan
dipermukaan agar.
2. Batang L atau batang drugal diambil kemudian disemprot alcohol dan dibakar diatas
Bunsen.
3. Kemudian sebarkan dengan menggosokkan pada permukaan supaya tetesan merata.
4. Batang L yang teralalu panas dapat menyebabkan sel-sel mikroorganisme dapat mati
karena panas.
1.3 STREAK PLATE (STP)
Tujuan : mengisolasi mikroorganisme dari campurannya atau meremajakan kultur ke dalam
medium baru.
Prsedur :
1. Siapkan alat dan bahan
2. Tuangkan PCA 10-15 ml sampai padat
3. Dipijarkan kawat ose bulat pada Bunsen
4. Diambil koloni Bakteri dari faktor pengenceran 1
5. Digoreskan zig-zag pada PCA
1.4 AGAR TEGAK(AT)
Tujuan : untuk menumbuhkan mikroorganisme secara tegak.
Prosedur :
1. Siapkan alat dan bahan
2. Pijarkan kawat ose lurus sampai berwarna merah
3. Tuangkan PDA 7 ml
4. Tusukkan kawat ose sedalam ¾ ke PDA
22
 5. Diambil faktor pengencer 1
1.5 AGAR MIRING (AM)
Tujuan : untuk menumbuhkan, khusunya pada kapang dan khamir dari koloni terbesar ke
yang terkecil.
Prosedur :
1. Siapkan alat dan bahan
2. Pijarkan kawat ose bulat pada bunsen
3. Ditunggu kawat ose bulat hingga merah
4. Diambil kapang dan khamir
5. Digoreskan pada media berisi PDA sebanyak 5 ml membentuk pola zig zag dari
bentuk terkecil hingga terbesar dan tidak boleh putus

23
 BAB II
HASIL PENGAMATAN

SAMPEL METODE ISOLASI HASIL

(+) Jelek
(++) Baik
(+++) Sangat Baik)
Pour plate 10^-4 +
Pour plate 10^-5 ++
Pour plate 10^-6 +++
Spread plate 10^-4

Spread plate 10^-5

Spread plate 10^-6
Streak plate +++
Agar tegak ++
Agar miring +

24
 BAB III
PEMBAHASAN

Pada litelatur jurnal yang kami dapat, penanaman inokulan harus dalam kondisi steril
untuk menghindari terjadinya kontaminasi dari mikroorganisme lain yang yang tidak sengaja
bisa ikut tertanam. Pada jurnal internasional yang kami dapat, ada metode baru yang bertujuan
untuk penghitungan koloni inokulan. Metode ini menggunakan 2 lapis agar untuk
menumbuhkan inokulan.

25
 BAB IV
PENUTUP

4.1 KESIMPULAN

1. Berbagai bentuk media digunakan untuk penanaman mikroorganisme yang sesuai.

2. Sterilisasi adalah faktor penting agar inokulasi tidak terkontaminasi
3. Hasil dari penanaman tergantung prosedur.

4.2 SARAN

Praktikan seharusnya menjalankan prosedur dengan benar agar hasil penanaman dapat
maksimal.

26
 DAFTAR PUSTAKA

Charnock, C. (2021). A simple and novel method for the production of polyethylene
terephthalate containing agar plates for the growth and detection of bacteria able to
hydrolyze this plastic. Journal of Microbiological Methods, 185, 106222.
https://doi.org/10.1016/j.mimet.2021.106222

Sambuaga, M. E., Longdong, S. N. J., & Manoppo, H. (2018). Sensitivitas Ekstrak Tanaman
Kemangi (Ocimum Sactum) TERHADAP Bakteri Aeromonas hydrophila. e-Journal
BUDIDAYA PERAIRAN, 6(1). https://doi.org/10.35800/bdp.6.1.2018.19520

27
DOKUMENTASI

28
LAMPIRAN

29
30
SIFAT-SIFAT KOLONI BAKTERI

31
 BAB I
MATERI

1.1 PENGERTIAN BAKTERI

Merupakan kelompok mikroorganisme bersel satu yang diklasifikasikan pada tingkat
domain.
1.2 SIFAT BAKTERI
Sifat sel bakteri berbeda-beda(menurut strain dan spesiesnya) bila dideteksi dibawah
mikroskop dengan menggunakan preparat hidup dan preparat mati ( awetan atau slide).
1.3 MACAM MACAM BENTUK KOLONI BAKTERI
1. Bulat
2. Tidak teratur
3. Berfilamen
4. Berakar
5. radial

32
 BAB II
HASILPENGAMATAN

2.1 Bentuk pertumbuhan pada agar tegak.

GAMBAR PERTUMBUHAN KOLONI BAKTERI
(AGAR TEGAK)

BENTUK : coccus (bulat)

2.2 Bentuk pertumbuhan pada cawan.

GAMBAR PERTUMBUHAN KOLONI BAKTERI
(CAWAN PETRI)

BENTUK : coccus (bulat)

UKURAN :2cm

33
 BAB III
PEMBAHASAN

Cappuccino & Sherman (1987) menyebutkan bahwa beberapa parameter morfologi

yang dapat digunakan adalah morfologi koloni yang tumbuh dalam medium pertumbuhan dan
morfologi sel yang dapat diamati menggunakan mikroskop dengan perbesaran tertentu.
Parameter morfologi koloni sel dalam medium pertumbuhan yang diamati berupa warna,
bentuk, ukuran dan letak koloni dalam medium. Dengan ini sesuai dengan tujuan pengamatan
yang kami lakukan untuk mengamati bentuk koloni bakteri.

Bersumber pada jurnal internasional yang kami pilih, kultur bakteri yang harus
diamati adalah ukuran dan bentuk koloni yang tumbuh. Hal ini juga sesuai dengan tujuan
pengamatan yang kami lakukan.

34
 BAB IV
PENUTUP

4.1 KESIMPULAN
1. Mikroorganisme memiliki koloni saat tumbuh
2. Koloni bakteri dapat ditentukan dari bentuk dan ukuran koloni
3. Bentuk koloni yang tumbuh memiliki nama julukan masing- masing
4.2 SARAN
Praktikan seharusnya diajarkan langsung mengamati bagaimana bentuk- bentuk koloni
mikroorganisme menggunakan mikroskop.

35
 DAFTAR PUSTAKA

Sabdaningsih, A., Budiharjo, A., and Kusdiyantini, E., 2013. ISOLASI DAN
KARAKTERISASI MORFOLOGI KOLONI BAKTERI ASOSIASI ALGA MERAH
(RHODOPHYTA) DARI PERAIRAN KUTUH BALI. Jurnal Akademika Biologi,
[Online] Volume 2(2), pp. 11-17. Retrieved from:
https://ejournal3.undip.ac.id/index.php/biologi/article/view/18986 [Accessed : 8 Dec.
2022].

Zöllner, R., Cronenberg, T., Kouzel, N., Welker, A., Koomey, M., & Maier, B. (2019). Type
IV pilin post-translational modifications modulate material properties of bacterial
colonies. Biophysical Journal, 116(5), 938–947.
https://doi.org/10.1016/j.bpj.2019.01.020

36
DOKUMENTASI

37
LAMPIRAN

38
39
MATERI SIFAT KOLONI KHAMR

40
 BAB I
MATERI

1.1 PENGERTIAN KHAMIR

Merupakan mikroorganisme yang mudah dijumpai pada produk fermentasi, tanah, air,
jaringan tanaman, daun, bunga, dan buah-buahan.
1.2 SIFAT KHAMIR
sifat sel khamir yang tampak dibawah mikroskop berbeda-beda bila dideteksi memakai
preparat hidup dan preaparta mati.
1.3 CIRI-CIRI KHAMIR DAN CONTOHNYA
1. Uniseluler
2. Memiliki sedikit miselium atau miselium semu
3. Bereproduksi dengan tunas
4. Fakultatif anaerob

41
 BAB II
HASIL PENGAMATAN

2.1 HASIL PENGAMATAN SEL KHAMIR

SEL KHAMIR
UMUR SEL, JAM 24 jam
PEMBESARAN 10x dan 40x
BENTUK SEL uniseluler
MISELIUM Sedikit
TUNAS ada

2.2 HASIL PENGAMATAN KOLONI KHAMIR

Bentuk pertumbuhan agar miring

GAMBAR PERTUMBUHAN KOLONI KHAMIR

10x 40x

42
 BAB III
PEMBAHASAN

Dari jurnal yang gunakan sebagai pembanding, ada sedikit perbedaan bentuk pada
khamir yang tergantung pada jenis khamir apa yang diamati. Namun pada umumnya semua
jenis khamir memiliki sifat koloni yang hampir mirip satu sama lain.

Dari litelatur jurnal internasional yang kami gunakan, koloni khamir bisa tumbuh
dengan berbagai macam bentuk geometri. Khamir juga bisa tumbuh di berbagai macam
bentuk media agar.

43
 BAB IV
PENUTUP

4.1 KESIMPULAN
1. Khamir memiliki berbagai macam bentuk
2. Khamir bisa tumbuh pada berbagai mentuk media agar
4.2 SARAN
Praktikan seharusnya mempraktikan langsung dalam mengamati bentuk koloni khamir

44
 DAFTAR PUSTAKA

Nurcholis, M., Fernando, D., Zubaidah, E., & Maligan, J. M. (2020). Isolasi Dan Identifikasi
Khamir thermotolerant Dan ethanol-tolerant PADA buah lokal Indonesia. Jurnal
Pangan Dan Agroindustri, 8(3), 122–133.
https://doi.org/10.21776/ub.jpa.2020.008.03.2

Vulin, C., Di Meglio, J. M., Lindner, A. B., Daerr, A., Murray, A., & Hersen, P. (2014).
Growing yeast into cylindrical colonies. Biophysical journal, 106(10), 2214–2221.
https://doi.org/10.1016/j.bpj.2014.02.040

45
DOKUMENTASI

46
LAMPIRAN

47
48
SIFAT KOLONI KAPANG

49
 BAB I
MATERI

1.1 PENGERTIAN KAPANG

Kapang merupakan anggota kerajaan fungi yang biasanya tumbuh pada permukaan
makanan yang sudah basi atau teralalu lama tidak diolah.

1.2 SIFAT KAPANG

Sifat sel kapang dibawah mikroskop berbeda beda dan bila dideteksi menggunakan
preparat hidup dan preparat mati

1.3 CIRI CIRI KAPANG DAN CONTOHNYA

1. Multiseluler
2. Memiliki banyak miselium
3. Bereproduksi dengan spora
4. Aerob
CONTOH: Rhizopus sp., Aspergilus sp.

50
 BAB II
HASIL PENGAMATAN

2.1 HASIL PENGAMATAN SEL KHAMIR

SEL KAPANG

10x 40x
UMUR SEL : JAM 24 jam
PEMBESARAN 10x dan 40x
BENTUK SEL Multiseluler
MISELIUM Banyak
SPORA Ada

51
 BAB III
PEMBAHASAN

Kapang akan banyak tumbuh pada media yang banyak mengandung karbohidrat,
seperti PDA yang terbuat dari kentang (Nurhasanah, 2008). Media PDA merupakan media
yang kaya dan mudah dicerna sehingga memudahkan kapang endofit untuk tumbuh (Gandjar
et al, 2006). Pada pengamatan secara mikroskopik hifa tidak bersepta, konidiofor tidak
bercabang, vesikula berbentuk bulat hingga semibulat, vialid terbentuk langsung pada vesikel,
kepala konidia berbentuk radial dan konidia berbentuk bulat. Pengmatan tersebut adalah hasil
dari penelitian dari litelatur dan hasilnya mirip dengan yang kami amati.

Dari litelatur jurnal internasiona, kapang sangat mudah tumbuh di berbagai macam
produk makanan yang kurang steril. Kapang mudah tumbuh pada roti walaupun roti tersebut
tidak terlalu lembab.

52
 BAB IV
PENUTUP

4.3 KESIMPULAN
1. Kapang adalah jamur yang mudah tumbuh pada produk makanan yang kurang
steril.
2. Kapang memiliki berbagai macam bentuk koloni dan dapat diamati dengan
mikroskop.
4.4 SARAN
Dalam praktikum, praktikan seharusnya mengamati langsung sifat koloni kapang
dengan mikroskop agar mendapatkan gambaran langsun

53
 DAFTAR PUSTAKA

Hafsari, A, R., Asterina, Isma. (2013). ISOLASI DAN IDENTIFIKASI KAPANG ENDOFIT
DARI TANAMAN. Jurnal Istek, 7(2).

Ollinger, N., Malachova, A., Sulyok, M., Schütz-Kapl, L., Wiesinger, N., Krska, R., &
Weghuber, J. (2022). Combination of DNA barcoding, targeted metabolite profiling
and multispectral imaging to identify mold species and metabolites in sliced bread.
Future Foods, 6, 100196. https://doi.org/10.1016/j.fufo.2022.100196

54
DOKUMENTASI

55
LAMPIRAN

56
57
MATARI ENUMERASI

58
 BAB I
MATERI

1.1 ENUMERASI (PENGERTIAN, MACAM MACAM, SYARAT)

Enumerasi adalah teknik yang digunakan untuk mengestimasi jumlah mikroorganisme
dalam suatu bahan atau sampel.
Macam macam : penghitungan jumlah bakteri hidup (tidak langsung), perhitungan jumlah
bakteri secara keseluruhan (lansung).
Syarat:
1. Jika terdapat 1 koloni maka dihitung 1.
2. Jika terdapat 2 koloni yang berhimpitan dan bisa dibedakan maka dihitung 2
3. Jika terdapat 2 koloni yang berhimpitan tapi tidak bisa dibedakan maka dihitung 1
4. Jika luas koloni kurang dari ½ cawan maka dihitung.

1.2 STANDART PLATE COUNT(PENGERTIAN, SYARAT, RUMUS)

Merupakan media pertumbuhan bakteri yang biasanya digunakan untuk pemeriksaan
kualitas bahan makanan
Syarat :
1. Satu koloni dihitung satu koloni
2. Dua koloni yang bertumpuk dihitung 1 koloni
3. Beberapa koloni yang berhubungan dihitung 1koloni
4. Dua koloni yang berhimpitan dan masih dibedakan dihitung 2 koloni
5. Koloni yang terlalu besar tidak dihitung
6. Koloni yang besarnya kurang dari setangah luas cawan dihitung 1 koloni
Rumus :

PP = 1/PP X E kol
SP = 1/PP X E kol X 10

Perbandingan : PP dari FP tertinggi/ PPdari FP terendah

1.3 HAEMOCYTOMETER(PENGERTIAN, JENIS, RUMUS)

Merupakan alat yang digunakan untuk menghitung jumlah sel secara langsung.
Jenis :
1. Neubauer
2. Neubauer improved
59
 3. Neubauer improved bright line
4. Bueker
5. Tuerk
Rumus :
KB = ∑ sel X sel/ml
KS = ∑ sel X 2,5 X sel/ml
KK = ∑ sel X 4 X

60
 BAB II
HASIL PENGAMATAN

METODE STANDART
ISOLASI JUMLAH KOLONI PENGENCERAN KE- PLATE
COUNT
10^-4 10^-5 10^-6
POUR PLATE 103 38 9 1 X 10^-6
SAMPEL : Saccharomyces
WAKTU INKUBASI : 24Jam

61
 BAB III
PEMBAHASAN

Angka Paling Mungkin (APM) atau sering disebut dengan Most Probable Number
(MPN) adalah suatu konsep lama yang dikenalkan oleh Mc Crady tahun 1915 yaitu teknik
penghitungan langsung kepadatan mikro-organisme dalam cairan (Cochran 1950). Hal ini
didasarkan pada penerapan teori kemungkinan pada jumlah respon pertumbuhan positif yang
diobservasi pada sejumlah pengenceran standar ketika sampel inokulum ditempatkan kedalam
sejumlah set tabung media kultur. Jumlah tabung positif di setiap pengenceran dapat
menunjukkan perkiraan asli, yaitu konsentrasi murni dari bakteri dalam sampel (Blodgett
2006). Teori tersebut diambil dari jurnal yang menandakan bahwa teknik enumerasi memiliki
jenis penghitungan yang lain.
Pada jurnal internasional yang kami baca, menyatakan bahwa kondisi atau jenis media
penanaman juga mempengaruhi hasil dari perhitungan koloni. Hal ini berarti bahwa
enumerasi yang kami lakukan tidak sepenuhnya sesuai dengan penelitian lainnya karena
banyak faktor lain yang mempengaruhi hasil.

62
 BAB IV
PENUTUP

4.1 KESIMPULAN
1. Enumerasi adalah teknik penghitungan koloni mikrooragnisme
2. Enumerasi memiliki berbagai macam jenis cara dalam menentukan jumlah koloni
3. Enumerasi memiliki berbagai faktor yang membuat penghitungan tidak akurat
4.2 SARAN
Praktikan seharusnya melakukan enumerasi secara langsung pada saat praktikum,
sehingga praktikan bisa menarik kesimpulan yang dipandu langsung oleh asisten.

63
 DAFTAR PUSTAKA

Kurnawati,A., Listyorini, D., Witjoro, A. (2022). Identifikasi dan Enumerasi Escherichia coli
dengan Kombinasi Metode MPN-PCR. THE JOURNAL OF MUHAMMADIYAH
MEDICAL LABORATORY TECHNOLOGIST, 5(1).

Oyeniran, A., Ibrahim, S. A., Gyawali, R., Tahergorabi, R., Zimmerman, T., & Krastanov, A.
(2020). A modified reinforced clostridial medium for the isolation and enumeration of
lactobacillus delbrueckii ssp. Bulgaricus in a mixed culture. Journal of Dairy Science,
103(6), 5030–5042. https://doi.org/10.3168/jds.2019-17894

64
DOKUMENASI

65
 LAMPIRAN

66
67
PEWARNAAN GRAM

68
 BAB 1
MATERI

1.1 PENGERTIAN BAKTERI GRAM DAN TUJUAN

Merupakan prosedur pewarnaan diferensial yang dapat membedakan jenis bakteri
berdasarkan reaksi yang timbul pada struktur dinding sel selama proses pewarnaan.
Tujuannya untuk membedakan reaksi gram positif, gram negative dan gram variable.

1.2 PERBEDAAN GRAM POSITIF DAN NEGATIF

Bakteri gram positif mempunyai kemampuan menahan zat warna Kristal ungu sedangkan
bakteri gram negative, tidak, hal inidisebabkan oleh perbedaan sifat dinding sel bakteri.

1.3 MEDIA YANG DIGUNAKAN (PEWARNA DAN FUNGSINYA)

1. Methelie blue untuk pewarna utama (primer)
2. Iodine untuk pengikat pewarna utama
3. Aquadest untuk pembilas
4. Alcohol 95% untuk melarutkan lipid dan mendehidrasikan protein
5. Safranin untuk pewarna kedua (sekunder)

69
 BAB II
HASIL PENGAMATAN

GAMBAR HASIL PENGAMATAN

PEMBESARAN : PEMBESARAN :
BAKTERIGRAM : hasil gagal karena BAKTERIGARAM : hasil gagal karena
hanya terindikasi warna merah hanya terindikasi warna merah

70
 BAB III
PEMBAHASAN

Dari hasil penelitian yang dilakukan pada media Mac Conckey Agar (MCA) sebanyak
10 sampel di 5 titik pada ruangan Komponen Darah ditemukan pertumbuhan bakteri 100%
yaitu bakteri gram negatif saja, karena media MCA ini merupakan media pertumbuhan
selektif (hanya pertumbuhan bakteri Gram Negatif) dan menghambat pertumbuhan bakteri
Gram Positif (Waworuntu, 2015). Menurut putri et al.,(2018) Identifikasi mikroskopis
dilakukan dengan melakukan pewarnaan Gram pada koloni yang tumbuh di media, dengan
pengecatan gram maka diantara berbagai macam bakteri yang dicat, ada yang dapat menahan
zat warna ungu (kristal violet) meskipun telah didekolorisasi dengan alkohol atau aseton.
Bakteri yang memberiwarna ungu dinamakan bakteri Gram positif. Sebaliknya, bakteri yang
tidak dapat menahan zat warna setelah dekolorisasi dengan alkohol dengan ciri berwarna
merah. Bakteri yang memperlihatkan reaksi semacam ini dinamakan bakteri Gram negatif.
Hal ini menunjukan bahwa pewarnaan gram dapat dilakukan secara langsung pada media
yang ditanamkan namun tetap menunujukan hasil yang sama.
Dari sumber jurnal internasional yang kami baca menyatakan bahwa pewarnaan gram
merupakan metode untuk merubah warna dinding sel mikroorganisme untuk menentukan
sifat- sifatnya. Bakteri gram positif atau negatif tidak sepenuhnya berada pada koloni yang
berbeda. Bakteri gram positif bisa bercampur pada bakteri gram negatif, begitu juga
sebaliknya.

71
 BAB IV
PENUTUP

4.3 KESIMPULAN
1. Pewarnaan gram bertujuan untuk mewarnai dinding sel bakteri sehingga dapat
ditentukan sifat- sifatnya.
2. Bakteri gram positif atau negatif dapat membaur menjadi satu.
3. Ada media penanaman tertentu untuk menumbuhkan bekteri gram positif atau
negatif saja.
4.4 SARAN
Hasil pewarnaan gram seharusnya ditunjukan langsung pada praktikan sehingga
praktikan mampu menarik kesimpulan dari pewarnaan gram.

72
 DAFTAR PUSTAKA

Huang, W.-Y., Lee, M.-S., Lin, L.-M., & Liu, Y.-C. (2020). Diagnostic performance of the
sputum gram stain in predicting sputum culture results for critically ill pediatric
patients with pneumonia. Pediatrics & Neonatology, 61(4), 420–425.
https://doi.org/10.1016/j.pedneo.2020.03.014

rahmatullah, widia. (2021). A AIR BACTERIA INDENTIFICATION BY USING GRAM

STAINING: IDENTIFIKASI BAKTERI UDARA MENGGUNAKAN TEKNIK
PEWARNAAN GRAM. JURNAL ILMU KESEHATAN BHAKTI SETYA
MEDIKA, 6(2), 83-91. Retrieved from http://www.jurnal.poltekkes-
bsi.ac.id/index.php/bsm/article/view/62

73
DOKUMENTASI

74
LAMPIRAN LITERATUR

75
76
SLIDE CULTURE

77
 BAB I
MATERI

1.1 PENGERTIAN DAN TUJUAN SLIDE CULTURE

Merupakan pengamatan mikroskopis tidak langsung mengidentifikasi isolate fungsi
berdasarkan hifa yang terbentuk. bertujuan untuk mengamati pertumbuhan kapang.

1.2 PROSEDUR (PDA PADAT DAN CAIR)

PDA PADAT:
1. Siapkan alat dan bahan
2. Diletakkan kertas saring diatas cawan petri
3. Diletakkan penyangga diatas kertas saring
4. Diletakkan objek glass diatas penyangga
5. Diletakkan PDA padat berbentuk kubus berukuran 1x1x1 cm diatas objek glass
6. Lalu dipijarkan kawat ose lurus diatas Bunsen
7. Diambil koloni kapang ditusukkan dikeempat sisi PDA padat
8. Ditutup dengan cover glass
9. Ditetesi kertas saring dengan menggunakan aquadest biar lembab
10. Diinkubasi selama 3 x 24 jam
11. Diamati pertumbuhan kapang
PDA CAIR :
1. Disiapkan alat dan bahan
2. Diletakkan kertas saring diatas cawan petri
3. Diletakkan penyangga diatas kertas saring
4. Diletakkan objek glass diatas penyangga
5. Diletakkan satu tetes PDA cair diatas objek glass
6. Dipijarkan kawat ose bulat diatas Bunsen
7. Diambil koloni kapang dan diletakkan diatas PDA cair
8. Ditutup dengan cover glass
9. Ditetesi kertas saring dengan aquadest supaya lembab
10. Diinkubasi selama 3 x24 jam
11. Diamati pertumbuhan kapang

78
 BAB II
HASIL PENGAMATAN

GAMBAR HASIL PENGAMATAN

VERSI : Padat VERSI : Cair

WAKTU : 24 Jam WAKTU : 24 Jam

79
 BAB III
PEMBAHASAN

Warna koloni dari isolat jamur RS-2 adalah hijau tua. Sedangkan bentuk koloni dari
jamur RS-2 adalah bulat dan membentuk koloni yang memusat. Jamur dengan morflogi
makroskopik seperti jamur RS-2 belum pernah dilaporkan dari tumbuhan A. paniculata. Isolat
tunggal hasil isolasi ini kemudian diidentifikasi secara mikroskopis melalui metode
pewarnaan di Laboratorium Kesehatan Daerah (Labkesda) Padang. Pengamatan secara
mikroskopis dilakukan dengan melakukan pewarnaan jamur endofitik menggunakan metode
slide culture. Metode ini digunakan untuk mempermudah dalam melihat ciri-ciri mikroskopis
dari jamur sehinga jamur lebih mudah dapat teridentifikasi. Secara mikroskopis isolat RS-2
memiliki ciri-ciri hifa bercabang dan berwarna biru setelah dilakukan pewarnaan dengan
methylene blue. Penelitian ini sebanding dengan pengamatan yang kami lakukan.

Dari jurnal internasional yang di ambil menyatakan bahwa metode slide kuktur
membawa hasil pertumbuhan dengan baik sehingga memperjelas pengamatan. Slide kultur
tidak mengakibatkan kontaminasi mikroorganisme lain dari rongga udara.

80
 BAB IV
PENUTUP

4.1 KESIMPULAN
1. slide kultur adalah metode untuk mengamati pertumbuhan kapang
2. slide kultur dapat digunakan untuk menentukan ciri hifa 4
4.1 SARAN
Praktikan seharusnya mengamati langsung bagaimana slide kultur dijalankan sehingga
praktikan mampu mengidentifikasi hasil pengamatan dan menarik kesimpulan.

81
 DAFTAR PUSTAKA

Riga, R., Suryelita., Etika, B,S., Suhanah, R,A., Al Khairi, V,A. (2022) AKTIVITAS
ANTIBAKTERI JAMUR ENDOFITIK RS-2 YANG DIISOLASI DARI
TUMBUHAN SAMBILOTO (Andrographis paniculata). Jurnal Zarah,10(1).

Prakash, P. Y., & Bhargava, K. (2016). A modified micro chamber agar spot slide culture
technique for microscopic examination of filamentous fungi. Journal of
Microbiological Methods, 123, 126–129. https://doi.org/10.1016/j.mimet.2016.02.015

82
DOKUMENTASI

83
LAMPIRAN LITERATUR

84
85