Pemeriksaan

Patologi Anatomi
dr. Muhammad In’am Ilmiawan, M.Biomed
27 Desember 2015
Pemeriksaan Laboratorium

SEDIAAN MIKROSKOPIS
Pembuatan Sediaan Mikroskopis

Tahapan
1. Tissue processing
2. Pemotongan
3. Pulasan/pengecatan
1. Tissue processing
1. Tissue processing
1. Fiksasi
2. Dehidrasi
3. Clearing
4. Infiltrating
5. Embedding
1. Tissue processing
1. Fiksasi • Stabilisasi protein
2. Dehidrasi • Cegah autolisis
• Mengeraskan
3. Clearing
4. Infiltrating Bahan: Formalin, Asam Pikrat,
5. Embedding Carnoy, dll
1. Tissue processing
1. Fiksasi Menghilangkan air & cairan
fiksatif
2. Dehidrasi
3. Clearing Bahan:
4. Infiltrating Alkohol 70%  Alkohol 95% 
5. Embedding Alkohol 100%
1. Tissue processing
1. Fiksasi • Menghilangkan larutan
dehidrasi
2. Dehidrasi
• Memudahkan masuk
3. Clearing larutan infiltratif
4. Infiltrating
5. Embedding Bahan: Xylene, Toluene,
Chloroform
1. Tissue processing
1. Fiksasi Memasukkan media
pendukung/penyokong
2. Dehidrasi
3. Clearing Bahan: Lilin Parafin
4. Infiltrating
5. Embedding
1. Tissue processing
1. Fiksasi Memposisikan dan
2. Dehidrasi mengeraskan
3. Clearing
4. Infiltrating
5. Embedding
2. Pemotongan
• Mikrotom
• Ketebalan 5 μM
3. Pulasan/Pengecatan
• Histokimia
• Imunohistokimia
• Fluoresensi
VIDEO PEMROSESAN JARINGAN
 HISTOKIMIA
Nukleus - Pewarna basa
• Bermuatan positif
• Mengikat zat bermuatan negatif (basofilik/basofilia)
• Pewarna: hematoxylin, toluidine blue, methylene blue,
thionin

Sitoplasma - Pewarna asam

• Bermuatan negatif
• Mengikat zat bermuatan positif
(asidofilik/eosinofilik/oksifilik/eosinofilia)
• Eosin, aniline blue, picric acid, acid fuchsine, light blue, light
green, orange G
• Neutrophilic, neutrophilia: bereaksi dengan kedua
jenis pulasan
• Metachromasia: perubahan warna.
Misal, toluidine blue  merah
 Pulasan Hematoksilin dan Eosin
HEMATOXYLIN
• Alum hematoxylin (Harris's and Mayer's) –
blue/purple
• Iron hematoxylin Weigert's (green and blue)
trichrome, Weigert van Gieson (brown/blue-black)

EOSIN
• Pink/red
• 0.5% - 1% eosin Y water solution
Langkah Pulasan HE
1. Deparafinisasi (Xylol, Xylol)
2. Rehidrasi (Alkohol 100%,95%, 70%, air)
3. Pengecatan
- Alum hematoxylin
- Air
- Eosin 0.5%
- Air
4. Dehidrasi (Alkohol 70%, 95%, 100%)
5. Clearing (Xylol,Xylol)
6. Mounting (Resin, Entelan, Canada balsam, dll),
deckglass
 FISH
Fluorescence in situ hybridization
Terima Kasih