Analisis Farmasi

Analisis Peptisida dalam Buah-buahan

Oleh:

FEBRYANTI AKZAH
CICILIA RESA
AYU NURKUMALA
PENDAHULUAN
Pestisida adalah zat kimia yang digunakan dalam
praktek pertanian modern untuk melindungi tanaman
dari hama dan penyakit yang berbeda, seperti tanaman
lain. Namun, penggunaan pestisida selama produksi
sering menyebabkan adanya residu pestisida pada buah
setelah panen.
 Residu pestisida adalah deposito pestisida bahan
aktif, metabolitnya atau produk pecahan di beberapa
komponen lingkungan. Analisis residu pestisida adalah
proses sangat penting dalam menentukan keselamatan
menggunakan pestisida tertentu. Sejumlah metode analisis
yang dirancang untuk menentukan beberapa residu
pestisida. Metode kuantifikasi tradisional seperti
kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC) dapat digunakan
dalam analisis ini.
 Tingkat maksimum residu (MRL) membatasi jenis dan jumlah
residu yang terdapat secara legal yang hadir pada makanan. . Pada
tahun 2003, metode QUECHERS untuk analisis residu pestisida
diperkenalkan yang memberikan hasil yang berkualitas tinggi secara
cepat, mudah, murah. Teknik yang paling umum dalam analisis sasaran
pestisida multi-residu adalah modern kromatografi gas, kromatografi
cair ditambah dengan spektrometri massa (GC-MS, LC-MS) dan /
atau tandem spektrometri massa (GC-MS / MS, LC-MS / MS) dengan
tiga analisis massa quadrupole.
BAHAN DAN METODE
1. SAMPEL
Pengambilan sampel dilakukan dengan sampling random
yang dilakukan dari berbagai pasar di kota-kota. Tergantung
pada sifat vegetasi (ukuran, bentuk, dll) Sampel dibungkus
dengan kertas bersih (aluminium foil) dan dibungkus
dengan kertas amplop. Penambahan silika gel sachet kecil
dalam amplop membantu mengurangi kadar air pada
sampel, kemudian sampel dibawa ke laboratorium analitis
untuk dilakukan pengujian.
2. Reagen

Kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC)

Asetonitril; air deionisasi; dimetil formamida; magnesium sulfat anhidrat dan
amina silica; asam asetat; natrium asetat.

Setiap sampel disaring melalui 0,45 mm polyvinylidene difluorida (PVDF) fIlter

sebelum injeksi. larutan stok standar disiapkan dengan melarutkan kristal standar
dalam asetonitril (atau dimetil formamida larut dalam asetonitril) untuk mencapai
konsentrasi akhir 1000-4000 mg / ml. Untuk optimasi metode, larutan standar
dibuat dengan mengencerkan larutan stok untuk konsentrasi 1-4 mg / ml.
 3. Preparasi sampel
 Ditimbang 15 g sampel homogen
 50 ml Polytetra fluoro etilena (PTFE) dimasukkan ke tabung
100 ml
 Ditambahkan 50 ml larutan standar trifenil fosfat (TPP)
 Ditambahkan 15 ml asetonitril yang mengandung 1% asam
asetat.
 Ditambahkan 6 g MgSO4 dan 2,5 g natrium asetat trihidrat
(setara dengan 1,5 g bentuk anhidrat).
 Sampel dikocok selama 4 menit.
 Sampel kemudian disentrifugasi pada 4000 rpm selama 5 menit
 5 ml supernatan dipindahkan ke tabung
 Ditambahkan 15 ml PTFE dan 750 mg MgSO4 dan 250 mg PSA.
 Ekstrak di mixer selama 20 menit dan disentrifugasi pada 4000
rpm selama 5 menit.
 Sekitar 3 ml supernatan disaring melalui 0,45 mm saringan
PTFE (diameter 13 mm), dan 800 ml bagian
dipindahkan ke botol autosampler.
 Ekstrak diuapkan sampai kering di bawah aliran argon dan
dilarutkan dalam 800 ml asetonitril / air (20/80, v / v) untuk
LC-MS / MS analysis. Acetonitrile / air (20/80, v / v) untuk
analisis LC-MS / MS.
 Untuk kalibrasi standar, 80 ml sampel dipindahkan ke
autosampler dan masing-masing 20 ml bagian untuk 0, 250, 500
dan 1250 mg / ml kemudian ditambahkan campuran standar
yang mengandung pestisida asetonitril / air (25/75 v / v)
untuk mencapai hasil ekstrak.
Metode analisis
 Analisis LC-MS

Untuk analisis LC, Agilent 1100 sistem HPLC digunakan. Isinya pompa biner,
degasser sebuah kolom thermost dan autosampler. Sebuah fase-balik C8 kolom analitis
150mm x 4.6mm diameter (id) dan 5 m ukuran partikel dan penjaga kolom 125 x 4,6
mm dan 5 ukuran partikel yang digabungkan dengan sistem LC. Air deionisasi yang
mengandung 0,1% asam format (komponen fase gerak A) dan asetonitril (komponen B)
yang bekerja untuk program gradien, yang dimulai dengan 20% B selama 3 menit dan
meningkat menjadi 100% B pada 27 menit. Kemudian kolom kembali bekerja selama 12
menit dengan 20% B. Dengan demikian, total waktu berjalan adalah 45 menit. Laju
aliran konstan 0,6 ml / menit, dan volume injeksi adalah 10 ml.
ANALISIS STATISTIK
 Dilakukan uji AnalisisVariance (ANOVA) dan t-Test antara tidak
dicuci dengan dicuci menggunakan air asin hangat. Hasilnya dapat
digunakan untuk memeriksa signifikansi data statistik.
 Hipotesis nol - "tidak ada korelasi" antara pestisida "s" tidak
dicuci "nilai residu dan 'dicuci air asin hangat' nilai residu. Ini
berarti perbedaan antara nilai rata-rata residu dari "tidak dicuci"
dengan "dicuci dengan air asin hangat" tidak signifikan ".
 Hipotesis alternatif (kebalikan dari hipotesis nol) - ada "korelasi"
antara dua nilai.
 Nilai α - Probabilitas bahwa hipotesis nol adalah valid. Ini
diasumsikan sebagai 0,05. Berarti bahwa 95% dari data bukanlah
hasil dari kebetulan (berarti data yang baik).
 'p-value' adalah α-nilai yang dihasilkan pada akhir jika uji
statistik. Harus jauh lebih rendah dari 0,05. Ada bukti yang
cukup untuk menyimpulkan bahwa rata-rata tidak ada nilai-nilai
yang tidak dicuci secara signifikan lebih besar dari rata-rata nilai
dicuci air asin hangat. Hipotesis Null itu ditolak. T-Tes
menunjukkan 'p-value' baik di bawah 0,05 untuk hampir semua
hasil, dengan demikian, menunjukkan bahwa data tersebut
signifikan secara statistik.
 HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini menggambarkan kombinasi dari dua metode paralel dalam
skrining kualitatif dan kuantitatif residu pestisida: (1) penyaringan kualitatif untuk
pestisida target dengan LC-MS / MS menggunakan data MRM dan (2) konfirmasi,
penentuan kuantitatif yang sering digunakan / atau sebelumnya terdeteksi pestisida
menggunakan metode MRM. Dibandingkan dengan metode lain yang tersedia,
metode QuEchERS adalah percaya untuk memberikan hasil terbaik. Konsep ini
diyakini memberikan lingkup terluas dengan usaha minimal dan masih memberikan
hasil kualitatif dan kuantitatif yang sangat baik, terutama ketika menggunakan
QuEChERS untuk persiapan sampel.
BUAH ANGGUR

Tidak dicuci : The fungisida Imazalil dan thiabendazole tetap sekitar 70 dan lebih dari
100% di atas BMR masing-masing. Insektisida Phosmet, pada rata-rata ditemukan menjadi
50% di atas BMR.

1. anggur hitam memiliki nilai residu awal yang lebih tinggi daripada anggur hijau untuk
semua pestisida.

2. Dicuci air hangat : Phosmet ditemukan untuk pergi di bawah BMR, tetapi orang lain yang
masih ada, tetapi menunjukkan penurunan sekitar 20 sampai 25% di tingkat residu.

3. Air asin hangat : Anggur hijau menunjukkan Imazalil dekat dengan BMR, tapi thiabendazole
masih sekitar 50% lebih dari BMR. Anggur hitam menunjukkan nilai residu yang jauh lebih
tinggi dari ini 2 pestisida
KESIMPULAN
 Kombinasi dikembangkan dari dua metode yang dijelaskan di atas

diijinkan mudah dan cepat skrining kualitatif pestisida target dalam 45

menit LCMS / MS run. Meskipun evaluasi manual dari kromatogram
diberikan meningkatkan waktu analisis dengan tambahan 15 menit per
sampel, sangat sedikit waktu, biaya dan tenaga kerja dihabiskan untuk
persiapan sampel. Dalam kasus sampel kotor, beberapa indikasi palsu
diamati, tetapi ini tertangkap oleh penggunaan MRM metode
konfirmasi dan kuantitatif untuk pestisida lebih umum.
 Imazalil adalah salah satu pestisida persisten pada
anggur dengan diperbolehkan BMR dari 5mg / kg.
Bila dikonsumsi dalam jangka waktu lama, yaitu 2
sampai 5 kali (50 mg / kg / hari) lebih dari BMR
menunjukkan beberapa masalah kematian dan depresi
enzim otak yang signifikan.