EFEK PLATELET-RICH FIBRIN (PRF) TERHADAP MIGRASI SEL FIBROBLAS KULIT

NORMAL PASCA PAJANAN MITOMISIN C

Karya Ilmiah Paripurna
Diajukan dalam rangka memenuhi sebagian persyaratan kelulusan Program
Pendidikan Dokter Spesialis Ilmu Bedah di Fakultas Kedokteran
Universitas Gadjah Mada

Diajukan oleh :
Nur Eko Hadi Sucipto
NIM: 11/323819/PKU/12626

BAGIAN ILMU BEDAH

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS GADJAH MADA
RSUP DR SARDJITO YOGYAKARTA
2015

Karya Ilmiah Paripurna

EFEK PLATELET-RICH FIBRIN (PRF) TERHADAP MIGRASI SEL FIBROBLAS KULIT
NORMAL PASCA PAJANAN MITOMISIN C
Oleh :
Nur Eko Hadi Sucipto
NIM : 11/323819/PKU/12626
Telah diseminarkan pada tanggal, 22 Oktober 2015

Pembimbing I

DR. dr. Ishandono Dachlan.,M.Sc.,Sp.B.,Sp.BP-RE(K)

NIP. 19520214 197903 1 001
Pembimbing II

DR. dr. Yohanes Widodo Wirohadidjojo, Sp. KK(K)

NIP. 195509151981031004
Mengetahui,
Kepala Bagian Ilmu Bedah

Ketua Program Studi Ilmu Bedah

FK UGM/RSUP DR Sardjito

FK UGM/RSUP DR Sardjito

DR.dr. Ishandono D., M.Sc, Sp.B., Sp.BP-RE(K)

NIP . 1952 0214 1979 031001

dr. Rosadi Seswandana., Sp.B., Sp.BP-RE(K)

NIP . 1972 1007 1999 031001

ii

HALAMAN PERNYATAAN

Dengan ini penulis menyatakan bahwa karya ilmiah paripurna ini bukan
merupakan karya ilmiah yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar
kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang pengetahuan penulis juga
belum menemukan karya ilmiah yang serupa yang pernah ditulis atau diterbitkan
oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis terdapat dalam naskah karya ilmiah
paripurna ini dan telah disebutkan oleh penulis dalam daftar pustaka.

Yogyakarta, Oktober 2015

Penulis

Nur Eko Hadi Sucipto

iii

KATA PENGANTAR

Puji syukur kami panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa, karena atas
rahmat serta karunia-Nya, penulis bisa menyelesaikan tugas ilmiah paripurna yang
berjudul Efek Platelet-Rich Fibrin (PRF) terhadap Migrasi sel Fibroblas
Kulit Normal Pasca Pajanan Mitomisin C
Karya ilmiah ini merupakan tugas akhir dalam mengikuti Program
Pendidikan Dokter Spesialis Ilmu Bedah di Fakultas Kedokteran Universitas
Gadjah Mada Yogyakarta. Karya ilmiah ini tidak dapat terwujud tanpa bantuan
dari berbagai pihak, oleh karena itu pada kesempatan ini dengan segala
kerendahan hati, perkenankanlah penulis menyampaikan rasa terima kasih dan
penghargaan yang setinggi-tingginya kepada :
1. DR.dr. Ishandono Dachlan, MSc., Sp. B, Sp. BP-RE(K), sebagai
pembimbing utama dan sebagai Kepala Bagian Ilmu Bedah FK
UGM/RSUP Dr. Sardjito, Yogyakarta yang telah memberikan bimbingan
dan arahan kepada kami dalam penyelesaian karya akhir ini.
2. DR. dr. Yohanes Widodo Wirohadidjojo, Sp. KK(K), sebagai pembimbing
lapangan, yang telah memberikan kesempatan untuk melakukan penelitian
dibagian Ilmu penyakit Kulit dan Kelamin.
3. dr. M Rosadi Seswandhana, SpB, SpBP-RE(K), sebagai Kepala Program
Studi Ilmu Bedah FK UGM/RSUP Dr. Sardjito, yang telah memberikan
kesempatan belajar sebagai peserta PPDS Ilmu Bedah dan penuh
kesabaran mendidik membantu kami selama menempuh pendidikan.
4. Seluruh Senior di Bagian Ilmu Bedah, penulis menghaturkan terima kasih
yang tidak terhingga atas segala kesempatan, dorongan, bimbingan dan
arahan selama penulis menjalani proses pendidikan ini.
5. Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada yang telah
mengijinkan dan menerima kami mengikuti pendidikan PPDS Ilmu Bedah.
6. Direktur RSUP Dr. Sardjito Yogyakarta yang telah memberikan fasilitas
dan kemudahan selama mengikuti pendidikan.
7. Teman sejawat Residen PPDS Ilmu Bedah, paramedis dan seluruh
karyawan di Bagian Ilmu Bedah FK UGM / RSUP DR. Sardjito
Yogyakarta, atas kebersamannya yang telah membantu kelancarannya
proses pendidikan dari awal sampai akhir.
8. Kedua orang tua penulis Tjipto Waloejo,SKM,M.Kes dan Sri Kushadiyati
serta Adik penulis Nur Layla Sucipto Putri, S.H. MKn dan dr. Nur Alvi
Saidah Agustina Sucipto Putri atas segala kemurahan hati, kasih sayang
dan dukungan material-spiritual kepada penulis.
iv

9. Kepada istri tercinta dr. Maya Yunita dan anak kami Muhammad Farrell
Archard Zhafif Sucipto dan Farah Hasnadhia Syarafana yang selalu sabar,
penuh pengertian, keikhlasan dan ketabahan telah memberikan semangat,
kasih sayang dan doa selama penulis menjalani proses pendidikan PPDS
Ilmu Bedah di FK UGM / RSUP Dr. Sardjito, Yogyakarta hingga selesai.
10. Semua pasien dan pihak yang tidak dapat penulis sebut satu persatu yang
telah membantu selama pendidikan.
Pada akhirnya penulis menyadari bahwa karya ilmiah ini masih banyak
kekurangan, tetapi mudah-mudahan tulisan ini bisa bermanfaat bagi kami dan
semua pihak yang memanfaatkannya.

Yogyakarta, Oktober 2015

Penulis

Nur Eko Hadi Sucipto

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ............................

HALAMAN PENGESAHAN ..........................

ii

HALAMAN PERNYATAAN...........................................................................

iii

KATA PENGANTAR.......................................................................................

iv

DAFTAR ISI ............................

vi

DAFTAR GAMBAR ............................

viii

DAFTAR TABEL ........................

ix

ABSTRAK........................................................................................................

BAB I PENDAHULUAN
A. Latar Belakang Penelitian......................................................................
B. Rumusan Masalah..................................................................................
C. Tujuan Penelitian ..................................................................................

D. Manfaat Penelitian ................................................................................

E. Keaslian Penelitian................................................................................

2
3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

A. Tinjauan Pustaka...................................................................................
1. Penyembuhan Luka.........................................................................

2. Komponen Penyembuhan Luka.......................................................

3. Fibroblas..........................................................................................

12

4. Platelet-Rich Fibrin.........................................................................

13

5. Migrasi sel Fibroblas.......................................................................

14

6. Mitomisin C.....................................................................................
7. Scratch Assay...................................................................................
B. Kerangka Teori......................................................................................
C. Kerangka Konsep...................................................................................
D. Hipotesis................................................................................................

16
17
18
19
20
20

vi

BAB III METODE PENELITIAN

A. Rancangan Penelitian .........................................................................

21

B. Waktu dan Tempat Penelitian ............................................................

21

C. Sample Penelitian ...............................................................................

21

D. Identifikasi Variabel Penelitian...........................................................

21

E. Definisi Operasional Variabel.............................................................

21

F. Deskripsi Intervensi............................................................................

22

G. Instrumen Penelitian...........................................................................

23

H. Cara Analisasi Data.............................................................................

24

I. Jalanya Penelitian ...............................................................................

24

1. Donor Fibroblas............................................................................

24

2. Tehnik Kultur Fibroblas................................................................

24

3. Tehnik Subkultur Fibroblas..........................................................

24

4. Perlakuan Terapi...........................................................................

25

5. Protokol Penatalaksanaan Scrarcth Assay....................................

25

6. Cara Analisis Data........................................................................

27

BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Penelitian................................................................................

29

B. Pembahasan......................................................................................

33

BAB V KESIMPULAN
A. Kesimpulan.......................................................................................

34

B. Saran.................................................................................................

34

DAFTAR PUSTAKA
LAMPIRAN

vii

DAFTAR GAMBAR
Gambar.1
Gambar.2
Gambar.3
Gambar.4
Gambar.5
Gambar.6
Gambar.7
Gambar.8
Gambar.9
Gambar.10
Gambar.11
Gambar.12
Gambar.13
Gambar.14

Fase Inflamasi Pada Penyembuhan Luka...............................

Fase Proliferasi Pada Penyembuhan luka.................. .............
Fase Maturasi Penyembuhan Luka........................................
Fase Penyembuhan Luka .......................................................
Fase Penyembuhan Luka dan Faktor Komplemen
Penyebuhan Luka....................................................................
Aktivasi Komplemen Klasik dan Alternatif...........................
Gambaran fibroblas dengan pengecatan hemetoksilin
eosin........................................................................................
Darah setelah dilakukan sentrifugal........................................
Struktur Kimia Mitomicin C...................................................
Skema Kerangka Teori...........................................................
Skema kerangka Konsep.........................................................
Skema Deskripsi Intervensi....................................................
Grafik rerata migrasi pada Kontrol.........................................
Grafik Rerata Migrasi pada kelompok perlakuan mitomicin
dan mitomicin+
PRF..........................................................................................

8
9
9
10
11
12
13
16
18
19
20
22
30

31

viii

DAFTAR TABEL
Tabel.1
Tabel.2
Tabel.3
Tabel.4
Tabel.5
Tabel.6
Tabel.7
Tabel.8
Tabel.9
Tabel.10
Tabel.11
Tabel.12
Tabel.13

KeaslianPenelitian...........................................................................
Sitokindalam Platelet-Rich Fibrin dan Fungsinya..........................
Bahan Penelitian.............................................................................
Alat Penelitian................................................................................
Uji normalitas...................................................................................
Uji kesamaan variansi.......................................................................
Perbandingan pengaruh kontrol negatif, kontrol positif, PRF12,5%,
PRF 25%, dan PRF 50% terhadap kecepatan migrasisel
fibroblas..........................................................................................
Perbandingan kecepatan migrasi sel fibroblas kelompok perlakuan
kontrol negatif dengan kelompok lain............................................
Perbandingan kecepatan migrasi sel fibroblas kelompok perlakuan
kontrol positif dengan kelompok lain............................................
Perbandingan kecepatan migrasi sel fibroblas kelompok perlakuan
PRF 12,5% dengan kelompok lain.................................................
Perbandingan kecepatan migrasi sel fibroblas kelompok perlakuan
PRF 25% dengan kelompok lain....................................................
Perbandingan kecepatan migrasi sel fibroblas kelompk
perlakuanPRF 50% dengan kelompok lain.......................................

3
15
23
23
29
30

30
31
31
31
32
32

ix

EFEK PLATELET-RICH FIBRIN (PRF) TERHADAP MIGRASI SEL

FIBROBLAS KULIT NORMAL PASCA PAJANAN MITOMISIN C
Nur Eko Hadi Sucipto*,Ishandono Dahlan**, Yohanes Widodo Wirohadidjojo***
*Residen Bedah Universitas Gadjah Mada /RSUP Dr.Sardjito Yogyakarta
** Bagian Bedah Plastik Universitas Gadjah Mada /RSUP Dr.Sardjito Yogyakarta
*** Bagian Kulit dan Kelamin Universitas Gadjah Mada /RSUP Dr.Sardjito
Yogyakarta
Latar Belakang: Penyembuhan luka merupakan proses yang sangat dinamis yang
terdiri dari beberapa tahap yaitu inflamasi, proliferasi dan remodeling. Migrasi sel
fibroblas mempunyai peranan yang sangat penting pada tahap proliferasi dan
remodeling. Platelet Rich Fibrin (PRF) merupakan fibrin autolog yang berisi
faktor pertumbuhan dan cytokine yang dibutuhkan pada proses penyembuhan
luka. Dilain sisi Mitomicin C menghambat penyembuhan luka
dengan
menginduksi yang menyebabkan kerusakan DNA yang menyebabkan apoptosis
dan menghambat proliferasi sel.
Metode: Kultur fibroblas diinkubasi pada medium kultur yang sesuai dengan atau
tanpa penambahan 10g/mL selama 2 jam. Setelah 2 kali pencucian dengan
mengunakan PBS, fibroblas di inkubasi pada media kultur yang berisi PRF
12,5%,25% dan 50% atau tanpa PRF sebagai kontrol negatif. Scratch assays
dilakukan untuk mengukur migrasi sel setelah dilakukan perlakuan mitomicin
fibroblas dengan atau tanpa penambahan PRF.
Hasil: Migrasi fibroblas setelah perlakuan dengan mitomicin C tanpa penambahan
RFF 16,7725 8,12405, setelah penambahan PRF 12,5%,25% dan 50%, migrasi
sel fibroblas masing-masing adalah 1914393,01785, 27,09103,46624, and
51,09071,86437, secara berurutan. Perlakuan PRF signifikan pada peningkatan
migrasi sel fibroblas dibandingkan dengan kontrol, (p=0.000)
Kesimpulan: perlakuan PRF secara signifikan meningkatkan migrasi sel fibroblas
setelah perlakuan dengan mitomicin C,diperlukan penelitian lebih lanjut
mengunakan penelitian secara in vivo untuk membuktikan penelitian in vitro yang
kami lakukan.
Kata Kunci: Migrasi sel Fibroblas, Platelet rich Fibrin (PRF), Mitomicin C

The Effect of Platelet-Rich Fibrin (PRF) on Skin Fibroblast Migration after

Mitomycin-C Treatment
Nur Eko Hadi Sucipto*,Ishandono Dahlan**, Yohanes Widodo Wirohadidjojo***
*Resident of General Surgery of Gadjah Mada University/ Sardjito General Hospital Yogyakarta
** Departement Plastic Surgeryof Gadjah Mada University/ Sardjito General Hospital Yogyakarta
*** Departement Dermatology of Gadjah Mada University/ Sardjito General Hospital Yogyakarta

Background: Wound healing is a dynamic process involving several phases

including inflammation, proliferation, and remodeling. Skin fibroblast migration
plays a crucial role especially during proliferation and remodeling. Platelet-rich
fibrin (PRF) is autologous fibrin matrix containing high levels of growth factors
and cytokines that are required for wound healing. On the other hand, MitomycinC is able to inhibit wound healing throughinduction of DNA damages that result
in apoptosis and inhibition of cell proliferation.
Methods: Fibroblasts were incubated in appropriated culture medium with and
without 10g/mL Mitomycin-C for 2 hours. After 2 times washing with PBS,
fibroblasts were incubated in culture medium containing 12,5%, 25%, and 50% of
PRF, or without PRF as a negative control. Scratch assays were performed to
measure migration of Mitomycin treated- fibroblasts following with or without
PRF treatment.
Results: on going research. Fibroblast migration after Mitomycin-C treatment
without PRF treatment was 16,7725 8,12405. After 12,5%, 25%, and 50% PRF,
migration of fibroblasts were 1914393,01785, 27,09103,46624, and
51,09071,86437, respectively. Treatment of PRF significantly increased
fibroblast migration compared to the control, (P value = 0.000)
Conclusion: PRF treatment significantly increases fibroblast migration after
treatment with Mitomycin-C. Further study using in vivo setting is required to
confirm our in vitro study.
Key Word: Fibroblast Migration, Platelet-Rich Fibrin (PRF) , Mitomycin-C

xi