25 mL n-butanol + 6 mL asam asetat + 25 mL aquades
- Dicampur sambil dikocok
- Diletakkan dalam lemari kromatografi - Dijenuhkan dengan uapnya
Fasa gerak
2. Menentukan Komponen Asam Amino
Kertas kromatografi 4x10 cm
- Diberi batas atas 0,5 cm dan batas bawah 1 cm
- Dioven 5 menit - Diteteskan 4 macam larutan (A, B, C, D) menggunakan pipa kapiler dengan jarak 1 cm - Dikeringkan tiap-tiap tetesan sebelum tetesan berikutnya diletakkan diatasnya (besar noda < 0,4 cm)
Kertas kromatografi yang ditetesi sampel
- Digantung diatas dalam lemari kromatografi beberapa jam guna dijenuhkan
dengan uap eluen, sampai tanda batas atas - Dielusi
Kertas kromatografi setelah dielusi
- Dikeluarkan kertas kromatografi
- Dikeringkan pada suhu 105-110 C selama 1-3 menit (sampai kering) - Disemprot dengan ninhidrin - Dikeringkan kembali selama 1 menit
Noda-noda asam amino yang berwarna akan terlihat
- Dicatat warnanya - Dihitung Rf pada tiap-tiap noda - Ditetapkan komponen-komponen asam amino dalam sampel dengan membandingkan harga Rf yang diperoleh dengan Rf asam-asam amino standar