Studi Biologi Dan Ekologi….

ISSN: 2086-8049
Henky Irawan Dinamika Maritim Volume 3 nomor 2 tahun 2014 30- 39

PENGARUH pH PADA EKSTENDER TERHADAP DAYA SIMPAN DAN

MOTILITAS SEL SPERMA IKAN MAS (Cyprinus carpio)

Henky Irawan

Fakultas Ilmu Kelautan dan Perikanan, Universitas Maritim Raja Ali Haji,
Tanjungpinang, Kepulauan Riau, 29125

Pengutipan ditulis:
Irawan, H. 2013. Pengaruh pH pada Ekstender Terhadap Daya Simpan dan Motilitas Sel
Sperma Ikan Mas (Cyprinus carpio). Dinamika Maritim Vol 3.No 2. Hal 30-39.
ABSTRACT

Penelitian mengenai pengaruh pH terhadap daya simpan dan motilitas sel sperma
ikan mas (Cyprinus carpio) dilakukan dengan membandingkan ekstender tanpa
penyesuaian pH dengan eksender dari bahan yang sama tetapi pH nya di sesuaikan
menjadi 7.7 dimana pH ini menyerupai pH pada seminal plasma ikan mas. Ekstender-
ekstender tersebut di buat dari bahan-bahan kimia yang umum terkandung dalam seminal
plasma ikan mas dan mudah di dapat seperti sodium chloride, potassium chloride,
fructose, glucose dan sucrose dengan kombinasi tertentu yang di beri nama ekstender A,
B, C, D, E, dan F. Penyimpanan sperma di lakukan dengan menggunakan metode
penyimpanan suhu dingin atau chilled storage dimana setiap hari di amati persentse
motilitas dan durasi motilitas sel sperma dari tiap perlakuan.
Hasil dari penelitian ini menunjukkan bahwa ekstender F dengan pH 7.7
memberikan hasil yang terbaik dengan lama penyimpanan sel sperma selama lima hari
dimana hingga hari kelima tersebut persentase motilitas sperma 85.0+13.5 % dan durasi
motilitas 93.0+7.0 detik berbeda nyata dibandingkan perlakuan lainnya. Eksternder F
dengan pH 7.7 dan eksterder F terbuat dari bahan yang sama yaitu fructose, tetapi pH
ekstender F tersebut hanya 5.08 dimana ini menunjukkan bahwa pH memberikan
pengaruh terhadap daya simpan sel sperma ikan mas.

Kata kunci: Ekstender, pH, motilitas

PENDAHULUAN kantung sperma, osmolalitas dari

Ikan Mas (Cyprinus carpio)
melakukan reproduksi dengan
pembuahan di luar tubuh dimana sel
sperma di lepaskan oleh induk jantan
akan bertemu sel telur yang di lepaskan
induk betina di perairan. Dalam proses
pembuahan telur ikan mas, sel sperma
yang di lepaskan oleh induk jantan akan
berenang di perairan dan menuju ke sel
telur dan bila sel sperma berhasil masuk
kedalam sel telur maka akan terjadi
pembuahan.
Sel sperma pada ikan biasanya
aktif karena dipicu oleh kondisi
osmolalitas lingkungan perairan dan
pada saat sel sperma berada dalam
seminal plasma pada tingkat tertentu
dapat menjaga sperma untuk tidak aktif.
Kondisi dari seminal plasma yang
menjaga sel sperma tidak aktif ini di
pengaruhi oleh kandungan bahan kimia
yang terkandung dalam cairan seminal
plasma tersebut.
Dalam usaha penyimpanan
sperma ikan di bidang budidaya
perairan, kemampuan ekstender dalam
mempertahankan kondisi tidak aktif atau
immotil pada sperma sangat penting.
Eksterder untuk sperma ikan mas di buat
dengan bahan-bahan kimia yang
menyerupai kandungan biokimia pada
cairan seminal ikan mas tersebut.

30
 Studi Biologi Dan Ekologi….
Henky Irawan
Ekstender untuk ikan mas dapat
di buat dari bahan-bahan kimia yang
mudah di dapat seperti sodium chloride,
potassium chloride, fructose, glucose
dan sucrose. Ekstender yang di buat dari
komposisi dan kombinasi bahan-bahan
kimia tersebut telah dapat menyerupai
kondisi osmolalitas pada seminal plasma
ikan mas yaitu sekitar 315 hingga 353
mmol/Kg tetapi pH pada ekstender
tersebut belum seperti pH pada seminal
plasma ikan mas yang pH nya 7.7.
Dalam membuat ekstender untuk
menyimpan sperma ikan mas, kondisi
osmolalitas sangat menentukan kondisi
tidak aktif atau immotil selama
penyimpanan sperma, tetapi pengaruh
kondisi pH ekstender belum di ketahui
dampaknya.
Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui pengaruh dari pH yang
berbeda pada ekstender untuk melihat
pengaruhnya terhadap daya simpan dan
motilitas sel sperma ikan mas dan
diharapkan nantinya data ini dapat
menjadi dasar dalam pembuatan dan
pengembangan ekstender pada ikan mas
(Cyprinus carpio).
METODOLOGI PENELITIAN
Pengambilan sperma
Penelitian ini di lakukan pada
musim memijah tahun 2009 di
laboratorium kriopreservasi,
Departemen Ilmu Perairan, Fakultas
Sains, Universitas Burapha, Thailand.
Ikan mas yang di gunakan berupa 20
ekor induk jantan dengan berat antara
300 – 600 gram yang budidayakan di
Tabel 1. Komposisi ekstender untuk ikam mas
No Nama kode ekstender Komposisi
1 A 25 mL larutan sodium chloride + 25 mL larutan
potassium chloride + 25 mL larutan fructose + 25 mL
larutan glucose
2 B 50 mL larutan sodium chloride + 50 mL larutan glucose
3 C 50 mL larutan potassium chloride + 50 mL larutan
fructose
4 D 50 mL larutan potassium chloride + 50 mL larutan
glucose
31
ISSN: 2086-8049
Dinamika Maritim Volume 3 nomor 2 tahun 2014 30- 39
Thailand. Induk jantan di beri
rangsangan dengan menyuntikkan
hormon pematangan gonad (20µg
GnRH dengan 10 mg domperidone
maleate di larutkan dengan 1 mL air
terdestilasi) per Kg bobot tubuh dan
diinkubasi selama 9-12 jam. Sperma di
keluarkan dengan metode stripping dan
ditamping dalam wadah yang bersuhu
rendah.
Pembuatan Ekstender
Menurut Kruger et al. (1984)
kandungan bahan kimia dalam seminal
plasma ikan mas adalah sebagai berikut:
Glucose 9-100 mg/L, Fructose 58-63
mg/L, Lactate 39-50 mg/L, Cholesterol
0-40 mg/L, Lipids 98-1316 mg/L,
Phospolipids 5.6 mg/L, Protein 0.4-3.8
mg/L and Amino acid 98-136 mg/L.
Kandungan ion yang terkandung dalam
seminal plasma ikan mas menurut
Kruger et al. (1984) pada musim dingin:
Na 71+3.6 mM, K 79+3.7 mM, Ca
2.7+0.1 mM, osmolalitas 346+19 dan
pH 7.53+0.3., pada awal musim semi:
Na 59+3.2 mM, K 73+3.5 mM, Ca
2.9+0.2 mM, osmolalitas 290+6 dan pH
7.67+0.1., pada akhir musim semi: Na
58+5.3 mM, K 76+4.6 mM, Ca 2.1+0.7
mM, osmolalitas 298+14 dan pH
7.59+0.04.
Ekstender dalam penelitian ini
dibuat dari bahan-bahan kimia yang juga
terdapat dalam seminal plasma ikan mas
serta mudah di dapat yaitu sodium
chloride, potassium chloride, fructose,
glucose dan sucrose dengan komposisi
yang dikombinasikan (Tabel 1)
 Studi Biologi Dan Ekologi…. ISSN: 2086-8049
Henky Irawan Dinamika Maritim Volume 3 nomor 2 tahun 2014 30- 39

5 E 50 mL larutan potassium chloride + 50 mL larutan

sucrose
6 F 100 mL larutan fructose

Ekstender yang telah jadi akan Angka pH seminal plasma ikan

di tambahkan antibiotic sebanyak 0,5%
(10,000 Unit/mL penicillin and 10,000
µg/mL streptomycin)/mL untuk
mencegah aktifitas bakteri. Bentuk
perlakuan yang dilakukan adalah
melihat daya simpan dan motilitas
sperma ikan mas yang disimpan pada
ekstender A, B, C, D, E, dan F dengan
ekstender A, B, C, D, E, dan F yang di
sesuaikan pH nya yaitu 7.7 sama dengan
pH cairan seminal ikan mas.
mas ini di dapat dengan cara melakukan
centrifuge pada sperma ikan pada 5000
rpm selama 15 menit pada suhu 4 0C.
Setelah terjadi pemisahan antara sel
sperma yang mengendap dibawah dan
seminal plasma yang terdapat pada
bagian atas / supernatant, cairan seminal
plasma tersebut diambil dan di ukur pH
nya dengan pH meter digital dan didapat
hasil uji pH adalah 7.7. dan osmolalitas
315 hingga 353 mmol/Kg

Table 2. Kandungan ekstender

Nama Komposisi Osmolalitas (mmol/Kg) pH
Extender Sebelum Setelah Sebelum Setelah
penambahan penambahan penambahan penambahan
0.5 % 0.5 % 0.5 % antibiotic of 0.5 %
antibiotic antibiotic antibiotic
A Sodium 324 302 5.61 5.85
chloride,
potassium
chloride,
fructose, and
glucose
B Sodium 291 314 5.65 6.11
chloride and
glucose
C Potassium 307 308 5.52 5.12
chloride and
fructose
D Potassium 301 313 5.48 5.09
chloride and
glucose
E Potassium 310 309 5.56 5.22
chloride and
sucrose
F Fructose 288 306 5.53 5.08

Untuk perlakuan ekstender A,B,C,D,E, tiap ekstender di lakukan dengan cara

dan F yang di sesuaikan pH nya menjadi
7,7 yang menyamai pH seminal plasma
ikan mas, dilakukan dengan cara
menambahkan larutan NaOH yang di
buat dengan cara mencampurkan 5 gram
NaOH dengan 500 mL air yang
didestilasi. Penyesuaian pH pada tiap-
meneteskan 1µL larutan NaOH tersebut
secara bertahap ke lauran ekstender
hingga pH ekstender tersebut menjadi
7,7.
Semua perlakuan pada sampel
di buat sebanyak tiga kali ulangan, yang
di letakkan dalam tabug kaca 10 ml dan

32
 Studi Biologi Dan Ekologi….
Henky Irawan
disimpan didalam refrigerator, proses
ini disebut chilled storage dimana
sperma di simpan dalam suhu rendah 4
o
C (Tiersch et al., 1994). Parameter yang
di amati pada semua perlakuan adalah
persentase motilitas sel sperma, durasi
motilitas sel sperma dan lama
penyimpanan sel sperma
Pengamatan motilitas sel sperma
Perlakuan di lakukan dengan
cara meletakkan sperma 10 µL sperma
ikan mas di atas object glass dan
mencampurkannya dengan 10 µL
larutan elektrolit dan non elektrolit ini
setiap larutan dari bahan kimia yang
berbeda tersebut di buat dengan tingkat
osmolalitas yang berbeda lalu di tutup
dengan cover glass dan di amati di
bawah mikroskop.
Pengamatan motilitas sperma
dilakukan dengan mengaktifkan sel
sperma dimana 10 µL sperma di
letakkan di atas object glass lalu
dicampur dengan 10 µL air tawar dan
ditutup dengan cover glass. Motilitas sel
sperma di rekam menggunakan
miroskop Nikon dengan perbesaran
33
ISSN: 2086-8049
Dinamika Maritim Volume 3 nomor 2 tahun 2014 30- 39
40x10 yang memiliki kamera digital
terhubung ke laptop dan software yang
digunakan untuk merekam adalah
gadmei tv home media v.330.
Penghitungan persentase motilitas
sperma di lakukan dengan cara
mengamati gambar sperma yang di
rekam di bawah mikroskop dan
membandingkannya dengan gambar
yang berselang waktu 3 detik
berikutnya, dengan begitu terlihat
pergerakan atau perpindahan sperma
sehingga dapat dibandingkan jumlah
sperma yang motil atau bergerak dengan
jumlah total sperma dan dikali 100%.
Analisis data
Data dari persentase motilitas
ditampilkan dalam bentuk rata-rata
dengan standar defiasi. Untuk analisis
statistic data ditransformasi kedalam
bentuk arcsin√P dan dianalisa dengan
two ANOVA, perbandingan motilitas
sperma ditentukan dengan
menggunakan Duncan’s New Multiple
Range Test dengan interval keparcayaan
95 % menggunakan program SPSS.
 Studi Biologi Dan Ekologi…. ISSN: 2086-8049
Henky Irawan Dinamika Maritim Volume 3 nomor 2 tahun 2014 30- 39

Table 3. Pengaruh pH pada ekstender terhadap persentase motilitas dan lama penyimpanan sel sperma ikan mas

Persentase motilitas (%)

Perlakuan
Hari 0 Hari 1 Hari 2 Hari 3 Hari 4 Hari 5 Hari 6
pq kq c a a a
Control 99.9+0.2 98.1+1.8 18.9+5.7 0.0+0.0 0.0+0.0 0.0+0.0 0.0+0.0a
Extender A 99.4+1.0oq 98.5+1.8lq 97.7+1.0kq 85.8+12.5ei 0.0+0.0a 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender A pH 7.7 98.3+1.9kq 98.7+1.2lq 98.0+2.3kq 92.4+3.3gk 79.6+18.9dg 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender B 98.8+2.1nq 99.4+0.7nq 98.1+2.6kq 91.0+5.7fj 73.8+2.8de 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender B pH 7.7 99.4+1.1oq 98.8+1.4lq 98.4+2.8mq 95.6+3.4ip 94.5+3.3io 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender C 98.5+1.3lq 98.8+1.7lq 98.8+1.3lq 93.6+2.8hm 93.0+3.0hl 12.1+8.6bc 0.0+0.0a
Extender C pH 7.7 100.0+0.0q 97.7+1.5kq 96.7+0.3jq 97.3+2.9kq 80.0+5.6def 5.7+2.5b 0.0+0.0a
Extender D 98.1+1.9kq 97.5+1.3kq 97.9+1.9kq 78.1+26.7dg 0.0+0.0a 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender D pH 7.7 99.4+1.0oq 97.5+1.3kq 96.1+3.7kq 96.3+1.2jq 79.8+6.8def 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender E 99.3+0.7nq 99.3+0.8nq 97.8+2.5kq 93.8+2.6hn 12.7+8.0bc 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender E pH 7.7 99.3+0.8nq 99.9+0.3oq 97.9+2.0kq 95.9+2.0ip 67.1+24.2d 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender F 98.6+1.2lq 99.0+1.1lq 97.3+3.6kq 97.2+1.2kq 95.6+2.1ip 9.4+8.1b 0.0+0.0a
Extender F pH 7.7 99.9+4.0kq 98.6+2.4nq 98.4+1.4kq 96.8+2.7kq 94.4+2.6hn 85.0+13.5eh 0.0+0.0a

Perbedaan huruf superscript pada nilai menunjukkan tingkat keyakinan secara statistik (P < 0.05).
Hari 0: Larutan sperma bercampur ekstander sebelum di simpan.

34
 Studi Biologi Dan Ekologi…. ISSN: 2086-8049
Henky Irawan Dinamika Maritim Volume 3 nomor 2 tahun 2014 30- 39

Pengaruh pH pada ekstender terhadap persentase motilitas dan lama

penyimpanan sel sperma ikan mas

Control
Extender A
Extender A pH 7.7
Extender B
Persentase motilitas (%)

Extender B pH 7.7
Extender C
Extender C pH 7.7
Extender D
Extender D pH 7.7
Extender E
Extender E pH 7.7
Extender F
Extender F pH 7.7

Hari

Gambar 1. Pengaruh pH pada ekstender terhadap persentase motilitas dan lama penyimpanan sel sperma ikan mas

35
 Studi Biologi Dan Ekologi…. ISSN: 2086-8049
Henky Irawan Dinamika Maritim Volume 3 nomor 2 tahun 2014 30- 39

Table 4. Pengaruh pH pada ekstender terhadap durasi motilitas sperma dan lama penyimpanan sel sperma ikan mas

Durasi motilitas (Detik)

Perlakuan
Hari 0 Hari 1 Hari 2 Hari 3 Hari 4 Hari 5 Hari 6
Control 128.0+11.3or 96.7+7.5dn 78.3+9.8bg 0.0+0.0a 0.0+0.0a 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender A 131.0+12.5pr 120.0+30.4lr 94.0+12.8cn 90.7+20.6bl 0.0+0.0a 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender A pH 7.7 114.3+17.9ir 99.3+5.7do 104.3+8.6eq 79.3+6.5bg 79.3+8.0bg 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender B 132.3+5.9or 104.3+7.0eq 101.0+7.5ep 91.0+7.2bl 76.0+6.2bf 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender B pH 7.7 98.7+18.1do 110.7+15.0hr 106.3+17.8fq 91.7+16.0bm 86.3+10.7bj 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender C 115.7+31.5jr 114.7+30.7jr 108.7+17.2fr 104.3+7.5eq 70.3+12.0bcd 64.0+11.1bc 0.0+0.0a
Extender C pH 7.7 132.0+19.9qr 104.3+6.8eq 100.7+18.9dp 89.0+2.6bk 76.3+8.7bf 78.3+8.0bg 0.0+0.0a
Extender D 103.7+7.1eq 101.0+11.8ep 96.3+8.1dn 83.7+6.5bi 0.0+0.0a 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender D pH 7.7 121.3+15.6lr 118.3+11.9kr 102.3+8.5eq 93.0+7.9cm 74.0+12.3be 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender E 110.3+19.1hr 124.3+37.0nr 93.0+15.1cm 93.3+18.6cm 65.3+25.3bc 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender E pH 7.7 120.0+32.1lr 111.0+13.9hr 92.3+15.1cm 83.0+15.7bh 90.7+4.5bl 0.0+0.0a 0.0+0.0a
Extender F 122.3+18.5mr 113.0+17.1hr 100.7+5.5dp 103.0+6.2eq 87.0+15.0bj 62.3+54.8b 0.0+0.0a
Extender F pH 7.7 178.7+33.8s 137.7+26.6r 116.3+23.2jr 103.3+9.0eq 104.0+26.6eq 93.0+7.0cm 0.0+0.0a

Perbedaan huruf superscript pada nilai menunjukkan tingkat keyakinan secara statistik (P < 0.05).
Hari 0: Larutan sperma bercampur ekstander sebelum di simpan.

36
 Studi Biologi Dan Ekologi…. ISSN: 2086-8049
Henky Irawan Dinamika Maritim Volume 3 nomor 2 tahun 2014 30- 39

Pengaruh pH pada ekstender terhadap durasi motilitas sperma dan lama

penyimpanan sel sperma ikan mas

Control
Extender A
Extender A pH 7.7
Extender B
Durasi motilitas (Detik)

Extender B pH 7.7
Extender C
Extender C pH 7.7
Extender D
Extender D pH 7.7
Extender E
Extender E pH 7.7
Extender F
Extender F pH 7.7

Hari

Gambar 2. Pengaruh pH pada ekstender terhadap durasi motilitas sperma dan lama penyimpanan sel sperma ikan mas

37
 Studi Biologi Dan Ekologi….
Henky Irawan
Melihat dari sperma yang sebagai
kontrol yaitu tidak diberi ekstender dengan
sperma yang diberi ekstender maka sperma
yang tidak diberi ekstender sel spermanya
hanya dapat bertahan hingga hari kedua
sedangkan sel sperma dari sperma yang diberi
ekstender dapat bertahan lebih dari hari ke
tiga. Ekstender dibuat pada tingkat osmolalitas
yang dapat mempertahankan sel sperma dalam
kondisi tidak aktif (Bates et al., 1996) dan
fungsi dari ekstender adalah memperpanjang
waktu penyimpanan sel sperma dan untuk
mengencerkan sperma with (Wayman &
Tiersch, 2000).
Pengaruh pH dapat dilihat secara
keseluruhan pada ekstender-ekstender yang
telah di sesuaikan pH nya menjadi 7,7 angka
persentase motilitas dan durasi motilitas lebih
tinggi serta waktu simpan sel sperma lebih
lama dibandingkan dengan ekstender
A,B,C,D,E, dan F yang biasa atau pH nya
tidak di sesuaikan (Tabel 3 dan 4).
Hasil dari penelitian ini menunjukkan
bahwa ekstender F dengan pH 7.7 memberikan
hasil yang terbaik dengan lama penyimpanan
sel sperma selama lima hari dimana hingga
hari kelima tersebut persentase motilitas
sperma 85.0+13.5 % dan durasi motilitas
93.0+7.0 detik berbeda nyata dibandingkan
perlakuan lainnya. Eksternder F dengan pH
7.7 dan eksterder F terbuat dari bahan yang
sama yaitu fructose, tetapi pH ekstender F
tersebut hanya 5.08 dimana ini menunjukkan
bahwa pH memberikan pengaruh terhadap
daya simpan sel sperma ikan mas dimana
motilitas sel sperma ikan mas dapat terjadi
dalam media dengan pH 6.0 hingga 9.0
(Redondo-Müller et al., 1991).
Fructose merupakan gula dimana gula
merupakan komponen dalam ekstender yang
dapat menjadi sumber energi bagi sel sperma
sama halnya pada hewan mamalia fructose dan
glucose juga menjadi sumber energi bagi sel
sperma (Mann & Lutwak-Mann, 1981).
Persentase motilitas menurun secara drastis
setelah hari penyimpanan yang optimum yang
polanya dapat dilihat pada gambar 1, dimana
pada waktu tersebut sel sperma telah
kehilangan kemampuan untuk bergerak atau
motil.
Proses penurunan kemampuan sel
sperma dalam bergerak atau disebut juga
proses penuaan sel sperma yang polanya dapat
dilihat pada gambar 2, dimana durasi motilitas
ISSN: 2086-8049
Dinamika Maritim Volume 3 nomor 2 tahun 2014 30- 39
sel sperma tersebut dari semua perlakuan
menurun dari hari-kehari walaupun selama
masa penyimpanan hingga waktu optimum
ketika sel sperma tersebut diaktifkan masih
ditemukan pesentase motilitas yang baik
KESIMPULAN
Dilihat secara keseluruhan dari semua
perlakuan maka ekstender-ekstender yang di
sesuaikan pH nya menjadi 7.7 yang
menyerupai pH pada seminal plasma ikan mas
tersebut pada persentase motilitas dan durasi
motilitas lebih tinggi serta waktu simpan sel
sperma lebih lama di bandingkan dengan
ekstender-ekstender yang tidak disesuaikan pH
nya.
Ekstender yang memberikan hasil
terbaik dalam penelitian ini adalah eksender F
dengan pH 7.7 dan disamping itu ekstender ini
terbuat dari satu bahan kimia yaitu fructose
sehingga dari segi pembuatannya juga mudah
dibandingkan dengan ekstender lainnya yang
terdiri dari kombinasi beberapa bahan kimia.
TINJAUAN PUSTAKA
Bates, M.C., Wayman, W.R., & Tiersch, T.R.
(1996). Effect of osmotic pressure on
the activation and storage of channel
catfish sperm. Transactions of the
American Fisheries Society, 125,
798-802.
Kruger, J.C.W., Smit, G.L., Van Vuren, J.H.J.
& Ferreira, J.T. (1984). Some
chemical and physical characteristics
of the semen of Cyprinus carpio L.
and Oreochromis mossambicus
(Peters). Journal of Fish Biology, 24,
263-272.
Mann, T., & Lutuwak-Mann, L. 1981. Male
Reproductive Function and Semen.
Springer-Verlag, Berlin, Heidenberg,
New York, New York.
Redondo-Müller, C., Cosson, M.-P., Cosson,
J. & Billard, R. (1991). In vitro
maturation of the potential for
movement of carp spermatozoa.
Molecular Reproduction and
Development, 29, 259–270.
38
 Studi Biologi Dan Ekologi…. ISSN: 2086-8049
Henky Irawan Dinamika Maritim Volume 3 nomor 2 tahun 2014 30- 39

Tiersch, T.R., Goudie, C.A., & Carmichael,

G.J. (1994). Cryopreservation of
channel catfish sperm: storage in
cryoprotectant, fertilization trials,
and growth of channel catfish
produced with cryopreserved sperm.
Transaction of the American
Fisheries Society, 123, 580-586.

Wayman, W.R., & Tiersch, T.R. (2000).

Research methods for
cryopreservation of sperm. World
Aquaculture Society. Baton Rouge,
Lousiana. pp. 264-27

39