Jurnal Sains dan Teknologi Farmasi, Vol. 16, No.

2, 2011, halaman 171-179 ISSN : 1410-0177

OPTIMASI METODA ISOLASI KATEKIN DARI GAMBIR UNTUK

SEDIAAN FARMASI DAN SENYAWA MARKER

Noveri Rahmawati1, Amri Bakhtiar2, Deddi Prima Putra2

1
Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau,
2
Fakultas Farmasi Universitas Andalas

ABSTRACT

Optimization studies out on isolation of catechin from gambier and pasta for the
pharmaceutical and marker compounds have been carried. Gambier gambier and paste
were obtained from the Medicinal Plant Garden Andalas University, Siguntur and Lima
Puluh Kota. Isolation method used was non-purification method, pre-purification for
gambier and fractination for pasta. The analysis performed included catechin solubility,
melting point, maximum absorption, thin-layer chromatography, loss on drying, ash
content, yield and determination of levels of catechin. Product which has the highest levels
of catechins, the determination was continued by analysis of UV spectra and NMR. The
best results for pharmaceuticals derived from Siguntur with pre-purification methods
which resulted in yield 56.3% with 96.17% catechin content, whereas for a marker
compound was obtained from gambier Siguntur pasta with fractionation method which
yielded 12.13% with 97.96% of catechin level.

Keywords: Method of isolation, Gambir, Catechins

_________________________________________________________________________

PENDAHULUAN metil ekstrak etanol daun gambir (sebagai

Gambir adalah ekstrak kering dari ranting
dan daun tanaman Uncaria gambir
(Hunter) Roxb. Termasuk Famili
Rubiaceae dan komoditas perkebunan
rakyat. Ekstrak gambir mengandung
katekin sebagai komponen utama serta
beberapa komponen lain seperti asam
kateku tanat, kuersetin, kateku merah,
gambir flouresin, lemak dan lilin.
Berdasarkan penelitian beberapa produk
gambir yang diolah masyarakat dari
berbagai daerah sentra produksi gambir
di Indonesia, diperoleh kandungan
katekin bervariasi dari 35 % sampai
dengan 95% (Amos, 2010).
Penelitian yang berkaitan dengan
aktivitas ekstrak gambir telah banyak
dilakukan diantaranya aktivitas
antioksidan dan antibakteri dari turunan
antiseptik mulut (Lucida dan Bakhtiar,
2007) dan gambir sebagai imunodilator.
Selain itu juga telah diteliti kemampuan
ekstrak gambir sebagai penghambat
sintesa asam lemak, efek toksik ekstrak
gambir terhadap organ ginjal, hati dan
jantung (Armenia et al., 2004) dan
antifeedan terhadap hama Spodoptera
litura Fab. (Handayani et al., 2004).
Beberapa aktivitas ekstrak gambir di atas
sebagian besar karena disebabkan oleh
katekin yang terkandung di dalam
gambir.
Selain uji aktivitas dari ekstrak gambir,
telah dilakukan juga beberapa uji
aktivitas dari katekin, diantaranya katekin
sebagai antimikroba (Dogra, 1987),
antispasmodik, bronkodilator dan
vasodilator (Ghayur et al., 2007) serta
digunakan pada penderita gingivitis.

171
Noveri R., et al.
Untuk penggunaan sebagai kosmetik,
telah dilakukan uji diantaranya sebagai
antiaging, sebagai anti jerawat dan untuk
menurunkan berat badan. Katekin juga
digunakan untuk senyawa marker yang
saat ini masih tergantung pada impor.
Pada penelitian ini akan dilakukan isolasi
katekin dari gambir dan pasta gambir
yang berasal dari Kabupaten Lima Puluh
Kota, Siguntur dan gambir terstandarisasi
dengan metoda yang berbeda dengan
peneliti sebelumnya.
METODOLOGI PENELITIAN
Sampel yang digunakan adalah pasta
gambir dan gambir (Uncaria gambir
(Hunter) Roxb.) yang diperoleh dari
perkebunan rakyat di Kabupaten Lima
Puluh Kota, Siguntur dan gambir yang
diproduksi Kebun Tumbuhan Obat
Universitas Andalas. Juga etil asetat,
metanol, pelarut teknis untuk isolasi dan
pelarut pure analitis untuk analisis
spektroskopi, kertas saring whatman cat
No. 1001 (125 mm), aquades dan katekin
pembanding dari SIGMA.
Peralatan
Alat-alat yang digunakan dalam
penelitian ini adalah sebagai berikut :
alat-alat gelas, alat destilasi. rotary
evaporator, oven vakum, lampu
ultraviolet 365 mm, fisher jhon melting
point apparatus, spektrofotometer UV-
Visible (Shimadzu UV-1601),
spektrofotometer IR merk Shimadzu type
IR Prestige-21, Spektrofotometer NMR
merk JEOL type ECA 500 dengan medan
magnet 0,2 Hz.
Pemeriksaan Mutu Gambir
a.Susut Pengeringan
Sampel ditimbang secara seksama
sebanyak 1 gram dan dimasukkan ke
dalam botol timbang dangkal bertutup
Persiapan larutan standar kemudian
diukur serapannya dengan
J. Sains Tek. Far., 16(2), 2011
yang sebelumnya telah dipanaskan pada
suhu 1050C selama 30 menit dan telah
ditara. Sebelum ditimbang, sampel
diratakan dalam botol timbang, dengan
menggoyangkan botol, hingga
merupakan lapisan setebal lebih kurang 5
mm sampai 10 mm. Kemudian
dimasukkan ke oven, buka tutupnya,
keringkan pada suhu 1050 C hingga bobot
tetap. Sebelum setiap pengeringan,
biarkan botol dalam keadaan tertutup
mendingin dalam eksikator hingga suhu
kamar.
b.Kadar abu
Lebih kurang 2 g sampai 3 g
sampel yang telah digerus dan ditimbang
seksama, dimasukkan, ke dalam krus
silikat yang telah dipijarkan dan ditara,
ratakan. Pijarkan perlahan-lahan hingga
arang habis, dinginkan, timbang. Jika
cara ini arang tidak dapat dihilangkan,
tambahkan air panas, saring melalui
kertas saring bebas abu. Pijarkan sisa
kerta dan kertas saring dalam krus yang
sama. Masukkan filtrat ke dalam krus,
uapkan, pijarkan hingga bobot tetap,
timbang. Hitung kadar abu terhadap
bahan yang telah dikeringkan di udara
(Dirjen POM, 2000).
c. Pemeriksaan Kadar katekin
Persiapan Standar Katekin
Katekin standar dikeringkan di
dalam oven pada temperatur 1050C
selama 3 jam (SNI, 2000).
Persiapan Contoh Gambir
Contoh gambir dihaluskan dan
lapisan gambir dibuat setipis mungkin di
atas kaca arloji atau cawan petri. Lapisan
gambir tersebut dikeringkan di atas oven
pada temperatur 1050C selama 3 jam
sampai kehilangan berat 15-17 % (SNI,
2000).
spektrofotometri UV pada panjang
gelombang maksimum.
172
Noveri R., et al. J. Sains Tek. Far., 16(2), 2011

Perhitungan : Universitas Andalas Padang dengan

Isolasi Katekin untuk Sediaan menggunakan alat melting point Fisher
Farmasi
% katekin = Et 279 x Ws x 100 Johns.
Ec 279 W
a.Gambir Pasaran c. Serapan Maksimum
Gambir pasaran diperoleh dari Lebih kurang 5 mg sampel ditimbang,
Kabupaten Lima Puluh Kota dan Pesisir dilarutkan dalam etil asetat pada labu
Selatan. 100 g serbuk gambir dimasukkan ukur 100 ml. Serapan diukur pada
ke dalam erlenmeyer 2 L tambahkan air panjang gelombang 280 nm
sebanyak 500 ml, panaskan selama 1 jam
lalu disaring. Filtrat didiamkan sampai d. Reaksi Warna
terbentuk endapan. Sejumlah cuplikan katekin, dilarutkan
Endapan dikeringkan dalam oven dalam etil asetat atau methanol. Beberapa
kemudian diserbukkan dan ditambah etil tetes larutan besi (III) klorida
asetat lalu direfluks selama 1 jam dan ditambahkan akan terbentuk warna hijau
disaring. Filtratnya dikentalkan kehitaman.
menggunakan rotary evaporator,
dikeringkan dan dianalisa. Pengulangan e. Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
dilakukan sebanyak 3 kali. Sampel dilarutkan dalam metanol,
lalu ditotolkan di atas plat KLT. Sebelum
b.Gambir Terstandarisasi plat dimasukkan, terlebih dahulu eluen
100 gram serbuk gambir ditambah Metanol : Etil asetat (1:1) dijenuhkan.
etil asetat sebanyak 500 ml lalu direfluks Setelah jenuh plat KLT dimasukkan ke
selama 1 jam lalu disaring dengan dalam camber yang berisi eluen,
menggunakan kertas saring. Filtratnya ditentukan Rf nya.
dikentalkan menggunakan rotary
evaporator, dikeringkan dan dianalisa. f. Penentuan Susut Pengeringan
Pengulangan dilakukan sebanyak 3 kali. Lebih kurang 0,1 g katekin
ditimbang dalam wadah yang sudah
c. Pasta Gambir ditara dan berat konstan. Dikeringkan
Pasta gambir difraksinasi pada suhu 1050C selama 5 jam dan
menggunakan etil asetat dan air dengan ditimbang kembali. Pengeringan
perbandingan 1 : 5, ambil bagian etil dilanjutkan dan ditimbang pada jarak 1
asetat dan diuapkan in vacuo, jam sampai perbedaan antara 2
dikeringkan dan dianalisa. Pengulangan penimbangan berturut-turut tidak lebih
dilakukan sebanyak 3 kali. dari 0,25 %.

Analisa Katekin untuk Sediaan g. Pemeriksaan Kadar Katekin

Farmasi
Kadar katekin ditentukan dengan metoda
a. Kelarutan yang sama pada pemeriksaan mutu
Reaksi identifikasi dilakukan terhadap gambir.
katekin. Pelarut yang digunakan adalah
etanol. Analisa Katekin untuk Senyawa
Marker
b. Pemeriksaan Titik Lebur
Pengukuran titik leleh dilakukan di a. Perekaman Spektrum UV
Laboratorium Biota Sumatera

173
Noveri R., et al. J. Sains Tek. Far., 16(2), 2011

Perekaman spektrum ultraviolet warna, bau, rasa, susut pengeringan,

menggunakan spektrofotometer
Ultraviolet, dilakukan dengan melarutkan
1,0 mg katekin dalam etil asetat.
Kemudian larutan dimasuk kan ke dalam
kuvet dan diukur puncak serapan
senyawa lalu dibandingkan dengan
standar.
b. Perekaman Spektrum NMR
Spektrum resonansi magnetik inti
direkam dengan alat Bruker Cup 500.
Spektrum ini direkam dalam pelarut
CD3OD.
Analisa Data
Data yang diperoleh diuji secara statistik
menggunakan uji t berpasangan.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil pemeriksaan mutu dari masing –
masing gambir yang meliputi bentuk,
kadar abu dan kadar katekin. Dari
pemeriksaan mutu yang dilakukan,
didapatkan hasil yang dapat dilihat pada
Tabel 1. Hasil analisa katekin yang
diisolasi dengan metoda non purifikasi,
metoda pre purifikasi dan metoda
fraksinasi dapat dilihat pada Tabel 2,3
dan 4.
Hasil analisis kualitatif katekin
menggunakan KLT didapatkan Rf 0,72
dan 0,78 untuk katekin KTO np dan
katekin dari pasta KTO. Rf katekin LPK
non purifikasi 0,74, metoda pre purifikasi
0,74 dan dari pasta 0,68. RF katekin SGT
non purifikasi adalah 0,76, metoda pre
purifikasi 0,68 dan dari pasta 0,72.
Sedangkan Rf katekin pembanding
adalah 0,73(Depkes, 2008).

Tabel 1. Hasil Pemeriksaan Mutu Gambir KTO, LPK dan SGT

Pengamatan
No Pemeriksaan KTO LPK SGT Persyaratan
1. Pemerian
a. Bentuk Utuh Utuh Utuh Utuh
b. Warna Kuning Kehitaman Kuning Kuning
kecoklatan kecoklatan Kecoklatan
c. Bau Khas Khas Khas Khas
d.Rasa Sepat Sepat Sepat -
2. Susut 18,51 ± 16,47± 0,11 20,66 ± 16
Pengeringan (%) 0,08 0,03
3. Kadar Abu (%) 2,09 ± 3,25 ± 0,025 2,22 ± 5
0,015 0,015
4. Kadar Katekin 80,71 ± 49,04 ± 0,17 60,34 ± Min 50
(%) 0,44 0,19

174
 Noveri R., et al. J. Sains Tek. Far., 16(2), 2011

Tabel 2. Hasil Pemeriksaan Katekin Non Purifikasi

No Pemeriksaan Pengamatan
KTO LPK SGT
1. Pemerian
a. Bentuk Serbuk Serbuk Serbuk
b. Warna Kuning Kuning Kuning
c. Bau Khas Khas Khas
d. Rasa Sepat Sepat Sepat
2. Kelarutan
Dalam etanol 1 : 4,13 1:3,24 1 : 6,8
3. Reaksi Warna Biru Biru Biru
Keunguan keunguan keunguan
4. Panjang Gelombang 280 nm 280 nm 280 nm
Serapan Maksimum
5. Titik Lebur 168 -170 158-162 166-170
6. Susut 9,55 ± 0,07 7,20 ± 0,05 9,56 ± 0,08
Pengeringan (%)
7. Kadar Abu (%) 0,033 ± 0,01 0,66 ± 0,006 0,30 ± 0,006
8. Kadar Katekin (%) 89,66 ± 0,19 76,56 ± 0,10 91,22 ± 0,62
9. Rendemen (%) 98,2 ± 0,85 64,67 ± 0,15 69,6 ± 0,10

Tabel 3. Hasil Pemeriksaan Katekin Pre Purifikasi

No Pemeriksaan LPK SGT

1. Pemerian
a. Bentuk Serbuk Serbuk
b. Warna Kuning Kuning
c. Bau Khas Khas
d. Rasa Sepat Sepat
2. Kelarutan dalam etanol 1:2,48 1:4,69
3. Reaksi Warna Biru keunguan Biru keunguan
4. Serapan Maksimum 280 280 nm
5. Titik Lebur 168-172 172-175
6. Susut Pengeringan (%) 11,4 ± 0,1 19,61 ± 0,14
7. Kadar Abu (%) 1,14 ± 0,01 0,14 ± 0,006
8. Kadar Katekin (%) 94,85 ± 0,00 96, 17 ± 0,18
9. Rendemen (%) 57,40 ± 0,20 56,3 ± 0,10

175
 Noveri R., et al. J. Sains Tek. Far., 16(2), 2011

Tabel 4. Pemeriksaan Katekin dari Pasta Gambir

No Pemeriksaan KTO LPK SGT

1. Pemerian
a. Bentuk Serbuk Serbuk Serbuk
b. Warna Kuning Kuning Kuning
c. Bau Khas Khas Khas
d. Rasa
2. Kelarutan dalam etanol 1: 3,06 1 : 3,12 1 : 4,75
3. Reaksi Warna Biru Biru Biru
keunguan keunguan keunguan
4. Panjang Gelombang 280 nm 280 nm 280 nm
5. Titik Lebur 174-178 174-178 176 -178
6. Susut Pengeringan (%) 8,63 ± 0,02 16,45 ± 0,08 15,82 ± 0,03
7. Kadar Abu (%) 0,63 ± 0,006 0,82 ± 0,006 0,19 ± 0,006
8. Kadar Katekin (%) 93,60 ± 0,11 94,19 ± 0,11 97,96 ± 0,22
9. Rendemen (%) 18,8 ± 0,10 11,85 ± 0,11 12,13 ±0,05

A B

Keterangan :
A : Profil KLT Katekin dari Gambir SGT dengan Metoda Isolasi Pre
Prurifikasi
B : Profil KLT Katekin dari Pasta SGT dengan Metoda Isolasi
Fraksinasi

176
Noveri R., et al.
Untuk penggunaan sebagai sediaan
farmasi, metoda isolasi katekin pre
purifikasi dapat digunakan karena
menghasilkan katekin dengan mutu
dan rendemen yang sesuai
spesifikasi. Sedangkan katekin untuk
penggunaan sebagai senyawa marker
dapat digunakan katekin dari pasta
Siguntur yaitu dengan kadar 97,9 %.
Kadar katekin yang diperoleh ini
mendekati dengan kadar katekin
yang dipersyaratkan oleh SIGMA
yaitu 98 %. Hasil pengukuran
spektrum ultraviolet (UV) sampel
katekin dalam etil asetat
menunjukkan serapan maksimum
pada panjang gelombang (λ) 280 nm
Spektrum 13C-NMR dan data
pergeseran kimia katekin hasil isolasi
diukur menggunakan pelarut
metanol-D3 dengan frekuensi 500
Gambar 1. Hasil Spektrogram Katekin Secara Sprektrofotometri
J. Sains Tek. Far., 16(2), 2011
MHz. Dari data 13C-NMR dapat
diketahui bahwa katekin hasil isolasi
memiliki 15 signal yang
menunjukkan adanya atom karbon
Sebanyak 15 buah, yaitu δc 157,8
(C- 9), 157,6 (C-7), 156,9 (C-5),
146,28 (C- 4’), 146, 26 (C-3’), 132,2
(C- 1’), 120,1 (C- 6’), 116,2 (C-5’),
115,3 (C- 2’), 100,9 (C-10), 96,3 (C-
6), 95,5 (C- 8), 82,8 (C-2), 68,8 (C-
3), 28,5 (C-4) ppm.
Hasil pemeriksaan spektrum
1
H-NMR katekin hasil isolasi diukur
menggunakan pelarut metanol-D3
dengan frekuensi 500 MHz.
Pergeseran kimia yang terjadi pada
2,52 (1H,dd), 2,84 (1H, dd), 3,98
(1H,m), 4,57 (1H, d), 5,86 (1H, d),
5,93 (1H, d), 6,72 (1H, dd), 6,76
(1H, d), 6,84 ( 1H, d).
177
Noveri R., et al. J. Sains Tek. Far., 16(2), 2011

Gambar 2. Spektrum 13C - NMR Katekin Hasil Isolasi dengan Pelarut

Metanol-D3 Frekwensi 500 MHz
Tabel 5. Spektrum 13C - NMR Katekin Hasil Isolasi dengan Pelarut
Metanol-D3 Frekwensi 500 MHz

Gambar 3. Spektrum 1H-NMR Katekin Hasil Isolasi dengan Pelarut

Metanol - D3 Frekwensi 500 MHz

Tabel 6. Spektrum 1H-NMR Katekin Hasil Isolasi dengan Pelarut

Metanol - D3 Frekwensi 500 MHz

178
Noveri R., et al. J. Sains Tek. Far., 16(2), 2011

KESIMPULAN 3391-2000, Departemen

Perindustrian dan Perdagangan.
Berdasarkan penelitian yang telah Budavari, S. (edit) 1996. The Merck
dilakukan maka dapat dibuat Index. An Encyclopaedia of
kesimpulan sebagai berikut : Chemicals, Drugs and
th
Biologicals.12 ed. Merck and
1. Metoda terbaik isolasi CO, lnc. Whitehouse Station.
katekin untuk sediaan farmasi N.J.p 312-313.
adalah pre purifikasi dengan Dogra, S, C. 1987. Antimikrobial Agents
kadar katekin 96,17 %. Used in Ancient India, Indian
2. Metoda terbaik isolasi Journal of History of Science,
katekin untuk senyawa 22 (2) : 164-169.
marker adalah fraksinasi dari Departemen Kesehatan Republik
pasta gambir dengan kadar Indonesia, 2008. Farmakope
katekin 97,96 % Herbal Indonesia Edisi I.
3. Sumber bahan baku yang Ghayur, M, N., Khan H., Gilani, A, H.
terbaik untuk memperoleh 2007. Antispasmodic,
Bronchodilator and
katekin dengan mutu dan Vasodilator Activities of (+)-
rendemen yang sesuai Catechin, a Naturally Occurring
spesifikasi adalah Siguntur Flavonoid, Arch Pharm Res Vol
30, No 8, 970-975.
Gumbira, S, E., Syamsu, K., Mardliyati,
DAFTAR PUSTAKA E., Herryandie, A., Evalia, NA.,
Rahayu, DL., Puspitarini, R.,
Amos, 2010. Kandungan Katekin Ahyarudin, A., Hadiwijoyo, A.
Gambir Sentra Produksi Di 2009. Agroindustri dan Bisnis
Indonesia. Gambir Indonesia. IPB Press,
Pusat Pengkajian Teknologi Bogor.
Agroindustri Badan Pengkajian .Handayani, D., Ranova, R.,
dan Penerapan Teknologi. Hemriyanton, B, Farlian, A.,
Jurnal Standardisasi Vol. 12, Almahdy dan Arneti. 2004.
No. 3 Tahun 2010: 149 – 155. Pengujian Efek Antifeedan dari
Armenia, Siregar, A dan Arifin, H. Ekstrak dan Fraksi Daun
2004. Toksisitas Ekstrak Uncaria Gambir (Hunter) Roxb.
Gambir (Uncaria gambir, Roxb) Terhadap Hama Spodoptera
Terhadap Organ Ginjal, Hati Litura Fab. Prosiding Seminar
dan Jantung Mencit, Prosiding Nasional XXVI Tumbuhan Obat
Seminar Nasional XXVI Indonesia.
Tumbuhan Obat Indonesia. Lucida, H., Bakhtiar, A., Putri, A,W.
Azad, KA.,Ogiyama, Koichi, Sassa dan 2007. Formulasi Sediaan
Takeshi. 2001. Isolation of (+)- Antiseptik Mulut dari Katekin
catechin and a new Gambir, Universitas Andalas,
polyphenolic compound in Padang.
Bengal catechu, J Wood Sci Parameter Standar Umum Ekstrak
47:406-409. Tumbuhan Obat, cetakan
Balai Penelitian dan Pengembangan pertama, 2000, Departemen
Industri Padang. 2000. Standar Kesehatan Republik Indonesia
Nasional (SNI) Gambir, 01- Direktorat Jenderal Pengawasan
Obat dan Makanan, Jakarta.

179
Noveri R., et al. J. Sains Tek. Far., 16(2), 2011

180