TUGAS KIMIA DASAR

RESUME LARUTAN BUFFER

“LARUTAN BUFFER STANDAR YANG DIGUNAKAN PADA PH FISIOLOGIS

ASAM N-(2-etilhidroksi) piperazin-N'-4-butanasulfonik (HEPBS) DARI 5 SAMPAI
55°C”

Oleh

Moch. Chusnul Rifqi Zauhair

NIM 182210101162

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS JEMBER

2019
 Asam dan basa merupakan salah sifat kimia yang berperan penting bagi kehidupan.
Asam dan basa merupakan sistem homeostasis suatu kehidupan. Salah satu senyawa yang akan
dibahas di resume kali ini adalah senyawa HEPBS yang tergolong senyawa asam lemah.
HEPBS memiliki nama IUPAC yakni N-(2-Hydroxyethyl)piperazine-N'-(4-butanesulfonic
acid) atau dalam Bahasa Indonesia adalah Asam N-(2-etilhidroksi)piperazin-N'-4-
butanasulfonik. Rumus molekul senyawa HEPBS adalah C10H22N2O4S. Senyawa HEPBS
merupakan senyawa organik zwitterionik, ion polar yang terbentuk dari suatu molekul yang
terdiri dari dua atau lebih gugus fungsi yang mana setidaknya memiliki satu muatan positif dan
satunya memiliki ion negatif yang memiliki nilai muatan formal nol. Karena memiliki
setidaknya satu muatan positif dan muatan negatif, zwitterionik sering disebut garam inner –
inner salt. Senyawa HEPBS merupakan suatu agen dapar – Buffering agents, yang merupakan
asam atau basa lemah yang digunakan untuk asiditas (pKa) dari senyawa yang akan diketahui
nilai derajat keasamannya setelah penambahan asam atau basa lemah. Senyawa ini memiliki
nilai asiditas (pKa) atau pH fisiologis sebesar 8.3 yang memungkinkan untuk digunakan
sebagai kultur sel – tergantung dari keadaan lingkungan sekitar.

Nilai pH enam larutan buffer dengan komposisi yang sama pada skala molal dan
delapan larutan buffer memiliki kekuatan ionik (I = 0,16 mol.kg-1) mirip dengan konsentrasi
plasma darah telah dievaluasi pada 12 suhu dari 5 hingga 55°C menggunakan konvensi Bates-
Guggenheim dan persamaan Debye-Hückel yang disempurnakan. Nilai Ej untuk larutan buffer
HEPBS telah diperoleh dari pengukuran sel junction yang mengalir. Nilai-nilai Ej ini telah
digunakan untuk memastikan nilai-nilai pH operasional pada 25 dan 37 °C untuk larutan buffer
HEPBS. Nilai pH pada 25 dan 37°C masing-masing adalah 7,415 dan 7,395, untuk larutan
buffer fosfat fisiologis. Buffer zwitterionik HEPBS terbukti bermanfaat sebagai standar pH
sekunder di wilayah yang dekat dengan serum darah.

Bates dan rekan-rekannya telah mengemukakan bahwa nilai pK2 dan jumlah
termodinamika senyawa tersebut dari 5 hingga 55 ° C, pada interval 5 ° C. Nilai-nilai ini sangat
sesuai dengan nilai Roy dan rekannya. Kalibrasi elektroda dengan pH meter pada pH dekat 7
adalah rutin di laboratorium klinis. NBS "buffer darah", KH2PO4 (0,008695) + Na2HPO4
(0,03043 mol.kg-1) telah diadopsi secara universal sebagai solusi standar referensi.
Keterbatasan 'buffer fosfat darah' adalah: (a) tidak ada resistansi matriks sampel dari bahan
darah, menghasilkan presipitasi dengan kation bivalen, dan (b) koefisien suhu darah tidak
sesuai dengan itu buffer fosfat.
 Sebelum terjadiya penelitian ini telah ditemukan nilai pK2 dari asam N-
(2hydroxyethyl)piperazine-N'-4-butanesulfonic (HEPBS) pada suhu 5 hingga 55°C, termasuk
pada suhu 37°C. Zat penyangga yang direkomendasikan oleh Good ini berguna untuk kontrol
pH di wilayah yang dekat dengan solusi fisiologis.

Zat buffer yang direkomendasikan oleh Good berguna untuk pengukuran pH dan
mengontrol keasaman pada kisaran pH 6-8. Roy dan rekan kerjanya telah melaporkan data pK2
dan nilai pH buffer asam amino tersubstitusi-N, asam asetat bis-[(2-hidroksiethil) amino]
(BICINE), dan nilai pH untuk buffer TRICINE. Nilai pK2 dan pH untuk buffer HEPES telah
diterbitkan oleh Feng dan rekan kerjanya. Kuantitas termodinamika (pK2 dan pH) buffer
fisiologis MOPS dan MOPSO telah diterbitkan oleh Roy dan rekan kerjanya, Wu dan rekannya
masing-masing. Larutan buffer ini terletak pada kisaran pH fisiologis 6-8. Bates dan rekan
kerjanya merekomendasikan buffer TRICINE sebagai standar utama untuk pengukuran pH.
Goldberg dan rekannya menerbitkan data pK2 dan jumlah termodinamika terkait untuk reaksi
ionisasi 68 senyawa buffer biologis. Mereka dengan jelas menunjukkan bahwa tidak ada data
untuk pK2 dan pH yang tersedia untuk bahan buffer HEPBS.

Oleh karena itu, peneliti diminta untuk mempelajari komposisi penyangga HEPBS
berikut ini pada skala konsentrasi molekuler yang dinyatakan dalam mol.kg-1. Nilai tepat dari
molalitas buffer, HEPBS, NaHEPBS, dan NaCl dimasukkan ke dalam tanda kurung untuk
komposisi berikut:

(a) HEPBS (0,02) + NaHEPBS (0,02),

(b) HEPBS (0,04) + NaHEPBS (0,08),

(c) HEPBS (0,08) + NaHEPBS (0,08),

(d) HEPBS (0,04) + NaHEPBS (0,04),

(e) HEPBS (0,05) + NaHEPBS (0,05),

(f) HEPBS (0,06) + NaHEPBS (0,06),

(g) HEPBS (0,02) + NaHEPBS (0,04) + NaCl (0,12),

(h) HEPBS (0,03) + NaHEPBS (0,06) + NaCl (0,10)

(i) HEPBS (0,04) + NaHEPBS (0,08) + NaCl (0,08)

(j) HEPBS (0,03) + NaHEPBS (0,09) + NaCl (0,07)

 (k) HEPBS (0,04) + NaHEPBS (0,04) + NaCl (0,12)

(l) HEPBS (0,05) + NaHEPBS (0,05) + NaCl (0,11)

(m) HEPBS (0,06) + NaHEPBS ( 0,06) + NaCl (0,10)

(n) HEPBS (0,08) + NaHEPBS (0,08) + NaCl (0,08).

HEPBS, dibeli dari Sigma Chemical Co., di kristalisasi dua kali dari 85 berat % etanol.
Sampel dikeringkan dengan vakum. Senyawa yang dimurnikan diuji dengan titrasi dengan
larutan standar NaOH. Kemurnian sampel adalah 99,94%. Semua solusi penyangga untuk
pengukuran sel disiapkan dengan metode berat dengan menambahkan jumlah air
konduktivitas, bahan penyangga, NaCl, dan larutan standar NaOH. Elektroda hidrogen hitam
platinum berlapis tipis dan elektroda perak-perak klorida termal-elektrolit dibuat seperti yang
dijelaskan dalam literatur.

Untuk menunjukkan keakuratan nilai pH dari empat belas larutan buffer, persamaan
berikut tanpa liquid junction digunakan untuk pengukuran emf:

Pt(s), H2(g, 1 atm)│HEPBS (m1) + NaHEPBS (m2) + NaCl (m3)│AgCl(s), Ag(s)

Dimana spesies dalam larutan dinyatakan dalam molalitas. Potensi sambungan cair, Ej,
diukur menggunakan persamaan:

Pt(s), H2(g, 1 atm)│HEPBS (m1) + NaHEPBS (m2),

NaCl (m3)││KCl(satd) │Hg2Cl2(s), Hg(l)

Nilai gaya gerak listrik sel galvanik (A) setelah koreksi tekanan biasa ke 1 atm. untuk
semua larutan buffer eksperimental dan suhu dimasukkan dalam Tabel 1 (tanpa Cl-) dan tabel
2 (dengan Cl-).

Nilai PαH dari semua larutan buffer termasuk larutan salin isotonik (I = 0,16) telah
dihitung dengan menggunakan metode standar Bates. Nilai -log (γHγClmH) atau p (aHγCl)
dikenal sebagai fungsi keasaman untuk enam larutan buffer dengan ion Cl, dan 12 suhu
diturunkan dari persamaan yang diberikan di bawah ini:

𝐸−𝐸°
p(αHγCl) + 𝑙𝑜𝑔10 𝑚𝐶𝑙
𝑘

Plot linier p(αHγCl) versus molalitas ion klorida, mCl-, menghasilkan nilai p(αHγCl)°
pada mCl- = 0. Nilai E, E°, dan mCl- dapat diperoleh dari Tabel 1 dan 2 dari intersep plot, nilai-
nilai p(αHγCl)° untuk enam larutan buffer dengan akurasi ± 0,001 tercantum pada Tabel 3.
Nilai-nilai p(αHγCl) dari 5 hingga 55°C untuk delapan buffer isotonik salin solusi (I = 0,16)
yang mengandung NaCl dimasukkan dalam Tabel 4. Nilai pH untuk enam larutan buffer Cl-
diperkirakan dari persamaan yang ditunjukkan di bawah ini:

pH(s) = p(αHγCl)° + log10γ°Cl

Persamaan Debye-Hückel yang diperluas dari konvensi Bates-Guggenheim digunakan

untuk perhitungan koefisien aktivitas ion tunggal, log10γ°Cl berguna dalam penugasan nilai pH
untuk standar solusi buffer yang ditunjukkan persamaan yang diberikan di bawah ini digunakan
untuk estimasi log10γ°Cl.

𝐴√𝐼
log10γ°Cl = − 1+𝐵𝑎°√𝐼 + 𝐶𝑙

Bentuk zwitterionik dari HEPBS diasumsikan tidak memberikan kontribusi terhadap

kekuatan ionik (I). Karena nilai pH larutan buffer HEPBS mendekati 7, hidrolisis HEPBS dan
Na-HEPBS diabaikan. Parameter C yang dapat disesuaikan diperkirakan dari persamaan
kuadrat dari bentuk yang ditunjukkan di bawah ini dalam sebuah persamaan.

C = C25 + 6.2 × 10-4(t - 25) - 8.7 × 10-6(t - 25)2

Dimana C25 = 0,032 kg.mol-1 pada 25°C dan t adalah suhu dalam derajat Celsius.

Dengan menggunakan seluruh persamaan tersebut, nilai-nilai pαH untuk enam larutan
buffer Cl- bebas diberikan pada Tabel 5. Persamaan kuadrat untuk pαH sebagai fungsi suhu
dinyatakan oleh persamaan untuk komposisi berikut:

HEPBS (0.02) + NaHEPBS (0.04):

paH = 8.522 – 1.460×10-2(t - 25) – 1.100×10-5(t - 25)2

HEPBS (0.04) + NaHEPBS (0.08)

paH = 8.499 – 1.439×10-2(t - 25) + 3.640×10-6(t - 25)2

HEPBS (0.08) + NaHEPBS (0.08)

paH = 8.213 – 1.474×10-2(t - 25) + 1.310×10-5(t - 25)2

HEPBS (0.04) + NaHEPBS (0.04)

paH = 8.209 – 1.374×10 – 2(t – 25) + 4.570 × 10 – 5(t – 25)2

 Tabel 1. Gaya Elektromotif Sel A Pt(s); H2 (g, 1 atm) | HEPBS (m1), NaHEPBS (m2),
NaCl (m3) | AgCl(s), Ag(s)

Tabel 2. Emf dari Sel A (dalam volt) Pt(s); H2 (g, 1 atm) | HEPBS (m1), NaHEPBS
(m2), NaCl (m3) | AgCl(s), Ag(s)
 Tabel 3. p(αHγCl) dari (HEPBS + NaHEPBS) larutan buffer 5 to 55 °C, yang
disesuaikan dengan persamaan diatas.

Tabel 4. p(αHγCl) dari (HEPBS + NaHEPBS) larutan buffer 5 to 55 °C, yang

disesuaikan dengan persamaan diatas.
 Tabel 5. Nilai p(αHγCl) dari (HEPBS + NaHEPBS) larutan buffer 5 to 55 °C, yang
disesuaikan dengan persamaan diatas.