BAB I

Pendahuluan
1.1 Latar belakang

Sentrifugal kromatografi lapis tipis adalah teknik kromatografi preparatif yang

menggunakan gaya sentrifugal untuk pemisahansistem multi-komponen. sebuah
instrumen yang biasa digunakan dalam teknik ini diberi nama sebagai
kromatotron(Asian journal of Pharmacy and life Science, 2011).

Kromatotron memiliki prinsip sama seperti kromatografi klasik dengan aliran

fase gerak yang dipercepat oleh gaya sentrifugal.Kromatografi jenis ini
menggunakan rotor yang dimiringkan dan terdapat dalam ruang tertutup oleh plat
kaca kuarsa, sedangkan lapisan penyerapnya berupa plat kaca yang dilapisi oleh
silika gel. Plat tersebut dipasang pada motor listrik dan diputar dengan kecepatan
800rpm.Pelarut pengelusi dimasukkan ke bagian tengah pelarut melalui
pompatorak sehingga dapat mengalir dan merambat melalui lapis tipis karenagaya
sentrifugal. Untuk mengetahui jalannya proses elusi dimonitor dengan lampu UV
(Hostettmann, 1995)

Ciri khas penyiapan kromatotron adalah sentrifugal dipercepat, radial,

kromatografi lapis tipis. Sampel yang akan dipisahkan digunakan, sebagai
larutan, dekat dari pusat diskyang berputar dilapisi dengan lapisan tipis dari
sorben. Elusi dengan bentuk pelarut band dari komponen terpisah yang berputar
melingkar keluar dari tepi rotor bersama-sama dengan pelarut. Sebuah sistem
pengumpulan baru membawa eluat untuk satu output tabung (Asian journal of
Pharmacy and-life Science,2011).

1
1.2 Perumusan masalah
1. Apa itu Kromatotron?
2. Apa keuntungan khusus dari Kromatotron?
3. Bagaimanakah Ciri-ciri sistem Cylograph (rotor)?
4. Apa itu Chylograph?
5. Bagaimanakah prinsip kerja alat Kromatotron?
1.3 Tujuan
1. Mengetahui aapa itu kromatotron
2. Mengetahui keuntungan khusus kromatotron
3. Mengetahui ciri-ciri sistem Cylograph
4. Mengetahui apa itu Chylograph
5. Mengetahui Prinsip kerja dari alat kromatotron

2
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Lapisan Tipis Kromatografi

Lapisan tipis kromatografi abstrak adalah teknik persiapan kromatografi yang

menggunakan gaya sentrifugal untuk pemisahan sistem multi-komponen. Alat yang
biasa digunakan dalam teknik ini disebut kromatotron. Kromatotron adalah sebuah
persiapan … yang dipercepat tengah malam … radial, kromatografi lapisan tipis.
Sampel yang akan dipisahkan digunakan, sebagai solusi, di dekat pusat sebuah
cakram berputar yang dilapisi lapisan tipis sorok. Elution oleh pelarut bentuk
melingkar dari komponen dipisahkan yang berputar dari tepi rotor bersama dengan
solvent. Sistem koleksi baru membuat jalan keluar dari satu keluaran. Sistem
Cyclograph adalah alat yang dipercepat centrifugally untuk mempersiapkan
pemisahan kromatografi. Alat ini memutar lapisan adsorbent material dilapisi sebagai
cincin datar pada kaca mundur. Fase stasioner untuk instrumen cyclograph (rotor)
yang mirip dengan persiapan plat TLC tapi bulat bukan rectangular. Metode
kromatografi Centrifugal dapat diterapkan dalam dua versi: linear dan radial. Dalam
versi radial dari centrifugal TLC, sistem kromatografer berputar tentang porosnya
sehingga gerakan fase bergerak dipercepat oleh kekuatan pemusing. Sistem
chromatografi Cyclograph centrifugal menggabungkan keuntungan dari fiktifik dan
kromatografi kolom. Untuk mengirim pemisah yang cepat dan efisien. Sebagian besar
tempat pemisahan terjadi dalam dua puluh menit atau kurang. Pemisahan cepat
adalah hasil dari tindakan sentrifugal dari Rotor yang berputar mendorong fase
bergerak melalui lapisan ceruk.

3
2.2 Perkenalan Kromatografi

kromatografi adalah istilah kolektif untuk serangkaian teknik laboratorium

untuk pemisahan campuran. Campuran itu larut dalam cairan yang disebut "fase
bergerak ", yang membawanya melalui sebuah struktur yang memuat bahan lain yang
disebut" fase stasioner ". Berbagai konstituen perjalanan campuran pada kecepatan
yang berbeda, menyebabkan mereka terpisah. Pemisahan didasarkan pada pemisahan
diferensial antara fase mobile dan stasioner. Perbedaan yang tidak kentara dalam
partisi senyawa menghasilkan daya retensi yang berbeda pada fase yang tidak
bergerak dan dengan demikian mengubah pemisahan. Kromatografi mungkin
persiapan atau analitis. Tujuan kromatografi persiapan adalah untuk memisahkan
komponen campuran untuk penggunaan lebih lanjut (dan dengan demikian
merupakan bentuk pemurnian). Kromatografi analitis dilakukan secara normal
dengan jumlah bahan yang lebih kecil dan untuk mengukur proporsi relatif analisis
dalam campuran. Keduanya tidak Saling eksklusif. Integritas kimiawi pada
komponen sampel sensitif dapat dipertahankan bahkan dengan penggunaan gel silika
adsorbents yang aktif.

2.3 Lapisan tipis kromatografi centrifugal

2.3.1 Kromatotron

Kromatotron adalah sebuah persiapan, dipercepat tengah, radial, kromatografi

lapisan tipis. Menggantikan persiapan TLC pelat, kolom kecil dan HPLC. Dimensi
keseluruhan adalah 30x35x30 cm.

4
2.3.2 Prinsip kromatotron

Operasi sampel untuk dipisahkan diterapkan, sebagai solusi, di dekat pusat

sebuah cakram berputar yang dilapisi lapisan tipis sorok. Elution oleh pelarut bentuk
melingkar dari komponen dipisahkan yang berputar dari tepi rotor bersama dengan
solvent. Sistem koleksi baru membuat jalan keluar dari satu keluaran.
Kapasitas : Up to 500 mg per komponen, 1-2 g total, e.g. dimethyl dan diethyl
phthalate di hexane - ethyl acetate 9:1 pada lapisan 4 mm gel silica.
Sorbents : Silica gel, alumina dan Silica gel - perak nitrat; Tidak berguna untuk
RP sorbents. Pelarut: kompatibel dengan semua pelarut kromatografi, termasuk asam
asetat; Tidak cocok untuk digunakan dengan asam mineral.

Solvent (pelarut) : Kompatibel dengan semua pelarut kromatografi,termasuk

asam asetat;tidak cocok untuk digunakan dengan asam mineral.

2.3.3 Keuntungan Khusus

 tidak ada "bercak" sampel atau goresan pita.

 Pemisahannya selesai dengan cepat, biasanya dalam 20 menit.
 Tutup UV yang transparan memungkinkan pengamatan langsung terhadap
senyawa UV yang menyerap atau berwarna selama pemisahan.
 Ketebalan lapisannya 1, 2, 4 atau 8 mm memberikan kapasitas tinggi.
 Lapisan sorbnya mudah diregenerasi pada situ untuk digunakan kembali.Pelarut
digunakan dengan hemat.
Gradient elution mudah. Atmosfer nitrogen mencegah oksidasi sampel.
 Padat (mudah dipindahkan dari lab ke lab), sedikit kendali, tanpa tekanan tinggi.
Harga rendah.
 Setengah lusin kromatotrons kurang dari sebuah persiapan HPLC.
 Senyawa tanpa kromophore yang terdeteksi di pecahan yang eluted oleh TLC
konvensional.
 Indeks bias dan monitor UV tidak dianjurkan.
 Dapat digunakan dengan koleksi pecahan meskipun koleksi tangan cukup.

5
2.3.4 Ciri – ciri Cyclograph : sistem kromatografi Centrifugal

 Motor kecepatan variabel (100-1400 RPM)

 Lampu UV terpadu 4 watt untuk melihat langsung sampel itu.
 On/Off switch untuk motor dan lampu UV.
 Pengaturan sudut pesawat yang dapat disesuaikan pada kapal (0-30 derajat).
 Ultra quiet & low flow pump (0 — 15ml/min).
 Kompatibel dengan semua pelarut kromatografi umum termasuk asam aurat.
 Ruang yang mudah dilepas untuk pembersihan kapal selam.

2.3.5 Cyclograph system

Cyclograph adalah alat yang dipercepat centrifugally untuk melakukan

persiapan pemisahan kromatografi. Alat ini memutar lapisan adsorbent material
dilapisi sebagai cincin datar pada kaca mundur. Sebuah pompa pelarut digunakan
untuk menerapkan sampel dan fase bergerak ke pusat lingkaran adsorbent yang
berputar. Aksi centrifugal mempercepat aliran fase bergerak melalui adsorbent
tersebut, memisahkan komponen sampel sebagai pita melingkar.
Fase mobile elutes terus-menerus menjadi saluran koleksi khusus berbentuk di dalam
tubuh instrumen. Komponen pita dikumpulkan secara manual dalam tabung uji atau
secara konvensional oleh seorang kolektor pecahan otomatis (tidak termasuk).
Penyatuannya terjadi dengan cepat, biasanya dalam waktu 20 menit, dibandingkan
dengan 90 sampai 120 menit untuk persiapan lapisan tipis kromatografi (TLC) atau
kromatografi kolom.

2.3.6 Faktor-faktor yang mempengaruhi

6
 Kromatografi Centrifugal, yang mula-mula diusulkan sebagai varian
kromatografi kertas, belakangan digunakan di TLC[5]. Metode ini diterapkan dalam
dua versi: linear dan radial. Dalam versi radial atau lingkaran dari centrifugal TLC,
sistem kromatografer berputar tentang porosnya sehingga gerakan fase bergerak
dipercepat oleh kekuatan centrifugal, seperti dalam versi linear. Dalam radial
centrifugal TLC, fase bergerak disediakan ke pusat sorapan edaran Sistem. Tingkat
penyebaran fase bergerak dapat diatur melalui pompa mikro. Menurut para
penulisnya [6], gaya sentrifugal berperan sama dengan tekanan dalam HPLC. Di
linear centrifugal TLC, jumlah yang setara untuk tekanan P di HPLC dapat
diungkapkan oleh hubungan.

P =ρω2 Zf /2 ……………

Dimana P adalah kerapatan fase gerak, W adalah kecepatan sudut pelat, dan ZF jarak
dari titik suplai ke depan fase gerak . Berdasarkan penjelasan di atas, centrifugal TLC
bisa dikategorikan sebagai metode TLC dengan aliran paksa yang terkontrol. Aliran
tersebut stabil dengan menggunakan kondisi TLC terus menerus dan tingkat elution
diatur oleh tingkat rotasi dukungan. Kita dapat memperhatikan bahwa tingkat evolusi
berkaitan langsung dengan segi kecepatan sudut [6]. Ulasan kritis terperinci tentang
kromatografi centrifugal [7], yang ditulis pada tahun 1964, masih dianggap penting
dewasa ini. Para penulis [7] percaya bahwa ekonomi waktu dalam evolusi
kromatogram lapisan tipis oleh centrifugal TLC tidak begitu besar. Tidak mungkin
untuk setuju sepenuhnya dengan pandangan ini. Untuk pemisahan yang sangat lama,
metode ini tidak diragukan dibenarkan secara ekonomi dan terus digunakan dalam
praktek analitif pada tahun-tahun terakhir: fase terbalik centrifugal TLC telah
digunakan dengan sukses untuk pemisahan senyawa tanaman di kutub dan versi ion-
exchange dari centrifugal TLC telah digunakan untuk penentuan Fe, Co, Ni, Cu, Hg,
dan logam lainnya. Berbagai aspek penerapan TLC centrifugal telah dibahas dalam
sejumlah penelitian [8]. Kemungkinan centrifugal TLC untuk persiapan pemisahan
telah ditunjukkan oleh Stahl dan Muller [9], yang menunjukkan bahwa muatan
sampel spesifik dalam metode ini dapat mencapai 10 hingga 1000 mg per milimeter

7
dari ketebalan lapisan penyerapan untuk satu senyawa. Hasil sebuah penelitian
terperinci menarik bukan hanya untuk persiapan melainkan juga untuk kromatografi
analitis.

penulisnya[9] mengilustrasikan kebergantunganSampai pada kesimpulan yang masuk

akal bahwa metode ini memiliki keuntungan yang pasti.

Gambar 2.

Gambar 2. Ketergantungan waktu perpisahan D pada tingkat aliran volume dari

tahap F mobile; Kondisi percobaan: gel phase-silica diam dengan 1,5% acronal,
mobile phase-80:20 hexane-ethyl acetate campuran, kecepatan rotasi 750 rev/ min
[9]Perhatian harus tertarik pada penampilan baru-baru ini dari beberapa metode baru
dan variasi dari alat yang melibatkan TLC centrifugal [10]. Metode baru kromatografi
persiapan planar adalah susunan centrifugal layer berurutan kromatografi
(SCLC)[10]. Menurut para pengarang [10], mesin ini menggabungkan keuntungan
dari persiapan dan mesin pemisah analitis, anti radial, dan TLC sequential. Alat
SCLC memungkinkan untuk melakukan kromatografi melingkar dengan sentrifugasi
pada tingkat rotasi yang berbeda. Persediaan bilangan m yang tidak dapat diperoleh
sampai taraf mana pun di atas lempeng memungkinkan dipisahkannya komponen-
komponen itu menggunakan fase bergerak secara perorangan. Selain itu, ada
kemungkinan melakukan kromatografi anti radial di bawah pengaruh kekuatan
kapiler. Jadi metode SCLC sebenarnya adalah prosedur hybrid yang memperluas
kemungkinan dari centrifugal TLC. Sebuah kromatografi baru yang berlawanan arah
dengan partisi kromatografi telah diusulkan oleh para penyelidik jepang [11].

8
 Gambar 3.

Gambar 3. Ketergantungan faktor pemisahan Rs untuk kerusakan di hydrazone pada

kecepatan rotasi sistem kromatografi n; Kondisi percobaan: phase-silica gel 60
dengan 1,5% acronal, mobile phase-80:20 hexaneethyl acetate campuran, tingkat
pasokan fase mobile ke sistem kromatografi (ml/ min1): 1) 3,5; 2) 2.1; 3) 1,1; 4) 5,2;
7.1; 6) 8,8. Pemisahan persiapan yang cepat dari serangkaian campuran asam amino,
gula, dan asam alifa jenuh telah dicapai dengan bantuannya. Kemungkinan
centrifugal TLC untuk peningkatan signifikan tingkat aliran fase HPTLC telah
ditunjukkan. Telah ditunjukkan bahwa hasil yang diperoleh dalam pemisahan tiga
menit dengan pemisahan setara dengan 12 menit pemisahan dengan TLC melingkar
biasa. Metode kromatografi kertas centrifugal, kemungkinannya, dan prospek untuk
perkembangannya telah dibahas. Kemungkinan mendapatkan tingkat aliran tinggi
dari fase mobile di kromatografi centrifugal terbatas. Diyakini bahwa penggunaan
rotasi dan tekanan di atas 1 atm diciptakan [lihat Eqn. (1)Akan menyebabkan
pecahnya kolom pelarut dan pencampuran udara dengan pelarut pada titik
pembukaannya. Selain itu, ada pembatasan lain yang dikaitkan dengan penerapan
lapisan sorbent terbuka pada kromatografi centrifugal: peningkatan resistansi lapisan
sorbengsi dengan peningkatan kecepatan evolusi dapat mengarah ke
"menumpkaikan" orang dari sorbent tersebut. Hal ini sebenarnya mengapa
kromatografi centrifugal tidak memungkinkan pencapaian tingkat aliran yang sama
dari fase mobile seperti di HPLC.

2.3.7 Keuntungan Sistem Chromatografi Cylograph Centrifufal

9
1. sistem chromatografi Cyclograph centrifugal mengkombinkan keuntungan kedua
fiktifikat dan kromatografi kolom. Untuk mengirim pemisah yang cepat dan
efisien. Sebagian besar tempat pemisahan terjadi dalam dua puluh menit atau
kurang.
2. pemisahan yang cepat adalah hasil dari tindakan sentrifugal dari Rotor yang
berputar yang menggerakkan fase bergerak melalui lapisan ceruk. Kecepatan fase
bergerak memungkinkan penggunaan partikel adsorbents yang lebih kecil. Rotor
untuk siklografi menggunakan rata-rata serat partikel adsorbent 15 micron, mirip
dengan TLC. Ranjang partikel kecil ini dibandingkan dengan 35 — 75 micron
memotong tipe kolom tekanan rendah Kromatografi memungkinkan tingkat
pemisahan yang lebih tinggi.
3. tindakan Centrifugal dikombinasikan dengan penggunaan pompa solvent untuk
menerapkan fase mobile memungkinkan kontrol penuh dari profile kecepatan
solvent. Tingkat aliran yang khas berkisar antara 2-3 ml/min per milimeter
ketebalan adsorbent. Ikatan yang ketat berarti dibebaskan dari fraksi dapat
dikumpulkan dalam volume minimum pelarut.
4. pompa metering pelarut juga menggunakan gradasi tahap dengan menggunakan
siklografik. Celah pompa dapat diganti dari pelarut yang lemah menjadi pelarut
yang lebih banyak di kutub sewaktu berlari. Hal ini memungkinkan senyawa
dengan berbagai ragam yang harus dipisahkan. Sampel-sampel yang rumit seperti
produk alami dengan cepat dipisahkan menjadi beberapa komponen kelas.
5. dengan membersihkan polaritas fase ponsel dari yang lemah ke yang kuat, kita
dapat lebih mudah menggunakan alat perekam untuk banyak penyekat sampel.
Dengan mengakhiri run dengan solvent yang kuat, dinyatakan kuat senyawa
adsorbed akan memerah dari Rotor tersebut. Hal ini memungkinkan Rotor
digunakan kembali untuk puluhan sampel.
6. Pemisahan pada skala Cyclograph dengan mudah dan cepat. Rotor tersedia dari 1
mm tebal hingga 8 mm ketebalan. Untuk kasus-kasus yang sulit, menghindari
komponen yang hanya sebagian diselesaikan, dapat diputar kembali ke Rotor

10
 yang berputar. Hal ini dengan efektif memungkinkan kromatografer
meningkatkan "panjang kolom" tanpa kerugian yang berkaitan.
7. pemisahan pada siklop dapat dipantau sewaktu dipasang pada lampu UV254. Zat
dipisahkan yang menyerap 254 nm cahaya akan terlihat terhadap latar belakang
hijau berpendar dari Rotor. Secara opsional sebuah UV366 sumber dapat
digunakan untuk mendeteksi komponen-komponen yang secara intrinsik
berwarna fluorescent.
8. integritas zat kimia berupa komponen-komponen sampel yang sensitif dapat
dipertahankan bahkan dengan menggunakan gel adsorbents silika yang aktif.
Tidak seperti TLC di mana cairan pelarut telah menguap sebelum kromatografi,
sampel yang diperkenalkan di siklograf tidak perlu terkena adsorbent kering. Hal
ini meminimalkan kemungkinan reaksi dari komponen sampel pada permukaan
adsorbent aktif. Kontrol lebih lanjut atmosfer adalah mungkin dengan pembilas
kapal dengan gas nitrogen selama kromatografi.

BAB III

PENUTUP

11
3.1 Kesimpulan

Kromatotron adalah sebuah persiapan, dipercepat tengah, radial, kromatografi

lapisan tipis. Menggantikan persiapan TLC pelat, kolom kecil dan HPLC. Dimensi
keseluruhan adalah 30x35x30 cm.

Ciri khas penyiapan kromatotron adalah sentrifugal dipercepat, radial, kromatografi

lapis tipis. Sampel yang akan dipisahkan digunakan, sebagai larutan, dekat dari pusat
diskyang berputar dilapisi dengan lapisan tipis dari sorben. Elusi dengan bentuk
pelarut band dari komponen terpisah yang berputar melingkar keluar dari tepi rotor
bersama-sama dengan pelarut. Sebuah sistem pengumpulan baru membawa eluat
untuk satu output tabung (Asian journal of Pharmacy and-life Science,2011).

3.2 Saran
Untuk pembuatan makalah ini saya menyadari masih banyak kekurangan saya
berharap bagi pembacanya untuk mengkritik guna untuk menyempurnakan
makalah ini.terima kasih

12
 DAFTAR PUSTAKA

 Asian Journal Of Pharmacy And Life-Science, Naval Kulkarni Et Al, 2011,

“ Centrifugal Thin Layer Chromatography”

 Harborne, J.B. 1987. Metoda Fitokimia, Ed. II, Penerjemah Kokasih

Padmawinata & Iwang Sodiro. Bandung: ITB.
 "Kromatografi"; http://en.wikipedia.org/wiki/Chromatography, diakses pada
21/08/2011.
 "Centrifugal lapisan tipis kromatografi";
http://www.harrisonresearch.com/chromatotron/spec s. HTML, diakses pada
21/08/2011.
 "Cyclograph: sistem kromatografi Centrifugal"; http://www.
Ichromatohy.com/cyclograp. HTML, diakses pada 21/08/2011.
 "Faktor-faktor yang mempengaruhi"; http://iopscience.iop36- 021X/56/4/R06.
PDF, akses pada 22/08/2011.
 Rosmus J. , Pavlicek M. dan Deyl Z. (1964) ThinLayer chromatografi,
publikasi Elsevier, Amsterdam, P.P. 119.
 D. L. Saunders dan L. R. Snyder (1970). "Baru melihat kekuatan pelarit,
selektivitas, dan perkembangan yang berkelanjutan", Journal of
Chromatographic Science, 8 (1970), 706-710.
 Z. Deyl, J. Rosmus dan M. Pavlicek (1964). "Lapisan Planar kromatografi
dalam analisis polutan anorganik", kromatogr. Rev., 6 (1964), 19-22.
 F. Derguini, V. Balogh-Nair and k Nakanishi (1979). "Synthesis of (+)-, (-)
and (±)-7'-Asam hidroxyabscisic ", Tetrahedron Letters, 51 (1979), 4899-4901.

13
 Egen Stahl dan Josef Muller (1982). "Kriteria menyiapkan lapisan tipis
kromatografi", kromatografi, 1982, 15(8), 493 — 497.
 S. Nyiredy, C. A. J. Erdelmeier dan O. Sticher (1985). "Faktor-faktor yang
mempengaruhi pemisahan kromatografi fase terbalik", jurnal kromatografi
resolusi tinggi & kromatografi komunikasi, 8 (1985), 73 — 77.
 Watura Murayama, Tetsuya Kobayashi, Kosuge Yasutaka, Hideki Yano,
Yoshiaki Nunogaki, dan Kanishi Nunogaki (1982). "Kromatografi kontra-saat
ini", Journal of chromatografi, 239, (1982), 643-646.
 "Keuntungan dari siklografik"; http://www. Ichromatohy.com/cyclograp.
HTML, diakses pada 21/08/2011.

14