1.

Uji Pewarnaan gram

Bakteri gram positif adalah bakteri yang mempertahankan zat warna metil ungu sewaktu proses
pewarnaan Gram. Bakteri jenis ini akan berwarna biru atau ungu di bawah mikroskop, sedangkan
bakteri gram negative akan berwarna merah muda karena diberi safranin.

2. Uji Methyl Red

Interpretasi hasil : negatif (-) : Tidak terjadi perubahan warna media menjadi merah setelah
ditambah methyl red 1%. Positif (+) : Terjadi perubahan warna media menjadi merah setelah
ditambahkan methyl red 1%. Artinya bakteri menghasilkan asam campuran (metilen glikon) dari
proses fermentasi glukosa yang terkandung dalam media MR (Cowan, 2004).

3. Uji Voges-Proskauer
Interpretasi hasil : negatif (-) : tidak terjadi perubahan warna media menjadi merah setelah
ditambahkan a naphtol 5% dan KOH 40%. Positif (+) : terjadi perubahan warna media menjadi
merah setelah ditambahkan a naphtol 5% dan KOH 40%, artinya hasil akhir fermentasi bakteri
adalah asetil metil karbinol (asetoin) (Colome, 2001).
4. Uji Citrate
Interpretasi hasil : negatif (-) : tidak terjadinya perubahan warna media dari hijau menjadi biru.
Artinya bakteri ini tidak mempunyai enzim sitrat permease yaitu enzim spesifik yang membawa
sitrat ke dalam sel. Positif (+) : terjadinya perubahan warna media dari hijau menjadi biru, artinya
kuman menggunakan citrat sebagai salah satu/satu-satunya sumber karbon (Ratna, 2012).

5. Uji Motilitas

Interpretasi hasil : negatif (-) : terlihat adanya penyebaran yang berwarna putih seperti akar hanya
pada bekas tusukan inokulasi. Positif (+) : terlihat adanya penyebaran yang berwarna putih seperti
akar disekitar inokulasi. Hal ini menunjukan adanya pergerakan dari bakteri yang diinokulasikan,
yang berarti bahwa bakteri ini memiliki flagel (Burrows, 2004).
6. Uji Urenase

Interpretasi hasil : negatif (-) : tidak terjadi perubahan warna media menjadi pink/merah jambu,
artinya kuman tidak memecah urea membentuk amoniak. Positif (+) : tidak terjadi perubahan
warna media menjadi pink/merah jambu, artinya kuman memecah urea membentuk amoniak (Lim,
2006).
7. Uji TSA (Triple Sugar Iron Agar)

Interpretasi hasil :
hanya memfermentasi glukosa : Bila pada dasar (butt) media berwarna kuning (bersifat asam) dan
lereng (slant) berwarna merah (bersifat basa). Memfermentasi semua karbohidrat : bila pada dasar
(butt) media berwarna kuning (bersifat asam) dan lereng (slant) berwarna kuning (bersifat asam).
Tidak memfermentasi semua karbohidrat : bila pada dasar (butt) media berwarna merah (bersifat
basa) dan lereng (slant) berwarna merah (bersifat basa). Fermentasi pada TSIA juga disertai
dengan pembentukan gas CO2 yang dapat dilihat dari pecahnya dan terangkatnya agar. Media
TSIA juga dapat digunakan untuk mengetahui pembentukan H2S yaitu melihat apakah kuman
memfermentasi metionin dan sistein (Asam amino yang mempunyai gugus S). Pada media TSIA
terdapat asam amino metionin dan sistein, jika kuman memfermentasi kedua asam amino ini maka
gugus S akan keluar dan gugus S akan bergabung dengan H2O membentuk H2S. Selanjutnya H2S
bergabung dengan Fe2+ akan membentuk FeS berwarna hitam dan mengendap (Buchanan, 2003).

8.Uji Gula-gula

Interpretasi hasil : negatif (-) : tidak terjadi perubahan warna media dari merah menjadi kuning,
artinya kuman tidak memfermentasi gula .Positif (+) : terjadi perubahan warna media dari merah
menjadi kuning. Artinya mikroorganisme memfermentasi gula membentuk ditandai dengan tinta
pada tutup kapas yang berbeda-beda. Untuk glukosa tidak berwarna, laktosa berwarna ungu,
maltosa berwarna merah, manitol berwarna hijau, dan sukrosa berwarna biru. Didalam media gula-
asam, positif + gas (+g) : Terjadi perubahan warna media dari merah menjadi kuning. Artinya
kuman memfermentasi gula membentuk asam dan gas.
9. Uji katalase
interpretasi hasil : jika ada gelembung beberapa saat setelah penetesan larutan H2O2 maka hasil
uji positif dan jika tidak ada gelembung maka hasilnya negatif

10. Uji O/F (Oksidatif/Fermentatif)

Uji oksidatif fermentasi bertujuan untuk mengetahui apakah suatu bakteri mampu melakukan
fermentasi dan oksidasi,. Interpretasi hasil : Positif (+) ditandai dengan munculnya warna kuning
pada medium OF. Pada uji OF jika organisme oksidatif terjadi apabila terlihat perubahan warna
pada media yang terbuka, sedangkan organisme fermentatif dapat diindikasikan dengan melihat
tidak adanya perubahan warna pada media yang tertutup (Fahri, 2008).
11. Uji Oksidase
Koloni yang bersifat oksidase (+) akan berubah warna menjadi biru atau ungu dalam kurung waktu
dari 10 detik dan jika koloni bakteri yang bersifat oksidase (-) akan berubah warna menjadi cokelat.

12. Uji KOH

Interpretasi hasil : Jika organisme atau bakteri gram (-) maka terbentuk lendir saat dicampurkan
dengan KOH 3% dan sebaliknya.
13. Uji MIO
Pembacaan hasil bakteri motil (+) yaitu pertumbuhan bakteri akan menyebar menjauhi garis
inokulasi sehingga media menjadi keruh dan bakteri non-motil (-) yaitu pertumbuhan hanya
terlihat disepanjang garis inokulasi dan media tidak keruh.
Pembacaan Indole dilakukan dengan menambahkan satu tetes reagen kovaks pada media MIO,
jika indole (+) jika terbentuk cincin merah pada permukaan atas media/agar dan indole (-) jika
tidak terbentuk cincin merah pada permukaan atas media/agar.
Untuk Ornithin Dekarboxylase, pembacaan hasil dengan mengamati perubahan pada daerah
anaerob media, ornithin dekarboxylase (+) apabila daerah anaerob media berwarna abu-abu, ungu
dan biru sedangkan ornithin dekarboxylase (-) apabila daerah anaerob media berubah menjadi
kuning.