UJI BIOKIMIA UNTUK IDENTIFIKASI

BAKTERI
1191042 Novia Rizky S
1191049 Rena Yuli K
1191058 Tasya Milenia S
1191075 Yudistira Bryan N
PENGERTIAN

 Uji Biokimia adalah suatu cara atau perlakuan yang dilakukan untuk mengidentifikasi dan
mendeterminasi suatu biakan murni bakteri hasil isolasi melalui sifat sifat fisiologisnya.
 Uji-uji biokimia yang biasanya dipakai dalam kegiatan identifikasi bakteri atau mikroorganisme yaitu

antara lain adalah uji MRVP, uji gula-gula, uji SIM, uji TSIA, uji Indol, dan Uji Simmons Citrate.
TSIA/KIA
 Untuk menguji H2S, Asam-Basa, dan Gas
 KIA (Kliger Iron Agar) mengandung 2 jenis gula: Lactosa dan dekstrosa
 TSIA (Triple Sugar Iron Agar) mengandung 3 jenis gula: lactosa, dekstrosa dan sukrosa
 Proses terbentuknya asam, kuman memfermentasi karbohidrat dengan adanya indikator
phenol red kuman dalam suasana asam merubah media menjadi kuning. Fermentasi kuman
ada 3 macam: acid/acid, alkali/acid, alkali/alkali.
 Uji H2S positif media berubah menjadi hitam
 Positif gas ditandai dengan sebagian media terangkat atau adanya gelembung pada media
CONTOH GAMBAR MEDIA TSIA


SIM (SULFIT INDOL MOTIL)
 Digunakan untuk uji H2S, Indol, dan Motil

 Indol merupakan zat berbau busuk yang dihasilkan oleh bakteri dari penguraian asam amino
triptopan oleh enzim triptopanase dengan penambahan reagen kovac menghasilkan indol
positif berwarna merah
 Motil positif ditandai dengan adanya kekeruhan pada media dikarenakan bakteri memiliki
alat gerak

 H2S positif ditandai dengan adanya warna hitam pada media

CONTOH GAMBAR MEDIA SIM
UREA
 Untuk uji hidrolisis urea
 Bakteri memfermentasi kristal urea menjadi amoniak dalam suasana basa bereaksi dengan
indikator phenol red sehingga merubah media urea menjadi merah muda
 (+) media menjadi merah muda
CONTOH GAMBAR MEDIA UREA
CITRAT

 Untuk mengetahui apakah bakteri menggunakan garam citrat sebagai sumber

karbon atau tidak

 Bakteri menggunakan garam citrat sebagai sumber karbon menghasilkan CO2

dan OH- dalam suasana basa. Dengan adanya indikator BTB (Brom Thymol
Blue) merubah media menjadi biru.
 (+) media berubah menjadi biru
CONTOH GAMBAR MEDIA CITRAT
MR (METHYL RED)

 Uji pembentukan asam

 Bakteri yang + MR akan membentuk warna merah setelah penambahan indikator Metil Red.

Bakteri tersebut memfermentasi glukosa dan menghasilkan asam dan menurunkan pH hingga

dibawah 5. Keadaan asam ini menyebabkan metal merah berwarna merah , karena metil merah

berwarna merah pada lingkungan dengan pH 4,4 dan berwarna kuning dalam lingkungan dengan

pH 6.2.

 (+) media berwarna merah setelah penambahan indikator methyl red.

CONTOH GAMBAR MEDIA MR
VP (VOGES PROSKAUER)
 Untuk membedakan antara organisme yang menghasilkan asam dalam jumlah yang besar
dan yang menghasilkan produk netral seperti asetilmetilkarbinol (asetoin) dari hasil
metabolisme glukosa.
 fermentasi glukosa yang dilakukan oleh kuman membentuk asetil metal karbinol / asetoin
(bersifat netral), yang teroksidasi dan bereaksi dengan alfa napthol membentuk warna
merah.
 Ditambahkan 5 tetes reagen barid dan 5 tetes KOH40% : (+) terbentuk cincin merah
CONTOH GAMBAR MEDIA VP
PAD (PHENYL ALANINE DEAMINASE)

 Uji adanya phenil piruvat

 Bakteri yang menghasilkan enzim fenil alanin deaminase akan mengubah fenil
alanin menjadi asam fenil piruvat dengan reaksi deaminasi. Aktivasi enzim
deaminase ini menghasilkan suasana basa yang dengan penambahan FeCl3
menyebabkan warna menjadi hijau. Atau asam fenil piruvat akan bereaksi dengan
FeCl3 membentuk warna hijau.
 Ditambahkan FeCl3 10% : (+) warna hijau pada sisi miring
CONTOH GAMBAR MEDIA PAD
GULA-GULA
 Fermentasi gula akan menghasilkan asam dan gas. Asam yang menyebabkan indicator fenol red berwarna
menjadi kuning dan gas yang terbentuk akan terakumulasi dalam tabung durham (pada tabung glukosa).

 Fungsi tabung durkham: menangkap gas yang dihasilkan oleh bakteri

 (+) gas: adanya gelembung pada tabung durkham

 Dibedakan menjadi beberapa jenis glukosa

Tutup merah: glukosa

Tutup hijau : manitol

Tutup kuning: maltosa

Tutup biru: sakarosa

Tutup putih : laktosa

CONTOH GAMBAR MEDIA GULA-GULA
TERIMA KASIH