POTENSI TUNIKATA Polycarpa aurata SEBAGAI SUMBER INOKULUM

JAMUR ENDOSIMBION PENGHASIL ANTIMIKROBA

Arafah Nurfadillah1, Magdalena Litaay1*, Risco G. Budji1, Nur Haedar1

1
Jurusan Biologi, FMIPA, Universitas Hasanuddin, Makassar 90245
*Email: mlitaay@fmipa.unhas.ac.id

ABSTRACT

The research on “Potency of tunicate Polycarpa aurata as a source of inoculum of

endosymbiont fungal that produces antimicrobial” had been done. The research aimed to
know the potency of tunicate as a source of inoculum fungal endosymbiont and to
characterize isolate symbiont fungal tunicate P.aurata. Tunicate sample was collected from
Barrang Lompo waters of Makassar, South Sulawesi. Isolation of endosymbiont fungi
tunicate P. aurata was performed using Potato Dextrose Agar medium (PDA). The
characterization of isolate fungal endosymbiont from tunicate P. aurata consist of
macroscopic and microscopic observation by simple staining and activity testing against
phatogenic microbes Salmonella thypi and Candida albicans. There is one isolate was
isolated from intestine of tunicate, named PY1. The result of macroscopic and microscopic
observation indicated that isolate was suspected to belong to the genus Saccharomyces.
Isolate was able to inhibit the growth of pathogenic microbes, which was bacteriocide to
Salmonella typhi and fungicide to Candida albicans.

Key word: Ascidian, Polycarpa aurata, Endosymbiont fungus, Antimicrobial.

PENDAHULUAN Ascidiacea, Thaliacea, Apendicularia

Laut merupakan salah satu sumber
kekayaan biologi dan kimia. Salah satu
sumber kekayaan biologi dan kimia dapat
diperoleh dari organisme laut. Beberapa
dekade terakhir, jumlah
senyawa bioaktif hasil isolasi
organisme laut meningkat secara cepat dan
sekarang telah ditemukan ratusan senyawa
baru setiap tahunnya. Senyawa
tersebut diekstraksi dari berbagai jenis
invertebrata laut, salah satunya yaitu
tunikata (Ananthan and Balasubramanian,
2009; Nofiani, 2008).
Menurut Brusca (2002), tunikata
dibagi dalam empat kelas
(Larvacea) dan Sorberacea. Jika
dibandingkan dengan seluruh hewan
invertebrata, tunikata adalah yang paling
dekat dengan hewan vertebrata karena
penelitian mempunyai bagian tulang belakang seperti
dari duri dan tabung saraf yang dimiliki saat
masih larva, oleh karena itu tunikata
dimasukan dalam filum Chordata (Colin &
bioaktif Arneson, 1995; Erdmann, 2004). Tunikata
yang ada di terumbu karang, diketahui
mengandung senyawa kimia yang berguna
sebagai bahan antibiotik, anti tumor, anti
inflamasi, imunosupresan dan antikanker.
Salah satu senyawa anti kanker dari
yakni: tunikata yang sudah cukup dikenal adalah

Submit to Jurnal Alam dan Lingkungan 2015 1

ecteinascidin 743 (ET-743) yang diisolasi polycarpaurine A, B, C; serta
pertama kali dari tunikata Ecteinascidin polucarpathiamines A dan B (Abas et al.,
turbinate yang sudah dikembangkan di 1996; Radchenko et al., 1997; Wang et
Uni Eropa dengan nama Yondelis®, dan al., 2007; Pham et al., 2013).
digunakan untuk terapi sarcoma pada Berdasarkan hal tersebut di atas
jaringan lunak (Carter and Keam, 2007). maka perlu dilakukan penelitian isolasi
Tunikata diketahui dapat dan karakterisasi jamur simbion tunikata
berasosiasi dengan bakteri laut dan jamur Polycarpa aurata asal perairan Pulau
laut (marine derivated fungi). Pada tahun Barrang Lompo sebagai sumber inokulum
2004, dilaporkan 20 senyawa baru dari jamur penghasil senyawa bioaktif yang
jamur laut yang telah diisolasi dari berpotensi sebagai antimikroba khususnya
tunikata. Beberapa senyawa baru dari mikroba patogen pada manusia.
jamur laut yang berasosiasi dengan METODE PENELITIAN
tunikata adalah phitolides A-D (jamur Alat-alat yang digunakan pada
Phytomyces sp. yang berasosiasi dengan penelitian ini terdiri atas peralatan untuk
Oxycorynia fascicularis), oxepinamides A- sampling dan peralatan laboratorium.
C (jamur Acremonium sp. yang berasosiasi Peralatan yang digunakan untuk sampling
dengan Ecteinascidia turbinate) dan adalah masker, fins, snorkel, wet suit, dan
yanuthone A-E (jamur Aspergilus niger coolbox. Sedangkan peralatan dalam
yang berasosiasi dengan Aplidium sp.) laboratorium adalah autoklaf, cawan petri,
yang diketahui berpotensi sebagai deck glass, objek glass, gelas ukur, gelas
antiinflamasi dan antimikroba (Bugni and kimia, botol vial, batang pengaduk, sendok
Ireland, 2004; Saleem et al., 2007; Wang tanduk, enkas, erlenmeyer, inkubator,
et al., 1997). lampu spiritus, mikroskop listrik, neraca
Salah satu contoh tunikata yang ohaus, ose bulat, swab cotton, oven,
banyak ditemukan di perairan Indonesia, sentrifuse, shaker, tabung reaksi, hot
khususnya di Kepulauan Spermonde plate, spoit, rak tabung reaksi, pipet tetes,
adalah Polycarpa aurata. Tunikata ini pipet skala spektrofotometer, jangka
memiliki ciri khas bertubuh agak keras sorong dan timbangan analitik.
serta berwarna biru dan kuning. Beberapa Bahan-bahan yang digunakan pada
penelitian yang telah dilakukan penelitian ini adalah tunikata Polycarpa
menunjukkan bahwa tunikata Polycarpa aurata, aquadest, air laut steril, alkohol 70
aurata kaya akan senyawa bioaktif, %, plastik sampel, minyak emersi, paper
diantaranya yakni: polycarpine;
Submit to Jurnal Alam dan Lingkungan 2015 2
disc, medium PDA (Potato Dextrose
Agar), medium SDA (Sabouraud Dextrose
Agar), medium Nutrient Agar (NA),
medium PDB (Potato Dextrose Broth),
methylen blue, aluminium
chloramphenicol, ketoconazol, mikroba uji
(Candida albicans dan Salmonella thypi),
NaCl 0,9 % dan spritus.
Pengambilan Sampel Polycarpa aurata
Pengambilan sampel tunikata P.
aurata dilakukan di perairan
Barrang Lompo, Makassar
kedalaman 2-10 m dengan
Sesudah diangkat dari permukaan laut,
selanjutnya dibersihkan menggunakan air
laut steril 2-5 kali. Kemudian dimasukkan
ke dalam plastik sampel, selanjutnya
dibawa ke laboratorium
menggunakan coolbox.
Isolasi Jamur Endosimbion
Tunikata yang telah dibersihkan
dibelah dan diambil bagian ususnya,
kemudian dipotong kecil-kecil
ditanam di atas medium PDA yang telah
memadat. Kemudian diinkubasi selama 5-
o
7 x 24 jam pada suhu 37 C. Koloni jamur
yang tumbuh dan berbeda, kemudian
dipindahkan ke cawan petri berisi medium
PDA. Isolat jamur yang
selanjutnya dimurnikan dengan metode
gores menggunakan ose bulat pada media
PDA hingga didapat koloni murni. Koloni
yang sudah dimurnikan, dipindahkan ke
tabung reaksi yang berisi medium PDA
miring dan disimpan sebagai stok kultur
untuk persiapan uji selanjutnya.
Kultur Jamur Endosimbion
foil, Isolat jamur pada Potato Dextrose
Agar, kemudian diambil dan
diinokulasikan pada media PDB (Potato
Dextrose Broth) 50 ml dan dishaker pada
kecepatan 120 rpm selama 2 x 24 jam.
Peremajaan Mikroba Uji
Pulau Mikroba uji yang digunakan yaitu
pada Salmonella thypi dan Candida albicans
SCUBA. yang berasal dari biakan murni, masing-
masing diambil sebanyak satu ose lalu
diinokulasikan dengan metode gores pada
medium Nutrient Agar (NA) miring untuk
bakteri dan medium Sabouraud Dextrose
dengan Agar (SDA) miring untuk jamur lalu
diinkubasi pada suhu 37 selama 1-2 x
24 jam.
Pembuatan Suspensi Mikroba Uji
Masing-masing mikroba uji dari
dan agar miring disuspensikan dengan bantuan
larutan NaCl fisiologis 0,9% steril.
Suspensi kemudian dituang ke dalam cuvet
berdiameter 13 mm. Penentuan kepadatan
suspensi biakan diatur sehingga diperoleh
pengenceran yang diharapkan pada
diperoleh panjang gelombang 580 mm yang memliki
transmitan 25% (setara dengan kepadatan
108) terhadap blanko NaCl 0,9% steril
dengan menggunakan alat
spektrofotometer.

Submit to Jurnal Alam dan Lingkungan 2015 3

Uji Aktivitas (Noverita, dkk., 2009). meliputi; warna koloni, bentuk tepi koloni,
Pengujian dilakukan secara in vitro elevasi, permukaan koloni dan tekstur
dengan metode difusi agar yang koloni.
menggunakan paper disc berukuran 5 mm. b. Pengamatan Mikroskopis (Intani,
Medium Nutrien Agar (NA) steril dan 2014).
medium Sabouraud Dextrose Agar (SDA) Pengamatan karakter mikroskopis
dalam erlenmeyer didinginkan hingga dilakukan dengan menggunakan
suhu 40-45 . Kemudian dituangkan mikroskop dan zar warna untuk melihat
suspensi mikroba uji secara aseptis ke bentuk sel. Pengamatan secara
dalamnya sebanyak 1 ml, lalu mikroskopis dilakukan dengan cara
dihomogenkan dan dituang pada beberapa membuat preparat biakan di atas kaca
cawan petri dan dibiarkan memadat. objek yang telah diwarnai dengan
Beberapa lembar paper disc steril methylen blue, kemudian ditutup dengan
masing-masing direndam selama 15 menit cover glass dan ditetesi minyak emersi.
dalam suspensi isolat jamur simbion Analisis Data
tunikata P. Aurata, suspensi ketoconazol Data diperoleh dari hasil uji
(kontrol positif untuk jamur patogen), aktivitas dan pengamatan morfologi jamur
suspensi chloramphenicol (kontrol positif endosimbion tunikata P. aurata yang
untuk bakteri patogen) dan medium PDB dianalisis secara deskriptif yang diolah
(kontrol negatif). Paper disc tersebut dalam bentuk tabel dan gambar.
kemudian diletakkan secara aseptis dengan HASIL DAN PEMBAHASAN
pinset steril pada permukaan medium Isolasi jamur simbion tunikata P.
dengan jarak paper disc satu dengan yang aurata yang berasal dari perairan Pulau
lain 2 cm. Selanjutnya diinkubasi pada Barrang Lompo, Makassar diperoleh satu
suhu 37 selama 1-2 x 24 jam dan diukur isolat. Dari lima titik potongan usus yang
daerah hambatannya menggunakan jangka tersebar pada medium Potato Dextrose
sorong. Agar (PDA), hanya satu titik yang
Identifikasi Isolat Jamur Endosimbion ditumbuhi oleh jamur yakni titik a pada
a. Pengamatan Makroskopis (Intani, inkubasi 7x24 jam. Isolat tersebut
2014). kemudian dimurnikan dan diberi kode
Pengamatan karakter makroskopis PY1. Hasil inokulasi tunikata P. aurata
dilihat berdasarkan kenampakan koloni pada medium agar dapat dilihat pada
yang tumbuh pada medium PDA yang Gambar 1.

Submit to Jurnal Alam dan Lingkungan 2015 4

 endapan putih di dasar tabung sehingga
a tergolong khamir fermentatif, sedangkan
PY1
isolat PY1 yang diinokulasikan pada
b
e medium padat memperlihatkan
pertumbuhan berupa bercak putih susu
c yang licin.
d
Berdasarkan hasil pengamatan
makroskopis terhadap isolat PY1 dapat
Gambar 1. Hasil inokulasi tunikata P. disimpulkan bahwa isolat PY1 tergolong
aurata pada medium agar
pada inkubasi 7x24 jam. khamir, dimana khamir merupakan
mikroorganisme golongan jamur (fungi)
Jamur yang tumbuh tersebut
yang berbentuk uniseluler, struktur selnya
kemudian diinokulasikan pada medium
lebih kompleks daripada bakteri,
yang sama untuk mendapatkan isolat
berukuran 5-10 kali lebih besar dari
murni. Hasil pemurnian isolat jamur
bakteri, bereproduksi dengan budding,
simbion tunikata P. aurata diinokulasikan
tidak mempunyai flagela atau organ lain
pada medium agar miring sebagai stok
untuk bergerak (Putranto dkk, 2010).
murni untuk karakterisasi makroskopis dan
Menurut Gandjar dkk (1999), khamir yang
mikroskopis serta persiapan uji aktivitas.
dinokulasikan pada medium cair tanpa
Karakterisasi Isolat Jamur
digoyang akan menunjukkan pertumbuhan
1. Pengamatan Makroskopis Isolat Jamur
berupa kekeruhan medium yang makin
Simbion Polycarpa aurata
lama akan mengendap sebagai lapisan
Hasil pengamatan makroskopis
putih pada dasar tabung dan khamir yang
isolat jamur simbion tunikata P. aurata
diinokulasikan pada medium cair dengan
yang dimurnikan pada medium PDA
digoyang menunjukkan pertumbuhan
berdasarkan warna, bentuk, tepi, tekstur,
berupa kekeruhan medium yang makin
dan elevasi koloni yakni: koloni berbentuk
lama makin keruh dibandingkan keadaan
oval, berwarna putih susu, bertepi rata,
medium awal, sedangkan khamir yang
elevasi cembung dan bertekstur licin.
diinokulasikan pada medium padat tanpa
Pertumbuhan isolat PY1 pada medium cair
penggoyangan akan menunjukkan
yang dirotasi terjadi perubahan warna
pertumbuhan berupa bercak-bercak licin
media dari bening menjadi keruh dan
agak basah pada permukaan medium.
isolat PY1 yang diinokulasikan pada
Bentuk pertumbuhan khamir pada medium
medium cair tanpa dirotasi terbentuk
cair ada dua yakni: pertumbuhan oksidatif
Submit to Jurnal Alam dan Lingkungan 2015 5
 dan pertumbuhan fermentatif. Khamir
oksidatif tumbuh membentuk lapisan
(film) atau pelikel pada biakan cair,
sedangkan khamir fermentatif biasanya
tumbuh di seluruh cairan/membentuk
endapan (Jumiyati dkk, 2012).
2. Pengamatan Mikroslopis Isolat Jamur
Tunikata Polycarpa aurata
Pengamatan mikroskopis
merupakan pengamatan yang dilakukan
dengan menggunakan mikroskop untuk
melihat bentuk sel dari jamur. Hasil
pengamatan mikroskopis isolat jamur PY1
terlihat sel berbentuk oval.
Berdasarkan hasil pengamatan
mikroskopis dan makroskopis dan mengacu
pada buku The Yeast A Taxonomic Study
(Kreger, 1987) ciri yang ditunjukkan oleh
Isolat PY1 diduga berasal dari Genus
Saccharomyces.
Uji Aktivitas Isolat Jamur Endosimbion
Uji aktivitas dilakukan untuk
melihat kemampuan isolat PY1 dalam
menghambat pertumbuhan mikroba
patogen dengan menggunakan metode
difusi agar terhadap bakteri Salmonella
thypi dan jamur Candida albicans. Hasil
uji aktivitas antimikroba dari isolat PY1
terhadap mikroba patogen diperlihatkan
pada Tabel 1.
Berdasarkan Tabel 1 terlihat bahwa
pada inkubasi 1x24 jam isolat PY1
memiliki diameter hambatan sebesar 17,35
mm terhadap S. thypi dan 13,85 mm
terhadap C. albicans, sedangkan pada
inkubasi 2x24 jam isolat PY1
menunjukkan diameter hambatan sebesar
17,95 mm terhadap S. thypi dan 14,35 mm
terhadap C. albicans. Kontrol (+) bakteri
menghambat 32,55 mm pada inkubasi
1x24 jam dan 33,45 mm pada inkubasi
jamur 2x24 jam, sedangkan kontrol (+) jamur
menghambat sebesar 22,5 mm pada
inkubasi 1x24 jam dan 22,75 mm pada
inkubasi 2x24 jam; dan untuk kontrol (-)
tidak mampu menghambat pertumbuhan
bakteri dan jamur uji. Dari hasil
pengamatan diameter hambatan diatas,
maka isolat PY1 dikatakan berpotensi
sebagai antimikroba dimana isolat PY1
bersifat bakteriosidal terhadap S. thypi dan
bersifat fungisidal terhadap C. albicans.
Hal ini terlihat dari ukuran diameter
hambatannya yang meningkat setelah
inkubasi 2x24 jam. Antimikroba yang
bersifat membunuh bakteri dikenal sebagai
bakteriosidal sedangkan yang membunuh
jamur disebut fungisidal (Ganiswarna,
1995). Besar kecilnya daerah hambatan
dipengaruhi oleh beberapa faktor seperti
laju pertumbuhan mikroorganisme,
kemampuan dan laju difusi bahan aktif
pada medium, kepekaan mikroorganisme
terhadap zat aktif serta ketebalan dan
viskositas medium (Cappucino and
Sherman, 2001).

Submit to Jurnal Alam dan Lingkungan 2015 6

Tabel 1. Hasil pengukuran diameter hambatan isolat jamur simbion tunikata P. aurata
setelah dishaker selama 2x24 jam dengan waktu inkubasi 1x24 jam dan 2x24 jam

Diameter Hambatan (mm)

Nama 1x24 Jam 2x24 Jam
No
Isolat Salmonella Candida Salmonella Candida
thypi albicans thypi albicans
1 PY1 17,35 13,85 17,95 14,35
2 Kontrol (+) 32,55 22,5 33,45 22,75
3 Kontrol (-) - - - -
Keterangan: Kontrol (+) = Chloramphenicol (bakteri) dan Ketoconazol (Jamur)
Kontrol (-) = Medium PDB

Menurut Roostita (2004), senyawa jamur laut (marine derivated fungi).

antimikrobial khamir yang telah diketahui Beberapa senyawa baru dari jamur laut
berupa asam-asam organik dan protein. yang berasosiasi dengan tunikata adalah
Asam-asam yang dihasilkan khamir phitolides A-D (jamur Phytomyces sp.
tersebut memiliki sifat antimikroba yang berasosiasi dengan Oxycorynia
sehingga menghambat pertumbuhan fascicularis), oxepinamides A-C (jamur
bakteri dan khamir. Berdasarkan hasil dari Acremonium sp. yang berasosiasi dengan
beberapa penelitian, pada umumnya Ecteinascidia turbinate) dan yanuthone A-
mikroorganisme yang hidup dengan cara E (jamur Aspergilus niger yang berasosiasi
berasosiasi dengan organisme laut dengan Aplidium sp.) yang diketahui
menunjukkan potensi besar dalam sekresi berpotensi sebagai antiinflamasi dan
metabolit sekunder yang bersifat antimikroba (Bugni and Ireland, 2004;
antimikroba. Saleem et al., 2007).
Mikroorganisme yang berasosiasi Beberapa hasil penelitian
dengan inangnya akan memproduksi sebelumnya menyatakan bahwa tunikata
senyawa bioaktif yang sama secara Polycarpa aurata kaya akan senyawa
struktural dan fungsional dengan senyawa bioaktif, diantaranya yakni: polycarpine;
bioaktif yang diproduksi inangnya polycarpaurine A-C; serta
Tunikata merupakan salah satu inang dari polucarpathiamines A dan B (Abas et al.,

Submit to Jurnal Alam dan Lingkungan 2015 7

1996; Amstrong et al, 2001; Radchenko et
al., 1997; Wang et al., 2007; Pham et al.,
2013).
KESIMPULAN
Kesimpulan dari penelitian ini
adalah:
1. Tunikata Polycarpa aurata berpotensi
sebagai sumber inokulum
simbion.
2. Terdapat satu isolat jamur simbion
tunikata Polycarpa aurata (PY1) yang
tergolong dalam
Saccharomyces.
3. Senyawa bioaktif yang dihasilkan oleh
jamur simbion tunikata Polycarpa
aurata berpotensi dalam menghambat
pertumbuhan mikroba
dimana bersifat bakteriosidal terhadap
Salmonella thypi dan
terhadap Candida albicans.
DAFTAR PUSTAKA
Abas, S. A., M. Bilayet H, D. van der H,
and J. Francis (1996), Alkaloids
from the Tunicate Polycarpa
aurata from Chuuk Atoll. J. Org.
Chem. [Internet] April 19, 1996,
61 (8), pp 2709-2712. Available
from: http://www.pubfacts.com
[Accessed 03rd November 2014].
Amstrong, E., L. Yan, K. G. Boyd, P. C.
Wright and J. G. Burgess (2001),
“The Symbiotic role of Marine
Microbes on Living surfaces”,
Hydrobiologia, 461:37-40.
Submit to Jurnal Alam dan Lingkungan 2015
Ananthan, M. M. K. G. and T.
Balasubramanian (2009),
“Antimicrobial Activity of Crude
Extracts of Some Ascidians
(Urochordata : Ascidiacea) from
Palk Strait, (Southeast Coast of
India)”, World J. Fish and Marine
Sci., 1 (4) : 262-267.
Brusca, R C. 2002. Invertebrates 2nd:
Other Deuterostomes -
Chaethognatha, Urochordata,
jamur Hemichordata. Sinauer Associates,
Sunderland. 936 hlm.
Bugni T. S., and C. Ireland (2004),
“Marine-derived fungi: A
Chemically and Biologically
Genus Diverse Group of
Microorganisms”, Nat. Prod. Rep.,
21:143-63.
Cappucino, J. G and N. Sherman (2001),
Microbiology: A Laboratory
Manual, 6th Edition. Benjamin-
Cummings Publishing company,
patogen,
San Fransisco. 447 hlm.
Carter, N. J. and S. Keam (2007),
fungisidal
Trabectedin: A review of its use in
the management of soft tissue
sarcoma and ovarian cancer, Drugs
[Internet] 16th October 2007, 67,
2257-2276. Available from:
http://www.pubfacts.com
[Accessed 25th October 2014].
Colin, P.L. and C. Arneson (1995),
Tropical Pacific Invertebrates: A
Field guide to the marine
invertebrates occurring on tropical
pacific coral reefs, sea grass beds
and mangrove, Coral Reef Press,
California. pp 296.
Erdmann, A. M. (2004), A Natural History
Guide To Komodo National Park,
The natural conservancy, Indonesia
coastal and marine program. pp
228.
8

Gandjar, I., W. Sjamsuridzal dan A. Oetari
(1999), Mikologi Dasar dan
Terapan, Yayasan Obor Indonesia.
Jakarta. Hal 42-43.
Intani, D. W. (2014), “Isolasi dan
Identifikasi Khamir Berdasarkan
Karakteristik Morfologi dan
Fisiologis”, Laporan Biologi
Khamir, FMIPA ITS.
Jumiyati, H. S. Bintari dan I. Mubarok
(2012), “Isolasi dan Identifikasi
Khamir Secara Morfologi di Tanah
Kebun Wisata Pendidikan
Universitas Negeri Semarang”,
Biosantifika. 4(1) (2012) 27-35.
Kreger, R. N. J. W. (1987), The Yeast A
Taxonomic Study, Elsevier Science
Publisher BV., Amsterdam. 1098
Hlm.
Nofiani, R. (2008), Urgensi dan
Mekanisme Biosistesis Metabolit
Sekunder Mikroba Laut. Jurnal
Natur Indonesia10 (2). 120-125.
Noverita, D., Fitria dan E. Sinaga (2009),
“Isolasi dan Uji Aktivitas
Antibakteri Jamur Endofit dari
Daun dan Rimpang Zingiber
ottensii Val”, Jurnal Farmasi
Indonesia Vol. 4, No. 4. pp 171-
176.
Pham, C. D., H. Weber, R. Hartmann, V.
Wray, W. Lin, D. Lai, and P.
Proksch (2013) New Cytotoxic
1,2,4-Thiadiazole Alkaloids from
the Ascidian Polycarpa aurata,
Org. Lett. [Internet] 12th April
2013, 15 (9), pp 2230-2233.
Available from:
http://www.pubfacts.com
[Accessed 15th October 2014].
Putranto, W. S., R. L. Balia, O.
Rachmawan dan E. Wulandari.
Submit to Jurnal Alam dan Lingkungan 2015
(2010), “Isolasi Yeast dari Daging
dan Potensinya sebagai Agen
Biopreservasi dan Pewarna
Makanan”, Jurnal Ilmu Ternak,
Juni 2010, Vol. 10 No. 1, 21-25.
Radchenko, O. S., V. L. Novikov, R. H.
Willis, P. T. Murphy and G. B.
Elyakov (1997) “Synthesis of
polycarpine, a cytotoxic sulfur-
containing alkaloid from the
ascidian Polycarpa aurata, and
related compounds”, Tetrahedron
Letters. 38 (20) pp 3581-3584.
Roostita, L B (2004), “Potensi dan
Prospek Yeast (khamir) dalam
Meningkatkan Diversifikasi
Pangan di Indonesia”, Pidato
Pengukuhan Jabatan Guru Besar
Tetap dalam Ilmu Pangan. Fakultas
Peternakan Universitas
Padjadjaran. Bandung.
Saleem, M., Ali, M.S, Hussain, S., Jabbar,
A., Ashraf, M., and Y. S. Lee.
(2007) Marine natural products of
fungal origin. Nat. Prod. Rep.
[Internet] October 2007, 24: 1142–
1152. Available from:
Http://www.pubfacts.com
[Accessed 29th October 2014].
Wang, G. Y.S., B. M. Borgeson and P.
Crews (1997), Phitolides A-D,
polyketides from a Marine
Tunicate-derived Culture of
Phytomyces sp. Tetrahedron
Letters. [Internet] 8th December
1997. 38(49) pp 8449-8452.
Available from:
http://www.sciencedirect.com
[Accessed 1st November 2014]
Wang, W., T. Oda, A. Fujita, R. E. P.
Mangindaan, T. Nakazawa, K.
Ukai, H. Kobayashi and M.
Namikoshi (2007) Three New
Sulfur-containing Alkaloids,
Polycarpaurines A, B and C, from
an Indonesian Ascidian Polycarpa
9
 aurata. Tetrahedron. [Internet] http://www.sciencedirect.com
8th January 2007. Vol. 63 (2): 409- [Akses 1 Nopember 2014]
412. Available from:

Submit to Jurnal Alam dan Lingkungan 2015 10