Review: Endocrine Control of Reproduction, Fish (Biran dan Berta 2018)

Ikan terdiri lebih dari 40% dari semua spesies vertebrata dan sangat beragam.
Namun demikian, komponen endokrin umum dan jalur yang mengatur reproduksi
ikan sangat dilestarikan dan seperti pada vertebrata lainnya, endokrin dihasilkan oleh
sumbu Hipotalamushipofisis-Gonad (HPG). Informasi sensorik dari lingkungan
internal dan eksternal serta isyarat sosial (seperti kehadiran lawan jenis, suhu,
photoperiod, metabolisme, sumber energi, gonad, dan lain-lain.), endokrin diproses
oleh otak ikan dan diintegrasikan oleh hipotalamus untuk memulai dan mengatur
aktivitas reproduksi. Hipotalamus bereaksi terhadap kondisi lingkungan dan fisiologis
dengan mensintesis dan melepaskan neuropeptida (terutama Gonadotropin-Releasing
Hormone; GnRH) dan monoamina (terutama dopamin) yang mengatur aktivitas sel-
sel endokrin di hipofisis anterior. Wilayah hipofisis itu menghasilkan hormon
gonadotropin Folicle Stimulating Hormone (FSH) dan Luteinizing Hormone (LH).
Setelah stimulasi, sel gonadotroph yang terletak di hipofisis anterior akan
memproduksi dan melepaskan hormonnya ke dalam darah. Kedua gonadotropin
mencapai gonad, di mana mereka merangsang sintesis hormon steroid yang, pada
gilirannya, mengatur pematangan gamet, serta menyampaikan umpan balik ke
hipotalamus dan hipofisis (Biran dan Berta 2018).
Terlepas dari keragaman strategi reproduksi di antara sekitar 29.000 spesies
ikan yang diakui, ikan memiliki beberapa karakteristik endokrin yang berbeda: (i)
Neurohipofisis ikan diposisikan secara dorsal ke adenohipofisis, berbeda dengan
kelompok anterior posterior hipofisis mamalia. Selain itu, tidak seperti adenohipofisis
mamalia, adenohipofisis teleostean tidak mengandung celah, sehingga tidak ada
pemisahan morfologis yang jelas menjadi pars distalis dan pars intermedia seperti
pada mamalia; (ii) Ikan tidak memiliki eminensia median dan sistem portal hipofisis.
Sebaliknya, baik neurohipofisis dan adenohipofisis secara langsung dipersarafi oleh
terminal saraf hipotalamus. Mode ganda regulasi gonadotrop oleh GnRH,
menggabungkan komponen neuroglandular dan neurovaskular; (iii) Sel-sel yang
memproduksi gonadotropin yang berbeda diatur secara spasial, dan dikelompokkan
pada kelenjar tertentu. Gonadotrop mamalia dapat menghasilkan FSH dan LH,
gonadotropin ikan diproduksi dan disekresikan oleh jenis sel yang berbeda. Sel-sel
LH menunjukkan kontak sel-ke-sel yang dekat dan membentuk jaringan yang
berkesinambungan di seluruh kelenjar sementara sel-sel FSH terdistribusi lebih
longgar, masih mempertahankan beberapa derajat kontak sel-ke-sel melalui proses
sitoplasmik; (iv) Karena peristiwa duplikasi seluruh genom yang telah terjadi selama
evolusi ikan, sebanyak tiga ligan GnRH dan lima gen reseptor GnRH (GnRH-R) telah
diidentifikasi pada spesies ikan tertentu. Sebaliknya, hanya satu atau dua varian
seperti itu yang terjadi pada mamalia. Duplikasi gen pada ligan GnRH menyebabkan
terjadinya segregasi pada pola ekspresi dan fungsi sentral dari masing-masing ligan.
Varian spesifik spesies (GnRH; GnRH1) yang terjadi pada ikan, terutama terletak di
daerah preoptik, dan memainkan peran sentral dalam mengatur reproduksi. Varian
yang sangat diawetkan (cGnRH-II tipe ayam; GnRH2) di otak tengah dapat bertindak
sebagai neurotransmitter dan/atau neuromodulator. GnRH tipe salmon (sGnRH;
GnRH3) yang telah diidentifikasi terutama di ganglion saraf terminal dan bulbus
olfaktorius, dilaporkan memiliki fungsi neuromodulator (Biran dan Berta 2018).
Beberapa spesies teleost hanya memiliki dua bentuk GnRH: genom salmon
dan ikan zebra tidak mengandung bentuk GnRH1, sedangkan ikan lele dan belut tidak
memiliki GnRH3. Misalnya, pada ikan zebra, beberapa neuron GnRH3 yang
berkembang di saraf terminal bermigrasi ke POA hipotalamus dan menginervasi
hipofisis. GnRH hipotalamus adalah regulator positif dari sumbu HPG, pelepasan
neuroendokrin dopamin hipotalamus berfungsi sebagai efektor negatif aktivitas HPG.
Dopamin adalah neurotransmitter, disintesis dari tirosin oleh tirosin hidroksilase
(enzim pembatas laju) dan Dopa-dekarboksilase. Meskipun dopamin diketahui
memiliki efek pleiotropik pada fungsi otak dan hipofisis, keterlibatannya dalam
regulasi endokrin reproduksi ikan telah ditunjukkan pada beberapa spesies ikan,
termasuk Ikan Mas, Ikan Zebra, Lele Afrika, Nila, Belut, Belanak Abu-Abu,
Sturgeon, dan Ikan Trout Pelangi (Biran dan Berta 2018).
Seperti pada vertebrata lainnya, regulasi reproduksi ikan melibatkan sintesis
dan sekresi hormon dari adenohipofisis, termasuk FSH (GTH-I), LH (GTH-II),
Growth Hormone (GH), Tiroid Stimulating Hormone (TSH) dan Adrenocorticotropic

2
Hormone (ACTH), dengan FSH dan LH berfungsi sebagai pengatur utama
perkembangan dan fungsi gonad. FSH dan LH adalah hormon heterodimerik. Selama
bertahun-tahun, gen subunit gonadotropin diisolasi di lebih dari 56 spesies ikan dari
setidaknya 14 ordo teleost, memungkinkan karakterisasi yang luas dari sintesis dan
pelepasan gonadotropin ikan. Sinyal dari neurohormon hipotalamus dan steroid
gonad terintegrasi dalam sel gonadotropin untuk mengatur sintesis dan pelepasan
kedua gonadotropin. Meskipun demikian, regulasi GnRH dari sintesis dan pelepasan
FSH kurang jelas dibandingkan dengan regulasi LH. Seperti dijelaskan sebelumnya,
ada dua mode utama perkembangan gonad pada ikan. Perkembangan gonad yang
sinkron disertai dengan dualitas yang jelas dari sekresi gonadotropin; sementara
adenohipofisis salmon yang belum matang sebagian besar mengandung sel FSH,
adenohipofisis ikan Trout Pelangi yang matang secara seksual mengandung sel
penghasil LH numerus. Selain itu, hanya FSH yang dilepaskan ke dalam darah
salmon coho yang belum matang, dengan peningkatan kadar selama langkah
rekrutmen gonad, dan penurunan kadar menuju pematangan oosit akhir dan
pemijahan. Sementara kedua gonadotropin menginduksi sekresi E2, LH lebih poten
daripada FSH dalam meningkatkan 17A,20B kadar dihydroxy-4-pregnen-3-one
(DHP) dari oosit pasca vitellogenik. Namun, pada ikan mas, LH saja sudah cukup
untuk mengatur vitellogenesis dan pematangan akhir oosit sementara FSH mungkin
memiliki peran lain yang belum ditentukan. Sebaliknya, baik FSH dan LH disintesis
dan dilepaskan selama semua tahap reproduksi pada ikan multi-pemijahan dengan
ovarium asinkron seperti gilthead seabream, ikan mas dan nila. Perbedaan ini
mungkin karena kebutuhan untuk mengatur perkembangan beberapa generasi oosit
secara paralel. Dalam situasi ini, regulasi diferensial dari setiap generasi oosit dapat
dikaitkan dengan perbedaan ekspresi reseptor gonadotropin (Biran dan Berta 2018).
Reseptor FSH dan LH ikan adalah GPCR yang termasuk dalam reseptor mirip
rhodopsin. FSHR dan LHR mamalia menunjukkan selektivitas yang sangat tinggi
terhadap ligan serumpunnya, yang mengarah ke spesifisitas fungsional. Pemodelan
struktural yang dikombinasikan dengan uji in vitro aktivasi reseptor gonadotropin
telah menunjukkan bahwa pada beberapa spesies ikan, FSHR dapat mengikat FSH

3
dan LH, sementara di hampir semua spesies ikan yang diuji, LHR sangat spesifik
untuk LH. Seiring dengan pentingnya mereka dalam induksi steroidogenesis ovarium,
reseptor gonadotropin diekspresikan oleh sel folikel ovarium (sel teka dan granulosa)
dan oleh sel interstisial dan sel perawat testis (sel Leydig dan Sertoli). Steroid gonad
mengirimkan umpan balik mereka untuk mengatur sintesis dan pelepasan FSH dan
LH. Umpan balik ini dapat bersifat positif atau negatif, tergantung pada keadaan
reproduksi ikan (Biran dan Berta 2018).
LH bekerja pada folikel ovarium untuk menghasilkan DHP, Maturation-
inducing Hormone (MIH) pada sebagian besar ikan. Peningkatan dramatis dalam
kapasitas folikel pasca vitellogenik untuk menghasilkan DHP sebagai respons
terhadap LH berkorelasi dengan penurunan P450c17 (P450c17-I) dan P450 aromatase
(oP450arom) mRNA dan peningkatan bentuk baru P450c17 (P450c17-II) dan 20B-
hidroksisteroid dehidrogenase (20B-HSD) mRNA (Biran dan Berta 2018).
Sebagian besar spesies ikan yang digunakan dalam penelitian dan budidaya
adalah gonochoristic. Oleh karena itu, ikan yang matang secara seksual akan
memiliki testis fungsional (jantan) atau ovarium fungsional (betina). Pada sebagian
besar ikan gonochoristic, FSH dan LH merangsang sintesis tiga kunci steroid seks:
E2 berfungsi sebagai estrogen utama dan merangsang proliferasi dan pertumbuhan sel
germinal dan vitellogenesis; 11 ketotestosteron (11-KT) berfungsi sebagai androgen
sentral yang mengatur spermatogenesis dan spermiogenesis; DHP mengatur
pematangan akhir oosit dan ovulasi pada betina serta pematangan spermatozoa dan
spermiasi pada Jantan.Yaron, 1995). Selain itu, DHP terlibat dalam onset meiosis
ogonia di ovarium dan spermatogonia di testis. Androgen dan E2 (di bawah FSH)
terlibat dalam munculnya tetesan lipid dalam oosit previtellogenik. Patut dicatat
bahwa vertebrata yang lebih tinggi menggunakan testosteron dan bukan 11-KT
sebagai hormon androgenik utama mereka. Jalur ini diatur secara paralel dengan
regulasi umpan balik steroid gonad yang disebutkan di atas pada fungsi reproduksi
hipotalamus dan hipofisis (Biran dan Berta 2018).
Dalam spermiogenesis, sperma non-fungsional menjalani proses pematangan
sperma menjadi spermatozoa matang, yang sepenuhnya mampu motilitas dan

4
pembuahan yang kuat. Proses ini terutama dikendalikan oleh hormon steroid seks.
Pembaruan spermatogonial dikendalikan oleh E2 melalui ekspresi faktor
pertumbuhan sel endotel yang diturunkan dari trombosit. Proliferasi spermatogonia
menuju meiosis diprakarsai oleh 11-KT, yang dihasilkan oleh stimulasi FSH. 11-KT
mencegah ekspresi hormon anti-Müllerian (AMH), yang berfungsi untuk
menghambat proliferasi spermatogonia dan menginduksi ekspresi aktivin B, yang
berfungsi dalam induksi proliferasi spermatogonial. Meiosis diinduksi oleh DHP
melalui aksi tripsin. DHP juga mengatur pematangan sperma melalui pengaturan
seminal plasma pH. Stimulasi gonadotropik sel Leydig di testis menginduksi sintesis
dan pelepasan 11-KT, yang mengarah pada aktivasi sel Sertoli, menghasilkan
stimulasi spermatogenesis. Dengan berkembangnya spermatogenesis, tingkat 11-KT
mulai menurun dan tingkat DHP meningkat, yang mengarah ke induksi
spermiogenesis. Pada beberapa spesies ikan, DHP terbukti lebih mengatur motilitas
sperma. Dalam kasus ikan betina, peran endokrin steroid gonad lebih kompleks; di
samping perannya dalam regulasi umpan balik dan perkembangan gonad, estrogen
gonad menginduksi sintesis dan pelepasan Vitelogenin (VTG), protein penyimpanan
utama dalam oosit ikan, oleh hati betina. Pada ikan dengan ovarium sinkron, sel teka
dari folikel merespon FSH untuk menghasilkan testosteron, yang kemudian
diaromatisasi menjadi E2 oleh sel granulosa. E2 merangsang produksi VTG dan
secara paralel mengatur akumulasinya di kuning telur. Setelah pertumbuhan
vitellogenik oosit, kadar FSH menurun bersamaan dengan peningkatan kadar LH. Hal
ini menyebabkan pergeseran dalam steroidogenesis yang menyebabkan ovarium
memproduksi terutama DHP. Selain mekanisme genomik klasik dari tindakan steroid
yang dimediasi oleh aktivasi reseptor nuklear intraseluler, sekarang ada banyak bukti
bahwa steroid juga mengaktifkan reseptor pada permukaan sel untuk memulai
pensinyalan intraseluler yang cepat dan respons biologis yang seringkali non-
genomik. Dua protein baru yang ditemukan baru-baru ini dengan domain tujuh-
transmembran, GPCR30 (GPR30), dan reseptor progestin membran (mPRs), masing-
masing memiliki karakteristik pengikatan ligan dan pensinyalan reseptor membran
estrogen dan progestin. Selama fase pertama sampai fase akhir pertumbuhan oosit

5
vitellogenik – folikel ovarium menghasilkan sejumlah besar estrogen dan sejumlah
kecil progestin, menghasilkan aktivasi jalur penghambatan yang mengatur
pematangan oosit, tetapi bukan jalur stimulasi. Estrogen bekerja melalui GPR30
untuk mengaktifkan protein G stimulator (Gs), menghasilkan stimulasi aktivitas
adenilat siklase dan peningkatan produksi cAMP. Tingkat cAMP yang tinggi
mempertahankan penangkapan meiosis oosit ikan. Selain itu, estrogen meningkatkan
ekspresi GPR30 untuk mempotensiasi jalur penghambatan dan menurunkan regulasi
mPRA ekspresi untuk memblokir yang stimulator, melalui aktivasi GPR30 melalui
jalur yang tidak diketahui. Akibatnya, oosit tetap dalam penangkapan meiosis. Pada
fase kedua, jalur steroidogenik dialihkan ke produksi progestin dan produksi estrogen
menurun. Pada saat yang sama, progestin, melalui mPRA, menyebabkan penurunan
regulasi ekspresi GPR30, yang bersama-sama dengan penurunan kadar estrogen,
menyebabkan penekanan jalur penghambatan. Ikatan progestin dengan mPRA
menghasilkan aktivasi protein G yang menurunkan aktivitas adenilat siklase dan
tingkat cAMP, yang menyebabkan penghambatan protein kinase A, sehingga
melepaskan oosit dari penangkapan meiosis dan memungkinkan pematangan oosit
untuk dilanjutkan (Biran dan Berta 2018).

6
Review: Transcriptome analysis of common carp (Cyprinus carpio) provides insights
into the ovarian maturation related genes and pathways in response to LHRHA and
dopamine inhibitors induction (Liu et al., 2020)

Luteinizing hormone-releasing hormone analog (LHRH-A) dan dopamin

inhibitor telah banyak digunakan untuk menginduksi pematangan oosit dan ovulasi
pada ikan yang didomestikasi. Meskipun pendekatan ini merupakan metode yang
dapat diandalkan untuk mengatur reproduksi ikan. Pematangan oosit ikan dan ovulasi
adalah peristiwa reproduksi penting yang melibatkan serangkaian perubahan
fungsional dan morfologis. Proses-proses ini dikendalikan oleh Brain-Hipofisis-
Gonad. Dalam kondisi buatan, LHRH-A yang terkait dengan inhibitor dopamin telah
ditunjukkan menjadi bahan yang efektif untuk menginduksi pematangan oosit dan
pelepasan oosit banyak spesies ikan. Otak adalah organ neuroendokrin yang penting
untuk mengontrol perkembangan ovarium dan memainkan peran penting dalam
mengatur steroidogenesis, pematangan oosit dan ovulasi. Dopamin adalah
neurotransmitter kecil yang memberikan efek penghambatan pada reproduksi di
banyak teleost. Peran dopamin dalam mengontrol pematangan ovarium telah diteliti
pada beberapa ikan. Pada ikan mas dan ikan zebra biasa, efek stimulasi dari GnRH
dalam sistem neuroendokrin berada di bawah penghambatan dopaminergik. Pada
belut Eropa, dopamin menghambat pelepasan hormon luteinizing, dan oosit kemudian
gagal untuk matang dan mengalami ovulasi. Studi selanjutnya menunjukkan bahwa
efek penghambatan dopamin dimediasi oleh reseptor dopamin D2. Injeksi dengan
menggunakan LHRH-A dan inhibitor dopamin dapat menurunkan ekspresi dopamine
receptor D2b dan peningkatan tingkat GVBD, yang dapat memblokir reseptor
dopamin D2 dan memodulasi pelepasan LH. Teleost memiliki dua isoform gen
aromatase P450, Cyp19a1a dan Cyp19a1b. Cyp19a1a dianggap sebagian besar
diekspresikan dalam ovarium dan Cyp19a1b adalah diekspresikan di otak. Aktivitas
aromatase otak yang tinggi selama musim pemijahan. Hal tersebut mengisyratkan
bahwa Cyp19a1b mungkin juga memiliki fungsi penting dalam reproduksi ikan. Di
sisi lain, LH juga diatur oleh efek umpan balik dari steroid seks gonad. Pada ikan mas
prapubertas, E2 dapat menginduksi hormon luteinizing sekresi dan ekspresi mRNA,

7
yang menunjukkan pola umpan balik positif regulasi E2 pada LH. Namun, implantasi
testosteron tetapi tidak estradiol dapat menginduksi respons hipofisis terhadap
LHRH-A eksogen pada ikan mas betina dewasa secara seksual (Liu et al., 2020).
Ovarium adalah organ reproduksi wanita penting yang menghasilkan telur dan
steroid hormon. Ini juga berfungsi sebagai reservoir protein, lipid, dan RNA yang
diperlukan untuk pertumbuhan dan pematangan oosit. Selama vitelogenesis, oosit
ikan mengakumulasi lipid dan protein kuning telur dari plasma, yang umumnya
dianggap sebagai energi utama cadangan oosit dewasa (Wiegand, 1996; Lubzens et
al., 2010). Dalam penelitian kami, DEG terkait dengan fosforilasi oksidatif meningkat
secara signifikan dalam kelompok yang diberi hormon. Studi sebelumnya telah
menunjukkan bahwa oksidatif fosforilasi adalah jalur utama untuk generasi ATP di
mitokondria selama pematangan dan pembuahan oosit. NS jalur fosforilasi oksidatif
diperkaya dalam ikan mas yang diberi hormon, mencerminkan kebutuhan energi yang
tinggi selama pematangan oosit dan selanjutnya perkembangan embrio. Pada teleost,
seperti pada vertebrata lainnya, oogenesis dan ovulasi diatur oleh interaksi berurutan
hormon endokrin dari sumbu otak-hipofisis-ovarium. LH memainkan peran utama
dalam fase oosit pematangan dan ovulasi. Pada kebanyakan teleost, kadar LH darah
meningkat secara drastis ketika pematangan ovarium akan mencapai tahap akhir. LH
berikatan dengan reseptornya pada sel granulosa folikel dan mengaktivasi target hilir
dan jalur pensinyalan, yang akhirnya mengarah ke folikel pecah. 20β-hsd yang
terlibat dalam sintesis maturating-inducing steroid, LH menggerakkan inti kuning
telur pada jalur steroidogenik dari produksi estrogen hingga produksi MIS selama
pematangan oosit (Liu et al., 2020).

8
 Daftar Pustaka

Biran, J., dan B. Levavi-Sivan. 2018. Endocrine Control of Reproduction, Fish.

Encyclopedia of Reproduction. 6: 362-368.

Liu, H., Wang, J., Zhang, L., Zhang, Y., Wu, L., Wang, L., Dong, C., Nie, G., Li, X.
2020. Transcriptome analysis of common carp (Cyprinus carpio) provides
insights into the ovarian maturation related genes and pathways in response to
LHRH-A and dopamine inhibitors induction. General and Comparative
Endocrinology. 301: 1-35.