µ f) ☒ ☒Bogo

Enzyme linked
-
•
Ygbisadideteksi : < Protein >

immunosorbent assay en2im

}
-

"
↳ also called
"
EIA -

Protein carrier

ENZYME immuno " ' " Protein transporter Sbg antigen

-

-
hormon
• Enzim : HRP -
Vitamin
• Elisa adalah Px analytical kuantitatif -
obat
Bentuksampel
Nb.se/amasudahdibuatantibodithdsitoplasma
serum plasma saliva urine
•
:
, ,
, ,

senyawaygakandiidentifikasi
set
• Rx antigen -
antibodi ( Rx immunology )
apabilaterjadireaksi •
Aplikasi ELISA :
I →
mendeteksi markers suatupenyakit
Perllbahan warn a ex :
rapid antigen coup 19 ( ELISA kualitatif )
I → mendeteksi allergen
absorb ansiberbeda → bidang industri Maranan
t

spektrofotometer •
ygdigunakan 01 ELISA : antibodi monoclonal
Iv ↳ hanyamengenali 1 epitop antigen

banding Kan dgsampelygberisisenyawa ↳ px ELISA : SPESIFIK → antibodihanya

Standard gkonsentrasi ygberbeda mengenali 1 bagiandr antigen

• antigen :
yg ing in Kita Cari / identifikasi •
Sebelumada ELISA digunakan teknik
↳ u/ mengidentifikasiadanyasuatusenyawa radio immunoassay dgmenggunakan
dan konsentrasinya radioisotopes → bahaya → dihentikan
•
TIDAK ADA Kit
ygmenggunakansampel DARAH

↳ krn ELISA harusdlmbentukcairan •

Sekarang dikembangkan fluorescence
•
Konsentrasi ygadadlmcairanbiologisrendah ↳ anti bodi di label dog fluorophore
( Miko gram -
milligram ) ( dapat berpendar )
•
Apabilakonsentrasisenyawadisampeimelebihi ↳ Shg dim 1 Sam pet bisamendeteksi
"
Max . absorb ansi range → Perla diencerkan lebihdr I senyawa scr bersama
• Apabila konsentrasi
senyawa di sampeldibawah ( multiplex arrays )
min . absorb ansi range → gaadaperubahan
warnaltdkterdeteksil
 SEJARAH PER KEMBANGAN

RIAL radio immunoassay ) •

ELISA tenaga robot

nldeteksi DM (t) human error lebih Kecil

t (t ) sumuranlebihbanyak

ELISA • ELISA dg nano material

•
modifikasi dari RIA 4) lebihspesifikulmendeteksi senyawa
omengukurkonsentrasi IgG di Kerinci • ELISA wash free ltanpadicuci )
-

I 4) mempersingkatwaktu
ELISA t Enzim HRP

•
mengukur Kadar hormon HCG PRINSIP PASAR ELISA

I Coating / capture
* ELISA + HRP 1- microplate → immobilisasi antigen dipermukaan
Sumuran microplate
•
bisamendeteksibanyaksampel
dlmwaktu bersamaan → pelapisan

② Plate Blocking
→ u/
menghilangkanrx antigen -
antibodi
•
Immunoassays ( IA ) Sekar ang bisamenganalisis : Yg tdkspesifik 1Pa Isu )
-

kuantitatif →
umumnyamenggunakan BSA ( serum
-

semikuantitatif albumin drsapi ) / ski meal 1 ? )

kualitatif teskehamilan rapid antigen →
menutupipermukaansumuranyg
-

→
,

•
Efektif untuk : tidal ada antibodi
-
menentukan diagnosis ③ Probing / Detection
-

me monitor → antigen -

antibodiygsudahbereaksi
-

memvltuskan pengobatan di deteksi

•
Keunggulan : →
dgantibodiyg dilabelidgenzim /
-

sensitif fluorophore
-

spesifik → kemungkinan posit if Palsu Kecil ④ Signal measurement

Pre Sisi mengukur
→ se Karang vs berikutnya →
berapabanyakwarnaygberubah
-

tidal ada variasiygbanyak

?⃝
• antigen lantibodi ygdigunakan diikatkan • absorbs i :
dibawamasuk
dgfase pad at dari microplate . adsorbs i : Melekat

fase pad at : -

Polystyrene •
enzyme → kinase :
melekatkansenyawa
-
polyvinyl / ke fosfat → aktif

Polypropylene IRX fosforilasi )

↳ Phospatase menghilangkan
-

•
microplate mampumengadsorbsi antigen - :

anti bodi gugusfosfat

• en2im Yg paling banyakdigunakan : ( Rxdefosforilasi )

HRP
{ alkaline Phospatase •
peroxidase = HRP
•
Kalo pave alkaline phospatase harusada
substrata ya : P -
nitro -
phenyl phospatase
→ gugus fosfatdilepaskan → p nitro phenyl →
- -

menyebabkan warn a Kuning

• Rx antigen antibodi T - :
Kuning tua
Rx antigen -
anti bodi t :
Kuning Muda
• Kalo pake peroxidase harusadasubstratnya :

5- amino salicylic acid / ortho phenyl ene diamine

→
menghasilkan warn a coklat

Kato pake beta galactosidase ga bis a

•
→

pake spektofoto meter → haru spake fluorometer

•
Rxenzim -
sub Strat → inkubasi 1=30-60 men it

•
Stop solution : u/ menghentikanrx →

supaya talk terjadi posit if palsu

→ NaOH ,
HCI , 142504
•
Has it tergantung pd warn a ygdihasilkan
↳ range : 400-600 nm