Anda di halaman 1dari 94

SKRIPSI

SINTESIS DAN KARAKTERISASI SCAFFOLD NANOFIBER


POLIVINIL ALKOHOL (PVA) BERBASIS STRONSIUM
HIDROKSIAPATIT DARI CANGKANG LOBSTER PASIR (Panulirus
homarus) UNTUK REKAYASA JARINGAN TULANG

SYNTHESIS AND CHARACTERIZATION OF POLYVINYL ALCOHOL


(PVA) NANOFIBER SCAFFOLD BASED ON STRONTIUM
HYDROXYAPATITE FROM SAND LOBSTER SHELLS (Panulirus
Homarus) FOR BONE TISSUE ENGINEERING

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh derajat Sarjana


Sains Ilmu Fisika

Arian Hermawan Diputra


19/442397/PA/19146

PROGRAM STUDI FISIKA


DEPARTEMEN FISIKA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS GADJAH MADA
YOGYAKARTA
2023
PRAKATA
Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Kuasa atas limpahan
kasih dan karunia-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan
judul “Sintesis dan Karakterisasi Scaffold Nanofiber Polivinil Alkohol (PVA)
Berbasis Stronsium Hidroksiapatit dari Cangkang Lobster Pasir (Panulirus
homarus) untuk Rekayasa Jaringan Tulang” sebagai salah satu syarat memperoleh
gelar sarjana. Penulis menyadari dalam penyelesaian skripsi ini terdapat dukungan
dari banyak pihak. Penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1. Tuhan Yang Maha Kuasa atas rahmat dan karunia yang telah diberikan.
2. Kedua orang tua dan seluruh keluarga yang telah memberikan motivasi,
doa, dan dukungan moral maupun material.
3. Bapak Prof. Dr. Yusril Yusuf, S.Si., M.Si., M.Eng. selaku dosen
pembimbing yang telah bersedia memberikan arahan dan bimbingan
kepada penulis dari awal penelitian hingga skripsi ini selesai.
4. Ibu Dra. Eko Tri Sulistyani, M.Sc. selaku dosen pembimbing akademik
yang telah memberikan motivasi dan bimbingan kepada penulis selama
menempuh perkuliahan.
5. Bapak Drs. Bambang Murdika Eka Jati, M.S., Bapak Prof. Dr. Harsojo,
SU., M.Sc., dan Ibu Dr. Sc. Ari Dwi Nugraheni. S.Si., M.Sc. selaku dosen
penguji yang telah memberikan masukan dan saran yang membangun.
6. Kak Mona Sari Sadeli yang telah meluangkan waktu dan turut membantu
penulis dalam proses penelitian hingga skripsi ini selesai.
7. Tim Riset Biomaterial Fisika Universitas Gadjah Mada
8. Teman-teman Fisika 2018 dan semua pihak yang terlibat dalam proses
penelitian yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu.
Penulis berharap skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi seluruh pembaca.
Penulis juga menyadari masih terdapat kekurangan dalam skripsi ini, sehingga
saran dan kritik yang membangun sangat diharapkan untuk perbaikan.

Yogyakarta,14 April 2023

Penulis

ii
DAFTAR ISI

DAFTAR ISI ....................................................................................................................... iii


DAFTAR GAMBAR ........................................................................................................... v
DAFTAR TABEL .............................................................................................................. vii
INTISARI .......................................................................................................................... viii
ABSTRACT .......................................................................................................................... ix
BAB I PENDAHULUAN .................................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang............................................................................................................ 1
1.2 Rumusan Masalah....................................................................................................... 3
1.3 Tujuan Penelitian ........................................................................................................ 3
1.4 Batasan Masalah ......................................................................................................... 3
1.5 Metode Penulisan ....................................................................................................... 4
1.6 Manfaat Penelitian ...................................................................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................................... 5
BAB III DASAR TEORI.................................................................................................... 11
3.1 Tulang....................................................................................................................... 11
3.2 Hidroksiapatit ........................................................................................................... 13
3.3 Stronsium Hidroksiapatit .......................................................................................... 15
3.4 Polivinil Alkohol ...................................................................................................... 15
3.5 Scaffold Nanofiber ................................................................................................... 17
3.6 Metode Electrospinning............................................................................................ 18
3.7 X-Ray Diffraction (XRD) ......................................................................................... 21
3.8 Fourier Transform Infrared (FTIR) ......................................................................... 24
3.9 Scanning Electron Miscroscopy (SEM) dan Energy Dispersive X-Ray (EDX) ....... 25
3.10 Transmission Electron Miscroscopy (TEM) ............................................................ 26
3.11 Uji bioaktivitas ......................................................................................................... 27
3.12 Uji tarik..................................................................................................................... 27

iii
BAB IV METODE PENELITIAN ..................................................................................... 30
4.1 Lokasi Penelitian ...................................................................................................... 30
4.2 Alat dan Bahan ......................................................................................................... 30
4.3 Diagram Alir Penelitian ............................................................................................ 30
4.4 Prosedur Penelitian ................................................................................................... 32
4.5 Teknik Analisis Data ................................................................................................ 33
BAB V ................................................................................................................................ 37
5.1 Hasil Karakterisasi HAp dan SrHAP........................................................................ 37
5.1.1 Hasil Karakterisasi XRD HAp dan SrHAp .............................................................. 37
5.1.2 Hasil Karakterisasi FTIR HAp dan SrHAp .............................................................. 39
5.1.3 Hasil Karakterisasi SEM-EDX HAp dan SrHAp ..................................................... 40
5.1.4 Hasil Karakterisasi TEM HAp dan SrHAp .............................................................. 42
5.2 Hasil Karakterisasi scaffold nanofiber ..................................................................... 43
5.2.1 Hasil Karakterisasi XRD scaffold nanofiber ............................................................ 43
5.2.2 Hasil Karakterisasi FTIR scaffold nanofiber ............................................................ 44
5.2.3 Hasil Karakterisasi SEM scaffold nanofiber ............................................................ 45
5.2.4 Hasil Karakterisasi TEM scaffold nanofiber ............................................................ 49
5.2.5 Hasil Uji Bioaktivitas scaffold nanofiber ................................................................. 50
5.2.6 Hasil Uji Tarik scaffold nanofiber ............................................................................ 52
BAB VI .............................................................................................................................. 55
6.1 Kesimpulan............................................................................................................... 55
6.2 Saran ......................................................................................................................... 55
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................................ 57
LAMPIRAN ....................................................................................................................... 78

iv
DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Spektra FTIR (a) cangkang abalon, (b) cangkang abalon
yang dikalsinasi, dan (c) HAp ................................................................................ 13
Gambar 2.2 Pola XRD (a) cangkang abalon, (b) cangkang abalon
yang dikalsinasi, dan (c) HAp ................................................................................ 15
Gambar 2.3 Pola XRD SrHAp ............................................................................... 16
Gambar 2.4 Hasil SEM dan distribusi diameter dari nanofiber
PVA/CS/CHAp ...................................................................................................... 17
Gambar 2.5 Hasil uji tarik pada PVA/HAp............................................................ 18
Gambar 3.1 Struktur hierarki tulang ...................................................................... 19
Gambar 3.2 Jenis sel pada jaringan tulang ............................................................. 20
Gambar 3.3 Struktur kristal HAp (a) tampilan atas dan
(b) tampilan bawah................................................................................................. 22
Gambar 3.4 Struktur monomer PVA/terhidrolisis penuh, (b) struktur vinil
alkohol, (c) struktur PVA, dan (d) PVA terhidrolisis sebagian ............................. 23
Gambar 3.5 Mekanisme perbaikan dan regenerasi tulang oleh
scaffold nanofiber................................................................................................... 26
Gambar 3.5 (a) Skema persiapan alat dan bahan electrospinning dan
(b) mekanisme Taylor cone selama electrospinning .............................................. 27
Gambar 3.6 Pengaturan difraksi sinar-X................................................................ 29
Gambar 3.7 Pola XRD (a) amorf dan (b) kristal ....................................................30
Gambar 3.8 Skema diagram FTIR .........................................................................32
Gambar 3.9 Skema diagram SEM ..........................................................................33
Gambar 3.10 Skema diagram uji tarik ...................................................................35
Gambar 4.1 Diagram alir penelitian .......................................................................37
Gambar 5.1 Pola difraksi XRD HAp dan SrHAp ..................................................30
Gambar 5.2 Spektra FTIR HAp dan SrHAp ..........................................................32
Gambar 5.3 Hasil morfologi dari SEM untuk (a) HAp dan (b) SrHAp .................33
Gambar 5.4 Hasil EDX dan kandungan unsur (a) HAp dan (b) SrHAp ................35
Gambar 5.5 Hasil morfologi dari TEM (a) HAp dan (b) SrHAp ...........................37
Gambar 5.6 Pola difraksi scaffold nanofiber (a) PVA, (b) PVA/HAp, (c)
PVA/SrHAp 5%, (d) PVA/SrHAp 10%, dan (e) PVA/SrHAp 15%...................... 27
Gambar 5.7 Spektra FTIR scaffold nanofiber (a) PVA, (b) PVA/HAp, (c)
v
PVA/SrHAp 5%, (d) PVA/SrHAp 10%, dan (e) PVA/SrHAp 15%...................... 29
Gambar 5.8 Hasil morfologi SEM dari scaffold nanofiber (a) PVA, (b) PVA/HAp,
(c) PVA/SrHAp 5%, (d) PVA/SrHAp 10%, (e) PVA/SrHAp 15% .......................30
Gambar 5.9 Hasil distribusi diameter untuk scaffold nanofiber (a) PVA, (b)
PVA/HAp, (c) PVA/SrHAp 5%, (d) PVA/SrHAP 10%, (e) PVA/SrHAp 15%, dan
(f) rata-rata diameter nanofiber ..............................................................................32
Gambar 5.10 Hasil morfologi TEM dari scaffold nanofiber (a) PVA/HAp, (b)
PVA/SrHAp 5%, (c) PVA/SrHAp 10%, dan (c) PVA/SrHAp 15% ......................33
Gambar 5.11 Hasil morfologi SEM dari scaffold nanofiber(a) PVA, (b)
PVA/HAp, (c) PVA/SrHAp 5%, (d) PVA/SrHAp 10%, dan (e) PVA/SrHAp 15%
setelah direndam selama 1, 3, dan 5 hari ...............................................................35
Gambar 5.12 Hasil uji tarik berupa (a) ultimate strength, (b) elongation at break,
dan (c) modulus Young ..........................................................................................37

vi
DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Tabel rasio kandungan Sr dalam HAp ................................................... 16


Tabel 2.2 Karakteristik nanofiber PVA/HAp ......................................................... 18
Tabel 3.1 Komposisi kimiawi tulang ..................................................................... 20
Tabel 3.2 Karakteristik PVA .................................................................................. 24
Tabel 3.3 Dampak parameter electrospinning pada morfologi nanofiber .............. 28
Tabel 5.1 Jadwal kegiatan penelitian ..................................................................... 41

vii
INTISARI

SINTESIS DAN KARAKTERISASI SCAFFOLD NANOFIBER


POLIVINIL ALKOHOL (PVA) BERBASIS STRONSIUM
HIDROKSIAPATIT DARI CANGKANG LOBSTER PASIR (Panulirus
homarus) UNTUK REKAYASA JARINGAN TULANG

Oleh

ARIAN HERMAWAN DIPUTRA


19/442397/PA/19146

Pada penelitian ini akan dilakukan fabrikasi scaffold nanofiber PVA berbasis
stronsium hidroksiapatit (SrHAp) menggunakan metode electrospinning.
Fabrikasi scaffold tersebut dibuat dengan variasi massa SrHAp sebesar 5%, 10%,
dan 15% terhadap massa polivinil alkohol (PVA). Variasi stronsium diketahui
meningkatkan bioaktivitas dan PVA diketahui sebagai polimer yang memiliki
kekuatan mekanik yang bagus. Material yang dihasilkan berupa scaffold nanofiber
PVA/HAp, PVA/SrHAp 5%, PVA/SrHAp 10%, dan PVA/SrHAp 15%. Material
scaffold nanofiber PVA/HAp digunakan sebagai kontrol negatif saat dilakukan
karakterisasi. Karakterisasi dilakukan dengan X-Ray Diffractometer (XRD),
Fourier Transform Infrared (FTIR), Scanning Electron Microscopy (SEM),
Energy Dispersive X-ray (EDX), uji bioaktivitas, dan uji tarik.

Kata Kunci: nanofiber, PVA, scaffold, stronsium hidroksiapatit

viii
ABSTRACT

SYNTHESIS AND CHARACTERIZATION OF POLYVINYL ALCOHOL


(PVA) NANOFIBER SCAFFOLD BASED ON STRONTIUM
HYDROXYAPATITE FROM SAND LOBSTER (Panulirus homarus)
SHELLS FOR BONE TISSUE ENGINEERING

By

ARIAN HERMAWAN DIPUTRA


19/442397/PA/19146

.
In this research, PVA nanofiber scaffold fabrication based on strontium
hydroxyapatite (SrHAp) will be carried out using the electrospinning method. The
scaffold fabrication was made with mass variations of SrHAp of 5%, 10%, and
15% to the mass of polyvinyl alcohol (PVA). Strontium variations are known to
increase bioactivity and PVA is known as a polymer with good mechanical
strength. The resulting materials are PVA/HAp, 5% PVA/SrHAp, 10%
PVA/SrHAp, and 15% PVA/SrHAp scaffolds. PVA/HAp nanofiber scaffold
material was used as a negative control during characterization. Characterization
was carried out by X-Ray Diffractometer (XRD), Fourier Transform Infrared
(FTIR), Scanning Electron Microscopy (SEM), Energy Dispersive X-ray (EDX),
bioactivity test, and tensile test
Keyword: nanofiber, PVA, scaffold, stronsium hidroksiapatit

ix
BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang


Tulang merupakan jaringan yang digunakan sebagai penopang berat suatu
organisme dan berfungsi sebagai titik tumpu gerakan karena memiliki keterkaitan
dengan otot (Tanaka et al., 2020). Cacat tulang dapat terjadi karena beberapa hal
yaitu penyakit (osteoporosis, arthritis, dan sebagainya), peregangan berlebihan,
faktor usia, dan konsumsi obat terlarang (Gautam et al., 2022). Beberapa metode
penyembuhan cacat tulang seperti autograft, allograft, atau implan tulang. Tetapi
beberapa metode tersebut memiliki beberapa keterbatasan. Misalnya, penggunaan
autograft dapat menyebabkan morbiditas di lokasi pencangkokan dan infeksi.
Sedangkan allograft dapat menyebabkan risiko penularan penyakit (Wang &
Yeung, 2017). Implan tulang menjadi alternatif untuk penyembuhan cacat tulang.
Namun implan tulang konvensional menggunakan logam seperti titanium (Ti) dan
tantalum (Ta) memiliki kelemahan: menghambat pembentukan tulang,
menstimulasi keropos tulang, dan korosi (Ghassemi et al., 2018). Oleh karena itu,
studi rekayasa jaringan tulang bertujuan untuk mengembangkan strategi yang
berfokus pada implan tulang untuk penyembuhan jaringan tulang (Lopes et al.,
2018).

Rekayasa jaringan tulang menekankan pada sifat regeneratif jaringan tulang


untuk menyembuhkan cacat tulang. Dasar dari rekayasa jaringan tulang adalah
kombinasi dari sel, scaffold, dan faktor pertumbuhan. Peran scaffold adalah
sebagai tempat berkembangnya sel pada jaringan tulang, dimana pembentukan sel
membantu faktor pertumbuhan untuk tumbuh ke arah tertentu (Yaszemski, 1996).
Tujuan rekayasa jaringan tulang dalam pembentukan scaffold adalah meniru
struktur dan fungsi matriks ekstraseluler (ECM) tulang alami, yang mempunyai
bentuk 3 dimensi (3D) untuk menunjang adhesi, proliferasi, dan diferensiasi serta
memiliki sifat fisik yang memadai untuk penyembuhan tulang (Qu et al., 2019).
Pembentukan scaffold yang efektif memiliki beberapa karakteristik yaitu:
biokompatibilitas, biodegradable, dan tidak beracun (Tariverdian et al., 2019).

Biomaterial merupakan komponen utama dari scaffold karena memenuhi


karakteristik tersebut. Salah satu biomaterial yang banyak digunakan dalam

1
rekayasa jaringan tulang adalah Hidroksiapatit (HAp). HAp merupakan fase
kalsium fosfat dengan rasio Ca/P bernilai 1,67 yang menyusun sebagian besar
komposisi dari tulang. Sintesis HAp dapat dilakukan melalui: metode kering
(solid state dan mekanokimia), metode basah (presipitasi, hidrotermal, dan
hidrolisis), dan metode suhu tinggi (pembakaran dan pirolisis) (Mohd Pu’ad et al.,
2020). Metode presipitasi merupakan metode yang banyak digunakan karena
dapat mensitesis HAp dalam jumlah banyak dengan biaya yang terjangkau
(Arokiasamy et al., 2022). Sintesis HAp dapat diperoleh dari bahan kimia atau
bahan alami yang kaya akan kalsium. Beberapa bahan alami tersebut antara lain
cangkang kerang, tulang kerbau, rajungan, dan cangkang lobster (Sari & Yusuf,
2018). Pada penelitian ini, sintesis HAp menggunakan metode presipitasi dengan
bahan alami berupa cangkang lobster pasir (Panulirus homarus).

Doping atau substitusi atom (𝐴𝑔+, 𝑍𝑛2+, 𝑆𝑟2+, dan ion lainnya) dapat
memodifikasi sifat fisik, kimia, dan biologis HAp (Murugesan et al., 2022). Ion
divalen Sr2+ dapat menstimulasi peningkatan bioaktivitas untuk rekayasa jaringan
tulang (Obada et al., 2021). Keramik HAp dengan substitusi Stronsium (Sr) dapat
meningkatkan diferensiasi dan mineralisasi sel osteoblastik (Ni et al., 2011).
Substitusi Stronsium pada HAp (SrHAp) menunjukkan pengaruh sebagai agen
antibakteri terhadap Eschericia coli dan Staphylococcus aureus (Ravi et al.,
2012).

Fabrikasi scaffold menjadi faktor penting dalam rekayasa jaringan tulang.


Metode fabrikasi scaffold yaitu: freeze drying (Karimi et al., 2021), porogen
leaching (Mawuntu & Yusuf, 2019; Sari et al., 2021), gas foaming (Moon et al.,
2021), dan electrospinning (Mohammadalipour et al., 2022). Pada penelitian ini,
fabrikasi scaffold menggunakan metode electrospinning. Metode electrospinning
menghasilkan scaffold berarsitektur nanofiber dengan luas permukaan yang
mampu mengadsorpsi protein dan binding sites ke membran sel (Rezvani et al.,
2016). Membran pada nanofiber memiliki sifat topografi 3D, porositas tinggi, dan
luas permukaan yang besar (Liu et al., 2017). Kebanyakan jaringan dan organ
pada manusia tersusun atas nanofiber pada ECM, yang memungkinkan
penggunaan electrospinning nanofiber dalam perbaikan jaringan dan organ
sebagai scaffold (Hussey et al., 2018; Y. S. Zhang & Xia, 2015). Beragam
nanofiber dapat dibentuk dari beragam polimer alami maupun sintesis (Xie et al.,

2
2020). Polivinil alkohol (PVA) merupakan polimer yang sering digunakan dalam
fabrikasi scaffold. Pada penelitian ini, PVA digunakan sebagai bahan polimer
untuk electrospinning karena sifat biokompatibilitas yang baik (Agrawal &
Pramanik, 2016) dan stabilitas mekanik (Teixeira et al., 2019).

Berdasarkan pemaparan di atas, maka dalam penelitian ini akan dilakukan


fabrikasi scaffold nanofiber PVA berbasis stronsium hidroksiapatit dari cangkang
lobster pasir. Sintesis stronsium hidroksiapatit menggunakan metode presipitasi
dan fabrikasi scaffold nanofiber menggunakan metode electrospinning.
Karakterisasi yang dilakukan berupa: (1) X-Ray Diffraction (XRD), (2) Fourier
Transform Infrared (FTIR), (3) Scanning Electron Microscope (SEM), (4) uji
bioaktivitas, dan (5) uji tarik.

1.2 Rumusan Masalah


Berdasarkan latar belakang yang dipaparkan sebelumnya, maka pada
penelitian ini dapat dirumuskan masalah sebagai berikut.
1. Bagaimana proses fabrikasi dari scaffold nanofiber PVA berbasis stronsium
hidroksiapatit?
2. Bagaimana karakteristik fisikokimia, mekanis, dan bioaktivitas scaffold
nanofiber.?
1.3 Tujuan Penelitian
Tujuan dari penelitian ini adalah sebagai berikut.
1. Fabrikasi scaffold nanofiber PVA berbasis stronsium hidroksiapatit
menggunakan metode electrospinning.
2. Mengkaji karakteristik fisikokimia, mekanis, dan bioaktivitas scaffold
nanofiber.
1.4 Batasan Masalah
HAp dan SrHAp disintesis dari cangkang lobster pasir (Panulirus homarus)
menggunakan metode presipitasi. Fabrikasi scaffold nanofiber menggunakan
metode electrospinning dengan bahan hidroksiapatit, stronsium hidroksiapatit, dan
PVA. Scaffold nanofiber PVA digunakan sebagai variabel kontrol. Scaffold
nanofiber difabrikasi dengan variasi bahan pengisi yaitu hidroksiapatit dan
stronsium hidroksiapatit dengan konsentrasi 5 wt% untuk mengetahui pengaruh
dari kedua bahan tersebut. Pengaruh konsentrasi SrHAp dalam nanofiber juga
dilakukan dengan variasi 5, 10, dan 15 wt%. Scaffold hasil fabrikasi

3
dikarakterisasi menggunakan XRD, FTIR, dan SEM. Kemudian dilakukan pula uji
bioaktivitas menggunakan larutan SBF dan uji tarik pada scaffold hasil fabrikasi.
1.5 Metode Penulisan
Sistematika penulisan skripsi ini terdiri dari 5 bab, di antaranya adalah sebagai
berikut:
1. BAB I Pendahuluan, menjelaskan terkait latar belakang dilakukannya
penelitian mengenai fabrikasi dan karakterisasi scaffold nanofiber PVA
berbasis stronsium hidroksiapatit untuk rekayasa jaringan tulang.

2. BAB II Tinjauan Pustaka, berisi kajian hasil penelitian-penelitian


sebelumnya yang berkaitan dengan fabrikasi dan karakterisasi scaffold
nanofiber PVA berbasis stronsium hidroksiapatit untuk rekayasa jaringan
tulang .
3. BAB III Dasar Teori, berisi acuan dan teori yang digunakan dalam
penelitian, yaitu terkait tulang, hidroksiapatit, stronsium hidroksiapatit,
polivinil alkohol, scaffold nanofiber, metode electrospinning dan beberapa
metode pengujian yang akan digunakan.
4. BAB IV Metode Penelitian, menjelaskan terkait waktu dan tempat
penelitian, alat dan bahan yang digunakan dalam penelitian, langkah-
langkah penelitian, metode karakterisasi, dan teknik uji pada scaffold
nanofiber PVA berbasis stronsium hidroksiapatit.
5. BAB V Jadwal Penelitian, berisi tabel rencana jadwal penelitian yang akan
dilakukan hingga penelitian selesai.
Bagian akhir dari usulan penelitian ini juga dilengkapi dengan daftar pustaka
yang mencakup semua referensi yang digunakan dalam penulisan usulan
penelitian.
1.6 Manfaat Penelitian
Manfaat dari penelitian ini adalah sebagai berikut.
1. Memberi informasi terkait proses fabrikasi scaffold nanofiber PVA berbasis
stronsium hidroksiapatit,

2. Memberi informasi terkait karakterisasi pada scaffold nanofiber PVA berbasis


stronsium hidroksiapatit.
3. Menjadi referensi bagi penelitian-penelitan selanjutnya, khususnya dalam
kajian biomaterial scaffold nanofiber PVA berbasis stronsium hidroksiapatit.

4
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

Hidroksiapatit (HAp) merupakan biomaterial yang cukup menjanjikan untuk


rekayasa jaringan tulang. Beberapa penelitian menunjukan HAp sebagai
komponen anorganik dari tulang yang memiliki kelebihan biokompatibilitas
tinggi, tidak beracun, dan osteokonduktif (Dorozhkin, 2010; Lei et al., 2017;
Mondal et al., 2018; dan Yang et al., 2018). Sintesis HAp dari sumber alam telah
menarik perhatian peneliti karena memiliki biokompatibilitas, adhesi sel, dan
potensi proliferasi lebih baik daripada bahan sintetis. Bahan alami yang bersumber
dari mamalia, ikan, dan cangkang menjadi pilihan pertama untuk sintesis HAp
karena tersedia secara luas dan mempunyai kandungan kalsium yang tinggi.
Bahan cangkang seperti cangkang kerang dan cangkang siput merupakan sumber
kalsium untuk sintesis HAp (Arokiasamy et al., 2022). Penelitian yang dilakukan
oleh Sari et al. (2021) menggunakan cangkang kerang abalon (Haliotis asinine)
sebagai sumber kalsium. Cangkang kerang abalon yang telah dibersihkan lalu
dikalsinasi. Sintesis HAp menggunakan metode presipitasi. Karakterisasi FTIR
digunakan untuk menganalisa gugus fungsi pada (a) cangkang kerang abalone, (b)
cangkang kerang abalon yang dikalsinasi, dan (c) HAp .

Gambar 2.1 Spektra FTIR dari (a) cangkang abalon,


(b) cangkang abalon yang dikalsinasi, dan (c) Hap (Sari et al., 2021)
Spektra FTIR pada gambar 2.1 (a) dan (b) menunjukkan cangkang kerang abalon
memiliki gugus fungsi C=O dan CaO, sedangkan cangkang kerang abalone yang
dikalsinasi memiliki gugus fungsi C=O, CaO, dan OH-. Spektra FTIR pada

5
gambar 2.1 (c), HAp memiliki gugus fungsi OH-, PO43-, dan CO32-.
Karakterisasi XRD digunakan untuk menentukan sifat kristalografi pada (a)
cangkang kerang abalon, (b) cangkang kerang abalon yang dikalsinasi, dan (c)
HAp. Pada gambar 2.2 (a) menunjukkan cangkang kerang abalon memiliki sudut
difraksi (2𝜃), ukuran kristal, dan regangan mikro sebesar 33°, 48,14 ± 3,54 nm,
dan 0,00253 secara berurutan; gambar 2.2 (b) menunjukkan cangkang kerang
abalon yang dikalsinasi memiliki sudut difraksi (2θ), ukuran kristal, dan regangan
mikro sebesar 37,21°, 48,74 ± 3,25 nm, dan 0,00223 secara berurutan; dan
gambar 2.2 (c) menunjukkan HAp memiliki sudut difraksi (2θ), ukuran kristal,
dan regangan mikro sebesar 31,76°, 33,91 ± 7,5 nm, dan 0,00373 secara
berurutan.

Gambar 2.2 Pola XRD dari (a) cangkang kerang abalon,


(b) cangkang kerang abalon yang dikalsinasi, dan (c) HAp (Sari et al., 2021)
Berdasarkan hasil pola XRD, serbuk CaO yang dikalsinasi memiliki ukuran kristal
yang tinggi menghasilkan peningkatan kristalinitas dan penurunan tingkat amorf.
CaO yang dikalsinasi juga memiliki regangan mikro yang lebih kecil daripada
cangkang kerang abalon. Nilai regangan mikro yang kecil menunjukkan cacat
pada kristal sedikit. Jarak antara bidang kristal dan HAp bernilai 2,81 Å. Hasil
tersebut mendekati dari bidang kristal HA yaitu 2,88 Å, membuatnya sesuai
dengan standar internasional (ISO 13779-3, ISO 13175-3) untuk implan HA.
Substitusi oleh beberapa ion baik monovalen, divalen, trivalen, dan sebagainya
dilakukan untuk modifikiasi sifat fisikokimia HAp. Harrison et al. (2021)
menggunakan ion Sr2+sebagai substitusi dari HAp (SrHAp) dengan metode
6
presipitasi. Variasi kandungan Sr, beserta hasil Sr/(Ca + Sr) dan (Ca + Sr)/P
ditunjukkan pada tabel 2.1. Karakterisasi XRF digunakan untuk memperoleh nilai
rasio (Ca + Sr)/P yang ditunjukkan pada tabel 2.1 sebagai berikut.
Tabel 2. 1 Tabel rasio kandungan Sr dalam HAp (Harrison et al., 2021)

Hasil karakterisasi
Jumlah Sr
Sr/(Ca+Sr) (Ca+Sr)/P
(at.%)
at.% at.%
0 0,02 1,63
2,5 2,45 1,57
5 4,83 1,57
10 9,55 1,56
50 49,67 1,58
100 99,79 1,50

Kandungan jumlah Sr divariasikan berdasarkan rasio atom Sr dan atom Sr + Ca.


Rasio (Ca + Sr)/P yang diperoleh lebih rendah daripada nilai stoikiometri (1,67)
seiring dengan penambahan jumlah Sr.

Gambar 2.3 Pola XRD SrHAp (a) tidak disinter dan (b) disinter pada 1000℃
(Harrison et al., 2021)

Karakterisasi XRD digunakan untuk mengamati fase dan kristalografi yang


terjadi pada SrHA. Seperti pada gambar 2.3, penambahan Sr menyebabkan
pergeseran puncak 2𝜃 lebih rendah dalam pola XRD. Pergeseran tersebut
menunjukkan fase substitusi Sr pada β-tricalcium phosphate. Pada stabilitas
termal yang tinggi, terdapat sejumlah kecil dekomposisi HAp menjadi β-
tricalcium phosphate atau β-tristrontium phosphate. Penggabungan Sr dan Ca
menyebabkan ukuran kristal yang rendah disebabkan oleh kekacauan pada kristal
7
karena efek regangan pada kisi kristal. Kekacauan tersebut terjadi karena jari-jari
ion Sr yang lebih besar daripada ion Ca (Bigi et al., 2007;O’Donnell et al., 2008).

Nanofiber memiliki karakteristik pori dimana dapat meniru ECM pada tulang,
sehingga media nanofiber digunakan sebagai scaffold pada rekayasa jaringan
tulang. Januariyasa et al. (2020) telah berhasil memfabrikasi scaffold nanofiber
berbasis karbonat hidroksiapatit (CHAp)/PVA/Chitosan (CS). Polimer yang
digunakan adalah PVA digunakan sebagai polimer sintesis dan CS digunakan
sebagai polimer alami, sedangkan CHAp digunakan sebagai pengisi dalam
matriks polimer. Fabrikasi scaffold nanofiber dilakukan dengan variasi kandungan
CHAp sebesar 0, 5, 10, 15, 20 wt%.

Gambar 2.4 Hasil SEM dan distribusi diameter dari nanofiber PVA/CS dengan
kandungan CHAp sebesar (a) 0 wt%, (b) 5 wt%, (c) 10 wt %, (d) 15 wt%, dan
(e) 20 wt% (Januariyasa et al., 2020)

Variasi kandungan terebut memberikan pengaruh pada morfologi dan diameter


nanofiber. Seperti pada gambar 2.3, dengan penambahan kandungan CHAp terjadi
gumpalan. Gumpalan yang terjadi pada penambahan CHAp dari kandungan 5-15
8
wt% memiliki ukuran sub-mikro sehingga masih tergolong pada klasifikasi
morfologi nanofiber. Sedangkan pada kandungan 20 wt% gumpalan terjadi terlalu
besar sehingga dapat merusak morfologi nanofiber. Selain itu, diameter nanofiber
sedikit menurun seiring dengan penambahan CHAp. Hasil tersebut berada dalam
kisaran diameter fiber (100-450) nm pada ECM tulang alami (Asran et al., 2010a).
Penurunan diameter nanofiber disebabkan oleh penambahan CHAp pada larutan
sehingga meningkatkan konduktivitas larutan (Chaudhuri et al., 2016; Heydari et
al., 2017; dan Wu et al., 2005).
Hartatiek et al. (2020) melakukan fabrikasi scaffold nanofiber HAp dengan
polimer PVA. Pada penelitian tersebut, diketahui bahwa HAp memiliki sifat
mekanik yang rendah sehingga penggunaan polimer PVA diharapkan dapat
meningkatkan sifat mekanik pada nanofiber.

Gambar 2.5 Hasil uji tarik pada PVA/HAp (Hartatiek et al., 2020)
Kandungan HAp divariasikan sebesar 0%, 10%, 15%, 20%, 25%, dan 30%
terhadap kandungan PVA. Gambar 2.5 menunjukkan kekuatan tarik dari nanofiber
PVA/HAp. Penambahan kandungan HAp menyebabkan peningkatan pada
kekuatan tarik nanofiber.
Porositas pada nanofiber ditunjukkan pada tabel 2.2. Penambahan HAp
menyebabkan penurunan rata-rata diameter pada nanofiber PVA/HAp
dibandingkan dengan matriks PVA. Rasio Ca/P yang diperoleh mendekati nilai
teoretis rasio Ca/P yaitu 1,67.
Tabel 2.2 Karakteristik nanofiber PVA/HAp (Harrison et al., 2021)

Komposisi Rata-rata diameter


Rasio Ca/P Porositas (%)
PVA/HAp nanofiber (nm)
100/0 264 - 74
90/10 205 1,64 62
85/15 193 1,65 77

9
80/20 173 1,85 68
75/25 222 1,67 75
70/30 234 1,61 74

Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Fisika Material dan


Instrumentasi Universitas Gadjah Mada (UGM), Laboratorium Kimia Fakultas
MIPA UGM, dan Laboratorium Penelitian Pengujian Terpadu (LPPT) UGM.

10
BAB III
DASAR TEORI

3.1 Tulang
Tulang memiliki peran penting dalam penyusunan kerangka, mendukung
gerakan mekanik, melindungi organ, dan memproduksi serta menampung sel
darah. Klasifikasi struktur hierarki tulang berdasarkan tingkatan panjang dan
lebar, terdiri dari skala makro (tulang trabekular dan tulang kortikal), skala mikro
dan sub-mikro (harvesian canal, osteon, dan lamella), skala nano (serat kolagen),
dan skala sub-nano (mineral dan kolagen) seperti pada gambar 3.1 (Qu et al.,
2019).

Gambar 3.1 Struktur hierarki tulang (wil et al., 2011)


Extracellular matrix (ECM) adalah struktur tiga dimensi non-seluler yang
disekresikan oleh sel ke ruang ekstraseluler. ECM dari setiap jenis jaringan pada
tubuh memiliki komposisi dan topologi yang unik (Frantz et al., 2010). ECM

11
menyediakan jaringan dengan bobot dan elastisitas yang terus menerus
direformasi karena perubahan reseptor, faktor pertumbuhan, dan pH untuk
mengontrol perkembangan, fungsi, dan homeostatis jaringan (Bonnans et al.,
2014; Mouw et al., 2014). ECM jaringan tulang tersusun atas kolagen fibril,
Hidroksiapatit (HAp), dan mineral terikat lainnya. Kolagen dan HAp secara
bersamaan terkandung sekitar 95% dari tulang alami dalam kondisi kering (Ma et
al., 2018). Komposisi tulang alami terdiri dari fase organik dan anorganik seperti
yang ditunjukkan pada tabel 3.1.
Tabel 3. 1 Komposisi kimia tulang (wt%) (Eliaz & Metoki, 2017)

Fase anorganik Fase organik


HA ≈ 60 Kolagen ≈ 20
H2O ≈ 9 Protein non-kolagen ≈ 3
Sel tulang: osteoblast, osteosit,
Karbonat ≈ 4 dan osteoklas
Garam Sitrat ≈ 0,9
𝑁𝑎+ ≈ 0,7
𝑀𝑔2+ ≈ 0,5
lainnya: K+, F-, Zn2+,Fe2+, Cu2+, Sr2+, Pb2+

Sel tulang memiliki peran krusial pada fungsi jaringan tulang. Terdapat empat
sel utama dalam jaringan tulang yaitu: sel osteogenik, osteoblas, osteosit, dan
osteoklas. Ilustrasi jenis sel tersebut ditunjukkan pada gambar 3.2. Keempat jenis
sel tersebut mengatur proses kompleks remodeling tulang, bersama-sama sel-sel
ini membentuk struktur anatomi sementara yang dikenal sebagai unit multiseluler
dasar (Behzadi et al., 2017)

Gambar 3.2 Jenis sel pada jaringan tulang (Behzadi et al., 2017)

12
Osteoblas berasal dari sel osteoprogenitor mesenkim di sumsum tulang dan
jaringan ikat lainnya. Sel tersebut berdiferensiasi dan berproliferasi menjadi
osteoblas sebelum pembentukan tulang, dirangsang melalui protein morfogenetik
tulang. Osteoblas berperan dalam pertumbuhan dan pembentukan tulang (Ansari,
2019). Selain itu, osteoblast juga berperan dalam sintesis, deposisi, dan
mineralisasi matriks tulang dengan menghasilkan osteoid. Osteoblas dewasa dapat
berubah menjadi lapisan sel kuboid, yang dapat mengalami apoptosis atau
menjadi osteosit dan sel pelapis tulang (Sikavitsas et al., 2001).

Osteosit merupakan sel yang paling banyak ditemui di jaringan tulang.


Osteosit berasal dari sel punca mesenkim yang mengalami diferensiasi
osteoblastik. Sel tersebut adalah osteoblast pasif yang terperangkap dalam tulang
yang telah dibentuk. Osteosit memiliki peran yang sangat penting dalam
komunikasi dalam jaringan tulang. Selain itu, osteosit juga berperan dalam jalur
sinyal biokimia dan pengaturan homeostatis kalsium dan fosfat. Kerusakan
pertumbuhan sel osteosit menyebabkan kerapuhan tulang dan dapat menyebabkan
osteoporosis (Standring, 2020; Teti, 2011).

Osteoklas merupakan sel besar dengan lebih dari satu nucleus yang dibedakan
dari sel hematopoietik (Boyle et al., 2003). Kerja osteoklas adalah melepaskan
enzim dan asam untuk melarutkan mineral dalam tulang dan mencernanya, proses
tersebut disebut resorpsi. Osteoklas membantuk membentuk ulang tulang cacat
dan membuat jalur untuk saraf dan pembuluh darah. Penyimpangan dalam
aktivitas osteoklastik membedakan penyakit seperti osteoporosis (peningkatan
aktivitas osteoklas) dan osteopetrosis (penurunan aktivitas osteoklas) (Kular et al.,
2012; Standring, 2020).

Sel osteogenik berasal dari sel punca mesenkim dan terdiferensiasi menjadi
osteoblas. Selain itu, sel osteogenik juga dapat terdiferensiasi menjadi fibroblas,
adiposit, kondrosit, dan sel otot. Beberapa sel osteogenik berubah menjadi
osteoblas setelah dibagi dalam proses mitosis. Sel osteogenik bersifat aktif selama
proses pembentukan tulang atau penyembuhan cacat (Bilgiç et al., 2020).

3.2 Hidroksiapatit
Hidroksiapatit (HAp) merupakan material keramik tersusun atas kalsium
fosfat yang memiliki biokompatibilitas tinggi dan tidak beracun. HAp sebagai
13
komponen fase anorganik dalam tulang terkandung sekitar 60-70% menurut
beratnya (Arokiasamy et al., 2022; Sossa et al., 2018). Rumus sel unit dan rumus
umum HAp secara stoikiometri adalah Ca5(PO4)3(OH) dan Ca10(PO4)6(OH)2
secara berturut-turut dengan rasio Ca/P bernilai 1,67. Struktur kristalografi HAp
ditunjukkan pada gambar 3.3 dengan parameter kisi 𝑎 = 9,433 Å dan 𝑐 =
6,875 Å (Laonapakul et al., 2021; Munir et al., 2022).

Gambar 3.3 Struktur kristal HAp (a) tampilan atas dan


(b) tampilan bawah (Munir et al., 2022)
Pada tulang alami, HAp tidak sepenuhnya murni berdasarkan stoikiometri dan
memiliki kekurangan pada kalsium atau fosfat berbeda dengan HAp sintesis. HAp
tidak hanya mengandung Ca2+, PO43, dan OH-, melainkan mengandung beberapa
unsur seperti Mg2+, Sr2+, Fe2+, Na+, dan K+ (Ahmed et al., 2020; Greish et al.,
2013). Berbagai unsur tersebut disebut juga trace elements. Trace elements
merupakan unsur kimia yang terkandung dalam jumlah kecil pada bahan alami.
Pada tulang, trace elements memiliki peran penting dalam regenerasi tulang dan
mempercepat proses pembentukan tulang (Falah S. Al-Fartusie & Saja N.
Mohssan, 2017; Mohd Pu’ad, Koshy, et al., 2019).

Sintesis HAp dari bahan alami memiliki osteokonduktivitas lebih baik daripada
HAp dari bahan sintetis. Bahan alami sebagai penyusun HAp memiliki aktivitas
biologis dan biokompatibilitas yang tinggi daripada bahan sintetik (Alif et al.,
2018; Piccirillo et al., 2015). Metode sintesis HAp dapat diklasifikasikan dalam
metode basah, kering, dan suhu tinggi (Sadat-Shojai et al., 2013). Masing-masing

14
dari metode tersebut menghasilkan perbedaan dalam ukuran, morfologi dan fase
kristalinitas HA[. Sehingga karakteristik HAp berpengaruh pada bioaktivitas, sifat
mekanis dan sifat biologis (Mohd Pu’ad, Abdul Haq, et al., 2019).
3.3 Stronsium Hidroksiapatit
Penambahan doping trace elements pada HAp menjadi salah satu alternatif
dalam hal mengatasi kurangnya osteoinduktivitas dan meningkatkan diferensiasi
osteogenik. Beberapa ion seperti Sr2+, Zn2+, Mg2+, Cu2+, dan Si4+ merupakan
elements yang dapat mempercepat angiogenesis dan merangsang diferensiasi
osteogenik sel punca mesenkim (Lei et al., 2017). Ion Stronsium (Sr) telah banyak
diteliti dalam penyembuhan jaringan tulang, karena secara bersamaan dapat
meningkatkan pembentukan tulang dan menghambat resorbsi tulang (Pilmane et
al., 2017). Ion Sr dapat meningkatkan proliferasi osteoblas, diferensiasi osteoblast,
sintesis kolagen tipe I, mineralisasi matriks tulang, dan menghambat diferensiasi
dan aktivasi osteoklas (Jiménez et al., 2019; Pilmane et al., 2017).

Doping ion Sr pada HAp menghasilkan Stronsium hidroksiapatit (SrHAp)


dimana ion Ca2+ tersubstitusi dengan ion Sr2+. Substitusi tersebut dapat terjadi
karena radius ion 𝑆𝑟2+ (1,12 Å) mirip dengan ion Ca2+ (1,00 Å). SrHAp tidak
hanya mengatasi osteokonduktivitas dari HAp, tetapi juga mengontrol pelepasan
ion 𝑆𝑟2+ dari SrHAp (Lei et al., 2017). Dampak positif SrHAp terjadi pada
konsentrasi ion 𝑆𝑟2+ dalam jumlah yang kecil (Marie et al., 2001; Terra et al.,
2009).
3.4 Polivinil Alkohol
Polivinil alkohol (PVA) merupakan polimer sintetik yang larut dalam air. PVA
memiliki rumus kimia [CH2CH(OH)]n. PVA tidak disintesis melalui proses
polimerisasi dari vinil alcohol melainkan disintesis melalui hidrolisis dari polivinil
asetat (PVAc) atau polivinil ester, karena bentuk tautomer aldehida dari vinil
alkohol lebih stabil daripada bentuk alkoholnya (Hallensleben, 2000). Struktur
PVA ditunjukkan pada gambar 3.4 (Aslam et al., 2018). Hidrolisis PVAc
([CH2CH(OAc)]n) dilakukan pada kondisi asam dengan etanol dan polivinil ester
([CH2CH(OCOR)]n) dihidrolisis dalam larutan basa dengan etanol. Proses
hidrolisis dijelaskan dengan skema berikut (Verma & Quraishi, 2022):

[CH2CH(OAc)]n + 𝐶2𝐻5𝑂𝐻 → [CH2CH(OH)]n + 𝐶2𝐻5𝑂𝐴𝑐

15
[CH2CH(OCOR)]n + 𝐶2𝐻5𝑂𝐻 → [CH2CH(OH)]n + 𝐶2𝐻5𝑂𝐶𝑂𝑅

Gambar 3.3 (a) Struktur monomer PVA/terhidrolisis penuh, (b) struktur vinil
alkohol, (c) struktur PVA, dan (d) PVA terhidrolisis sebagian (Aslam et al., 2018)

Lamanya waktu reaksi hidrolisis (saponifikasi) menentukan derajat hidrolisis


PVA (DeMerlis & Schoneker, 2003). PVA yang dijual di pasar tersedia dengan
berat molekul yang beragam. Berdasarkan derajat hidrolisis dan berat molekul,
PVA memiliki beberapa jenis dengan sifat kimia dan sifat fisik seperti pada tabel
3.2.

Tabel 3.2 Karakteristik PVA


Parameter Keterangan Referensi
Massa
20,000 - 400,000 g/mol
molekul
Rumus (−𝐶𝐻2𝐶𝐻𝑂𝐻) −𝑛 (ben Halima,
struktural − (𝐶𝐻2𝐶𝐻𝑂𝐶𝑂𝐶𝐻3 −)−𝑚 2016)
Rumus
(𝐶2𝐻4𝑂)𝑛(𝐶4𝐻6𝑂2)𝑚
empiris
PVA
terhidrolisis 84,2%-89%
sebagian
PVA
(Edwin Marin et
terhidrolisis 93,2%-96,5%
al., 2014)
cukup
PVA
terhidrolisis 98%-99%
penuh
Larut dalam air,
(Hassan &
Kelarutan Tidak larut dalam hidrokarbon alifatik dan
Peppas, 2000)
aromatik, minyak, keton, dan ester
Tampilan Krim keputihan, butiran, serbuk (Aslam et al.,
16
Massa jenis 1,19 – 1.31 g/cm3 2018)
230℃ untuk terhidrolisis penuh, dan
Titik leleh 180℃-190℃ untuk terhidrolisis sebagian
Titik didih 228℃
Perubahan warna pada ~100℃, menjadi
Stabilitas
gelap di atas 150℃, dan dekomposisi pada
termal
~200℃
(Aslam et
Suhu transisi
75℃-85℃ al.,2018)
gelas
Kalor jenis 1,5 J/(g K)
Massa jenis
1,3 (untuk terhidrolisis sebagian)
relatif
PVA memiliki sifat tidak beracun, biokompatibel, dan kekuatan mekanik
tinggi. Sifat tersebut menjadikan PVA banyak digunakan dalam aplikasi bidang
medis (Khalaji et al., 2021). Salah satu penerapan dalam bidang medis adalah
dalam fabrikasi scaffold. Beragam metode fabrikasi scaffold telah dilakukan untuk
rekayasa jaringan tulang seperti electrospinning, gas foaming, dan solvent casting.
Scaffold dengan bahan PVA menunjukkan struktur pori yang dapat dikontrol,
porositas yang tinggi, dan laju degredasi yang baik. Meningkatkan kecepatan
pengadukan dan waktu pengadukan larutan PVA dapat meningkatkan porositas
scaffold (Ye et al., 2014). Pengaruh berat molekul yang tinggi dapat meningkatkan
kekuatan tensil, kristalinitas, adhesi, dan viskositas (Edwin Marin et al., 2014).
3.5 Scaffold Nanofiber
Scaffold merupakan unsur penting dalam rekayasa jaringan tulang karena
berfungsi sebagai prototipe untuk interaksi sel dan perkembangan ECM tulang.
Secara umum scaffold memiliki sifat struktur yang kuat dan berpori. Selain itu,
scaffold harus memungkinkan sel untuk tumbuh dan berkembang biak. Scaffold
juga harus memiliki sifat fisikokimia seperti kekuatan, biokompatibilitas,
biodegradability, dan permukaan kimia yang baik untuk perkembangan jaringan
dan kemampuan untuk merespon dan mentolerir gangguan luar (Bose et al.,
2012).

Kekuatan tulang yang lemah disebabkan oleh struktur komposit fibril kolagen
yang termineralisasi. Fibril kolagen yang termineralisasi tersebut kemudian
mengatur agar menghasilkan struktur tulang yang baik sehingga meningkatkan
kekuatan tulang (Oryan et al., 2014). Scaffold terbentuk secara alami terbentuk
menyerupai kolagen berserat nano tersebut. Scaffold nanofiber memiliki ukuran
serat menyerupai serat kolagen, berkisar antara 50 sampai 500 nanometer (Smith
17
& Ma, 2004). Scaffold nanofiber memiliki sifat permukaan yang berbeda dari
bahan dengan struktur mikro lainnya karena luas permukaan dan kekasarannya
meningkat secara substansial serta kemiripan dimensinya dengan jaringan tulang
(Cheng et al., 2017; Smith & Ma, 2004). Scaffold ukuran nano dengan sifat
permukaan cell-friendly menyediakan interaksi protein kompleks yang lebih
banyak
Molekul organik
Faktor pertumbuhan
Antibiotik

Nanofibers termodifikasi

Nanofibers mendukung
Diferensiasi MSC

Perbaikan dan regenerasi


tulang

Nanofibers menginduksi
diferensiasi dan mineralisasi
osteoblas
Gambar 3.4 Mekanisme perbaikan dan regenerasi tulang oleh scaffold nanofiber
(Anjum et al., 2022)
Karena sifat afinitas pengikatan sel, mineralisasi apatit, dan diferensiasi osteoblas
yang baik, scaffold dapat merangsang pertumbuhan tulang baru lebih dari bahan
tradisional (Pant et al., 2019; Pryjmaková et al., 2020). Hal tersebut merupakan
salah satu alasan scaffold berukuran nano memiliki keunggulan dibandingkan
bahan konvensional pada rekayasa jaringan tulang (Anjum et al., 2022).
3.6 Metode Electrospinning
Ada banyak metode yang digunakan untuk fabrikasi scaffold nanofiber seperti
fibrillation melt (Rampichová et al., 2018) , blow spinning (Medeiros et al., 2016),
nanolithography(Chlanda et al., 2019), self-assembly (Nie et al., 2017) dan
electrospinning (Januariyasa et al., 2020). Metode tersebut memiliki seperti bahan
yang terbatas, biaya tinggi, dan tingkat produksi rendah. Metode electrospinning
memiliki efisiensi lebih tinggi dan harga yang terjangkau untuk fabrikasi
nanofiber (Moradi et al., 2018).

Electrospinning merupakan metode yang cepat dan efisien dalam fabrikasi


nanofiber dari polimer alami dan sintetik seperti PVA, PVP, selulosa, dan gelatin

18
(Anjum et al., 2022). Metode electrospinning memanfaatkan siklus
elektrodinamika, dimana tetesan larutan polimer dialiri arus listrik untuk
menghasilkan sebuah bidang diikuti dengan peregangan dan pemanjangan untuk
menghasilkan nanofiber (Soldate & Fan, 2019).

Gambar 3.5 (a) Skema persiapan alat dan bahan electrospinning dan (b)
mekanisme Taylor cone selama electrospinning (Maji & Pramanik, 2022)

Skema persiapan alat dan bahan electrospinning relative mudah seperti pada
gambar 3.5 (a) menjadikan electrospinning dapat diakses hampir di setiap
laboratorium (Mirjalili & Zohoori, 2016; Sill & von Recum, 2008).

Spineret, pompa jarum suntik, dan konduktif kolektor merupakan komponen


penting bersamaan dengan sumber tegangan tinggi. Siklus electrospinning secara
umum terdiri dari empat langkah berurutan: Pertama, pengisian larutan polimer
dan pembentukan Taylor cone; kedua, pemanjangan jet yang telah diisi; ketiga,
penipisan jet untuk meningkatkan stabilitas dengan adanya medan listrik yang
tinggi; keempat, pemadatan dan pengumpulan serat pada kolektor (Xue et al.,
2019). Pada metode ini, medan listrik digunakan antara larutan polimer dan
kolektor. Setelah larutan polimer terisi pada jet, kemudian permukaan tetesan
polimer ditekan ke ujung jarum. Tegangan listrik yang tinggi mengarah pada
pemanjangan permukaan hemisfer menjadi bentuk kerucut yang dikenal sebagai
Taylor cone (Theron et al., 2001; Zachariades et al., 1995). Ketika tegangan listrik
mencapai nilai kritis dengan melampaui gaya tegangan permukaan, tetesan
polimer keluar dari ujung jarum seperti pada gambar 3.5(b), dimana terjadi
ketidakstabilan dan perlahan menjadi tipis karena pemanjangan dan penguapan

19
larutan (Frenot & Chronakis, 2003; Hohman et al., 2001; Reneker et al., 2000). Jet
yang terisi akhirnya terkumpul di kolektor aluminium foil menghasilkan lapisan
tipis beserat (Kameoka et al., 2003).

Bagian kontrol pada metode electrospinning dapat dikategorikan menjadi 3


parameter utama. (1) Parameter sistem: berat molekul polimer berperan penting
dalam menentukan laju degradasi nanofiber. Parameter sistem lainnya seperti
parameter lautan yang didalamnya terdiri atas tegangan permukaan, viskositas,
dan konduktivitas yang sebagian besar ditentukan berdasarkan pembentukan
butiran pada nanofiber. (2) Parameter proses: parameter proses seperti diameter
jarum, laju aliran polimer, dan tegangan listrik sangat berpengaruh pada diameter
nanofiber. Selain itu, jarak ujung jarum dan kolektor juga penting untuk mengatur
tingkat penguapan pelarut dari nanofiber, sedangkan gerakan kolektor
menentukan pola penyelarasan serat. Berbagai sistem kolektor yang digunakan
adalah templat elektrokonduktif (Zhang & Chang, 2007), kolektor enamel
(Zucchelli et al., 2009), kolektor plat paralel (Klinkhammer et al., 2009), dan
kolektor drum berputar (Sankaran et al., 2014). (3) Parameter lingkungan:
parameter lingkungan seperti kelembaban dan suhu penting untuk penguapan
pelarut selama proses electrospinning. Terlebih kelembaban mempengaruhi proses
pengeringan serat yang dihasilkan dan disipasi muatan serat, yang mempengaruhi
diameter serat. Secara keseluruhan, sifat nanofiber dapat dengan mudah
dimodifikasi oleh larutan dan proses electrospinning (Maji & Pramanik, 2022).
Tabel 3.3 menunjukkan pengaruh parameter electrospinning pada morfologi
nanofiber (Motamedi et al., 2017).

Tabel 3.3 Dampak parameter electrospinning pada morfologi nanofiber

Parameter Dampak

Laju aliran Pengurangan laju aliran mengurangi diameter serat


atau sebaliknya

Jarak ujung jarum dengan Peningkatan jarak ujum jarum dengan kolektor
kolektor mengakibatkan rata-rata diameter serat yang rendah

Konsentrasi polimer Dengan meningkatnya konsentrasi polimer,


diameter serat rata-rata meningkat

20
Kelembaban relative Peningkatan kelembapan di dalam ruang
electrospinning menurunkan diameter serat.

Tegangan permukaan Pengaruh tegangan permukaan pada diameter serat


tidak signifikan

Diameter jarum Jarum dengan diameter lebih rendah menghasilkan


serat halus (diameter lebih kecil)

Tegangan Tegangan yang meningkat menghasilkan diameter


serat yang besar

Konduktivitas larutan Peningkatan konduktivitas larutan membantu


mengurangi diameter serat

Berbagai metode electrospinning dilakukan untuk fabrikasi nanofiber seperti


solution electrospinning (Ji et al., 2006), melt electrospinning (Asran et al., 2010),
multi-axial electrospinning (Khalf & Madihally, 2017), modified collector
electrospinning (Teo et al., 2005), nozzle free electrospinning (Keirouz et al.,
2019), dan multi nozzle electrospinning (Theron et al., 2005). Scaffold yang
difabrikasi dari metode tersebut memiliki satu kesamaan yang sama dengan
jaringan serat ECM tulang, karakteristik serat dari nanofiber merupakan fokus
utama pada rekayasa jaringan tulang (Maji & Pramanik, 2022).
3.7 X-Ray Diffraction (XRD)
Difraksi sinar-X (XRD) digunakan untuk mengkaji struktur kristal material
karena panjang gelombang sinar-X (antara 0,2 - 10 nm) sebanding dengan jarak
antar atom pada padatan kristal. Metode ini mengukur jarak rata-rata antara
lapisan atom.

21
Gambar 3.6 Pengaturan difraksi sinar-X (Titus et al., 2019)
XRD dapat menentukan orientasi kristal tunggal atau butiran dan mengukur
ukuran dan bentuk daerah kristal kecil (Salame et al., 2018). Seberkas sinar-X
yang terkolimasi dihamburkan oleh kisi periodik sampel, sebagai hasil dari
interaksi foton dengan elektron material menggunakan proses hamburan yang
elastis dan koheren. Skema persiapan cara kerja XRD ditunjukkan pada gambar
3.6.

Gambar 3.7 Pola XRD (a) amorf dan (b) kristal (Salame et al., 2018)

Setiap bahan kristal memiliki struktur atom yang tersembunyi, ketika diiradiasi
dengan sinar-X menyebabkan interferensi konstruktif dan destruktif dari berkas
sinar-X yang tersebar, menghasilkan pola difraksi unik yang menunjukkan
beberapa titik puncak, yang dikenal sebagai puncak difraksi Bragg (Kaliva &
Vamvakaki, 2020). Pola difraksi bahan kristal dan amorf disajikan pada gambar
3.6. XRD dari sampel kristal menunjukkan adanya puncak yang terdefinisi dengan
baik pada sudut hamburan tertentu, sedangkan sampel amorf menunjukkan
intensitas maksimum yang meluas hingga beberapa derajat (2θ) (Lamas et al.,
2017). Difraksi sinar-X oleh kristal dijelaskan oleh hukum Bragg yang
menghubungkan panjang gelombang sinar-X dengan jarak antar atom, dan
22
diberikan oleh persamaan sebagai berikut:

2𝑑 𝑠𝑖𝑛 𝜃 = 𝑛𝜆 (3.1)
𝑑 adalah jarak tegak lurus antara pasangan bidang yang berdekatan, 𝜃 adalah
sudut datang atau sudut Bragg, 𝜆 adalah panjang gelombang sinar, dan 𝑛
menunjukkan bilangan bulat urutan refleksi dan perbedaan jalur dalam hal
panjang gelombang, antara gelombang yang tersebar oleh bidang atom yang
berdekatan (Salame et al., 2018).

Sinar-X dihasilkan ketika partikel bermuatan listrik dengan energi yang cukup
dipercepat menuju anoda. Diperlukan tabung vakum di mana berkas elektron yang
dihasilkan oleh filamen panas dikolimasi dan dipercepat dengan potensial listrik
20–45 kV. Berkas elektron ini diarahkan ke anoda logam. Anoda disimpan dalam
ruang vakum tinggi untuk menghindari tabrakan antara partikel udara dan elektron
insiden atau foton sinar-X yang dipancarkan. Penyerapan sinar-X yang melewati
bahan bergantung pada berat atom unsur-unsur yang ada dalam bahan tersebut.
Sinar-X dideteksi oleh detektor, dan sinyalnya diproses dengan mikroprosesor
atau secara elektronik. Spektograf diperoleh dengan mengubah sudut antara
sumber, sampel, dan detektor (Salame et al., 2018; Titus et al., 2019b).

XRD dapat memberikan informasi tambahan mengenai ukuran kristal. Ukuran


kristal rata-rata dapat dihitung dengan lebar puncak difraksi menggunakan
persamaan Scherrer:

𝑆 = 𝐾𝜆/𝛽𝑐𝑜𝑠𝜃 (3.2)

S adalah ukuran kristal, 𝜆 adalah panjang gelombang datang sinar-X, 𝛽 adalah


lebar penuh pada setengah dari intensitas maksimum puncak refleksi (FWHM),
dan 𝐾 adalah konstanta Scherrer (Salame et al., 2018). Akan tetapi, persamaan
Scherrer tidak mempertimbangkan regangan dan cacat partikel yang dapat
menyebabkan pelebaran puncak. Oleh karena itu, ukuran partikel yang
dikarakterisasi dengan XRD tidak boleh dianggap sebagai ukuran absolut dari
ukuran kristal melainkan sebagai batas bawah (Holbrook et al., 2015; Salame et
al., 2018).

Secara umum, pola XRD digunakan untuk mendapatkan rasio unsur campuran,
derajat kristalinitas, dan penyimpangan material tertentu dari komposisi atau
strukturnya (Titus et al., 2019). Belakangan ini, XRD in-situ telah dikembangkan
23
sebagai metode karakterisasi dalam studi mekanik dan kinetic untuk mengikuti
proses reaksi dengan waktu bersamaan (Barhoum & Luisa García-Betancourt,
2018).
3.8 Fourier Transform Infrared (FTIR)
Analisis Fourier Transform Infrared (FTIR) digunakan untuk identifikasi
bahan organik, anorganik, dan polimer menggunakan sinar inframerah. Perubahan
pola pita serapan menunjukkan adanya perubahan komposisi material. FTIR
berfungsi untuk mengidentifikasi dan mengkarakterisasi bahan yang tidak
diketahui, mendeteksi kontaminan suatu bahan, serta mengidentifikasi
dekomposisi dan oksidasi (Titus et al., 2019)

Gambar 3.8 Skema diagram FTIR (Titus et al., 2019)


Skema diagram FTIR ditunjukkan pada gambar 3.8. Spektometer FTIR terdiri
atas sumber, ruang sel, detektor, amplifier, converter A/D, dan komputer. Radiasi
dari sumber mencapai detektor setelah melewati interferometer. Sinyal diperkuat
dan diubah menjadi sinyal digital oleh konverter A/D dan amplifier, setelah itu
sinyal ditransfer ke komputer dimana transformasi Fourier dilakukan (Titus et al.,
2019).

Radiasi infra merah memiliki panjang gelombang sekitar 10.000–100 cm-1


dipancarkan melalui sampel dengan sebagian radiasi diserap dan sebagian
melewatinya. Radiasi yang diserap oleh sampel diubah menjadi energi vibrasi atau
rotasi. Sinyal resultan yang diperoleh pada detektor umumnya adalah spektrum
dari 4000 hingga 400 cm-1, yang merepresentasikan karakteristik molekuler
sampel. Setiap molekul memiliki sifat yang unik, menjadikan FTIR alat yang
penting untuk identifikasi bahan kimia (Taha et al., 2013).

24
3.9 Scanning Electron Miscroscopy (SEM) dan Energy Dispersive X-Ray (EDX)
Pada scanning electron microscopy (SEM), berkas elektron diarahkan ke
spesimen bukan pada berkas sinar, seperti dalam kasus mikroskop optik (Joshi M
et al., 2008). Sinar elektron dengan konsentrasi tinggi ditembakkan dari pistol
elektron yang terletak di bagian atas perangkat. Dua jenis senjata elektron utama
adalah senjata emisi medan, yang menghasilkan medan listrik kuat yang merobek
elektron dari atom, dan senjata termionik, di mana filamen dipanaskan hingga
elektron mengalir (Titus et al., 2019).

SEM memindai permukaan sampel dengan berkas elektron berenergi tinggi


(Goldstein J et al., 2018). Ketika berkas elektron mengenai spesimen, sinar-X dan
tiga jenis elektron dipancarkan: elektron hamburan balik (primer), elektron
sekunder, dan elektron Auger. SEM memanfaatkan elektron primer dan sekunder.
Gambar beresolusi tinggi dihasilkan oleh SEM yang menampilkan detail citra
sekitar 1–5 nm menggunakan elektron sekunder. Untuk mengidentifikasi
komposisi unsur, sinar-X digunakan dengan teknik yang dikenal sebagai EDX.
Elektron hamburan balik digunakan untuk membentuk citra dalam teknik ini.

Gambar 3.9 Skema diagram SEM (Titus et al., 2019)


Skema diagram cara kerja SEM ditunjukkan pada gambar 3.9. Kolom elektron
memiliki kumparan pemindaian, dan berkas elektron dilewatkan melaluinya ke
lensa akhir. Hal tersebut membelokkan berkas sinar ke arah vertikal dan
horizontal sehingga dapat melakukan pemindaian raster di atas area permukaan.
Sinyal terdeteksi dan diperkuat dengan bantuan perangkat elektronik,

25
menampilkannya sebagai gambar pada tabung sinar katoda. Pemindaian raster
disinkronkan dengan mikroskop. Gambar yang ditampilkan adalah peta distribusi
intensitas sinyal yang dipancarkan dari area spesimen yang dipindai.

Metode EDS menyajikan pemetaan keseluruhan sampel dengan menganalisis


unsur dekat dengan permukaan dan mempirkirakan proporsi unsur pada posisi
yang berbeda. EDX digunakan bersamaan dengan SEM. Berkas elektron dengan
energi 10–20 keV mengenai permukaan sampel penghantar menyebabkan sinar-X
memancar dari bahan. Energi sinar-X yang dipancarkan bergantung pada bahan
yang diuji. EDX tidak sesuai dengan teknik ilmu permukaan, karena sinar-X
dihasilkan di wilayah dengan kedalaman sekitar 2 mikron. Dengan menggerakkan
berkas elektron melintasi material, gambar dari setiap elemen dalam sampel dapat
diperoleh. Biasanya diperlukan waktu berjam-jam untuk memperoleh gambar,
karena intensitas sinar-X rendah (Joshi M et al., 2008).

Komposisi partikel nano di dekat dan di permukaan dapat diperkirakan


menggunakan EDX, asalkan mengandung beberapa ion logam berat. Misalnya,
partikel nano seperti perak, emas, dan paladium di permukaan dapat dengan
mudah diidentifikasi menggunakan EDX. Unsur dengan nomor atom rendah sulit
dideteksi oleh EDX (Titus et al., 2019).
3.10 Transmission Electron Miscroscopy (TEM)
Transmission Electron Microscopy (TEM) merupakan teknik lain dari elektron
mikroskop yang sering digunakan untuk material berskala nano. Walaupun TEM
memiliki kemiripan dengan SEM, perbedaan dasarnya adalah spesimen sampel
dan posisi sampel pada saat pengujian. Dalam TEM, spesimen sampel harus
sangat tipis dan berkas elektron ditransmisikan menembus sampel (Kaliva &
Vamvakaki, 2020).

Skema diagram cara kerja TEM ditunjukkan pada gambar 3.10. Pada saat
pancaran elektron mengenai sampel, terjadi interaksi antara berkas elektron dan
sampel yang mengubah elektron datang menjadi elektron yang tidak terhambur,
terhambur secara elastis, atau terhambur secara tidak elastis. Elektron yang
terhambur atau tidak terhambur difokuskan pada lensa kemudian diproyeksikan
pada layar untuk menghasilkan difraksi elektron, citra kontras amplitudo, citra
kontas fase (Salame et al., 2018).

26
Gambar 3.10. Skema diagram TEM (Titus et al., 2019)
3.11 Uji bioaktivitas
Bahan bioaktif adalah “salah satu yang telah dirancang untuk menginduksi
aktivitas biologis tertentu” menurut konferensi konsensus ESB di tahun 1987 (D.
F. Williams, 1987). Sedangkan Kokubo & Takadama, (2006) meninjau material
bioaktif sebagai bahan pengikat tulang, secara rinci dijelaskan sebagai persyaratan
suatu bahan untuk berikatan dengan tulang hidup adalah pembentukan apatit
menyerupai tulang pada permukaannya saat diimplan ke dalam organ hidup.
Pembentukan apatit secara in vivo tersebut dapat digantikan dengan simulated
body fluid (SBF) dengan konsentrasi ion hampir sama dengan plasma darah
manusia. Definisi bioaktivitas adalah bahan bioaktif seperti HAp tulang akan
terbentuk secara selektif setelah direndam dalam larutan SBF (Kokubo, 1991;
Kokubo & Takadama, 2006). Sejak tahun 2007, larutan standar yang diakui secara
internasional untuk pengujian bioaktivitas in vitro adalah formulasi SBF yang
termasuk dalam ISO 23317 (Nommeots‐Nomm et al., 2020).
3.12 Uji tarik
Uji tarik adalah proses uji destruktif yang memberikan informasi tentang
kekuatan tarik, kekuatan luluh, dan kekakuan material logam. Uji tarik mengukur
gaya yang diperlukan untuk mematahkan spesimen komposit dan sejauh mana
spesimen meregang atau memanjang hingga putus.

27
Gambar 3.10 Ilustrasi grafik hasil uji tarik (Ridwan et al., 2020)
Beberapa besaran yang diperoleh dari uji tarik berupa strain, stress, ultimate
strength, elongation at break, dan modulus Young. Gambar 3.10
merepresentasikan eksistensi dari besaran tersebut. Stress (σ ) didefinisikan
dengan persamaan berikut
F
σ= A (3.3)
0

dimana F merupakan beban yang diterapkan tegak lurus terhadap penampang


spesimen dan A0 merupakan luas penampang sebelum beban diterapkan. Strain
(𝜖) didefinisikan dengan persamaan berikut
∆𝑙
𝜖= (3.3)
𝑙0

Dimana ∆𝑙 merupakan perpanjangan deformasi atau perubahan panjang dari


panjang awalnya dan 𝑙0 merupakan panjang awal sebelum beban diterapkan.
Stress dan strain diperoleh pada saat pengujian dilakukan (Ridwan et al., 2020).
Ultimate strength merupakan stress maksimal pada saat pengujian. Elongation at
break merupakan strain maksimal pada saat pengujian. Modulus Young
merupakan rasio stress terhadap strain yang dapat didefinisikan dengan
persamaan berikut

σ
𝐸= (3.3)
𝜖

Pengujian tarik komposit umumnya berupa pengujian tegangan dasar atau uji
tegangan flat-sandwich sesuai dengan standar seperti ISO 527-4, ISO 527-5,
ASTM D 638, ASTM D 3039, dan ASTM C 297. Pengujian tersebut
28
menghasilkan diagram tegangan-regangan yang digunakan untuk menentukan
modulus tarik. Pengujian tarik disajikan pada gambar 3.10 (Saba et al., 2019).

Gambar 3.10 Skema diagram uji tarik (Farhat, 2021)

29
BAB IV
METODE PENELITIAN

4.1 Lokasi Penelitian


Penelitian ini akan dilakukan di Laboratorium Fisika Material dan
Instrumentasi Universitas Gadjah Mada (UGM), Laboratorium Kimia Fakultas
MIPA UGM, Laboratorium Penelitian Pengujian Terpadu (LPPT) UGM,
Laboratorium Teknologi II Fakultas Teknologi Pertanian UGM.

4.2 Alat dan Bahan


Bahan yang digunakan untuk fabrikasi scaffold adalah (1) kalsium hidrosida
[Ca(OH)2] dari cangkang lobster sebagai sumber kalsium sintesis HAp, (2)
diammonium hidrogen fosfat [(NH4)2HPO4] sebagai sumber kalsium sintesis
HAp, (3) NH4OH sebagai larutan basa (4) stronsium nitrat [Sr(NO3)2] sebagai
doping SrHAp, (5) polivinil alkohol (PVA) dengan MW: 145.000 sebagai bahan
matriks nanofiber, dan (6) aquabides sebagai pelarut.
Alat yang digunakan untuk sintesis adalah (1) timbangan analitik untuk
mengukur massa, (2) gelas ukur untuk mengukur volume larutan dan bahan
pelarut, (3) gelas beaker sebagai wadah larutan, (4) pipet untuk memindahkan
larutan dan pelarut dalam jumlah kecil, (5) spatula untuk mengambil bahan
padat, (6) buret untuk proses titrasi, (7) statif untuk menjaga kestabilan gelas
beaker pada saat pengadukan, (8) corong untuk memudahkan menuangkan
larutan, (9) magnetic stirrer untuk mengaduk larutan, (10) magnetic bar sebagai
pengaduk, (11) kertas saring untuk menyaring HAp dan SrHAp, (12) pH meter
untuk menentukan pH larutan, (13) termometer air raksa untuk mengukur suhu
larutan, (14) crucible untuk tempat sampel, (15) oven untuk mengeringkan
sampel, (16) furnace untuk pemanasan suhu tinggi, (17) alat electrospinning untuk
fabrikasi nanofiber, (18) plat dilapisi aluminium foil sebagai kolektor, (19) jarum
suntik sebagai persiapan polimer untuk electrospinning, (20) Ball mill untuk
menggiling cangkang lobster, (21) sonikator untuk proses sonifikasi, dana (22)
autoclave.
4.3 Diagram Alir Penelitian
Penelitian ini akan dikerjakan mulai dari tahap preparasi bahan, fabrikasi
30
scaffold, hingga karakterisasi seperti yang ditunjukkan dalam diagram alir
penelitian pada gambar 4.1 sebagai berikut.

Gambar 4.1 Diagram alir penelitian

31
4.4 Prosedur Penelitian
Prosedur pada penelitian ini meliputi tahap persiapan Ca(OH) 2 dari cangkang
lobster, sintesis HAp dan SrHAp, pembuatan larutan polimer, proses
electrospinning ,dan karakterisasi. Masing-masing dari tahapan tersebut akan
dijelaskan sebagai berikut.
1. Tahap persiapan Ca(OH)2 dari cangkang lobster
Cangkang lobster direbus selama 45 menit dengan air mendidih. Kemudian
direndam dalam aseton setelah itu dilakukan proses pengeringan dengan oven.
Setelah itu cangkang lobster dilakukan proses ball milling untuk menghasilkan
serbuk CaCO3. Serbuk CaCO3 kemudian dikalsinasi menghasilkan serbuk
Ca(OH)2.
2. Tahap sintesis HAp dan SrHAp
Sintesis HAp dan SrHAp dilakukan menggunakan metode presipitasi dengan
modifikasi. Pada sintesis HAp, serbuk Ca(OH)2 sebanyak 3 gram dan Sr(NO3)2
sebanyak 1 gram dilarutkan dalam 50 mL aquabides (larutan 1), kemudian
(NH4)2HPO4 sebanyak 3,211 gram dilarutkan dalam 50 mL aquabides (larutan 2).
Kedua larutan tersebut kemudian diaduk selama 1 jam dengan suhu 70℃. Setelah
itu, larutan 2 ditambahkan tetes demi tetes dengan laju 1mL/menit pada
larutan 1. Larutan campuran tersebut ditambahkan NH4OH 25% sebanyak 3 M.
Kemudian diaduk Kembali selama 1 jam dengan suhu 70℃. Setelah itu, dilakukan
proses hidrotermal dengan menuangkan larutan campuran ke dalam autoclave lalu
dipanaskan menggunakan oven selama 6 jam dengan suhu 100℃. Larutan
tersebut kemudian didiamkan selama 24 jam, kemudian disaring. Endapan SrHA
kemudian dikeringkan menggunakan oven selama 6 jam dengan suhu 100℃.
Kemudian SrHA dikalsinasi menggunakan furnace selama 6 jam dengan suhu
1000℃. Prosedur yang sama berlaku untuk sintesis SrHAp dengan komposisi
Ca(OH)2 sebanyak 3,147 gram dan Sr(NO3)2 sebanyak 1 gram (larutan 1) dan
(NH4)2HPO4 sebanyak 3,742 gram.
3. Tahap pembuatan larutan electrospinning
Mula-mula PVA ditimbang sebanyak 10 wt% kemudian dilarutkan pada
aquades dengan suhu 80℃. Larutan PVA kemudian diaduk selama 3 jam (larutan
1). Lalu, serbuk HAp didispersikan dalam aquabides selama 1 jam dengan suhu
larutan mencapai 80℃. Kemudian PVA ditambahkan ke dalam larutan HAp, lalu
32
diaduk selama 24 jam (larutan 2). Kandungan HAp sebanyak 5 wt% dari berat
PVA, sedangkan kandungan PVA sebanyak 10 wt%. Kemudian serbuk SrHAp
mendapatkan perlakuan yang sama dengan serbuk HAp dengan variasi SrHAp 5,
10, 15 wt% (larutan 3, 4, dan 5). Sebelum melakukan proses electrospinning
larutan disonikasi selama 1 jam.
4. Tahap electrospinning
Larutan electrospinning dimasukkan ke dalam jarum suntik sebanyak 3 mL
dengan diameter lubang jarum sebesar 0,5 mm. Kolektor konduktor dilapisi
aluminium foil diletakkan pada jarak 13 cm dari ujung jarum. Kemudian tegangan
tinggi sebesar 10 kV diberikan pada jarum. Laju aliran larutan dipertahankan
pada 0,25 mL/jam. Percobaan dilakukan selama 24 jam pada suhu kamar. Scaffold
nanofiber yang terbentuk diberi nama PVA, PVA/HAp, PVA/SrHAp 5%, 10%,
dan 15%.
5. Tahap Karakterisasi
Scaffold nanofiber yang telah terbentuk akan dikarakterisasi XRD, FTIR,
SEM-EDX, uji bioaktivitas, dan uji tarik. Pengujian XRD digunakan untuk
mengidentifikasi struktur kristal pada scaffold nanofiber, pengujian FTIR
dilakukan untuk mengetahui gugus fungsi pada scaffold nanofiber, pengujian
SEM-EDX dilakukan untuk mengetahui morfologi dan unsur yang terkandung
pada scaffold nanofiber, uji bioaktivitas untuk mengamati perkembangan apatit
pada scaffold nanofiber, dan uji tarik untuk mengamati kekuatan mekanik
scaffold nanofiber
4.5 Teknik Analisis Data
Tahap selanjutnya adalah menganalisis data hasil karakterisasi yang diperoleh
dari tahap sebelumnya. Data tersebut dianalisis untuk memperoleh informasi
mengenai kristalinitas, gugus fungsi, morfologi, bioaktivitas scaffold nanofiber,
dan kekuatan mekanik scaffold nanofiber.
1. Analisis XRD
Analisis XRD dilakukan dengan instrumen Bruker D8 Advance. Sumber
menggunakan sinar-X radiasi Cu-K𝛼 dengan panjang gelombang 1,5406Å.
Tegangan yang digunakan adalah 40 kV dan arus anoda adalah 24 mA.
Pemindaian dilakukan dengan interval 0,02046 dengan lama waktu pemindaian
sebesar 0,04 detik. Data hasil XRD merupakan kurva hubungan antara sudut
difraksi (2θ) dengan intensitas. Sampel yang dikarakterisasi XRD adalah HAp,
33
SrHAp, PVA, PVA/HAp, PVA/SrHAp 5%, 10%, dan 15%.

Analisis XRD digunakan untuk menentukkan indeks kristalinitas (Xc ),


ukuran kristal (S), parameter kisi (a dan c), microstrain (𝜀). Data XRD yang
telah diperoleh diplot dalam grafik menggunakan perangkat lunak Origin 2018.
Referensi data puncak difraksi dapat diperoleh dari situs COD (Crystallography
Open Database), kemudian terdapat file dengan ekstensi .cif yang dapat diunduh.
File tersebut dibuka menggunakan aplikasi Vesta, kemudian referensi puncak
difraksi dapat diketahui.

Indeks kristalinitas serbuk HAp dan SrHAp dihitung menggunakan


persamaan sebagai berikut (Sa et al., 2017):

𝑉112⁄ (4.1)
300
𝑋𝑐 = (1 − ) × 100%
𝐼300

𝑋𝑐 adalah indeks kristalinitas, V112⁄ adalah besar intensitas lembah diantara


300

puncak (112) dan (300), dan I300 adalah besar intensitas puncak (300). Indeks
kristalinitas merupakan fraksi volume kristalinitas suatu fase dalam sampel
tertentu. Hal tersebut mewakili ukuran kristal rata-rata, kesempurnaan, dan
susunan kristal (LeGeros, 1991; Reyes-Gasga et al., 2013).

Ukuran kristal dihitung menggunakan persamaan 3.1 dengan K merupakan


konstanta Scherrer bernilai 0,9; λ merupakan panjang gelombang radiasi sinar-X
bernilai 1,5406Å; β merupakan Full Width at Half Maximum (FWHM) yang dapat
diperoleh dari grafik; dan θ merupakan sudut difraksi. Ukuran kristal diperoleh
berdasarkan puncak-puncak difraksi (002), (211), (112), (300), dan (202). Ukuran
kristal kemudian dirata-ratakan untuk memperoleh ukuran kristal rata-rata dari
sampel.

Parameter kisi dapat diperoleh dengan menggunakan persamaan sebagai


berikut:

1 4 ℎ2 + ℎ𝑘 + 𝑘 2 𝑙2 (4.3)
= ( ) +
𝑑2 3 𝑎2 𝑐2

d adalah jarak antar bidang dan h,k,l adalah indeks miller. Persamaan tersebut
berlaku bagi material dengan struktur kristal heksagonal, dimana hidroksiapatit
34
memiliki struktur kristal tersebut (Khalid & Chaudhry, 2019; Terra et al., 2009).
Microstrain merupakan cacat kristal material yang dapat ditentukkan
menggunakan persamaan berikut :

𝛽 (4.4)
𝜀=
4𝑡𝑎𝑛𝜃
2. Analisis FTIR
Analisis FTIR menggunakan berkas cahaya inframerah untuk mengetahui
gugus fungsi suatu sampel. Data hasil FTIR merupakan kurva hubungan transmisi
dengan bilangan gelombang. Spektrum FTIR dibagi menjadi 3 area panjang
gelombang yaitu spketrum far-IR jauh (< 400 cm-1), spektrum mid-IR (400-4000
cm-1), dan spektrum near-IR (4000-13000 cm-1). Spektrum mid-IR merupakan
analisis FTIR yang paling sering digunakan dan terbagi atas 4 daerah sebagai
berikut: (1) daerah ikatan tunggal (2500-4000 cm-1), (2) daerah ikatan rangkap
tiga (2000-2500 cm-1), daerah rangkap dua (1500-2000 cm-1), dan daerah sidik
jari (600-1500 cm-1) (Nandiyanto et al., 2019).
Analisis FTIR menggunakan instrumen FTIR, Thermo Nicolet iS10. Sampel
yang dianalisis menggunakan adalah HAp, SrHAp, PVA/HAp, PVA/SrHAp 5,
10, dan 15. Sampel serbuk menggunakan metode pellet KBr dengan rentang
bilangan gelombang (4000-400) cm-1 Sedangkan sampel nanofiber menggunakan
metode ATR (Attenuated Total Reflection) dengan rentang bilangan gelombang
(4000-600) cm-1.
3. Analisis SEM-EDX
Data SEM berupa citra yang menampilkan morfologi 3 dimensi dari sampel,
sedangkan data EDX berupa sebaran unsur yang terkandung dalam sampel.
Analisis SEM menggunakan instrumen SEM, Joel JSM-6510LA-1400. Sampel
yang dianalisis menggunakan SEM adalah HAp, SrHAp, PVA, PVA/HAp,
PVA/SrHAp 5, 10, dan 15, untuk HAp dan SrHAp dianalisis menggunakan SEM-
EDX. Sifat morfologi nanofiber berupa diameter, ukuran pori, struktur, dan
keseragaman (Öznergiz et al., 2014). ImageJ digunakan untuk membantu
perhitungan distribusi diameter nanofiber dengan mengukur secara acak 100
nanofiber tunggal.
4. Analisis TEM
Data TEM berupa citra yang menampilkan morfologi 2 dimensi dari sampel.

35
Analisis TEM menggunakan instrumen TEM, Joel Jem-1400. Sampel yang
dianalisis menggunakan TEM adalah HAp, SrHAp, PVA, PVA/HAp,
PVA/SrHAp 5%, PVA/SrHAp 10%, dan PVA/SrHAp 15%. Pada HAp dan
SrHAp, TEM digunakan untuk menganalisis morfologi dalam skala nano dan
mengetahui ukuran partikel. Sedangkan pada scaffold nanofiber, TEM digunakan
untuk mengamati inkorporasi HAp dan SrHAp pada matriks nanofiber.
5. Uji bioaktivitas
Sampel scaffold nanofiber PVA PVA/HAp, PVA/SrHAp 5, 10, dan 15
digunting menjadi persegi berukuran 20 × 20 𝑚𝑚2 , kemudian direndam pada
larutan SBF. Larutan SBF dibuat sesuai yang tertera pada (Kokubo & Takadama,
2006) Setelah dicelupkan selama 1, 3, dan 5 hari, sampel dibilas dengan aquades
dan dikeringkan dengan suhu ruang. Perkembangan apatit sampel diamati
menggunakan SEM dan komposisi fiber diamati menggunakan EDX (Januariyasa
et al., 2020).
6. Uji tarik
Data uji tarik berupa kekuatan tarik, modulus Young, dan elongasi pada saat
putus. Uji tarik dilakukan menggunakan instrumen UTM, Zwick DOFB.5 TS.
Sampel yang dianalisis adalah PVA, PVA/HAp, PVA/SrHAp 5, 10, dan 15 sesuai
dengan ISO 527. Sampel dipotong menjadi persegi panjang dengan ukuran 50 ×
10 𝑚𝑚2, lalu ditempel pada kerangka kertas berukuran 50 × 10 𝑚𝑚2 agar
nanofiber tidak rusak pada genggaman (Maccaferri et al., 2021). Pengujian
dilakukan dengan kecepatan 5mm/menit dan 2 kali pengulangan.

36
BAB V
HASIL DAN PEMBAHASAN

5.1 Hasil Karakterisasi HAp dan SrHAP


Serbuk HAp dan SrHAp disintesis dari cangkang lobster pasir (Panulirus
homarus) sebagai sumber kalsium menggunakan metode presipitasi. Perbedaannya
terletak pada substitusi ion Sr2+ pada SrHAp. Berikut hasil dan pembahasan dari
karakterisasi HAp dan SrHAp.
5.1.1 Hasil Karakterisasi XRD HAp dan SrHAp
Karakterisasi XRD dilakukan untuk menentukkan indeks kristalinitas (Xc ),
ukuran kristal (S), parameter kisi (a dan c), microstrain (𝜀). Gambar 5.1
menunjukkan pola XRD untuk HAp dan SrHAp. Berdasarkan pola XRD pada
gambar 5.1, puncak difraksi pada HAp dan SrHAp sesuai dengan data referensi
pada HAp (JCPDS no. 09-0432). Hal tersebut terbukti dengan bidang kisi (002),
(211), (112), (300), dan (202). Bidang kisi tersebut ditemukan pada pola difraksi
HAp di sudut 25,73°, 31,59°, 32,03°, 32,72°, dan 33,89°; sedangkan pada pola
difraksi SrHAp di sudut 25,6°, 31,52°, 31,90°, 32,66°, dan 33,78°. Substitusi ion
Sr2+ menyebabkan pergeseran puncak ke 2𝜃 yang lebih rendah (Harrison et al.,
2021). Hasil pola XRD tersebut juga menunjukkan adanya fase minor puncak 𝛽-
tricalcium phosphate (𝛽-TCP). 𝛽-TCP dapat membantu regenerasi tulang karena
sifat osteokonduktif, osteoinduktif, dan kemampuan resorpsi yang baik (Bohner et
al., 2020).

Gambar 5.1 Pola difraksi XRD HAp dan SrHAp


37
Dari pola XRD tersebut diperoleh hasil indeks kristalinitas (Xc ), ukuran
kristal (S), parameter kisi (a dan c), dan microstrain (𝜀) seperti pada tabel 5.1.
Kristalinitas pada HAp dan SrHAp secara berturut-turut bernilai 91,1% dan 64,6%.
Terjadi penurunan kristalinitas pada HAp ketika dilakukan substitusi oleh ion Sr2+.
Substitusi Sr pada HAp menyebabkan penurunan indeks kristalinitas. Hal tersebut
dapat terjadi karena radius ion dari Sr (1,13Å) lebih lebih besar dari Ca (0,99Å)
mengakibatkan distorsi dan ketidakstabilan pada struktur fosfat (Li et al., 2007).
Kristalinitas yang tinggi disebabkan oleh perlakuan hidrotermal. Suhu dan tekanan
yang tinggi dapat meningkatkan pembentukan kristalinitas apatit dan mengurangi
bagian amorf. (Mohd Pu’ad et al., 2019). HAp dengan kristalinitas yang tinggi
dapat meningkatkan diferensiasi dan mineralisasi osteogenik pada tulang.

Ukuran kristal HAp dan SrHAp berturut-turut bernilai (37 ± 3) nm dan


(31 ± 3) nm. SrHAp memiliki ukuran yang lebih kecil daripada HAp sesuai
dengan penurunan kristalinitas. HAp dan SrHAp memiliki ukuran kristal yang
cukup kecil. Ukuran kristal yang kecil dapat meningkatkan sifat bioaktivitas dan
biokompatibilitas dari hidroksiapatit mengarah ke peningkatan regenerasi pada
tulang. Sebagai tambahan, ukuran kristal yang kecil dapat meningkatkan luas
permukaan material yang dapat meningkatkan efisiensi dalam pertumbuhan sel
dan proliferasi (Dey et al., 2014; Shaheen, 2022).

Parameter kisi HAp a bernilai 9,471(Å) dan c bernilai 6,917(Å), sedangkan


parameter kisi SrHAp a bernilai 9,485(Å) dan c bernilai 6,951(Å). Nilai parameter
kisi yang diperoleh mendekati dengan nilai referensi dari penelitian Laonapakul et
al., 2021. Microstrain HAp bernilai (2,6 ±0,4)×10-4 , sedangkan SrHAp bernilai
(2,89 ± 0,09) × 10−4. Hasil dari kedua microstrain bernilai sangat kecil
mengindikasikan adanya sejumlah kecil cacat pada kristal (Sari & Yusuf, 2018).
Nilai microstrain SrHAp lebih tinggi daripada HAp karena penambahan
kandungan Sr yang menyebabkan susunan kristal Ca2+ dan Sr2+ yang tidak
sempurna (Silva et al., 2020). Selain itu, peningkatan microstrain pada SrHAp
juga menghasilkan penurunan kristalinitas dan ukuran kristal dibandingkan dengan
HAp.

38
Tabel 5.1 Nilai kristalinitas, ukuran kristal, parameter kisi, dan microstrain HAp
dan SrHAp
Parameter kisi
Kristalinitas Ukuran kristal
Sampel (Å) Microstrain (𝜀)
(Xc ) (S)
a c

HAp 91,1% (37 ± 3) nm 9,471 6,917 (2,6 ± 0,4) × 10−4

SrHAp 64,6% (31 ± 3) nm 9,485 6,951 (2,89 ± 0,09) × 10−4


5.1.2 Hasil Karakterisasi FTIR HAp dan SrHAp
Karakterisasi FTIR dilakukan untuk mengidentifikasi senyawa kimia dalam
HAp dan SrHAp. Spektra FTIR memberikan informasi mengenai gugus fungsi
dan ikatan kimia. Berdasarkan spektra FTIR pada gambar 5.2, dapat diamati pita
serapan dari 3000-3500 cm-1 mengacu pada air yang diserap, sedangkan puncak
pita serapan pada 3425 cm-1 untuk HAp dan 3449 cm-1 untuk SrHAp mengacu
pada mode stretching OH- . Selain itu mode bending OH- ditemukan pada puncak
pita 632 cm-1, namun pada SrHAp tidak ditemukan. Hal tersebut dapat terjadi
seperti pada penelitian Joshi et al., 2020 disebabkan oleh subtitusi Sr yang dapat
mengurangi intensitas dari OH- karena penurunan kristalinitas dengan doping Sr.
Penelitian lain menunjukkan bahwa substitusi Ca oleh Sr dapat menyebabkan
hilangnya gugus OH- dan gangguna struktur sepanjang sumbu c (Terra et al.,
2009).

Gambar 5.2 Spektra FTIR HAp dan SrHAp

39
Spektra FTIR menunjukkan beberapa mode vibrasi gugus fungsi 𝑃𝑂4 3−. Pada
HAp puncak pita 1095 cm-1dan 1049 cm-1 mengacu pada mode vibrasi stretching
asimetris (𝜐3 ) dari P-O. Sedangkan 𝜐3 pada SrHAp terdapat pada puncak pita
1118 cm-1 dan 1041 cm-1. Terdapat juga mode vibrasi stretching simetris (𝜐1 ) dari
P-O untuk HAp terdapat di puncak 987 cm-1 dan SrHAp terdapat di puncak 948
cm-1. Terakhir terdapat mode vibrasi bending asimteris (𝜐4 ) dari O-P-O dimana
untuk HAp terdapat di puncak 571 cm-1 dan 601 cm-1, sedangkan untuk SrHAp
terdapat di puncak 555 cm-1 dan 601 cm-1. Gugus fungsi PO4 3- dengan mode
vibrasi tersebut merupakan karakteristik dari hidroksiapatit (Moreira et al., 2016).
Pita serapan mengalami pergeseran ke panjang gelombang yang lebih rendah pada
substitusi Sr karena terjadi amorfisasi pada sturktur hidroksiapatit (Ressler et al.,
2022).

Pita serapan 1465 cm-1 baik pada HAp maupun SrHAp mengindikasikan
adanya gugus CO3 2- dengan metode vibrasi stretching simetris. Adanya gugus
karbonat tersebut menunjukkan diperolehnya HA dengan karbonat tipe B, dimana
karbonat menggantikan gugus anionik PO4 3- pada struktur hidroksiapatit.
Substitusi tersebut dapat terjadi karena penyerapan CO2 selama proses sintesis
atau setelah proses kalsinasi yang tidak dilakukan dalam kondisi atmosfer inert
(Marinho et al., 2023). Namun keberadaan gugus CO3 2- umum terjadi karena
CO3 2- terjadi secara alami pada tulang manusia (Sari et al., 2021).

5.1.3 Hasil Karakterisasi SEM-EDX HAp dan SrHAp


Karakterisasi SEM digunakan untuk mengamati morfologi HAp dan SrHAp.
Berdasarkan gambar 5.3a dan 5.3b, teramati morfologi HAp dan SrHAp dengan
perbeseran 5000x memiliki aglomerasi partikel seperti granula atau butiran yang
seragam. Metode presipitasi menunjukkan sintesis HAp dan SrHAp menghasilkan
butiran halus dan dan ukuran partikel yang seragam (Sari et al., 2021). Substitusi
ion Sr2+ pada morfologi SrHAp tidak memberikan perbedaan yang signifikan dari
morfologi HAp.

40
a.) b.)

Gambar 5.3 Hasil morfologi dari SEM untuk (a) HAp dan (b) SrHAp
Karakterisasi EDX digunakan untuk mengetahui kandungan unsur HAp dan
SrHAp. Gambar 5.3c dan 5.3d menunjukkan hasil EDX dan kandungan unsur
kimia yang terkandung dalam HAp dan SrHAP. Hasil EDX menunjukkan rasio
Ca/P dari HAp bernilai 1,68 dan rasio (Ca+Sr)/P dari SrHAp bernilai 1,69. Kedua
nilai tersebut mendekati rasio stoikiometri HAp dengan Ca/P yang bernilai 1,67.
Substitusi kandungan Sr pada SrHAp diketahui dari rasio Sr/(Ca+Sr) yang bernilai
0,1092.

a.)

b.)

Gambar 5.4 Hasil EDX dan kandungan unsur (a) HAp dan (b) SrHAp

41
Rasio tersebut mendekati dengan kandungan substitusi Sr pada sintesis SrHAp
yaitu 10 at% dari total Ca dan Sr. Berlebihnya kandungan Sr yang tidak signifikan
dapat terjadi karena dalam proses sintesis yang menggunakan bahan alam terdapat
unsur pengotor selain kalsium (Arokiasamy et al., 2022). Salah satunya
merupakan unsur stronsium yang dapat dibuktikan pada berlebihnya kandungan
Sr dalam SrHAp.
5.1.4 Hasil Karakterisasi TEM HAp dan SrHAp
Karakterisasi TEM dilakukan untuk mengamati morfologi dalam skala nano dan
rata-rata ukuran partikel HAp dan SrHAp. Berdasarkan gambar 5.5a dan 5.5b,
HAp dan SrHAp memiliki morfologi partikel nano berbentuk bulat. Morfologi
bentuk bulat hidroksiapatit juga ditemukan pada penelitian Arunseshan
Chandrasekar et al. (2013) dan Januariyasa et al. (2020). Morfologi pada partikel
SrHAp memiliki sifat lebih berpori dibandingkan HAp. Pori dalam ukuran nano
dapat menyediakan area permukaan yang lebih besar untuk pertukaran ion dimana
dapat meningkatkan penyerepan protein dan meningkatkan interaksi sel osteoblas
dalam proliferasi dan diferensiasi (Januariyasa et al., 2020; Lowry et al., 2018).

a.) b.)

Gambar 5.5 Hasil morfologi dari TEM (a) HAp dan (b) SrHAp

Rata-rata ukuran partikel HAp dan SrHAp secara berturut-turut bernilai (81±10)
nm dengan rentang ukuran partikel dari 64,52 nm sampai 95,12 nm dan (57±19)
nm dengan rentang ukuran partikel dari 32,93 nm sampai 71,14 nm. Pengaruh
kalsinasi pada temperatur yang tinggi mengakibatkan pertumbuhan ukuran partikel
yang tinggi. Rerata ukuran partikel SrHAp lebih kecil dibandingkan HAp.
Penurunan ukuran partikel pada SrHAp sesuai dengan analisis XRD dimana terjadi
penurunan ukuran kristal pada substitusi Sr. Penurunan ukuran partikel tersebut

42
juga diperkuat oleh penelitian yang dilakukan oleh Stipniece et al. (2021). Selain
itu, substitusi Sr dapat menghambat pertumbuhan kristal (Lowry et al., 2018).
5.2 Hasil Karakterisasi scaffold nanofiber
Sampel Scaffold nanofiber yang dikarakterisasi adalah PVA, PVA/HAp,
PVA/SrHAp 5%, PVA/SrHAp 10%, dan PVA/SrHAp 15%. Karakterisasi yang
dilakukan berupa XRD, FTIR, SEM, TEM, uji tarik, dan uji bioaktivitas. Terdapat
modifikasi hasil karakterisasi fisikokimia scaffold nanofiber dibandingkan dengan
hasil karakterisasi HAp dan SrHAp karena komposisi polimer lebih dominan
dibandingkan doping. Selain itu, terdapat uji tarik sebagai sifat mekanik dan uji
bioaktivitas sebagai uji in-vitro. Hasil karakterisasi disampaikan sebagai berikut.

5.2.1 Hasil Karakterisasi XRD scaffold nanofiber


Karakterisasi XRD dapat mengidentifikasi informasi struktur polimer pada fase
amorf dan kristalin polimer. Pada umumnya, material dengan bahan dasar polimer
bersifat semikristalin dimana memiliki bagian amorf dan kristalin (Sudirman et
al., 2020). Penambahan HAp atau SrHAp sebagai pengisi (filler) pada scaffold
nanofiber memberikan pengaruh hasil XRD yang bervariasi.

Gambar 5.6 Pola difraksi scaffold nanofiber (a) PVA, (b) PVA/HAp, (c)
PVA/SrHAp 5%, (d) PVA/SrHAp 10%, dan (e) PVA/SrHAp 15%

Berdasarkan pola XRD pada gambar 5.1 kelima sampel menunjukkan bagian
amorf dan kristalin. Kelima sampel menunjukkan adanya puncak difraksi pada
43
sudut ~19,65° yang mengindikasikan puncak PVA disebabkan oleh terjadinya
ikatan hidrogen antar molekul (J. H. Park et al., 2010). Pernyataan tersebut
didukung oleh penelitian yang dilakukan oleh Alwan et al., 2016 dan Linh et al.,
2010. Pada PVA/HAp, PVA/SrHAp 5%, PVA/SrHAp 10%, dan PVA/SrHAp
15% terdapat puncak difraksi dari filler HAp dan SrHAP. Pada PVA/HAp
terdapat puncak difraksi pada sudut 31,79° dan 32,21° yang mengindikasikan
adanya HAp dalam sampel tersebut. Pada PVA/SrHAp 5% memiliki puncak
difraksi di sudut 31,15° dan 27,93°, sedangkan PVA/SrHAp 10% dan 15%
memiliki puncak difraksi di sudut 26,13°; 28,22°; ~31,57°; dan ~34,19°. Puncak
difraksi pada PVA/SrHAp 5, 10, dan 15% menunjukkan pergeseran 2θ seperti
yang dijelaskan pada 5.1.1. Penambahan HAp dan SrHAp juga mempengaruhi
kristalinitas dari sampel, seperti pada peningkatan kristalinitas PVA/SrHAp
seirign dengan peningkatan konsentrasi SrHAp. Hal tersebut dapat terjadi karena
semakin banyak kandungan SrHAp menyebabkan peningkatan kristalinitas
SrHAp pada struktur nanofiber (Januariyasa et al., 2020). Namun, penambahan
filler tersebut menyebabkan penurunan puncak pada PVA dimana mengurangi
kristalinitas dari material. Partikel HAp dan SrHAP pada nanofiber dapat
mengganggu rantai makromolekular polimer, yang menyebabkan penurunan
jumlah dari kristalin polimer (G.-M. Kim et al., 2008).
5.2.2 Hasil Karakterisasi FTIR scaffold nanofiber
Karakterisasi FTIR dilakukan untuk mengetahui gugus fungsi pada scaffold
nanofiber. Berdasarkan pada gambar 5.6, kelima sampel menunjukkan
karakteristik puncak serapan dari PVA yang ditunjukkan pada sekitar puncak pita
3280 cm-1sebagai mode vibrasi stretching dari OH- , 2917 cm-1 sebagai mode
vibrasi stretcing asimetris dari CH2 , 1654 cm-1 sebagai mode vibrasi stretching
karbonil dari C=O, 1430 cm-1 sebagai mode vibrasi bending dari CH2 , 1320 cm-1
sebagai mode vibrasi deformasi C-H, 1247 cm-1 sebagai mode vibrasi wagging C-
H, 1090 cm-1 sebagai mode vibrasi stretching C-O, dan 840 cm-1 sebagai mode
vibrasi C-C. Penelitan yang dilakukan oleh Kharazmi et al. (2015) dan Omkaram
et al. (2007) mendukung perolehan hasil tersebut.

44
Gambar 5.7 Spektra FTIR scaffold nanofiber (a) PVA, (b) PVA/HAp, (c)
PVA/SrHAp 5%, (d) PVA/SrHAp 10%, dan (e) PVA/SrHAp 15%

5.2.3 Hasil Karakterisasi SEM scaffold nanofiber


Karakterisasi SEM dilakukan untuk mengamati morfologi dan struktur
permukaan dari nanofiber. Tahap electrospinning menjadi faktor penting dalam
pembentukan morfologi nanofiber. Dalam penelitian ini, parameter pada tahap
electrospinning seperti diameter lubang jarum, kolektor, jarak kolektor dengan
jarum, tegangan, laju aliran dipertahankan dalam kondisi konstan. Sehingga
perubahan karakteristik morfologi pada nanofiber bergantung pada larutan
electrospinning. Gambar 5.8a-e menunjukkan nanofiber PVA, PVA/HAp,
PVA/SrHAp 5%, 10%, dan 15%. Secara umum, morfologi nanofiber tampak
memberikan porositas yang tinggi dimana aspek tersebut menjadi persyaratan
dalam komposisi matriks ekstraselular tulang (Maji & Pramanik, 2022).
Berdasarkan gambar 5.8a, nanofiber PVA memiliki bentuk seragam, aspek rasio
tinggi, dan mulus tanpa timbulnya benjolan (beads). Konsentrasi larutan PVA 10
wt% menghasilkan karakteristik morfologi yang bagus. Ketidakadaan beads dari
citra morfologi tersebut karena konsentrasi PVA yang rendah (<8 wt%) dapat
menimbulkan beads. Selain itu, penentuan konsentrasi larutan PVA 10 wt% juga
mempertimbangkan faktor tebal dan diameter nanofiber. Semakin tinggi
konsentrasi larutan maka semakin besar tebal dan diameter nanofiber yang

45
dihasilkan (J.-C. Park et al., 2010; Rwei & Huang, 2012).

Gambar 5.8b-e menunjukkan nanofiber PVA dengan filler HAp (gambar 5.8b)
dan SrHAp (gambar 5.8c-e). Tampak jelas pada citra morfologi tersebut bahwa
penambahan HAp dan SrHAp menimbulkan aglomerasi pada nanofiber. Pada
gambar 5.8b dan 5.5c, tampak PVA/SrHAp 5% memiliki aglomerasi yang lebih
besar seperti yang ditunjukan panah merah dibandingkan dengan PVA/HAp
walaupun masing-masing nanofiber memiliki konsentrasi filler yang sama.
Peningkatan aglomerasi dapat disebabkan oleh larutan electrospinning
PVA/SrHAp memiliki konduktivitas yang tinggi dibandingkan PVA/HAp
(Januariyasa et al., 2020). Sr memiliki konduktivitas yang lebih tinggi
dibandingkan Ca karena Sr memiliki jumlah elektron valensi yang lebih tinggi
daripada Ca. Sebagai tambahan, Sr memiliki jari-jari atom yang lebih besar dan
energi ionisasi yang lebih rendah daripada Ca, dimana dapat memudahkan
pergerekan elektron (Richard Sauerheber & Bettina Heinz, 2016). Berdasarkan
gambar 5.8c-e, peningkatan konsentrasi SrHAp memiliki pengaruh pada
banyaknya aglomerasi yang terjadi. Peningkatan konsentrasi SrHAp juga dapat
meningkatkan konduktivitas larutan electrospinning sehingga nanofiber
PVA/SrHAp 10% dan 15% menimbulkan beads yang ditunjukkan pada panah
hitam (Wu et al., 2005).

a.) b.)

c.) d.)

46
e.)

Gambar 5.8 Hasil morfologi SEM dari scaffold nanofiber (a) PVA, (b)
PVA/HAp, (c) PVA/SrHAp 5%, (d) PVA/SrHAp 10%, (e) PVA/SrHAp 15%

Gambar 5.7 menunjukkan distribusi dan rata-rata diameter dari masing-masing


nanofiber. Berdasarkan gambar 5.7a-e, tidak tampak anomali yang cukup besar
pada distribusi diameter. Pesebaran nilai diameter memenuhi distribusi normal
dimana nanofiber memiliki keseragaman yang baik. Nanofiber PVA memiliki
rentang diameter 187-698 nm, nanofiber PVA/HAp memiliki rentang diameter
160-375 nm, nanofiber PVA/SrHAp 5% memiliki rentang diameter 92-381 nm,
nanofiber PVA/SrHAp 10% memiliki rentang diameter 105-256 nm, dan
nanofiber PVA/SrHAp 15% memiliki rentang diameter 60-243 nm. Berdasarkan
gambar 5.7f, rata-rata diameter diperoleh untuk PVA sebesar (360±98) nm, untuk
PVA/HAp sebesar (247±54) nm, untuk PVA/SrHAp 5% sebesar(211±51) nm,
untuk PVA/SrHAp 10% sebesar (169±40) nm, dan untuk PVA/SrHAp 15%
sebesar (134±35) nm.

a.) b.)

47
c.) d.)

e.) f.)

Gambar 5.9 Hasil distribusi diameter untuk scaffold nanofiber (a) PVA, (b)
PVA/HAp, (c) PVA/SrHAp 5%, (d) PVA/SrHAP 10%, (e) PVA/SrHAp 15%,
dan (f) rata-rata diameter nanofiber

Hasil rata-rata diameter nanofiber tersebut masuk dalam rentang ukuran


diameter serat kolagen (50-500 nm) pada matriks ekstraseluler tulang (Smith &
Ma, 2004). Nanofiber PVA memiliki rata-rata diameter paling tinggi. Hal tersebut
dapat terjadi karena penambahan baik HAp maupun SrHAp dapat meningkatkan
konduktivitas larutan electrospinning. Larutan electrospinning yang memiliki
konduktivitas yang tinggi menghasilkan diameter nanofiber yang kecil (S. J. Kim
et al., 2005). Pernyataan ini diperkuat oleh penelitian yang dilakukan Angammana
& Jayaram, (2011). Berdasarkan gambar 5.7b dan 5.7c, PVA/HAp memiliki rata-
rata diameter lebih tinggi dibandingkan PVA/SrHAp 5% walaupun memiliki
kandungan masing-masing HAp dan SrHAp yang sama yaitu 5%. Seperti yang
sudah disampaikan sebelumnya, SrHAp memiliki konduktivitas yang lebih tinggi
akibat pengaruh dari ion Sr. Konduktivitas yang tinggi dapat meningkatkan
muatan yang dipancarkan pada jet electrospinning menyebabkan elongasi pada jet
oleh gaya listrik sehingga menghasilkan nanofiber dengan diameter yang kecil
(Angammana & Jayaram, 2011). Berdasarkan gambar 5.7c-e, seiring dengan
penambahan kandungan SrHAp pula menyebabkan peningkatan konduktivitas
pada larutan electrospinning sehingga terjadi penurunan rata-rata diameter

48
nanofiber.
5.2.4 Hasil Karakterisasi TEM scaffold nanofiber
Karakterisasi TEM dilakukan untuk mengetahui morfologi nanofiber pada skala
nano. TEM menggunakan berkas elektron yang ditransmisikan menembus sampel.

a.) b.
)

c.) d.
)

Gambar 5.10 Hasil morfologi TEM dari scaffold nanofiber (a) PVA/HAp, (b)
PVA/SrHAp 5%, (c) PVA/SrHAp 10%, dan (c) PVA/SrHAp 15%

Sehingga TEM menghasilkan citra 2 dimensi yang dapat mengetahui


penambahan HAp dan SrHAp pada matriks nanofiber. Berdasarkan gambar 5.10a-
d, tampak partikel HAp dan SrHAp seperti yang ditunjukkan panah merah
mengisi ruang dari matriks nanofiber. Seperti yang jelas terlihat matriks PVA
bersifat semikristalin ditandai dengan warna yang lebih cerah, sedangkan partikel
HAp dan SrHAp bersifat tinggi kristalin ditandai dengan warna yang lebih gelap.
Terperangkapnya partikel HAp dan SrHAp dalam nanofiber dapat bermanfaat
dalam aplikasi jaringan tulang (Sheikh et al., 2010). Namun pada sisipan gambar
5.10e, tampak terjadinya aglomerasi partikel HAp dan SrHAp pada nanofiber
49
seperti yang ditunjukkan pada panah biru. Keberadaan aglomerat ini dikonfirmasi
dengan hasil SEM.
5.2.5 Hasil Uji Bioaktivitas scaffold nanofiber
Pertumbuhan apatit pada scaffold nanofiber dapat menentukan kemampuan
ikatan pada tulang. Hal yang paling esensial pada material bioaktif adalah
kemampuan untuk mengikat pada tulang melalui nukleasi apatit pada permukaan
material untuk mempercepat pembentukan lapisan hidroksiapatit selama inkubasi
(Nirmala et al., 2010).

Uji bioaktivitas dilakukan dengan merendam scaffold nanofiber pada larutan


dengan konsentrasi ion menyerupai plasma darah manusia. Scaffold nanofiber
direndam pada larutan SBF pada 37°C selama periode 1, 3, dan 5 hari. Pada
gambar 5.11, alfabet a, b, c, d, dan e secara berturut-turt menunjukkan sampel
nanofiber PVA, PVA/HAP, PVA/SrHAp 5, 10, dan 15%. Sedangkan angka 1, 3,
dan 5 setelah alfabet menunjukkan waktu inkubasi yaitu 1, 3, dan 5 hari.

a1.) a3.) a5.)

b1.) b3.) b5.)

c1.) c3.) c5.)

50
d1.) d3.) d5.)

e1.) e3.) e5.)

Gambar 5.11 Hasil morfologi SEM dari scaffold nanofiber(a) PVA, (b) PVA/HAp,
(c) PVA/SrHAp 5%, (d) PVA/SrHAp 10%, dan (e) PVA/SrHAp 15% setelah
direndam selama 1, 3, dan 5 hari

Berdasarkan gambar a1-3 menunjukkan hampir tidak adanya lapisan apatit


yang terbentuk pada nanofiber PVA. Hal ini dapat terjadi karena PVA bukan
merupakan material yang bioaktif (Poormoghadam et al., 2021). Ketiadaan lapisan
apatit pada nanofiber PVA juga ditemukan oleh penelitian yang dilakukan
(Anjaneyulu et al., 2017) dan (Sheikh et al., 2010). Gambar b-e menunjukkan
pertumbuhan apatit pada permukaan nanofiber karena HAp dan SrHAp
merupakan material yang bioaktif dan secara klinis digunakan sebagai implan
tulang. Perkembangan nukleasi apatit dan porositas pada nanofiber PVA/HAp,
PVA/SrHAp 5, 10, dan 15% meningkat seiring dengan lamanya waktu inkubasi.
Relasi perkembangan apatit dengan lama waktu inkubasi tersebut juga diperkuat
oleh penelitian yang dilakukan (Mahabole et al., 2012). Pada gambar b dan c,
tampak secara signifikan nukleasi apatit pada PVA/SrHAp 5% lebih dominan
dibandingkan PVA/HAp yang memiliki kandungan yang sama yaitu 5% dari total
berat polimer. Seperti yang sudah dijelaskan sebelumnya, substitusi Sr dalam
jumlah yang kecil pada HAp dapat meningkatkan sifat bioaktivitas. Pengaruh
konsentrasi filler diamati dalam penambahan SrHAp pada gambar c-e.
Penambahan SrHAp sebanyak 10% memiliki lapisan apatit yang paling dominan
hampir melingkupi seluruh permukaan material. Sebaliknya, pada PVA/SrHAp
15% tidak menunjukkan pertumbuhan nukleasi apatit yang signifikan dengan
hampir menyerupai morfologi pada PVA/SrHAp 5%. Hal ini dapat terjadi karena
aglomerasi yang terlalu dominan pada PVA/SrHAp 15% seperti pada hasil SEM.
51
Aglomerasi pada nanofiber dapat menghalangi proses difusi, memperlambat
pelepasan ion, dan mengurangi efektivitas nanofiber (Chen et al., 2007).
5.2.6 Hasil Uji Tarik scaffold nanofiber
Uji tarik dilakukan untuk mengetahui sifat mekanis dari nanofiber.
Karakteristik mekanis pada uji tarik adalah ultimate strength, modulus Young, dan
elongation at break. Hasil dari karakteristik tersebut pada gambar 5.11 dan tabel
5.2. Tabel 5.2 menunjukkan nilai ultimate strength dan modulus Young yang
rendah dari masing-masing nanofiber. Perolehan hasil tersebut dapat terjadi
karena ketebalan dan dimensi nanofiber yang kurang optimal untuk uji tarik. Hal
itu terjadi karena terdapat beberapa keterbatasan seperti waktu pada tahap
electrospinning dan instrumen. Peneliti tidak bisa dengan leluasa menggunakan
alat electrospinning karena harus bergantian dengan peneliti lainnya. Selain itu,
collector pada alat electrospinning masih menggunakan plat dimana sebaran
nanofiber tidak rata dibandingkan collector menggunakan rotating drum.
Berdasarkan gambar 5.11a, penambahan HAp dan SrHAp pada nanofiber
menyebabkan peningkatan pada seluruh karakteristik mekanis. Pernyataan ini
diperkuat oleh penelitian yang dilakukan (Salim et al., 2021) dan (Wang et al.,
2021) Hal ini dapat disebabkan oleh HAp dan SrHAp merupakan material yang
keras, sehingga dapat meningkatkan ketegaran nanofiber (Januariyasa et al.,
2020). Selain itu, adhesi yang kuat pada nanofiber terjadi karena pembentukan
ikatan hidrogen antara partikel HAp dan SrHAp dengan PVA. Berdasarkan hasil
karakteristik mekanis, scaffold nanofiber pada penelitian ini tidak dapat digunakan
untuk aplikasi pada tulang penahan beban (load-bearing bone), namun dapat
diaplikasikan sebagai kandidat potensi pada tulang tanpa beban (non load-bearing
bone) untuk rekayasa jaringan tulang (Asran et al., 2010).

52
Tabel 5.2 Nilai ultimate strength, elongation at break, dan modulus Young dari
scaffold nanofiber
Ultimate strength Elongation at break Modulus Young
Sampel
(MPa) (%) (MPa)

PVA (0,43 ± 0,06) (6 ± 1) (7,6 ± 0,6)

PVA/HAp (1,3 ± 0,6) (29 ± 8) nm (12 ± 3)

PVA/SrHAp 5% (0,8 ± 0,3) (15 ± 3) (11 ± 6)

PVA/SrHAp 10% (0,9 ± 0,4) (24 ± 15) (9 ± 4)

PVA/SrHAp 15% (0,7 ± 0,2) (19 ± 4) (8 ± 1)

Ketiga kurva parameter memiliki tren yang fluktuatif. Keseluruhan kurva


tersebut memiliki nilai terendah pada nanofiber PVA dan nilai tertinggi pada
nanofiber PVA/HAp. Kemudian terjadi tren fluktuatif pada nanofiber SrHAp.
Parameter ultimate strength menunjukkan nanofiber PVA/SrHAp 10% memiliki
nilai ultimate strength tertinggi, nanofiber PVA/SrHAp 15% memiliki nilai
ultimate strength terendah, dan nanofiber PVA/SrHAp 5% berada diantaranya.
Parameter elongation at break menunjukkan nanofiber PVA/SrHAp 10%
memiliki nilai elongation at break tertinggi, nanofiber PVA/SrHAp 5% memiliki
nilai elongation at break terendah, dan nanofiber PVA/SrHAp 10% berada
diantaranya. Kurva parameter modulus Young terjadi tren penurunan nilai
modulus Young seiring dengan penambahan SrHAp.

a.) b.)

53
c.)

Gambar 5.12 Hasil uji tarik berupa (a) ultimate strength, (b) elongation at break,
dan (c) modulus Young

Karakteristik ultimate strength PVA/SrHAp lebih rendah dibandingkan


PVA/HAp. Hal ini dapat terjadi karena HAp memiliki kristalinitas yang lebih
tinggi dibandingkan SrHAp. Hal tersebut dibuktikan dengan hasil XRD pada
5.1.1. Kristalinitas yang tinggi dapat meningkatkan ultimate strength karena
ikatan rantai pada bagian kristalin terikat kuat satu sama lain. Akibatnya, material
menjadi rentan terhadap deformasi dan kekerasan meningkat secara signifikan
(Gleadall, 2015). PVA/SrHAp 10% mengalami kenaikan ultimate strength dari
PVA/SrHAp 5% karena lebih banyak partikel SrHAp yang mengisi matriks
nanofiber sebagai filler. Namun terjadi penurunan ultimate strength pada
PVA/SrHAp 15%. Penurunan pada kandungan SrHAP yang terbesar ini
disebabkan oleh terjadinya aglomerasi yang dominan pada matriks nanofiber.
Aglomerasi ini menyebabkan gangguan pada rantai polimer nanofiber yang
mengakibatkan kerusakan pada saat uji terjadi lebih cepat di bawah gaya tegangan
(H. Kim et al., 2014). Karakterisitk elongation at break juga mengalami fenomena
serupa dengan karakteristik ultimate strength. Penelitian yang dilakukan oleh
(Salim et al., 2021), (Asran et al., 2010), dan (Januariyasa et al., 2020)
menunjukkan adanya fase peningkatan dan fase penurunan karakteristik mekanis.
Dalam penelitian ini, karakteristik ultimate strength dan elongation at break pada
PVA/SrHAp 5-10% memiliki fase peningkatan dan terjadi fase penurunan pada
PVA/SrHAp 15%. Hal ini diperkuat oleh penelitian yang dilakukan (Asran et al.,
2010). Karakteristik modulus Young memberikan tren kurva yang berbeda dimana

54
BAB VI
HASIL DAN PEMBAHASAN
6.1 Kesimpulan
Dari hasil penelitian ini, maka diperoleh kesimpulan sebagai berikut.

1. .Fabrikasi scaffold nanofiber PVA berbasis hidroksiapatit dan stronsium


hidroksiapatit berhasil dilakukan dengan metode electrospinning

2. Substitusi stronsium pada hidroksiapatit dan kandungan filler dalam


scaffold nanofiber memberikan pengaruh sebagai berikut:

a. Analisis XRD menunjukkan scaffold nanofiber memiliki kristalinitas


yang rendah karena bersifat amorf. Penambahan kandungan filler
menunjukkan kenaikan intensitas puncak pada sudut difraksi SrHAp.

b. Analisis FTIR pada masing-masing scaffold nanofiber menunjukkan


gugus fungsi dari masing-masing material penyusun scaffold
nanofiber. Tidak ada perubahan signifikan pada kelima sampel.

c. Analisis SEM menunjukkan adanya aglomerasi pada scaffold nanofiber


yang memiliki filler. Penambahan kandungan filler menyebabkan
penurunan diameter nanofiber.

d. Uji bioaktivitas menunjukkan substitusi Sr dapat meningkatkan


karakteristik bioaktivitas. Semakin lama waktu inkubasi maka
perkembangan apatit juga semakin banyak. Penambahan SrHAp juga
dapat meningkatkan bioaktivitas. SrHAp 10% pada scaffold nanofiber
adalah kandungan yang paling optimal.

e. Uji tarik menunjukkan penambahan filler pada scaffold nanofiber dapat


meningkatkan karakteristik mekanis.
6.2 Saran
Saran yang dapat diberikan penulis untuk penelitian selanjutnya adalah
melakukan variasi substitusi Sr untuk mengamati karakteristik fisikokimia pada
hidroksiapatit. Selain itu, melakukan perbandingan metode lain dalam sintesis
hidroksiapatit seperti hidrotermal untuk mengamati karakterisasi fisikokimia. Pada
tahap fabrikasi scaffold nanofiber sebaiknya menggunakan larutan agak banyak
hingga nanofiber mencapai ketebalan tertentu untuk uji tarik. Melakukan uji
antibakteri untuk menganalisis pengaruh Sr sebagai agen antibakteri.
55
56
DAFTAR PUSTAKA

Agrawal, P., & Pramanik, K. (2016). Chitosan-poly(vinyl alcohol) nanofibers by free


surface electrospinning for tissue engineering applications. Tissue Engineering and
Regenerative Medicine, 13(5), 485–497.https://doi.org/10.1007/s13770-016-9092-3

Ahmed, M. K., Al-Wafi, R., Mansour, S. F., El-dek, S. I., & Uskoković, V. (2020).
Physical and biological changes associated with the doping of carbonated
hydroxyapatite/polycaprolactone core-shell nanofibers dually, with rubidium and
selenite. Journal of Materials Research and Technology, 9(3), 3710–3723.
https://doi.org/10.1016/j.jmrt.2020.01.108

Ali, A., Chiang, Y. W., & Santos, R. M. (2022). X-ray Diffraction Techniques for
Mineral Characterization: A Review for Engineers of the Fundamentals, Applications,
and Research Directions. Minerals, 12(2), 205. https://doi.org/10.3390/min12020205

Alif, M. F., Aprillia, W., & Arief, S. (2018). A hydrothermal synthesis of natural
hydroxyapatite obtained from Corbicula moltkiana freshwater clams shell biowaste.
Materials Letters, 230, 40–43. https://doi.org/10.1016/j.matlet.2018.07.034

Alwan, T. J., Toma, Z. A., Kudhier, M. A., & Ziadan, K. M. (2016). Preparation and
Characterization of the PVA Nanofibers produced by Electrospinning. Madridge
Journal of Nanotechnology & Nanoscience, 1(1), 1–3. https://doi.org/10.18689/mjnn-
1000101

Angammana, C. J., & Jayaram, S. H. (2011). Analysis of the Effects of Solution


Conductivity on Electrospinning Process and Fiber Morphology. IEEE Transactions
on Industry Applications, 47(3), 1109–1117.
https://doi.org/10.1109/TIA.2011.2127431

Anjaneyulu, U., Priyadarshini, B., Nirmala Grace, A., & Vijayalakshmi, U. (2017).
Fabrication and characterization of Ag doped hydroxyapatite-polyvinyl alcohol
composite nanofibers and its in vitro biological evaluations for bone tissue
engineering applications. Journal of Sol-Gel Science and Technology, 81(3), 750–
761. https://doi.org/10.1007/s10971-016-4243-5

Anjum, S., Rahman, F., Pandey, P., Arya, D. K., Alam, M., Rajinikanth, P. S., & Ao, Q.
(2022). Electrospun Biomimetic Nanofibrous Scaffolds: A Promising Prospect for
57
Bone Tissue Engineering and Regenerative Medicine. International Journal of
Molecular Sciences, 23(16), 9206. https://doi.org/10.3390/ijms23169206

Ansari, M. (2019). Bone tissue regeneration: biology, strategies and interface studies. In
Progress in Biomaterials (Vol. 8, Issue 4, pp. 223–237). Springer Science and
Business Media Deutschland GmbH. https://doi.org/10.1007/s40204-019-00125-z

Arokiasamy, P., al Bakri Abdullah, M. M., Abd Rahim, S. Z., Luhar, S., Sandu, A. V.,
Jamil, N. H., & Nabiałek, M. (2022). Synthesis methods of hydroxyapatite from
natural sources: A review. Ceramics International, 48(11), 14959–14979.
https://doi.org/10.1016/j.ceramint.2022.03.064
Arunseshan Chandrasekar, Suresh Sagadevan, & Arivuoli Dakshnamoorthy. (2013).
Synthesis and characterization of nano-hydroxyapatite (n-HAP) using the wet
chemical technique. International Journal of Physical Sciences, 8(32), 1639–1645.

Aslam, M., Kalyar, M. A., & Raza, Z. A. (2018). Polyvinyl alcohol: A review of research
status and use of polyvinyl alcohol based nanocomposites. Polymer Engineering &
Science, 58(12), 2119–2132. https://doi.org/10.1002/pen.24855

Asran, A. Sh., Henning, S., & Michler, G. H. (2010). Polyvinyl alcohol– collagen–
hydroxyapatite biocomposite nanofibrous scaffold: Mimicking the key features of
natural bone at the nanoscale level. Polymer, 51(4), 868–876.
https://doi.org/10.1016/j.polymer.2009.12.046

Barhoum, A., & Luisa García-Betancourt, M. (2018). Physicochemical characterization of


nanomaterials: size, morphology, optical, magnetic, and electrical properties. In
Emerging Applications of Nanoparticles and Architecture Nanostructures (pp. 279–
304). Elsevier. https://doi.org/10.1016/B978-0-323-51254-1.00010-5

Barth, H. D., Zimmermann, E. A., Schaible, E., Tang, S. Y., Alliston, T., & Ritchie, R. O.
(2011). Characterization of the effects of x-ray irradiation on the hierarchical
structure and mechanical properties of human cortical bone. Biomaterials, 32(34),
8892–8904.
https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2011.08.013
Behzadi, S., Luther, G. A., Harris, M. B., Farokhzad, O. C., & Mahmoudi, M. (2017).
Nanomedicine for safe healing of bone trauma: Opportunities and challenges.
Biomaterials, 146, 168–182. https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2017.09.005
58
Ben Halima, N. (2016). Poly(vinyl alcohol): review of its promising applications and
insights into biodegradation. RSC Advances, 6(46), 39823–39832.
https://doi.org/10.1039/C6RA05742J

Bigi, A., Boanini, E., Capuccini, C., & Gazzano, M. (2007). Strontium- substituted
hydroxyapatite nanocrystals. Inorganica Chimica Acta, 360(3), 1009–1016.
https://doi.org/10.1016/j.ica.2006.07.074

Bilgiç, E., Boyacıoğlu, Ö., Gizer, M., Korkusuz, P., & Korkusuz, F. (2020). Architecture
of bone tissue and its adaptation to pathological conditions. In Comparative
Kinesiology of the Human Body (pp. 71–90). Elsevier. https://doi.org/10.1016/B978-
0-12-812162-7.00006-0

Bohner, M., Santoni, B. L. G., & Döbelin, N. (2020). β-tricalcium phosphate for bone
substitution: Synthesis and properties. Acta Biomaterialia, 113, 23–41.
https://doi.org/10.1016/j.actbio.2020.06.022

Bonnans, C., Chou, J., & Werb, Z. (2014). Remodelling the extracellular matrix in
development and disease. Nature Reviews Molecular Cell Biology, 15(12), 786–801.
https://doi.org/10.1038/nrm3904

Bose, S., Roy, M., & Bandyopadhyay, A. (2012). Recent advances in bone tissue
engineering scaffolds. Trends in Biotechnology, 30(10), 546–554.
https://doi.org/10.1016/j.tibtech.2012.07.005

Boyle, W. J., Simonet, W. S., & Lacey, D. L. (2003). Osteoclast differentiation and
activation. Nature, 423(6937), 337–342. https://doi.org/10.1038/nature01658

Chaudhuri, B., Mondal, B., Ray, S. K., & Sarkar, S. C. (2016). A novel biocompatible
conducting polyvinyl alcohol (PVA)- polyvinylpyrrolidone (PVP)-hydroxyapatite
(HAP) composite scaffolds for probable biological application. Colloids and Surfaces
B: Biointerfaces, 143, 71–80.
https://doi.org/10.1016/j.colsurfb.2016.03.027
Chen, M., Patra, P. K., Warner, S. B., & Bhowmick, S. (2007). Role of Fiber Diameter in
Adhesion and Proliferation of NIH 3T3 Fibroblast on Electrospun Polycaprolactone
Scaffolds. Tissue Engineering, 13(3), 579–587.
https://doi.org/10.1089/ten.2006.0205

59
Cheng, H., Chawla, A., Yang, Y., Li, Y., Zhang, J., Jang, H. L., & Khademhosseini, A.
(2017). Development of nanomaterials for bone- targeted drug delivery. Drug
Discovery Today, 22(9), 1336–1350.
https://doi.org/10.1016/j.drudis.2017.04.021

Chlanda, A., Oberbek, P., Heljak, M., Górecka, Ż., Czarnecka, K., Chen, K.- S., &
Woźniak, M. J. (2019). Nanohydroxyapatite adhesion to low temperature plasma
modified surface of 3D-printed bone tissue engineering scaffolds - qualitative and
quantitative study. Surface and Coatings Technology, 375, 637–644.
https://doi.org/10.1016/j.surfcoat.2019.07.070

D. F. Williams. (1987). Definitions in biomaterials : proceedings of a consensus


conference of the European Society for Biomaterials.Elsevier.

DeMerlis, C. C., & Schoneker, D. R. (2003). Review of the oral toxicity of polyvinyl
alcohol (PVA). Food and Chemical Toxicology, 41(3), 319– 326.
https://doi.org/10.1016/S0278-6915(02)00258-2

Dey, S., Das, M., & Balla, V. K. (2014). Effect of hydroxyapatite particle size,
morphology and crystallinity on proliferation of colon cancer HCT116 cells.
Materials Science and Engineering: C, 39, 336–339.
https://doi.org/10.1016/j.msec.2014.03.022

Dorozhkin, S. v. (2010). Bioceramics of calcium orthophosphates. Biomaterials, 31(7),


1465–1485.
https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2009.11.050

Edwin Marin, John Rojas, & Yhors Ciro. (2014). A review of polyvinyl alcohol
derivatives: Promising materials for pharmaceutical and biomedical applications.
African Journal of Pharmacy and Pharmacology, 8(24), 674–684.

Eliaz, N., & Metoki, N. (2017). Calcium Phosphate Bioceramics: A Review of Their
History, Structure, Properties, Coating Technologies and Biomedical Applications.
Materials, 10(4), 334.
https://doi.org/10.3390/ma10040334

Falah S. Al-Fartusie, & Saja N. Mohssan. (2017). Essential Trace Elements and Their
Vital Roles in Human Body. Indian Journal of Advances in Chemical Science, 5(3),

60
127–136.

Farhat, H. (2021). Materials and coating technologies. In Operation, Maintenance, and


Repair of Land-Based Gas Turbines (pp. 63–87). Elsevier.
https://doi.org/10.1016/B978-0-12-821834-1.00007-1
Frantz, C., Stewart, K. M., & Weaver, V. M. (2010). The extracellular matrix at a glance.
Journal of Cell Science, 123(24), 4195–4200.https://doi.org/10.1242/jcs.023820

Frenot, A., & Chronakis, I. S. (2003). Polymer nanofibers assembled by electrospinning.


Current Opinion in Colloid & Interface Science, 8(1), 64–75.
https://doi.org/10.1016/S1359-0294(03)00004-9

Gautam, G., Kumar, S., & Kumar, K. (2022). Processing of biomaterials for bone tissue
engineering: State of the art. Materials Today: Proceedings, 50, 2206–2217.
https://doi.org/10.1016/J.MATPR.2021.09.459

Ghassemi, T., Shahroodi, A., Ebrahimzadeh, M. H., Mousavian, A., Movaffagh, J., &
Moradi, A. (2018). Current Concepts in Scaffolding for Bone Tissue Engineering.
The Archives of Bone and Joint Surgery, 6(2), 90–99.

Gleadall, A. (2015). Mechanical properties of biodegradable polymers for medical


applications. In Modelling Degradation of Bioresorbable Polymeric Medical Devices
(pp. 163–199). Elsevier. https://doi.org/10.1533/9781782420255.2.163

Goldstein J, Newbury DE, Echlin P, Joy DC, Fiori C, & Lifshin E. (2018). Scanning
electron microscopy and X-ray microanalysis. Plenum Press.

Greish, Yaser & J.D., Bender & A., Singh & L.S., Nair & P.W., Brown & H.R., Allcock
& C.T., Laurencin. (2013). Hydrolysis of Ca-deficient hydroxyapatite precursors in
the presence of alanine-functionalized polyphosphazene nanofibers. Ceramics
International. 39. 519–528. https://doi.org/10.1016/j.ceramint.2012.06.057.

Hallensleben, M. L. (2000). Polyvinyl Compounds, Others. In Ullmann’s Encyclopedia of


Industrial Chemistry. Wiley-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA.
https://doi.org/10.1002/14356007.a21_743

Harrison, C. J., Hatton, P. v., Gentile, P., & Miller, C. A. (2021). Nanoscale strontium-
substituted hydroxyapatite pastes and gels for bone tissue regeneration.

61
Nanomaterials, 11(6).
https://doi.org/10.3390/nano11061611

Hartatiek, Yudyanto, Wuriantika, M. I., Utomo, J., Nurhuda, M., Masruroh, & Santjojo,
D. J. D. H. (2020). Nanostructure, porosity and tensile strength of
PVA/Hydroxyapatite composite nanofiber for bone tissue engineering. Materials
Today: Proceedings, 44, 3203–3206.
https://doi.org/10.1016/j.matpr.2020.11.438

Hassan, C. M., & Peppas, N. A. (2000). Structure and Applications of Poly(vinyl alcohol)
Hydrogels Produced by Conventional Crosslinking or by Freezing/Thawing
Methods. In Biopolymers · PVA Hydrogels, Anionic Polymerisation Nanocomposites
(pp. 37–65). Springer Berlin Heidelberg. https://doi.org/10.1007/3-540-46414-X_2

Heydari, Z., Mohebbi-Kalhori, D., & Afarani, M. S. (2017). Engineered electrospun


polycaprolactone (PCL)/octacalcium phosphate (OCP) scaffold for bone tissue
engineering. Materials Science and Engineering: C, 81, 127–132.

https://doi.org/10.1016/j.msec.2017.07.041

Hohman, M. M., Shin, M., Rutledge, G., & Brenner, M. P. (2001). Electrospinning and
electrically forced jets. I. Stability theory. Physics of Fluids, 13(8), 2201–2220.
https://doi.org/10.1063/1.1383791

Holbrook, R. D., Galyean, A. A., Gorham, J. M., Herzing, A., & Pettibone, J. (2015).
Overview of Nanomaterial Characterization and Metrology (pp. 47–87).
https://doi.org/10.1016/B978-0-08-099948-7.00002-6

Hotaling, N. A., Bharti, K., Kriel, H., & Simon, C. G. (2015). DiameterJ: A validated open
source nanofiber diameter measurement tool. Biomaterials, 61, 327–338.
https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2015.05.015

Hussey, G. S., Dziki, J. L., & Badylak, S. F. (2018). Extracellular matrix- based materials
for regenerative medicine. Nature Reviews Materials, 3(7), 159–173.
https://doi.org/10.1038/s41578-018-0023-x

Januariyasa, I. K., Ana, I. D., & Yusuf, Y. (2020). Nanofibrous poly(vinyl


alcohol)/chitosan contained carbonated hydroxyapatite nanoparticles scaffold for

62
bone tissue engineering. Materials Science and Engineering C, 107.
https://doi.org/10.1016/j.msec.2019.110347

Ji, Y., Ghosh, K., Shu, X., Li, B., Sokolov, J., Prestwitch, G.,
Clark, R., & Rafailovich, M. (2006). Electrospun three-dimensional hyaluronic acid
nanofibrous scaffolds. Biomaterials, 27(20), 3782–3792.
https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2006.02.037

Jiménez, M., Abradelo, C., San Román, J., & Rojo, L. (2019). Bibliographic review on the
state of the art of strontium and zinc based regenerative therapies. Recent
developments and clinical applications. Journal of Materials Chemistry B, 7(12),
1974–1985.
https://doi.org/10.1039/C8TB02738B

Joshi, K. J., Shastri, N. M., & Shah, N. M. (2020). Synthesis and characterization of pure
and strontium doped hydroxyapatite by sono-chemical assisted hydrothermal
technique. AIP Conference Proceedings, 2220. https://doi.org/10.1063/5.0001313

Joshi M, Bhattacharya A, & Ali W. (2008). Characterization techniques for


nanotechnology application in textiles. Indian J Fibre Text Res, 33,304–317.

Kaliva, M., & Vamvakaki, M. (2020). Nanomaterials characterization. In Polymer


Science and Nanotechnology (pp. 401–433). Elsevier. https://doi.org/10.1016/B978-
0-12-816806-6.00017-0

Kameoka, J., Orth, R., Yang, Y., Czaplewski, D., Mathers, R., Coates, G. W., &
Craighead, H. G. (2003). A scanning tip electrospinning source for deposition of
oriented nanofibres. Nanotechnology, 14(10), 1124–1129.
https://doi.org/10.1088/0957-4484/14/10/310

Karimi, M., Asefnejad, A., Aflaki, D., Surendar, A., Baharifar, H., Saber- Samandari, S.,
Khandan, A., Khan, A., & Toghraie, D. (2021). Fabrication of shapeless scaffolds
reinforced with baghdadite-magnetite nanoparticles using a 3D printer and freeze-
drying technique. Journal of Materials Research and Technology, 14, 3070–3079.
https://doi.org/10.1016/j.jmrt.2021.08.084

Keirouz, A., Fortunato, G., Zhang, M., Callanan, A., & Radacsi, N. (2019). Nozzle-free
electrospinning of Polyvinylpyrrolidone/Poly(glycerol sebacate) fibrous scaffolds for
63
skin tissue engineering applications. Medical Engineering & Physics, 71, 56–67.
https://doi.org/10.1016/j.medengphy.2019.06.009

Khalaji, S., Golshan Ebrahimi, N., & Hosseinkhani, H. (2021). Enhancement of


biocompatibility of PVA/HTCC blend polymer with collagen for skin care
application. International Journal of Polymeric Materials and Polymeric
Biomaterials, 70(7), 459–468.https://doi.org/10.1080/00914037.2020.1725761

Khalf, A., & Madihally, S. v. (2017). Recent advances in multiaxial electrospinning for
drug delivery. European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 112, 1–
17.
https://doi.org/10.1016/j.ejpb.2016.11.010

Khalid, H., & Chaudhry, A. A. (2019). Basics of hydroxyapatite-structure, synthesis,


properties, and clinical applications. In Handbook of Ionic Substituted
Hydroxyapatites (pp. 85–115). Elsevier. https://doi.org/10.1016/B978-0-08-102834-
6.00004-5

Kharazmi, A., Faraji, N., Mat Hussin, R., Saion, E., Yunus, W. M. M., & Behzad, K.
(2015). Structural, optical, opto-thermal and thermal properties of ZnS–PVA
nanofluids synthesized through a radiolytic approach. Beilstein Journal of
Nanotechnology, 6, 529–536. https://doi.org/10.3762/bjnano.6.55

Kim, G.-M., Simon, P., & Kim, J.-S. (2008). Electrospun PVA/HAp nanocomposite
nanofibers: biomimetics of mineralized hard tissues at a lower level of complexity.
Bioinspiration & Biomimetics, 3(4), 046003. https://doi.org/10.1088/1748-
3182/3/4/046003

Kim, H., Che, L., Ha, Y., & Ryu, W. (2014). Mechanically-reinforced electrospun
composite silk fibroin nanofibers containing hydroxyapatite nanoparticles. Materials
Science and Engineering: C, 40, 324–335.
https://doi.org/10.1016/j.msec.2014.04.012

Kim, S. J., Lee, C. K., & Kim, S. I. (2005). Effect of ionic salts on the processing of
poly(2-acrylamido-2-methyl-1-propane sulfonic acid) nanofibers. Journal of Applied
Polymer Science, 96(4), 1388–1393. https://doi.org/10.1002/app.21567

Klinkhammer, K., Seiler, N., Grafahrend, D., Gerardo-Nava, J., Mey, J., Brook, G. A.,
64
Möller, M., Dalton, P. D., & Klee, D. (2009). Deposition of Electrospun Fibers on
Reactive Substrates for In Vitro Investigations. Tissue Engineering Part C: Methods,
15(1), 77–85.
https://doi.org/10.1089/ten.tec.2008.0324

Kokubo, T. (1991). Bioactive glass ceramics: properties and applications. Biomaterials,


12(2), 155–163. https://doi.org/10.1016/0142- 9612(91)90194-F

Kokubo, T., & Takadama, H. (2006). How useful is SBF in predicting in vivo bone
bioactivity? Biomaterials, 27(15), 2907–2915.
https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2006.01.017

Kular, J., Tickner, J., Chim, S. M., & Xu, J. (2012). An overview of the regulation of bone
remodelling at the cellular level. Clinical Biochemistry, 45(12), 863–873.
https://doi.org/10.1016/j.clinbiochem.2012.03.021

Lamas, D. G., de Oliveira Neto, M., Kellermann, G., & Craievich, A. F. (2017). X-Ray
Diffraction and Scattering by Nanomaterials. In Nanocharacterization Techniques
(pp. 111–182). Elsevier. https://doi.org/10.1016/B978-0-323-49778-7.00005-9

Laonapakul, T., Sutthi, R., Chaikool, P., Talangkun, S., Boonma, A., &
Chindaprasirt, P. (2021). Calcium phosphate powders synthesized from CaCO3 and
CaO of natural origin using mechanical activation in different media combined with
solid-state interaction. Materials Science and Engineering: C, 118, 111333.
https://doi.org/10.1016/j.msec.2020.111333

LeGeros, R. Z. (1991). Calcium phosphates in oral biology and medicine. Monographs in


Oral Science, 15, 1–201.

Lei, Y., Xu, Z., Ke, Q., Yin, W., Chen, Y., Zhang, C., & Guo, Y. (2017).
Strontium hydroxyapatite/chitosan nanohybrid scaffolds with enhanced
osteoinductivity for bone tissue engineering. Materials Science and Engineering: C,
72, 134–142.
https://doi.org/10.1016/j.msec.2016.11.063

Li, Z. Y., Lam, W. M., Yang, C., Xu, B., Ni, G. X., Abbah, S. A., Cheung, K. M. C., Luk,
K. D. K., & Lu, W. W. (2007). Chemical composition, crystal size and lattice
structural changes after incorporation of strontium into biomimetic apatite.

65
Biomaterials, 28(7), 1452–1460. https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2006.11.001

Linh, N. T. B., Min, Y. K., Song, H.-Y., & Lee, B.-T. (2010). Fabrication of polyvinyl
alcohol/gelatin nanofiber composites and evaluation of their material properties.
Journal of Biomedical Materials Research Part B: Applied Biomaterials, 95B(1),
184–191. https://doi.org/10.1002/jbm.b.31701

Liu, G., Gu, Z., Hong, Y., Cheng, L., & Li, C. (2017). Electrospun starch nanofibers:
Recent advances, challenges, and strategies for potential pharmaceutical applications.
Journal of Controlled Release, 252, 95– 107.
https://doi.org/10.1016/j.jconrel.2017.03.016

Lopes, D., Martins-Cruz, C., Oliveira, M. B., & Mano, J. F. (2018). Bone physiology as
inspiration for tissue regenerative therapies. Biomaterials, 185, 240–275.
https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2018.09.028

Lowry, N., Brolly, M., Han, Y., McKillop, S., Meenan, B. J., & Boyd, A. R. (2018).
Synthesis and characterisation of nanophase hydroxyapatite co-substituted with
strontium and zinc. Ceramics International, 44(7), 7761–7770.
https://doi.org/10.1016/j.ceramint.2018.01.206

Ma, H., Feng, C., Chang, J., & Wu, C. (2018). 3D-printed bioceramic scaffolds: From
bone tissue engineering to tumor therapy. Acta Biomaterialia, 79, 37–59.
https://doi.org/10.1016/j.actbio.2018.08.026

Maccaferri, E., Cocchi, D., Mazzocchetti, L., Benelli, T., Brugo, T. M., Giorgini, L., &
Zucchelli, A. (2021). How Nanofibers Carry the Load: Toward a Universal and
Reliable Approach for Tensile Testing of Polymeric Nanofibrous Membranes.
Macromolecular Materials and Engineering, 306(7), 2100183.
https://doi.org/10.1002/mame.202100183

Mahabole, M. P., Bahir, M. M., Kalyankar, N. V., & Khairnar, R. S. (2012). Effect of
incubation in simulated body fluid on dielectric and photoluminescence properties of
nano-hydroxyapatite ceramic doped with strontium ions. Journal of Biomedical
Science and Engineering, 05(07), 396–405. https://doi.org/10.4236/jbise.2012.57050

Maji, K., & Pramanik, K. (2022). Electrospun scaffold for bone regeneration. International
Journal of Polymeric Materials and Polymeric Biomaterials, 71(11), 842–857.
66
https://doi.org/10.1080/00914037.2021.1915784

Marie, P. J., Ammann, P., Boivin, G., & Rey, C. (2001). Mechanisms of Action and
Therapeutic Potential of Strontium in Bone. Calcified Tissue International, 69(3),
121–129. https://doi.org/10.1007/s002230010055

Marinho, J. P. N., Neme, N. P., Matos, M. J. de S., Batista, R. J. C., Macedo, W. A. de A.,
Gastelois, P. L., Gomes, D. A., Rodrigues, M. A., Cipreste, M. F., & Sousa, E. M. B.
de. (2023). Nanostructured system based on hydroxyapatite and curcumin: A
promising candidate for osteosarcoma therapy. Ceramics International.
https://doi.org/10.1016/j.ceramint.2023.03.115

Mawuntu, V. J., & Yusuf, Y. (2019). Porous structure engineering of bioceramic


hydroxyapatite-based scaffolds using PVA, PVP, and PEO as polymeric porogens.
Journal of Asian Ceramic Societies, 7(2), 161–

169. https://doi.org/10.1080/21870764.2019.1595927

Medeiros, E. L. G., Braz, A. L., Porto, I. J., Menner, A., Bismarck, A., Boccaccini, A. R.,
Lepry, W. C., Nazhat, S. N., Medeiros, E. S., & Blaker, J. J. (2016). Porous Bioactive
Nanofibers via Cryogenic Solution Blow Spinning and Their Formation into 3D
Macroporous Scaffolds. ACS Biomaterials Science & Engineering, 2(9), 1442–1449.
https://doi.org/10.1021/acsbiomaterials.6b00072

Mirjalili, M., & Zohoori, S. (2016). Review for application of electrospinning and
electrospun nanofibers technology in textile industry. Journal of Nanostructure in
Chemistry, 6(3), 207–213.https://doi.org/10.1007/s40097-016-0189-y

Mohammadalipour, M., Karbasi, S., Behzad, T., Mohammadalipour, Z., & Zamani, M.
(2022). Effect of cellulose nanofibers on polyhydroxybutyrate electrospun scaffold
for bone tissue engineering applications. International Journal of Biological
Macromolecules, 220, 1402–1414. https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2022.09.118

Mohd Pu’ad, N. A. S., Abdul Haq, R. H., Mohd Noh, H., Abdullah, H. Z., Idris, M. I., &
Lee, T. C. (2020). Synthesis method of hydroxyapatite: A review. Materials Today:
Proceedings, 29, 233–239. https://doi.org/10.1016/j.matpr.2020.05.536

Mohd Pu’ad, N. A. S., Koshy, P., Abdullah, H. Z., Idris, M. I., & Lee, T. C. (2019).
Syntheses of hydroxyapatite from natural sources. Heliyon, 5(5), e01588.
67
https://doi.org/10.1016/j.heliyon.2019.e01588

Mondal, S., Hoang, G., Manivasagan, P., Moorthy, M. S., Nguyen, T. P., Vy Phan, T. T.,
Kim, H. H., Kim, M. H., Nam, S. Y., & Oh, J. (2018).
Nano-hydroxyapatite bioactive glass composite scaffold with enhanced
mechanical and biological performance for tissue engineering application. Ceramics
International, 44(13), 15735–15746. https://doi.org/10.1016/j.ceramint.2018.05.248

Moon, J. Y., Lee, J., Hwang, T. I., Park, C. H., & Kim, C. S. (2021). A
multifunctional, one-step gas foaming strategy for antimicrobial silver nanoparticle-
decorated 3D cellulose nanofiber scaffolds. Carbohydrate Polymers, 273, 118603.
https://doi.org/10.1016/j.carbpol.2021.118603

Moradi, S. L., Golchin, A., Hajishafieeha, Z., Khani, M., & Ardeshirylajimi,
A. (2018). Bone tissue engineering: Adult stem cells in combination with
electrospun nanofibrous scaffolds. Journal of Cellular Physiology, 233(10), 6509–
6522. https://doi.org/10.1002/jcp.26606

Moreira, M. P., de Almeida Soares, G. D., Dentzer, J., Anselme, K., de Sena, L. Á.,
Kuznetsov, A., & Santos, E. A. dos. (2016). Synthesis of magnesium- and manganese-
doped hydroxyapatite structures assisted by the simultaneous incorporation of
strontium. Materials Science and Engineering: C, 61, 736–743.
https://doi.org/10.1016/j.msec.2016.01.004

Motamedi, A. S., Mirzadeh, H., Hajiesmaeilbaigi, F., Bagheri-Khoulenjani, S., &


Shokrgozar, M. (2017). Effect of electrospinning parameters on morphological
properties of PVDF nanofibrous scaffolds. Progress in Biomaterials, 6(3), 113–123.
https://doi.org/10.1007/s40204-017-0071-

Mouw, J. K., Ou, G., & Weaver, V. M. (2014). Extracellular matrix assembly: a
multiscale deconstruction. Nature Reviews Molecular Cell Biology, 15(12), 771–785.
https://doi.org/10.1038/nrm3902

Munir, M. U., Salman, S., Ihsan, A., & Elsaman, T. (2022). Synthesis, Characterization,
Functionalization and Bio-Applications of Hydroxyapatite Nanomaterials: An
Overview. In International Journal of Nanomedicine (Vol. 17, pp. 1903–1925). Dove
Medical Press Ltd. https://doi.org/10.2147/IJN.S360670

68
Murugesan, V., Vaiyapuri, M., & Murugeasan, A. (2022). Fabrication and
characterization of strontium substituted chitosan modify hydroxyapatite for
biomedical applications. Inorganic Chemistry Communications, 142.
https://doi.org/10.1016/j.inoche.2022.109653

Nandiyanto, A. B. D., Oktiani, R., & Ragadhita, R. (2019). How to Read and Interpret
FTIR Spectroscope of Organic Material. Indonesian Journal of Science and
Technology, 4(1), 97.
https://doi.org/10.17509/ijost.v4i1.15806
i, G.-X., Yao, Z.-P., Huang, G.-T., Liu, W.-G., & Lu, W. W. (2011). The
effect of strontium incorporation in hydroxyapatite on osteoblasts in vitro. Journal of
Materials Science: Materials in Medicine, 22(4), 961– 967.
https://doi.org/10.1007/s10856-011-4264-0

Nie, W., Peng, C., Zhou, X., Chen, L., Wang, W., Zhang, Y., Ma, P. X., & He, C. (2017).
Three-dimensional porous scaffold by self-assembly of reduced graphene oxide and
nano-hydroxyapatite composites for bone tissue engineering. Carbon, 116, 325–337.
https://doi.org/10.1016/j.carbon.2017.02.013

Nirmala, R., Nam, K. T., Park, D. K., Woo-il, B., Navamathavan, R., & Kim, H. Y.
(2010). Structural, thermal, mechanical and bioactivity evaluation of silver-loaded
bovine bone hydroxyapatite grafted poly(ε-caprolactone) nanofibers via
electrospinning. Surface and Coatings Technology, 205(1), 174–181.
https://doi.org/10.1016/j.surfcoat.2010.06.027

Nommeots‐Nomm, A., Hupa, L., Rohanová, D., & Brauer, D. S. (2020). A review of
acellular immersion tests on bioactive glasses––influence of medium on ion release
and apatite formation. International Journal of Applied Glass Science, 11(3), 537–
551.
https://doi.org/10.1111/ijag.15006

Obada, D. O., Salami, K. A., Oyedeji, A. N., Fasanya, O. O., Suleiman, M. U., Ibisola, B.
A., Atta, A. Y., Dodoo-Arhin, D., Kuburi, L. S., Dauda, M., & Dauda, E. T. (2021).
Solution combustion synthesis of strontium- doped hydroxyapatite: Effect of
sintering and low compaction pressure on the mechanical properties and
physiological stability. Materials Letters, 304.

69
https://doi.org/10.1016/j.matlet.2021.130613

Omkaram, I., Sreekanth Chakradhar, R. P., & Lakshmana Rao, J. (2007). EPR, optical,
infrared and Raman studies of VO2+ ions in polyvinylalcohol films. Physica B:
Condensed Matter, 388(1–2), 318–325. https://doi.org/10.1016/j.physb.2006.06.134

O’Donnell, M. D., Fredholm, Y., de Rouffignac, A., & Hill, R. G. (2008). Structural
analysis of a series of strontium-substituted apatites. Acta Biomaterialia, 4(5), 1455–
1464.
https://doi.org/10.1016/j.actbio.2008.04.018

Oryan, A., Alidadi, S., Moshiri, A., & Maffulli, N. (2014). Bone regenerative medicine:
classic options, novel strategies, and future directions. Journal of Orthopaedic
Surgery and Research, 9(1), 18.
https://doi.org/10.1186/1749-799X-9-18
Öznergiz, E., Kiyak, Y. E., Kamasak, M. E., & Yildirim, I. (2014). Automated Nanofiber
Diameter Measurement in SEM Images Using a Robust Image Analysis Method.
Journal of Nanomaterials, 2014, 1–6. https://doi.org/10.1155/2014/738490

Pant, B., Park, M., & Park, S.-J. (2019). Drug Delivery Applications of Core- Sheath
Nanofibers Prepared by Coaxial Electrospinning: A Review. Pharmaceutics, 11(7),
305.
https://doi.org/10.3390/pharmaceutics11070305

Park, J. H., Karim, M. R., Kim, I. K., Cheong, I. W., Kim, J. W., Bae, D. G., Cho, J. W.,
& Yeum, J. H. (2010). Electrospinning fabrication and characterization of poly(vinyl
alcohol)/montmorillonite/silver hybrid nanofibers for antibacterial applications.
Colloid and Polymer Science, 288(1), 115–121. https://doi.org/10.1007/s00396-009-
2147-4

Park, J.-C., Ito, T., Kim, K.-O., Kim, K.-W., Kim, B.-S., Khil, M.-S., Kim, H.-Y., & Kim,
I.-S. (2010). Electrospun poly(vinyl alcohol) nanofibers: effects of degree of
hydrolysis and enhanced water stability. Polymer Journal, 42(3), 273–276.
https://doi.org/10.1038/pj.2009.340

Piccirillo, C., Pullar, R. C., Costa, E., Santos-Silva, A., E. Pintado, M. M., &
L. Castro, P. M. (2015). Hydroxyapatite-based materials of marine origin: A
bioactivity and sintering study. Materials Science and Engineering: C, 51, 309–315.
70
https://doi.org/10.1016/j.msec.2015.03.020

Pilmane, M., Salma-Ancane, K., Loca, D., Locs, J., & Berzina-Cimdina, L. (2017).
Strontium and strontium ranelate: Historical review of some of their functions.
Materials Science and Engineering: C, 78, 1222–1230.
https://doi.org/10.1016/j.msec.2017.05.042

Poormoghadam, D., Ghollasi, M., Babavalian, H., Tabasi, A., Shams, M., Goodarzi, V., &
Salimi, A. (2021). Modification and characterization of an innovative polyvinyl
alcohol-45S5 bioactive glass nanocomposite scaffold containing Donepezil
hydrochloride for bone tissue engineering applications. Materials Letters, 300,
130160. https://doi.org/10.1016/j.matlet.2021.130160

Pryjmaková, J., Kaimlová, M., Hubáček, T., Švorčík, V., & Siegel, J. (2020).
Nanostructured Materials for Artificial Tissue Replacements. International Journal
of Molecular Sciences, 21(7), 2521.
https://doi.org/10.3390/ijms21072521

Qu, H., Fu, H., Han, Z., & Sun, Y. (2019). Biomaterials for bone tissue engineering
scaffolds: A review. In RSC Advances (Vol. 9, Issue 45, pp. 26252–26262). Royal
Society of Chemistry.
https://doi.org/10.1039/c9ra05214c

Rampichová, M., Chvojka, J., Jenčová, V., Kubíková, T., Tonar, Z., Erben, J., Buzgo, M.,
Daňková, J., Litvinec, A., Vocetková, K., Plencner, M., Prosecká, E., Sovková, V.,
Lukášová, V., Králíčková, M., Lukáš, D., & Amler, E. (2018). The combination of
nanofibrous and microfibrous materials for enhancement of cell infiltration and in
vivo bone tissue formation. Biomedical Materials, 13(2), 025004.
https://doi.org/10.1088/1748-605X/aa9717

Ravi, N. D., Balu, R., & Sampath Kumar, T. S. (2012). Strontium- Substituted Calcium
Deficient Hydroxyapatite Nanoparticles: Synthesis, Characterization, and
Antibacterial Properties. Journal of the American Ceramic Society, 95(9), 2700–
2708. https://doi.org/10.1111/j.1551-2916.2012.05262.x

Reneker, D. H., Yarin, A. L., Fong, H., & Koombhongse, S. (2000). Bending instability of
electrically charged liquid jets of polymer solutions in electrospinning. Journal of
Applied Physics, 87(9), 4531–4547. https://doi.org/10.1063/1.373532

71
Ressler, A., Ivanković, T., Polak, B., Ivanišević, I., Kovačić, M., Urlić, I., Hussainova, I.,
& Ivanković, H. (2022). A multifunctional strontium/silver-co-substituted
hydroxyapatite derived from biogenic source as antibacterial biomaterial. Ceramics
International, 48(13), 18361–18373. https://doi.org/10.1016/j.ceramint.2022.03.095

Reyes-Gasga, J., Martínez-Piñeiro, E. L., Rodríguez-Álvarez, G., Tiznado-Orozco, G. E.,


García-García, R., & Brès, E. F. (2013). XRD and FTIR crystallinity indices in sound
human tooth enamel and synthetic hydroxyapatite. Materials Science and
Engineering: C, 33(8), 4568–4574. https://doi.org/10.1016/j.msec.2013.07.014

Rezvani, Z., Venugopal, J. R., Urbanska, A. M., Mills, D. K., Ramakrishna, S., &
Mozafari, M. (2016). A bird’s eye view on the use of electrospun nanofibrous
scaffolds for bone tissue engineering: Current state‐of‐the‐art, emerging directions
and future trends. Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine, 12(7),
2181–2200.https://doi.org/10.1016/j.nano.2016.05.014

Richard Sauerheber, & Bettina Heinz. (2016). Temperature Effects on Conductivity of


Seawater and Physiologic Saline, Mechanism and Significance. Chemical Sciences
Journal, 6(4). https://doi.org/10.4172/2150-3494.1000109

Ridwan, R., Prabowo, A. R., Muhayat, N., Putranto, T., & Sohn, J. M. (2020). Tensile
analysis and assessment of carbon and alloy steels using FE approach as an
idealization of material fractures under collision and grounding. Curved and Layered
Structures, 7(1), 188–198. https://doi.org/10.1515/cls-2020-0016

Rwei, S.-P., & Huang, C.-C. (2012). Electrospinning PVA solution-rheology and
morphology analyses. Fibers and Polymers, 13(1), 44–50.
https://doi.org/10.1007/s12221-012-0044-9

Sa, Y., Guo, Y., Feng, X., Wang, M., Li, P., Gao, Y., Yang, X., & Jiang, T. (2017). Are
different crystallinity-index-calculating methods of hydroxyapatite efficient and
consistent? New Journal of Chemistry, 41(13), 5723–5731.
https://doi.org/10.1039/C7NJ00803A

Saba, N., Jawaid, M., & Sultan, M. T. H. (2019). An overview of mechanical and physical
testing of composite materials. In Mechanical and Physical Testing of Biocomposites,
Fibre-Reinforced Composites and Hybrid Composites (pp. 1–12). Elsevier.

72
https://doi.org/10.1016/B978-0-08- 102292-4.00001-1

Sadat-Shojai, M., Khorasani, M.-T., Dinpanah-Khoshdargi, E., & Jamshidi,


A. (2013). Synthesis methods for nanosized hydroxyapatite with diverse structures.
Acta Biomaterialia, 9(8), 7591–7621.https://doi.org/10.1016/j.actbio.2013.04.012

Salame, P. H., Pawade, V. B., & Bhanvase, B. A. (2018). Characterization Tools and
Techniques for Nanomaterials. In Nanomaterials for Green Energy (pp. 83–111).
Elsevier. https://doi.org/10.1016/B978-0-12- 813731-4.00003-5

Salim, S. A., Loutfy, S. A., El-Fakharany, E. M., Taha, T. H., Hussien, Y., & Kamoun, E.
A. (2021). Influence of chitosan and hydroxyapatite incorporation on properties of
electrospun PVA/HA nanofibrous mats for bone tissue regeneration: Nanofibers
optimization and in-vitro assessment. Journal of Drug Delivery Science and
Technology, 62, 102417. https://doi.org/10.1016/j.jddst.2021.102417

Sankaran, K. K., Vasanthan, K. S., Krishnan, U. M., & Sethuraman, S.


(2014). Development and evaluation of axially aligned nanofibres for blood vessel
tissue engineering. Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine, 8(8),
640–651.
https://doi.org/10.1002/term.1566

Sari, M., Hening, P., Chotimah, Ana, I. D., & Yusuf, Y. (2021). Bioceramic
hydroxyapatite-based scaffold with a porous structure using honeycomb as a natural
polymeric Porogen for bone tissue engineering. Biomaterials Research, 25(1).
https://doi.org/10.1186/s40824-021-00203-z

Sari, M., & Yusuf, Y. (2018). Synthesis and characterization of hydroxyapatite based on
green mussel shells ( perna viridis ) with the variation of stirring time using the
precipitation method. IOP Conference Series: Materials Science and Engineering,
432, 012046. https://doi.org/10.1088/1757-899X/432/1/012046

Shaheen, M. Y. (2022). Nanocrystalline hydroxyapatite in periodontal bone regeneration:


A systematic review. The Saudi Dental Journal, 34(8), 647–660.
https://doi.org/10.1016/j.sdentj.2022.09.005

Sheikh, F. A., Barakat, N. A. M., Kanjwal, M. A., Park, S. J., Park, D. K., & Kim, H. Y.
(2010). Synthesis of poly(vinyl alcohol) (PVA) nanofibers incorporating

73
hydroxyapatite nanoparticles as future implant materials. Macromolecular Research,
18(1), 59–66. https://doi.org/10.1007/s13233-009-0111-2

Sikavitsas, V. I., Temenoff, J. S., & Mikos, A. G. (2001). Biomaterials and bone
mechanotransduction. Biomaterials, 22(19), 2581–2593.
https://doi.org/10.1016/S0142-9612(01)00002-3

Sill, T. J., & von Recum, H. A. (2008). Electrospinning: Applications in drug delivery and
tissue engineering. Biomaterials, 29(13), 1989–2006.
https://doi.org/10.1016/j.biomaterials.2008.01.011

Silva, L. M., Menezes, D. S., Narayanan, S., Shokuhfar, T., Shahbazian-Yassar, R.,
Dalmônico, G. M. L., Werckmann, J., Farina, M., & dos Santos, E. A. (2020).
Counterions present in syntheses induce the precipitation of two different populations
of Sr-containing hydroxyapatite crystals. Ceramics International, 46(4), 4502–4510.
https://doi.org/10.1016/j.ceramint.2019.10.177

Smith, L. A., & Ma, P. X. (2004). Nano-fibrous scaffolds for tissue engineering. Colloids
and Surfaces B: Biointerfaces, 39(3), 125–131.
https://doi.org/10.1016/j.colsurfb.2003.12.004

Soldate, P., & Fan, J. (2019). Controlled deposition of electrospun nanofibers by


electrohydrodynamic deflection. Journal of Applied Physics, 125(5), 054901.
https://doi.org/10.1063/1.5084284

Sossa, P. A. F., Giraldo, B. S., Garcia, B. C. G., Parra, E. R., & Arango, P. J.
A. (2018). Comparative study between natural and synthetic Hydroxyapatite:
structural, morphological and bioactivity properties. Matéria (Rio de Janeiro),23(4).
https://doi.org/10.1590/s1517-707620180004.0551

Standring, S. (2020). Gray’s anatomy: the anatomical basis of clinical practice, 42nd edn.
Elsevier.

Stipniece, L., Wilson, S., Curran, J. M., Chen, R., Salma-Ancane, K., Sharma, P. K.,
Meenan, B. J., & Boyd, A. R. (2021). Strontium substituted hydroxyapatite promotes
direct primary human osteoblast maturation. Ceramics International, 47(3), 3368–
3379. https://doi.org/10.1016/j.ceramint.2020.09.182

74
Sudirman, S., Karo Karo, A., Sukaryo, S. G., Adistiana, K. D., & Dahlan, K. (2020).
Synthesis of Nanofiber from Polyvinyl Alcohol (PVA)-Collagen Using
Electrospinning Methods. Jurnal Kimia Terapan Indonesia, 21(2), 55–65.
https://doi.org/10.14203/jkti.v21i2.428

Taha, M., Hassan, M., Essa, S., & Tartor, Y. (2013). Use of Fourier transform infrared
spectroscopy (FTIR) spectroscopy for rapid and accurate identification of Yeasts
isolated from human and animals. International Journal of Veterinary Science and
Medicine, 1(1), 15–20. https://doi.org/10.1016/j.ijvsm.2013.03.001

Tanaka, M., Aoki, K., Haniu, H., Kamanaka, T., Takizawa, T., Sobajima, A., Yoshida, K.,
Okamoto, M., Kato, H., & Saito, N. (2020). Applications of Carbon Nanotubes in
Bone Regenerative Medicine.
https://doi.org/10.3390/nano10040659

Tariverdian, T., Sefat, F., Gelinsky, M., & Mozafari, M. (2019). Scaffold for bone tissue
engineering. In Handbook of Tissue Engineering Scaffolds: Volume One (pp. 189–
209). Elsevier. https://doi.org/10.1016/B978-0- 08-102563-5.00010-1

Teixeira, M. A., Amorim, M. T. P., & Felgueiras, H. P. (2019). Poly(Vinyl Alcohol)-


Based Nanofibrous Electrospun Scaffolds for Tissue Engineering Applications.
Polymers, 12(1), 7.
https://doi.org/10.3390/polym12010007

Teo, W. E., Kotaki, M., Mo, X. M., & Ramakrishna, S. (2005). Porous tubular
structures with controlled fibre orientation using a modified electrospinning method.
Nanotechnology, 16(6), 918–924.
https://doi.org/10.1088/0957-4484/16/6/049

Terra, J., Dourado, E. R., Eon, J.-G., Ellis, D. E., Gonzalez, G., & Rossi, A.
M. (2009). The structure of strontium-doped hydroxyapatite: an experimental and
theoretical study. Phys. Chem. Chem. Phys., 11(3), 568–577.
https://doi.org/10.1039/B802841A

Teti, A. (2011). Bone Development: Overview of Bone Cells and Signaling. Current
Osteoporosis Reports, 9(4), 264–273.

https://doi.org/10.1007/s11914-011-0078-8

75
Theron, A., Zussman, E., & Yarin, A. L. (2001). Electrostatic field-assisted alignment of
electrospun nanofibres. Nanotechnology, 12(3), 384–390.
https://doi.org/10.1088/0957-4484/12/3/329

Theron, S. A., Yarin, A. L., Zussman, E., & Kroll, E. (2005). Multiple jets in
electrospinning: experiment and modeling. Polymer, 46(9), 2889–2899.
https://doi.org/10.1016/j.polymer.2005.01.054

Titus, D., James Jebaseelan Samuel, E., & Roopan, S. M. (2019). Nanoparticle
characterization techniques. In Green Synthesis, Characterization and Applications
of Nanoparticles (pp. 303–319). Elsevier. https://doi.org/10.1016/B978-0-08-102579-
6.00012-5

Verma, C., & Quraishi, M. A. (2022). Polyvinyl alcohol (PVA) as a biodegradable


polymeric anticorrosive material: A review on present advancements and future
directions. Corrosion Engineering, Scienceand Technology, 1–17.
https://doi.org/10.1080/1478422X.2022.2125621

Wang, J., Cai, N., Chan, V., Zeng, H., Shi, H., Xue, Y., & Yu, F. (2021). Antimicrobial
hydroxyapatite reinforced-polyelectrolyte complex nanofibers with long-term
controlled release activity for potential wound dressing application. Colloids and
Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects, 624, 126722.
https://doi.org/10.1016/j.colsurfa.2021.126722

Wang, W., & Yeung, K. W. K. (2017). Bone grafts and biomaterials substitutes for bone
defect repair: A review. In Bioactive Materials .KeAi Communications Co, 2(4),
224–247
https://doi.org/10.1016/j.bioactmat.2017.05.007

Wu, Y., Hench, L. L., Du, J., Choy, K.-L., & Guo, J. (2005). Preparation of
Hydroxyapatite Fibers by Electrospinning Technique. Journal of the American
Ceramic Society, 87(10), 1988–1991.
https://doi.org/10.1111/j.1151-2916.2004.tb06351.x

Xie, X., Chen, Y., Wang, X., Xu, X., Shen, Y., Khan, A. ur R., Aldalbahi, A., Fetz, A. E.,
Bowlin, G. L., El-Newehy, M., & Mo, X. (2020). Electrospinning nanofiber
scaffolds for soft and hard tissue regeneration. Journal of Materials Science &

76
Technology, 59, 243–261. https://doi.org/10.1016/j.jmst.2020.04.037

Xue, J., Wu, T., Dai, Y., & Xia, Y. (2019). Electrospinning and Electrospun Nanofibers:
Methods, Materials, and Applications. Chemical Reviews, 119(8), 5298–5415.
https://doi.org/10.1021/acs.chemrev.8b00593

Yang, C., Huan, Z., Wang, X., Wu, C., & Chang, J. (2018). 3D Printed Fe Scaffolds with
HA Nanocoating for Bone Regeneration. ACS Biomaterials Science & Engineering,
4(2), 608–616.
https://doi.org/10.1021/acsbiomaterials.7b00885

Yaszemski, M. (1996). Evolution of bone transplantation: molecular, cellular and tissue


strategies to engineer human bone. Biomaterials, 17(2), 175– 185.
https://doi.org/10.1016/0142-9612(96)85762-0

Ye, M., Mohanty, P., & Ghosh, G. (2014). Morphology and properties of poly vinyl
alcohol (PVA) scaffolds: Impact of process variables. Materials Science and
Engineering: C, 42, 289–294.
https://doi.org/10.1016/j.msec.2014.05.029

Zachariades, A. E., Porter, R. S., Doshi, J., Srinivasan, G., & Reneker, D. H. (1995). High
Modulus Polymers. A Novel Electrospinning Process. Polymer News, 20, 206–207.

Zhang, D., & Chang, J. (2007). Patterning of Electrospun Fibers Using Electroconductive
Templates. Advanced Materials, 19(21), 3664–3667.
https://doi.org/10.1002/adma.200700896

Zhang, Y. S., & Xia, Y. (2015). Multiple facets for extracellular matrix mimicking in
regenerative medicine. Nanomedicine, 10(5), 689–692.
https://doi.org/10.2217/nnm.15.10

Zucchelli, A., Fabiani, D., Gualandi, C., & Focarete, M. L. (2009). An innovative and
versatile approach to design highly porous, patterned, nanofibrous polymeric materials.
Journal of Materials Science, 44(18), 4969–4975. https://doi.org/10.1007/s10853-009-
3759-2

77
LAMPIRAN
1. Stoikiometri
a. Perhitungan stoikiometri untuk sintesis HAp
HAp memiliki persamaan reaksi sebagai berikut:
10𝐶𝑎(𝑂𝐻)2 + 6(𝑁𝐻4 )2 𝐻𝑃𝑂4 → 𝐶𝑎10 (𝑃𝑂4 )6 (𝑂𝐻)2 + 12𝑁𝐻3 + 18𝐻2 𝑂
Berdasarkan reaksi tersebut, diperlukan larutan10 M 𝐶𝑎(𝑂𝐻)2 dan 6
𝑛
M(𝑁𝐻4 )2 𝐻𝑃𝑂4 . Molaritas memiliki rumus 𝑀 = 𝑉 . Volume pelarut dapat

diabaikan karena menggunakan volume yang sama yaitu 70 ml, sehingga


berikut perhitungan untuk masing-masing mol (n):

𝑀𝑟 𝐶𝑎(𝑂𝐻)2 = 74
𝑀𝑟 (𝑁𝐻4 )2 𝐻𝑃𝑂4 = 132
𝑚
𝑛=
𝑀𝑟
𝑛𝐶𝑎(𝑂𝐻)2
𝑀𝐶𝑎(𝑂𝐻)2 ⁄𝑉
=𝑛
𝑀(𝑁𝐻4 )2 𝐻𝑃𝑂4 (𝑁𝐻4 )2𝐻𝑃𝑂4
⁄𝑉
𝑀𝐶𝑎(𝑂𝐻)2 𝑛𝐶𝑎(𝑂𝐻)2
=
𝑀(𝑁𝐻4 )2 𝐻𝑃𝑂4 𝑛(𝑁𝐻4 )2𝐻𝑃𝑂4
𝑚𝐶𝑎(𝑂𝐻)2
𝑀𝐶𝑎(𝑂𝐻)2 ⁄𝑀𝑟
𝐶𝑎(𝑂𝐻)2
=𝑚
𝑀(𝑁𝐻4 )2 𝐻𝑃𝑂4 (𝑁𝐻 )
4 2 𝐻𝑃𝑂4
⁄𝑀𝑟
(𝑁𝐻4 )2 𝐻𝑃𝑂4
Jika 𝑚𝐶𝑎(𝑂𝐻)2 yang akan digunakan adalah 3 gram, maka diperoleh
𝑚(𝑁𝐻4 )2𝐻𝑃𝑂4 :

10 3⁄
=𝑚 74
6 (𝑁𝐻4 )2 𝐻𝑃𝑂4
⁄132
3 × 6 × 132
𝑚(𝑁𝐻4 )2𝐻𝑃𝑂4 =
74 × 10
𝑚(𝑁𝐻4 )2𝐻𝑃𝑂4 = 3,2108 𝑔
b. Perhitungan stoikiometri untuk sintesis SrHAp
SrHAp memiliki persamaan reaksi sebagai berikut:
9𝐶𝑎(𝑂𝐻)2 + 𝑆𝑟(𝑁𝑂3 )2 + 6(𝑁𝐻4 )2 𝐻𝑃𝑂4
→ 𝐶𝑎9 𝑆𝑟(𝑃𝑂4 )6 (𝑂𝐻)2 + 2𝑁𝐻4 𝑁𝑂3 + 10𝑁𝐻4 + 18𝐻2 𝑂
Berdasarkan reaksi tersebut, jumlah Sr untuk substitusi sebanyak 1 at%.
Maka perhitungan perbandingan massa diperoleh melalui persamaan

78
berikut.

𝑀𝑟 𝑆𝑟(𝑁𝑂3 )2 = 211,63
𝑛𝐶𝑎(𝑂𝐻)2 : 𝑛𝑆𝑟(𝑁𝑂3 )2 : 𝑛(𝑁𝐻4 )2 𝐻𝑃𝑂4
𝑚𝐶𝑎(𝑂𝐻)2 𝑚𝑆𝑟(𝑁𝑂3 )2 𝑚(𝑁𝐻4 )2 𝐻𝑃𝑂4
= : :
𝑀𝑅𝐶𝑎(𝑂𝐻)2 𝑀𝑟𝑆𝑟(𝑁𝑂3 )2 𝑀𝑟(𝑁𝐻4 )2𝐻𝑃𝑂4

𝑚𝐶𝑎(𝑂𝐻)2 𝑚𝑆𝑟(𝑁𝑂3 )2 𝑚(𝑁𝐻4 )2 𝐻𝑃𝑂4


9: 1: 6 = : :
74 211,63 132
Jika 𝑚𝑆𝑟(𝑁𝑂3 )2 yang akan digunakan adalah 1 gram, maka diperoleh
𝑚𝐶𝑎(𝑂𝐻)2 dan 𝑚(𝑁𝐻4 )2 𝐻𝑃𝑂4 :
1 × 9 × 74
𝑚𝐶𝑎(𝑂𝐻)2 =
211,63
𝑚𝐶𝑎(𝑂𝐻)2 = 3,147 𝑔
1 × 6 × 132
𝑚(𝑁𝐻4 )2𝐻𝑃𝑂4 =
211,63
𝑚(𝑁𝐻4 )2𝐻𝑃𝑂4 = 3,743 𝑔
c. Pembuatan larutan PVA 10%
Massa PVA untuk sintesis larutan PVA 10% dengan volume aquades 20
ml:
10
𝑚𝑃𝑉𝐴 = × 20
100
𝑚𝑃𝑉𝐴 = 2 𝑔

d. Komposisi kandungan HAp dan SrHAp pada scaffold nanofiber


Massa PVA yang digunakan adalah 2 gram. Kandungan HAp dan SrHAp
dihitung dari berat total massa polimer.
5
𝑚𝐻𝐴𝑝 = × 20
100
𝑚𝐻𝐴𝑝 = 1 𝑔
5
𝑚𝑆𝑟𝐻𝐴𝑝 5% = × 20
100
𝑚𝑆𝑟𝐻𝐴𝑝 5% = 1 𝑔
10
𝑚𝑆𝑟𝐻𝐴𝑝 10% = × 20
100
𝑚𝑆𝑟𝐻𝐴𝑝 10% = 2 𝑔
15
𝑚𝑆𝑟𝐻𝐴𝑝 15% = × 20
100
𝑚𝑆𝑟𝐻𝐴𝑝 15% = 3 𝑔

79
2. Analisis XRD
a. Perhitungan kristalinitas HAp
𝑉112⁄
300
𝑋𝑐 = (1 − ) × 100%
𝐼300
77,6
𝑋𝑐 = (1 − ) × 100%
871,3
𝑋𝑐 = 0,911 × 100%
𝑋𝑐 = 91,1%
b. Perhitungan kristalinitas SrHAp
𝑉112⁄
300
𝑋𝑐 = (1 − ) × 100%
𝐼300
318
𝑋𝑐 = (1 − ) × 100%
900
𝑋𝑐 = 0,646 × 100%
𝑋𝑐 = 64,6%
c. Perhitungan ukuran kristal HAp
k 𝜆 (nm) FWHM 2𝜃(°) 𝜃(°) 𝜃(𝑟𝑎𝑑) 𝜀
0,9 0,15406 0,19472 25,72741 12,863705 0,224514006 39,77458189
0,9 0,15406 0,19769 33,88724 16,94362 0,295721956 38,44121224
0,9 0,15406 0,20803 31,59592 15,79796 0,275726417 36,74573304
0,9 0,15406 0,21052 32,01643 16,008215 0,279396059 36,27316496
0,9 0,15406 0,23958 32,71553 16,357765 0,285496858 31,81700811
Rata-rata 36,61034005

Ralat 3,019626168

80
d. Perhitungan ukuran kristal HAp
k 𝜆 (nm) FWHM 2𝜃(°) 𝜃(°) 𝜃(𝑟𝑎𝑑) S
0,9 0,15406 0,29537 25,59895 12,799475 0,223392981 26,22772938
0,9 0,15406 0,23968 31,52591 15,762955 0,275115465 31,89892685
0,9 0,15406 0,22064 31,90484 15,95242 0,278422253 34,61909227
0,9 0,15406 0,2291 32,66555 16,332775 0,2850607 33,27670856
0,9 0,15406 0,19599 33,77806 15,88 0,277158285 30,56444066
Rata-rata 31,31737954

Ralat 3,222961763

e. Perhitungan parameter kisi kristal HAp dan HAp


hkl 2𝜃(°) 𝑑2 h2 +hk+k2 𝑙 2 a c
002 25,72741 11,962 - 4 - 6,917

300 32,71553 7,475 9 - 9,471 -

f. Perhitungan parameter kisi kristal HAp dan SrHAp


hkl 2𝜃(°) 𝑑2 h2 +hk+k2 𝑙 2 a c
002 25,59895 12,080 - 4 - 6,951

300 32,66555 7,497 9 - 9,485 -

g. Perhitungan microstrain HAp


FWHM 2𝜃(°) 𝜃(°) 𝜃(𝑟𝑎𝑑) 𝑡𝑎𝑛𝜃 Microstrain(𝜀)
0,19472 25,59895 12,863705 0,224514006 0,228363975 0,000194024
0,19769 31,52591 16,94362 0,295721956 0,304655011 0,000262791
0,20803 31,90484 15,79796 0,275726417 0,282933022 0,000256819
0,21052 32,66555 16,008215 0,279396059 0,28690056 0,000263537
0,23958 33,77806 16,357765 0,285496858 0,293515187 0,00030683
Rata-rata 0,0002568

Ralat 0,0000403

81
h. Perhitungan microstrain HAp
FWHM 2𝜃(°) 𝜃(°) 𝜃(𝑟𝑎𝑑) 𝑡𝑎𝑛𝜃 Microstrain(𝜀)
0,29537 25,72741 12,799475 0,223392981 0,22718479 0,000292795
0,23968 33,88724 15,762955 0,275115465 0,282273276 0,000295202
0,22064 31,59592 15,95242 0,278422253 0,285846892 0,000275192
0,2291 32,01643 16,332775 0,2850607 0,293041514 0,000292935
0,19599 32,71553 15,88 0,277158285 0,303614106
0,000259641
Rata-rata
0,000289031
Ralat
0,000009291
3. Analisis SEM
a. Data hasil pengukuran diameter scaffold nanofiber
PVA/SrHAp PVA/SrHAp 10 PVA/SrHAp
PVA PVA/HAp 5% % 15%
382,426 375,064 187,592 147,158 143,372
375,033 225,865 250,501 168,16 99,153
362,112 198,402 174,777 121,335 126,491
283,989 175,359 172,755 256,125 123,378
382,655 189,772 156,518 255,539 139,014
481,274 343,031 180,986 254,951 175,855
280,179 358,768 158,193 251,794 60,467
320,624 231,331 172,537 250,599 127,598
286,356 172,553 205,472 245,153 202,562
431,045 257,961 178,823 243,516 95,525
340,074 246,913 131,125 243,516 112,805
469,574 264,537 148,959 238,537 89,443
476,707 247,296 215,838 235,637 72,111
441,022 222,807 260,521 228,09 87,321
379,473 185,904 195,134 228,035 109,659
367,696 251,064 204,492 225 91,788
301,846 190,776 234,83 224,722 82,798
449,358 279,059 155,373 223,886 101,598
316,403 168,879 229,855 220,057 106,354
229,226 206,826 141,783 217,313 95,51
485,232 182,316 217,101 215,87 140,159
296,816 233,036 155,553 210,238 114,552
265,707 354,183 160,633 210,238 100,775
332,641 179,026 175,922 206,155 157,233
460,136 253,489 197,626 203,961 140,673
442,945 189,911 143,465 202,485 136,015
431,422 178,057 112,027 202,485 134,371
284,429 230,679 206,568 200,25 107,6
467,467 302,451 213,029 192,354 100

82
422,404 203,741 125,551 191,638 158,824
300,832 199,871 92,38 190,263 111,803
376,198 235,82 381,552 187,883 115,974
349,607 180,144 197,372 186,815 122,984
229,837 224,813 228,712 186,011 125,1
455,11 300,007 269,798 182,003 112,805
291,076 249,877 347,827 180,278 107,005
376,239 184,065 242,145 180,278 93,005
303,727 244,027 272,206 178,885 97,082
346,013 325,373 224,055 177,2 127,475
340,771 269,901 221,35 174,642 167,705
342,345 368,917 215,838 174,642 120,934
423,792 184,458 172,391 173,277 85,44
254,056 176,484 277,141 170,88 115,434
505,594 282,246 237,54 170,294 87,321
282,179 239,831 189,058 170 140,801
325,73 199,76 347,827 168,984 153,379
325,576 260,521 225,172 168,077 181,797
303,727 229,491 282,345 167,631 109,202
215,058 160,355 177,273 166,433 137,295
396,232 272,493 277,864 166,433 154,434
304,138 343,307 309,488 166,433 177,341
383,275 315,768 253,489 166,208 130
293,002 214,724 253,687 165,529 104,403
218,289 262,356 167,966 161,555 142,127
219,317 241,407 280,963 161,245 121,655
278,767 197,372 189,654 158,114 116,619
197,343 209,345 238,016 158,114 125,3
221,635 166,767 233,329 156,702 111,803
317,578 230,34 216,361 155,242 130
224,004 236,222 192,739 152,315 136,015
677,422 222,581 243,798 151,822 113,137
698,57 288,578 170,341 150,333 116,619
532,353 175,724 194,554 150,333 155,242
327,567 287,552 212,557 150,083 98,489
463,249 293,807 234,777 150 172,047
620,322 183,974 234,777 148,661 177,2
313,847 192,014 224,055 148,661 126,491
370 245,485 208,504 147,054 202,485
540,093 164,477 139,203 144,222 240,416
500,1 200,416 182,849 143,178 130
336,006 305,241 182,849 143,178 107,703
320,156 270,727 301,435 142,127 136,015
400 240,69 214,028 142,127 156,525
187,883 224,055 190,117 141,421 100,499
370,135 251,301 263,946 140,357 100
463,923 244,004 161,568 139,284 194,165

83
323,149 212,557 211,195 139,284 243,516
326,535 242,352 150,384 137,931 134,164
330,038 260,521 147,944 137,154 89,443
314,841 251,301 244,466 134,629 172,627
260,768 328,682 244,723 134,536 151,327
283,064 234,563 155,634 133,417 138,924
327,3 277,864 181,54 132,382 162,788
571,948 257,614 113,585 131,529 200
475,026 335,933 247,477 130,384 178,045
295,466 234,563 215,139 128,062 122,066
341,321 251,101 234,563 127,598 148,661
366,742 260,714 279,485 125,3 134,164
370,54 351,023 177,556 125,122 145,602
286,007 301,268 190,381 124,197 136,015
247,588 209,824 231,331 123,794 156,205
332,415 283,587 220,668 121,655 181,108
320,156 372,902 200,401 119,269 189,737
446,542 267,368 191,433 116,619 156,205
372,022 361,972 212,321 116,619 189,737
300,832 272,575 221,803 115,569 150
318,953 300,977 206,568 110,807 147,648
365,821 304,336 278,406 109,202 162,788
372,156 247,527 256,638 106,301 113,137
267,675 269,099 275,141 105,03 145,602
b. Data hasil perhitungan rata-rata diameter scaffold nanofiber
PVA/SrHAp PVA/SrHAp PVA/SrHAp
PVA PVA/HAP
5% 10% 15%
Rata-
359,85849 247,85967 211,27217 169,56394 133,71784
rata
Ralat 98,26991 54,19999 51,49678 40,27203 34,65702

4. Analisis uji tarik


a. Perhitungan modulus Young
Sampel Stress Elongasi Strain 𝜖 𝜖̅ ∆𝜖
1 0,126 1,584 0,01584 7,954545
PVA 7,557282 0,561815
2 0,149 2,081 0,02081 7,160019
1 0,333 2,472 0,02472 13,47087
HA 11,64615 2,580547
2 0,121 1,232 0,01232 9,821429
1 0,235 3,492 0,03492 6,729668
5 11,06962 6,137618
2 0,19 1,233 0,01233 15,40957
1 0,36 2,971 0,02971 12,11713
10 9,435295 3,79269
2 0,166 2,458 0,02458 6,753458
1 0,208 2,803 0,02803 7,420621
15 8,389686 1,370466
2 0,27 2,885 0,02885 9,358752

84
85

Anda mungkin juga menyukai