MAKALAH PRA SIDANG

Judul Penelitian : Aktivitas Antioksidan Dan Sitotoksik Ekstrak Buah

Parijoto (Medinilla speciosa Blume) Terhadap Sel Kanker
Galur MCF-7 Secara In Vitro
Pembimbing : 1. Dr. Tiana Milanda, M.Si., Apt.
2. Dr. Ade Zuhrotun, M.Si., Apt.
Nama/NPM : Rizky Azizah/260110140101
 ABSTRAK

Kanker merupakan kelompok penyakit yang disebabkan oleh pertumbuhan dan penyebaran
sel tubuh secara tidak normal. Salah satu penyebab penyakit kanker adalah radikal bebas
yang mengakibatkan stress oksidatif pada manusia. Antioksidan adalah senyawa yang dapat
mengurangi stress oksidatif. Aktivitas antioksidan erat hubungannya dengan aktivitas
antikanker. Antioksidan sintetik yang sudah banyak digunakan memiliki beberapa
kekurangan seperti efek samping jangka panjang. Parijoto (Medinilla speciosa Blume)
merupakan salah satu tanaman khas di Indonesia yang memiliki aktivitas kemopreventif
terhadap sel kanker T47D. Penelitian ini bertujuan untuk melihat aktivitas antioksidan dan
sitotoksisitas terhadap sel kanker galur MCF-7 dari ekstrak buah parijoto secara in vitro.
Pengujian aktivitas antioksidan dilakukan dengan radikal 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH).
Ekstrak metanol memiliki aktivitas antioksidan terbaik dengan nilai IC50 terendah sebesar
26,6 µg/mL. Uji sitotoksisitas terhadap sel kanker galur MCF-7 menggunakan metode Water
Soluble Tetrazolium (WST) Assay. Dari hasil pengujian sitotoksisitas didapat hasil bahwa
ekstrak metanol memiliki sitotoksisitas terbaik dengan nilai IC50 255,75 µg/mL. Berdasarkan
hasil penelitian yang telah dilakukan didapatkan kesimpulan bahwa ekstrak metanol buah
parijoto memiliki aktivitas antioksidan dan antikanker terbaik sebagai agen sitotoksik.

Kata kunci : Medinilla speciosa, antioksidan, sitotoksisitas, DPPH, WST Assay.

ABSTRACT

Cancer is a group of diseases caused by the body's growth and spread of abnormal cells.
Free radicals is one among many causes of cancer by causing oxidative stress in humans.
Antioxidants are compounds that can reduce oxidative stress. Antioxidant activity is closely
related to anticancer activity. Synthetic antioxidant is widely used but have some
disadvantages, such as long-term side effects. Parijoto (Medinilla speciosa Blume) is one of
the typical plants from Indonesia that has chemopreventive activity against T47D cancer
cells. This study aims to investigate in vitro antioxidant activity and cytotoxicity against
MCF-7 strain cancer cells from parijoto fruit extract. Antioxidant activity testing was
performed with radical 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and gave result that methanol
extract showed the best antioxidant activity with the lowest IC50 value of 26,6 mg / L. Testing
of cytotoxicity against MCF-7 strain cancer cells using Water Soluble Tetrazolium (WST)
Assay method gave result of cytotoxicity test result showed that methanol extract had the best
cytotoxicity with IC50 value 255,75 mg / L. Based on the results of research that has been
done to get the conclusion that the extract methanol parijoto fruit has the best antioxidant
and anticancer activity as chemopreventive agent.

Keywords : Medinilla speciosa, antioxidant, cytotoxicity, DPPH, WST Assay

PENDAHULUAN
Penyakit kanker merupakan salah
satu penyebab kematian utama di dunia
(Cancer Research UK, 2012). Prevalensi
kanker pada semua umur di masyrakat
Indonesia pada tahun 2013 tercatat
sebesar 1,4% atau sekitar 347.792 orang.
Menurut International Agency for
Research on Cancer (IARC), kasus
penyakit kanker payudara di Indonesia
mencapai 0,05% kasus dari total
penderita kanker (IARC, 2013).
Terapi kanker umumnya berupa
kombinasi cara terapi untuk menghambat
penyebaran dan pertumbuhan sel kanker.
Saat ini pembedahan, radiasi, dan
kemoterapi merupakan pilihan terapi
untuk kanker. Gabungan terapi ini bersifat
sangat toksik dan memiliki banyak efek
samping, sehingga mengganggu kualitas
hidup dan berbahaya bagi pasien
(Malcolm, 2003).
Harvey dan Missalidis (2008)
menyatakan bahwa senyawa antioksidan
dan antikanker dari bahan alam mampu
memperbaiki sel-sel, jaringan dan organ
tubuh yang rusak, dengan cara
meningkatkan sistem imunitas tubuh
manusia. Pada penggunaan yang tepat,
senyawa-senyawa alami ini tidak
menimbulkan efek samping, sehingga
aman digunakan (Rahmawati, et al., 2008).
Oleh karena itu, sudah banyak penelitian
yang dilakukan untuk mencari obat
antikanker yang efektif dan aman yang
berasal dari tanaman.
Salah satu tanaman yang
berpotensi untuk dijadikan sebagai
sumber antikanker adalah tanaman
parijoto terutama bagian buahnya.
Berdasarkan penelitian Wachidah (2013)
tumbuhan parijoto memiliki aktivitas
antioksidan selain itu berdasarkan
penelitian yang telah dilakukan oleh
Tussanti & Johan (2014) ekstrak etanol
buah parijoto memiliki sitotoksisitas
moderat terhadap sel kanker payudara
T47D.
Berdasarkan penelitian tersebut
maka, dilakukan penelitian untuk melihat
aktivitas ekstrak buah parijoto yang
berpotensi sebagai antioksidan dan
antikanker dari esktrak n-heksan, ekstrak
etil asetat dan ekstrak metanol buah
terhadap sel kanker MCF-7 dan
menggunakan metode DPPH dan WST
Assay sebagai pemandu.
METODE PENELITIAN
Alat
Alat yang digunakan dalam
penelitian ini adalah, spektrofotometer
Tecan Infinite M200 PRO Multi-Detection
Microplate Reader, inkubator
karbondioksida, maserator, mikropipet
SERANA®, ZEISS Axio Vert.A1 Inverted
Microscope, 96-well plate, microplate
reader (Epoch Biotech®), 96-wells plate
(NES®), rotary evaporator (IKA® HB 10),
lampu UV λ366 dan λ 254 (Camag UV-
Bertache), neraca analitik, penangas air
(Memmert®), rotary evaporator,
sentrifugasi, sonikator, tabung conical
steril, tissue culture flask, dan alat-alat
gelas yang umum digunakan di
Laboratorium Farmasi Bahan Alam,
Laboratorium Kultur Sel dan Laboratorium
Analisis Farmasi Universitas Padjadjaran.
Bahan
Bahan tumbuhan yang digunakan
dalam penelitian ini adalah buah Parijoto
(Medinilla speciosa Blume) dan diperoleh
dari Gunung Muria, Kudus, Jawa Tengah.
Sedangkan untuk bahan kimia yang
digunakan adalah air suling, amil alkohol,
asam klorida (Merck), besi (III) klorida
(Merck), kloroform (Merck), etil asetat, n-
heksan, metanol PA (Merck), etanol 70%,
serbuk magnesium (Bratachem), natrium
asetat, kalium hidroksida 5%, pereaksi
Dragendorf (Bratachem), pereaksi
Liebermann-Bouchard (Bratachem),
pereaksi Mayer (Bratachem), vanilin sulat
(Bratachem), ammonia 10%, pereaksi
DPPH (Sigma), troloks (Tokyo Chemical
Industry), media sel Dulbecco’s Modified
Eagle’s Medium (DMEM) (Nacalai
Tesque), Dimetil-sulfoksida (Merck),
Phosphate Buffer Salina (PBS) (Gibco®),
Penicillin-Streptomycin (Sigma), Fetal
Bovine Serum (FBS) (Gibco®), Trypsin
Replacement TripLE™ Express (Gibco®),
Cell Counting Kit-8 (Dojindo).
Metode
Pengumpulan, Pengolahan, dan
Determinasi Bahan
Bahan tumbuhan yang digunakan
adalah simplisia buah parijoto (Medinilla
speciosa Blume) yang diperoleh dari
Gunung Muria, Kudus, Jawa Tengah.
Simplisia buah parijoto dirajang secara
halus sehingga diperoleh serbuk yang siap
diekstraksi. Buah parijoto dideterminasi di
Laboratorium Taksonomi, Jurusan Biologi,
Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam, Universitas
Padjadjaran.
Ekstraksi
Ekstraksi dilakukan dengan cara
maserasi bertingkat menggunakan pelarut
n-heksan, etil asetat dan metanol secara
berurutan. Ekstraksi dilakukan hingga
didapatkan maserat bening. Maserat yang
didapat dari tiap maserasi dikentalkan
menggunakan rotary evaporator hingga
diperoleh ekstrak kental.
Pengujian Antioksidan Ekstrak dengan
metode DPPH
Larutan ekstrak dan troloks
masing-masing dimasukan ke dalam well
sebanyak 10 μL dan ditambahkan dengan
190 μL larutan DPPH. Plat ditutup dan
diguncang dengan lembut, kemudian
disimpan pada ruang gelap dengan suhu
kamar selama 30 menit. Pengukuran
absorbansi dilakukan pada panjang
gelombang yang telah ditentukan dan
diukur terhadap metanol sebagai blanko,
menggunakan microplate reader secara
triplo. Setelah didiamkan pada temperatur
kamar selama 30 menit, sisa DPPH
ditentukan secara spektrofoto metri pada
panjang gelombang 517 nm. Pengujian
larutan DPPH yang tidak mengandung
bahan uji) serta kontrol positif troloks.
Aktivitas penangkap radikal DPPH(%)
dihitung dengan rumus berikut:
Pengujian Sitotoksisitas Ekstrak dengan
Metode WST Assay
Sel diambil dari tangki nitrogen
cair dan dicairkan di atas penangas air
37oC. Sel kemudian dipindahkan ke dalam
tabung conical steril yang berisi medium
DMEM dan disentrifugasi selama 5 menit.
Setelah disentrifugasi, supernatant dibuang
dan pelet ditambahkan 1 mL medium
pertumbuhan berisi 20% bovine serum dan
dilakukan resuspensi perlahan. Kemudian
dimasukkan ke dalam 3-4 tissue culture
flask kecil. Berikutnya dilakukan inkubasi
pada suhu 37oC selama 24 jam. Setelah 24
jam, medium diganti hingga konfluen dan
jumlahnya cukup untuk penelitian,
dilakukan penggantian medium dengan
DMEM dan sel dilepaskan menggunakan
trypsin.
Kemudian larutan dipindahkan ke
dalam tabung conical steril dan
ditambahkan DMEM hingga 10 mL.
Berikutnya dilakukan sentrifugasi kembali
dan sel dicuci 2 kali dengan medium yang
sama. Jumlah sel yang telah sesuai
jumlahnya siap digunakan untuk
pengujian.
Setelah dibuat larutan stock dengan
konsentrasi 4000 µg/mL, dibuat
pengenceran bertingkat hingga diperoleh
konsentrasi pengujian 1.000 µg/mL; 500
µg/mL; 250 µg/mL; 125 µg/mL; 62,5
µg/mL; 31,25 µg/mL; 15,625 µg/mL; dan
7,8125 µg/mL Setelah itu, masing-masing
konsentrasi dimasukkan pada well plate
yang telah berisi medium DMEM dan sel
kanker payudara MCF-7. Kemudian well
plate diinkubasi dalam suhu 37oC selama
24 jam.
Setelah 24 jam, ditambahkan reagen
WST. Well plate kemudian diinkubasi
kembali selama 2 jam, kemudian
ditambahkan pereaksi stopper (asam
klorida 0,1N) dan dilakukan penghitungan
jumlah sel menggunakan microtiter plate
reader.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Simplisia buah parijoto kering
sebanyak 751,10 gram diekstraksi dengan
metode maserasi bertingkat menggunakan
pelarut n-heksan, etil asetat dan metanol.
Maserasi dilakukan selama 5x24 jam
dengan pergantian pelarut setiap 24 jam
agar proses penyarian lebih optimal.
Ekstrak n-heksan dan etil asetat yang
dihasilkan dari maserasi berupa massa cair
berwarna hijau-kehitaman sedangkan
ekstrak metanol yang didapatkan berupa
massa cair berwarna merah-kecoklatan.
Ekstrak cair yang diperoleh dipekatkan
menggunakan rotary evaporator pada
suhu 50oC dengan kecepatan putaran 65
rpm dan dihasilkan rendemen ekstrak pada
Tabel 1.

Tabel 1. Rendemen Hasil Maserasi Buah Parijoto

Berat (g) Rendemen (%)
Simplisia 751,10
Ekstrak n-Heksan 21 2,8
Ekstrak Etil Asetat 12,2 1,62
Ekstrak Metanol 40,76 5,43

Ekstrak buah parijoto kemudian dianalisis
dengan menggunakan kromatografi lapis
tipis. Larutan pengembang sebagai fase
gerak adalah campuran pelarut n-heksan :
etil asetat, dengan perbandingan 7 : 3.
Pengembang n-heksan dipilih, karena
sering digunakan pada pemeriksaan pola
KLT senyawa flavonoid (Harborne, 1973).
Hasil pengamatan KLT sebelum dan
sesudah menggunakan penampak bercak
aluminium klorida menunjukkan bahwa
ekstrak metanol memiliki bercak senyawa
aktif paling banyak, diikuti ekstrak etil
asetat. Bercak yang dimiliki ekstrak etil
asetat dan ekstrak metanol didominasi oleh
bercak yang berfluoresensi merah di
bawah lampu UV 366 nm yang
menandakan adanya senyawa klorofil
dalam ekstrak tersebut, dilanjutkan dengan
adanya satu atau dua bercak yang
berfluoresensi biru yang menandakan
adanya senyawa golongan flavonoid pada
ekstrak tersebut. Ekstrak n-heksan buah
parijoto tidak memiliki bercak, baik
sebelum maupun sesudah disemprotkan
penampang bercak aluminium klorida. Hal
ini dapat diartikan sebagai metabolit aktif
pada ekstrak n-heksan tidak cocok
menggunakan eluen yang telah digunakan
atau disebabkan senyawa flavonoid lebih
banyak terpartisi dengan pelarut semi polar
ke polar.
Pengujian aktivitas antioksidan
terhadap ekstrak buah parijoto dilakukan
dengan menggunakan metode DPPH.
Metode DPPH ini umum digunakan
sebagai pengujian aktivitas antioksidan
pada suatu sampel menggunakan pereaksi
2,2-difenil-1-pikrilhidrazil dengan standar
yang digunakan adalah troloks.
Ketiga ekstrak buah parijoto
masing-masing dibuat larutan stok 10000
µg/mL dan larutan stok standar troloks
sebesar 1000 µg/mL. Pengujian pada
masing-masing ekstrak dilakukan secara
triplicate dengan konsentrasi ekstrak n
heksan 5000; 1000; 500; 300; 100 µg/mL,
untuk konsentrasi ekstrak etil asetat 1000;
800; 500; 300; 100 µg/mL, konsentrasi
ekstrak metanol 1000; 800; 500; 300; 100
µg/mL dan konsentrasi troloks sebesar
150; 125; 100; 50; 25 µg/mL, yang
didapatkan dengan melakukan
pengenceran bertingkat. Masing-masing
well yang telah berisi 10 µL ekstrak diisi
dengan 180 µL perekasi DPPH.
Kemudian, microplate yang telah berisi
pereaksi DPPH dan sampel di inkubasi
selama 30 menit di ruang gelap untuk
diliat % inhibisi pada masing-masing
konsentrasi. % inhibisi pada masing-
masing konsentrasi ekstrtak dapat dilihat pada Tabel 2 berikut

Tabel 2 Persen Inhibisi Oksidan Ekstrak Buah Parijoto Terhadap DPPH

Jenis
Konsentrasi (µg/mL) Persen Inhibisi (%)
Sampel
25 21,83
50 34,17
Troloks 100 56,69
125 65,48
150 73,99
100 0,00
300 0,00
Ekstrak
500 0,00
n-Heksan
1000 0,00
5000 0,24
100 1,05
300 63,31
Ekstrak
500 67,85
Etil Asetat
800 78,70
1000 83,18
100 31,38
300 82,67
Ekstrak Metanol 500 83,81
800 84,74
1000 86,31

Dari hasil tersebut, kemudian dapat menghambat proliferasi sebesar 50%

diplotkan pada kurva respon dosis dimana
sumbu x adalah konsentrasi, dan sumbu y
adalah nilai dari % inhibisi. Dari grafik
tersebut didapatkan persamaan garis dari
masing-masing ekstrak, sehingga dapat
dihitung nilai IC50. Nilai IC50 didapatkan
menggunakan kurva respon dosis. IC50
merupakan konsentrasi dari ekstrak yang
dari total populasi sel. Nilai ini juga
menunjukkan potensi ekstrak sebagai agen
antioksidan. tingkat aktivitas antioksidan
dari ekstrak dapat dibagi menjadi sangat
kuat (<50 µg/mL), kuat (50-100 µg/mL),
sedang (100-250 µg/mL), lemah (250-500
µg/mL) dan tidak aktif (>500 µg/mL).
(Jun, et al., 2006).
 (a)
(c)
Gambar 1 Kurva inhibisi (a) Ekstrak n-heksan (b) Ekstrak etil asetat (c) Ekstrak metanol (d)
Troloks
Hasil perhitungan IC50
menunjukkan bahwa ekstrak etil asetat dan
ekstrak metanol buah parijoto memiliki
nilai IC50 <100 µg/mL. Hal ini
menunjukkan bahwa baik ekstrak etil asetat
dan esktrak metanol tergolong antioksidan
kuat. Ekstrak n-heksan sendiri memiliki
nilai IC50 yang besar yaitu lebih dari 500
µg/mL sehingga dianggap tidak aktif. Hal
ini dikarenakan senyawa yang memiliki
aktivitas sebagai antioksidan yang terdapat
pada ekstrak n-heksan lebih terpartisi pada
pelarut yang bersifat semipolar dan polar.
Aktivitas antioksidan biasanya
berkaitan dengan adanya senyawa
(b)
(d)
flavonoid, yang diduga disebabkan adanya
ikatan rangkap pada cincin C. Secara
umum, aktivitas radical scavenging yang
dimiliki oleh flavonoid bergantung pada
struktur dan susunan gugus hidroksil yang
terdapat pada flavonoid. Antioksidan
tertinggi disebabkan oleh senyawa-senyawa
flavonoid yang memiliki struktur orto 3,4,
dihidroksi, gugus hidroksil pada posisi
meta (contoh 5, 7 dihidroksi pada cincin
A), dan senyawa flavonoid yang memiliki
ikatan rangkap pada C2 dan gugus
hidroksil pada C3 cincin C (Kondo, et al.,
2000; Rice-Evans, et al., 1996).
 Flavonoid secara kimiawi persentase penghambatan proliferasi sel
merupakan donor satu-elektron. Flavonoid yang disajikan dalam Tabel 4 berikut.
sendiri merupakan turunan dari struktur Kemudian dari data persen
dasar cincin terkonjugasi dan gugus penghambatan proliferasi dapat dihitung
hidroksil yang memiliki potensi sebagai Inhibition Concentration 50 (IC50) yang
antioksidan dalam kultur sel in vitro dengan disajikan dalam Tabel 5 dan perbandingan
menarik anion superoksida, oksigen singlet, IC50 antar sampel dapat dilihat pada
lipid peroksi-radikal, dan atau menstabilkan Gambar 2 berikut.
radikal bebas yang terlibat dalam proses Perhitungan IC50 diperoleh dari
oksidatif melalui hidrogenasi atau persamaan yang masing-masing subfraksi,
pengompleksan dengan spesies kemudian mensubtitusikan angka 50 pada
pengoksidasi (Kondo, et al., 2000). sumbu y yang berarti % inhibisi sebanyak
Tabel 4 Persen Penghambatan Proliferasi
Tabel 3 Nilai IC50 dari Ekstrak Buah Sel MCF-7 oleh Ekstrak Buah
Parijoto Terhadap DPPH Parijoto
Sampel Nilai IC50 (µg/mL) Penghambatan Proliferasi (%)
Troloks 525,875 Kons. Ekstrak
Ekstrak Ekstrak
Ekstrak 298,786 (µg/mL) Etil
n-Heksan Metanol
n-Heksan 312,718 Asetat
Ekstrak 359,163 1000 0,00 59,61 53,80
500 0,00 56,33 57,89
Pengujian sitotoksisitas dapat 250 0,00 16,65 55,46
dilakukan dengan mengamati sel yang 125 0,00 15,89 16,10
bertahan hidup setelah dilakukan 62,5 0,00 11,36 3,67
pemberian sampel uji yang diduga 31,25 0,00 6,74 12,08
memiliki aktivitas sitotoksik. Metode WST 15,625 0,00 1,11 4,76
assay merupakan metode yang digunakan 7,8125 0,00 3,94 6,33
dalam pengujian sitotoksisitas dalam
penelitian ini. Pengamatan sel yang
bertahan hidup setelah pemberian sampel
dapat dilakukan dengan melihat nilai %Cell Proliferation Inhibition
absorbansi yang diperoleh menggunakan
70%
microtiter plate reader.
60%
Sebelum dilakukan prosedur uji
50%
sitotoksisitas, sampel dipersiapkan, ekstrak
40%
%CPI

n-heksan, ekstrak etil asetat dan ekstrak

30%
metanol buah parijoto dilarutkan dengan
20%
menggunakan DMSO. DMSO sendiri
10%
merupakan pelarut polar yang dapat
melarutkan senyawa yang bersifat polar 0%
0 500 1000 1500
maupun non polar dan senyawa yang larut Konsentrasi (µg/ml)
diberbagai pelarut baik organik maupun air. Ekstrak n-Heksan Ekstrak Metanol
Meskipun DMSO merupakan pelarut yang Ekstrak Etil Asetat
baik, namun DMSO memiliki efek
Gambar 2 Perbandingan persentase
sitotoksik terhadap sel MCF-7 pada
penghambatan proliferasi
konsentrasi lebih dari 1% (Tussanti &
sel dari ekstrak n-heksan,
Johan, 2014). Sehingga konsentrasi DMSO
ekstrak etil asetat dan
1% masih dapat digunakan untuk
ekstrak metanol buah
membantu melarutkan subfraksi. Hasil
absorbansi kemudian dihitung dalam
 parijoto terhadap sel MCF-
7 onkogen dan gen penekan tumor dalam
Tabel 5 Nilai IC50 Ekstrak Buah Parijoto
Terhadap sel MCF-7
Sampel Nilai IC50 (µg/mL)
Ekstrak n-Heksan Tidak terdefinisi
Ekstrak Etil Asetat 87,42
Ekstrak Metanol 103,398
50%, kemudian dihitung dan di dapatkan
nilai IC50. Nilai IC50 menunjukkan
konsentrasi yang dibutuhkan untuk
menghambat pertumbuhan sel sebesar
50% dari total populasinya. Nilai IC50 yang
lebih kecil menunjukkan bahwa senyawa
tersebut memiliki sifat yang lebih toksik
dibandingkan dengan nilai IC50 yang lebih
besar. Berdasarkan nilai-nilai IC50, tingkat
sitotoksisitas dari ekstrak dapat dibagi
menjadi kuat (<100 µg/mL), sedang
(101-200 µg/mL), dan lemah (>200
µg/mL) (Subarnas, et al., 2012)
Berdasarkan hasil yang tertera pada
Tabel 5 menunjukkan bahwa nilai IC50
terbaik dimiliki oleh ekstrak etil asetat,
dengan nilai 87,42 µg/ml.
Mekanisme senyawa dalam ekstrak
buah parijoto terhadap kematian sel belum
diketahui, namun diduga senyawa
flavonoidnya menginduksi apoptosis sel
tumor melalui aktivasi jalur kematian sel
(cell death pathway) oleh B-cell lymphoma
2 (Bcl-2) yang bersifat anti-apoptosis pada
sel kanker, dengan memicu ekspresi NF-kB
yang menurunkan ekspresi anti-apoptosis
Bcl-2, yang selanjutnya merusak sel kanker
(Wang, et al., 2016).
Ren, et al. (2003) dan Huang, et al.
(2010) menyebutkan bahwa flavonoid
memiliki sifat kemopreventif dan juga
berkontribusi untuk menginduksi apoptosis
dengan menahan siklus sel, mengatur
metabolisme karsinogen dan ekspresi
ontogenesis. Ren, et al. (2003) dan Huang,
et al. (2010) lebih lanjut menyebutkan
bahwa flavonoid memiliki mekanisme yang
saling melengkapi dan tumpang tindih,
termasuk aktivitas antioksidan dan menarik
radikal bebas, modulasi metabolisme
karsinogen, pengaturan ekspresi gen pada
proliferasi sel dan diferensiasi, induksi
penahanan siklus sel dan apoptosis,
modulasi aktivitas enzim dalam
detoksifikasi, oksidasi dan reduksi, sifat
anti-inflamasi dan aktivitas lain pada target
lain yang memungkinkan.
Hasil pengujian antioksidan dan
WST assay dari ekstrak tersebut tidak
berbanding lurus, dimana hasil pada uji
DPPH menunjukan bahwa ekstrak yang
paling aktif adalah ekstrak metanol,
sedangkan pada pengujian WST assay
terhadap sel MCF-7, didapatkan ekstrak
teraktif adalah ekstrak etil asetat. Sehingga
bisa disimpulkan bahwa ekstrak yang
memiliki aktivitas antioksidan terbaik
belum tentu memiliki potensi antikanker
yang berbanding lurus. Begitu pula
sebaliknya, senyawa yang memiliki potensi
antikanker terbaik belum tentu memiliki
potensi antioksidan yang paling baik pula.
SIMPULAN DAN SARAN
Simpulan
Nilai IC50 aktivitas antioksidan
ekstrak n-heksan, etil asetat dan metanol
buah parijoto berturut-turut 3475,317
µg/mL, 77,715 µg/mL dan 62,251 µg/mL
dan nilai IC50 aktivitas sitotoksik ekstrak n-
heksan, etil asetat dan metanol buah
parijoto berturut-turut tidak terdefinisi,
87,42 µg/mL dan 103,398 µg/mL.
Saran
Berdasarkan hasil penelitian ini
disarankan untuk melakukan fraksinasi dan
isolasi terhadap ekstrak buah parijioto dan
karakterisasi dari subfraksi teraktif yang
telah di uji dengan metode DPPH untuk
menyelidiki aktivitas antioksidan terbaik
dan WST assay untuk menyelidiki senyawa
aktif yang bersifat sitotoksik terhadap sel
kanker serviks MCF-7, serta penelusuran
mekanisme antikanker dari senyawa
tersebut sebagai pengembangan sebagai
fitofarmaka antioksidan maupun
antikanker.
DAFTAR PUSTAKA
Cancer Research UK, 2012. Worlwide
Cancer Statistics. Tersedia online di
http://www.cancerresearchuk.org/health-
professional/cancer-statistics/worldwide-
cancer#heading-Zero. [diakses tanggal
10 Oktober 2017].
Harborne, J.B., 1973. Pytochemical
Methods. London: Chapman and Hall.
Harvey, A. dan Missalidis L. 2008. Natural
Product in Drug Discovery. Glasgow:
Elsavier.
Huang JH, Huang CC, Fang JY, et al.,
2010. Protective effects of myricetin
against ultraviolet-B-induced damage in
human keratinocytes. Toxicol In Vitro,
24, pp. 21–28.
IARC, 2013. Cancer Incidence and
Mortality Worldwide. Tersedia online di
http://globocan.iarc.fr/. [diakses tanggal
10 Oktober 2017].
Jun, M. J. Hong. H. Fu, dan X.X. Wan.
2006. Comparison of Antioxidant
Activities of Isoflavones from Kudzu
Root (Pueraria lobata Ohwi). Journal of
Food Science. 68(6):2117 – 2122.
Kondo, K. et al., 2000. Conversion of
procyanidin B-type (catechin dimer) to
A-type: evidence for abstraction of C-2
hydrogen in catechin during radical
oxidation. Tetrahedron Letters, 41(4),
pp. 485-488.
Malcolm, R.A., 2003. The Cancer
Handbook. China: Huangzhiman.
Rachmawati, K, Iwan S.H. dan Rochmah
K. 2008. Efek Sitotoksik In Vitro Dari
Ekstrak Buah Mahkota Dewa (Phaleria
Macrocarpa) Terhadap Kultur Sel
Kanker Mieloma. J. Penelit. Med.
Eksakta. 7(1): 48-54.
Ren W, Qiao Z, Wang H, et al., 2003.
Flavonoids: promising anticancer agents.
Med Res Rev, 23, pp. 519–534.
Rice-Evans, C. A., Miller, N. J. & Paganga,
G., 1996. Structure-antioxidant
activity relationships of flavonoids and
phenolic acids. Free Radical Biology
and Medicine, 20(7), pp. 933-956.
Subarnas A., A. Diantini, R. Abdulah, A.
Zuhrotun, C. Yamazaki, M. Nakazawa
dan H. Koyama, 2012.
Antiproliferative activity of primates-
consumed plants against MCF-7
human breast cancer cell lines.
Journal of Medical Research, 1(4), pp.
38–43.
Tussanti, I. dan A.W. Johan, 2014.
Sitotoksisitas in Vitro Ekstrak Etanolik
Buah Parijoto (Medinilla speciosa,
Reinw. Ex Bl.) Terhadap Sel Kanker
Payudara T47D. Jurnal Gizi
Indonesia, 2(2): 53–58.
Wachidah, L.N., 2013. Flavonoid Total
Dari Buah Parijoto (Medinilla
Speciosa Blume). [Skripsi]. Jakarta:
Jurusan Farmasi FKIK UIN Syarif
Hidayatullah.
Wang, S., Tian Q., & An F., 2016. Growth
inhibition and apoptotic effects of total
flavonoids from Trollius chinensis on
human breast cancer MCF-7 cells.
Oncology Letters, 12(3), pp. 1705–
1710.