BAB 1

STERILISASI DAN PEMBUATAN

MEDIUM

PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI FARMASI

2019
 TUJUAN
• Mengetahui tujuan dan cara-cara sterilisasi
• Melakukan sterilisasi dengan menggunakan
autoklaf
• Mengetahui penggunaan dan macam medium
• Membuat medium
 DASAR TEORI

• STERILISASI

• Sterilisasi adalah suatu proses untuk mematikan semua

organisme yang terdapat pada atau di dalam suatu benda
• Cara sterilisasi
- sterilisasi scr fisik : dg pemanasan, sinar x, sinar uv, dst.
- sterilisasi scr kimia : dg disinfektan, lart. Alkohol, formalin,
dst.
- sterilisasi scr mekanik : dg filtrsai atau penyaringan
• PEMBUATAN MEDIUM

• Medium adalah suatu bahan yang terdiri atas campuran

nutrisi yang dipakai untuk menumbuhkan mikroba.
• Syarat medium :
- mengandung semua nutrisi
- mempunyai tekanan osmose, tegangan muka, pH yg sesuai
- tidak mengandung zat yg dpt menghambat pertumbuhan
- steril
 STERILISASI DENGAN AUTOKLAF

Tuangkan air secukupnya ke sterilisator

Tata alat-alat yang akan disterilkan

Letakkan tutup sterilisator pada tubuh sterilisator

Buka klep pengaman

Tutup klep apabila uap air mulai keluar dg deras

Pertahankan tekanan 2 atm selama 15-20menit

Matikan pemanasan dan tunggu sampai tekanan nol

Buka pengatur klep

Buang air yg tersisa dan keringkan semua bagiannya

Saat mencuci tutupnya jaga agar alat pengukur tidak

terkena air
 A. PEMBUATAN MEDIUM NUTRIEN CAIR

Bahan :
- Ekstrak daging
- Pepton
- NaCl
- Akuades

Cara Kerja :
Larutkan 3gr ekstrak daging + 5gr pepton dg 1 L
aquadest

Panaskan selama 5 menit

Dinginkan

Netralkan dg NaOH 1N ad Ph 7,2, cek dg pH meter

+ aquadest ad 1 Liter lagi

Saring larutan medium dg kain penyaring yg bersih

Sterilkan dg autoklaf, P=2 atm, T=121°C, t=20 menit

 B. PEMBUATAN MEDIUM NUTRIEN AGAR

Bahan :
- Ekstrak daging
- Pepton
- Agar- agar
- Aquadest

Cara Kerja :
Medium nutrien cair + 15-20 gr agar untuk 1 liter aquadest

Masukkan agar2 ke dlm medium yg dipanaskan selama

20-30 menit

Kembalikan volume medium ad 1 liter kembali

Dlm keadan panas saring dengan kain saring bersih

Masukkan dlm tabung reaksi steril

- Medium agar miring 5 ml
- Medium agar tegak 10 ml

Sterilkan dg autoklaf, P=2 atm, T=121°C, t=20 menit

C. PEMBUATAN MEDIUM NUTRIEN TAOGE CAIR

Bahan :
- Taoge 100 gr
- Sukrosa 60 gr
- Aquadest ad 1 liter

Cara Kerja :
Rebus taoge dengan aquadest ad 2 jam

Saring rebusan taoge, + sukrosa

Panaskan kembali ad larut

+ aquadest ad volumenya 1 liter

Sterilkan dg autoklaf, P=2 atm, T=121°C, t=15 menit

 B. PEMBUATAN MEDIUM TAOGE AGAR

Bahan :
- Taoge
- Sukrosa
- Agar- agar
- Aquadest

Cara Kerja :
Medium nutrien cair + 15-20 gr agar untuk 1 liter aquadest

Masukkan agar2 ke dlm medium yg dipanaskan selama

20-30 menit

Kembalikan volume medium ad 1 liter kembali

Dlm keadan panas saring dengan kain saring bersih

Masukkan dlm tabung reaksi steril

- Medium agar miring 5 ml
- Medium agar tegak 10 ml

Sterilkan dg autoklaf, P=2 atm, T=121°C, t=20 menit