ANALISIS PROTEIN

Asep Iin Nur Indra, S.Si, M.Si

Overview isolasi protein
Crude
Ultrafiltrasi protein

supernatan
Fisik,
Sel lisis
kimia/enzim
sentrifugasi
Residu sel
Dimurnikan dari apa?
Terkait produk jadi Terkait proses
1. Adanya fragmen peptide 1. Pemilihan sel inang
2. Adanya protein non target 2. Komponen media memiliki protein yang mirip
3. Adanya variasi ikatan disulfida 3. Adanya penambahan Tag/antibiotic
4. Adanya modifikasi protei (aminasi, glikosilasi, dll) 4. Reagen purifikasi menambah impurity
5. Adanya agregat 5. Proses pemurnian menggunakan detergen 
adanya denaturasi
6. Protein terdenaturasi Sebagian 6. Adanya DNA / RNA yang masih terbawa
Pemurnian
tahap awal
Konsentrasi garam
Sifat – sifat
Asam
Amino
Level struktur
Karakter protein
KROMATOGRAFI
KROMATOGRAFI AFINITAS
KROMATOGRAFI SIZE EXCLUSION
Kromatografi penukar ion
Karakterisasi
Karakterisasi
JENIS SDS, direduksi / tereduksi
Elektroforegram PAGE

Galuh, F., 2021

PERBEDAAN NATIVE VS SDS

Bjyusbiologi.com
Western blot
Daftar pustaka
1. Glick, BR and JJ Pasternak, 2003, Molecular Biotechnology: Principles
and Applications of Recombinant DNA, ASM Press, Washington DC,
p504-506
2. Sven Frokjaer and Lars Hovgaard, 2000, Pharmaceutical Formulation
Development of Peptides and Proteins, CRC Press, 29-3
3.