BIOTEKNOLOGI

3. Fusi Sel
Yaitu peleburan dua sel dari spesies yang sama atau berbeda agar terbentuk sel bastar (hibridoma, hibrid=bastar, oma-sel kanker) Tahap fusi sel:
a. Peleburan membran sel, b. Plasmogami = peleburan sitoplasma, c. Kariogami = peleburan inti sel.

a. Pada proses fusi sel buatan (in vitro), diperlukan:

a) Sel wadah/target yaitu sel yang memiliki sifat membelah cepat, agar menghasilkan hibridoma yang dapat dikultur dan membelah dengan cepat (misalnya sel mieloma/kanker). b) Sel sumber gen yaitu sel-sel yang memiliki sifat yang diinginkan, misalnya ampu memproduksi antibodi.

c) Fusi gen yaitu zat-zat yang mempercepat terjadinya fusi sel (misalnya NaNO3, PEG, dan virus).
d) Manfaat fusi sel:
- Pemetaan kromosom - Pembuatan antibodi monoklonal - Pembentukan spesies baru

4. Rekombinasi DNA
a. Alami: pindah silang, transduksi dan transformasi. b. Buatan: penyambungan DNA secara in vitro. - Alasan dapat dilakukan rekombinasi DNA: Struktur DNA semua spesies sama, DNA dapat disambung-sambung, Ditemukan enzim pemotong dan penyambung DNA, Gen dapat terekspresi di sel apapun.

a. Komponen yang diperlukan dalam rekombinasi DNA

1) Metode mendapatkan gen
Memotong langsung dari DNA Mentranskripsi balik RNA menjadi DNA Menyintesis DNA di laboratorium.

2) Enzim pemotong dan penyambung

Enzim restriksi endonuklease berfungsi memotong-motong benang DNA. Ligase berfungsi menyambung DNA.
Sumber Escherichia coli Haemophilus aegyptius H. Influenza Rd H. Influenza Rd Providencia stuartii Nama enzim Eco RI Hae III Hin dll Hin dll Pst I
Tempat pemotongan

G-A-A-T-T-S S-T-T-A-A-G G-G-S-S S-S-G-G G-T-Py-Pu-A-S S-A-Pu-Py-T-G A-A-G-S-T-T T-T-S-G-A-A S-T-G-S-A-G G-A-S-G-T-S

3) Pembawa gen atau vektor

Vektor bertugas sebagai kendaraan bagi gen untuk mengangkut gen masuk ke dalam target. Bakteri yang mendapatkan sifat baru akibat perubahan DNA sirkulernya disebut sebagai transformasi. Plasmid hasil penambahan dinamakan chimera atau DNA rekombinan.

4) Sel target
Sel target yang biasa digunakan adalah bakteri E. coli, karena:
a. E. coli mudah diperoleh dan mudah
dipelihara b. Tidak mengandung gen yang membahayakan (tidak ganas) c. Dapat membelah diri setiap 20 menit sekali sehingga dapat diperoleh keturunan dalam jumlah besar dalam waktu singkat.

b. Proses rekombinasi DNA

G A A T

A A T T S

Eco R1

S T T A A

T T A A G

A A T T S

S T T A A

G Ligase G A A T T S

S T T A A

Gambar. DNA Rekombinan

c. Masa depan rekombinasi DNA

Rekombinasi berperan dalam menghasilkan spesies dengan keunggulan yang baik guna menunjang kehidupan manusia. Contohnya:
- Mempercepat pertumbuhan hewan - Menghasilkan antibiotik - Menghasilkan daging yang banyak

F. Bioteknologi pertanian
1. Tanaman tahan hama
Dapat menghasilkan tanaman yang tahan terhadap serangan hama dan penyakit, terutama pada tanaman yang bernilai ekonomis.

2. Tanaman penambat nitrogen

Berdasarkan cara hidupnya, organisme penambat N (nitrogen) dapat dibedakan menjadi:
a. Organisme N yang hidup bebas, misalnya Azotobacter, Azospirillium dan Clostridium. b. Organisme N yang bersimbiosis dengan akar tumbuhan, misalnya Rhizobium.

Penggunaan pupuk N perlu dibatasi, karena:

a. Terbentuknya senyawa nitrat di perairan yang dapat menyebabkan eutrofikasi. b. Pemberian yang berlebihan mengakibatkan pengurasan unsur mikro. c. Pemberian yang berlebihan meningkatkan tekanan osmosis air tanah, sehingga mengakibatkan tanaman kering dan mati. d. Pemberian pupuk mengakibatkan air tanah menjadi asam akibatnya mengalami defisiensi unsur-unsur.

G. Bioteknologi Kedokteran
1. Pembuatan Obat-obatan
Contoh: fusi gen manusia dengan gen tikus menghasilkan obat serangan jantung.

2. Pembuatan Antibodi Monoklonal

Antibodi monoklonal digunakan untuk mendiagnosis penyakit dan tes diagnostik contohnya tes kehamilan.

3. Terapi gen manusia

Terapi gen = perbaikan kelainan genetik dengan memperbaiki gen. Ada 2 cara terapi, yaitu:
a. Menyiapkan retrovirus (virus DNA) dan menyisipkan alel ADA normal ke dalam asam nukleat retrovirus terbentuk retrovirus rekombinan.

b. Limfosit T yang telah diambil dari pasien dikultur secara invitro bersama dengan vektor retrovirus rekombinan. c. Retrovirus rekombinan menginfeksi sel limfosit T dan menyisipkan genomnya pada genom sel limfosit T, menghasilkan limfosit T normal. d. Sel limfosit T normal, yang mengandung alel ADA normal, dimasukkan kembali ke dalam tubuh lasien dengan disuntikkan.

4. Pembuatan Vaksin
Penyakit yang disebabkan oleh virus ada 2 tipe:
a. Vaksin yang berasal dari partikel virus yang virulen yang dikurangi keganasannya secara kimiawi maupun fisik, vaksin yangberasal dari virus aktif tetapi tidak patogen. b. Vaksin yang merangsang tubuh menghasilkan antibodi untuk melawan penyakit.

Gambar. Proses pembuatan vaksin

H. Bioteknologi Peternakan
Organisme transgenik = organisme hasil rekayasa genetika yang mengandung gen dari spesies lain. Contoh: penyuntikan hormon pertumbuhan sapi (BGH=bovine growth hormone) pada sapi perah untuk meningkatkan produksi susu selain meningkatkan produksi daging.

Gambar. Sapi perah

I. Bioteknologi Lingkungan 1. Biogas, untuk mengurangi pencemaran oleh kotoran ternak, dan sisa biogas dapat dimanfaatkan untuk pupuk. 2. Mikroorganisme pengolah limbah, untuk mengurangi pencemaran limbah sebelum di buang ke lingkungan. 3. Cacing tanah, dimanfaatkan untuk mengurangi pencemaran oleh sampah organik.

J. Manfaat dan Bahaya Bioteknologi 1. Manfaat bioteknologi, dalam hal penyediaan bahan makanan, energi, bidang pertanian, peternakan, kedokteran dan pengembangan ilmu pengetahuan. 2. Bahaya Bioteknologi
a. membuat senjata biologis b. memunculkan organisme strain jahat c. mengganggu keseimbangan lingkungan d. melanggar hukum dan nilai-nilai masyarakat.

3. Tindakan Pencegahan Bahaya Bioteknologi a) Adanya peraturan izin atau rekomendasi melakukan rekayasa genetika. b) Larangan pengklonan manusia. c) Ditetapkannya undang-undang larangan pembuatan senjata biologis. d) Standarisasi prosedur kerja laborium.

TERIMAKASIH