PEMERIKSAAN WIDAL

METODE SLIDE

No. Dokumen : 22/SOP/Lab-NPI/2016

SOP No. Revisi : 01
Tgl. Terbit : 01 April 2016
Halaman :1-4
UPT. PUSKESMAS
Kepala UPT
NUSA PENIDA I Puskesmas Nusa Penida I

dr. I Ketut Rai Sutapa

NIP. 19790401 200604 1 012

1. Pengertian Antigen Febrile Salmonella adalah suspensi berstandar dari stained.

bacteria yang dipersiapkan untuk pemeriksaan cepat dan
semikuantitatif dari serum antibody yang terbentuk saat fase akut
dari penyakit.
Antigen akan teraglutinasi dengan adanya homologous antibody
di sampel.

2. Tujuan Reaksi antara antigen dan antibody terhadap Salmonella typhi atau
paratyphi secara invitro akan memberikan hasil reaksi aglutinasi.

3. Kebijakan 1. SK Kepala Puskesmas Nusa Penida I No. 133 Tahun 2016

Tentang Pemberlakuan Standar Operasional Prosedur unit
Laboratorium UPT. Puskesmas Nusa Penida I

2. SK Kepala Puskesmas Nusa Penida I No. 38 Tahun 2015

Tentang Pelayanan Laboratorium dan Jenis Pemeriksaan
Laboratorium UPT. Puskesmas Nusa Penida I

4. Referensi 1. Petunjuk Pemeriksaan Laboratorium Puskesmas, Departemen

Kesehatan RI, Th. 1991

2. Pedoman Penyelenggaraan Praktek Laboratorium, Pus Lab Kes

Dep.Kes RI, Jakarta Tahun 1999.

3. Penuntun Laboratorium Klinik, R. gandasoebrata,

4. Fortress Diagnostics Limited,UK

1 /4
5. Prosedur A. Alat
1. Spuit 3 cc
2. Tabung reaksi 5 ml
3. Slide atau keramik putih
4. Multi pipet 50 l
5. Rotator
6. Centrifuge

B. Reagen
1. Antigen Salmonella O, Group D (typhi O)
2. Antigen Salmonella O, Group A
3. Antigen Salmonella O, Group B
4. Antigen Salmonella H, Antigen D (typhi H)
5. Positive Kontrol
6. Negative Kontrol
Stabil sampai expired date dalam suhu 2C - 8C

C. Cara kerja

I. Prosedur Test Penyaring (Screening Test)

1. Teteskan dua tetes (50l) serum yang belum diencerkan

pada slide atau keramik putih
2. Teteskan 1 tetes suspensi dari antigen sebelumnya
dicampur supaya homogen di samping sample serum.
3. Campur dengan pengaduk beberapa detik dan goyangkan
4. Goyangkan slide selama 1 menit dan amati terjadinya
aglutinasi. Jika terjadi aglutinasi selama 1 menit maka
untuk mengetahui titer antibody seharusnya dilanjutkan
ke test konfirmasi cara tabung.

II. Prosedur Test Metode Rapid Slide Titrasi (Pengenceran)

1. Dengan menggunakan mikropipet, Teteskan secara

berurutan sample yang positip 80l, 40l, 20l, 10l, dan
5l serum yang tidak diencerkan diatas slide atau keramik
putih
2. Dengan droper masukkan satu tetes antigen yang sudah
dicampur kemasing-masing serum
3. Campur dengan pengaduk beberapa detik dengan
membentuk bundaran
4. Secara perlahan goyangkan slide dan baca aglitunasi
pada satu menit
5. Hasil reaksi dapat ditentukan dengan terjadinya aglutinasi
dengan pengenceran serum sebagai berikut : 1/20, 1/40,
1/80, 1/160, 1/320.
6. Hasil titer test rapid slide dapat menentukan titer dari
serum yang diperiksa.

2 /4
 III. Cara Pemeriksaan Widal Tabung :

1. Siapkan 8 tabung dirak dan berikan label 1-8 pada tabung

2. Dengan mengguanakn pipet ambillah 1,9 ml pz atau saline
0,85% ke tabung pertama dan 1,0 ml saline kedalam
masing-masing tabung ke 2,3 dst sampai tabung ke-7
3. Dengan menggunakan mikropipet masukkan 0,1 ml serum
pasien ke tabung pertama kemudian campur
4. Pipet 1,0 ml dari tabung pertama ke tabung kedua,
campuran dengan baik.
5. Selanjutnya lakukan pengenceran dengan memindahkan
1,0 ml larutan sampai tabung ke-7, lalu buang sebanyak
1,0 ml.
6. Setelah larutan semua homogen, teteskan tetes suspensi
antigen kemasing-masing tabung
7. Inkubasikan sesuai dengan petunjuk :
- Antigen 36 0 C selama 24 jam
Proses inkubasi dilakukan sebagai berikut :
- Somatik (O) dan Proteus antigen : 48 0 C 50 0 C selama
4 jam.
- Flagella (H) antigen : 48 0 C 50 0 C selama 2 jam.
8. Amati adanya tanda tanda aglutinasi

D. Nilai Normal

1. Bila positive ditunjukkan dengan terjadinya aglutinasi

pada slide. Bila titer lebih besar dari 1/80 biasanya
biasanya mengindikasikan adanya infeksi.
2. Hasil positive yang lebih kecil dari 1/80 kemungkinan
adanya titer dari aglutinasi

3 /4
6. Diagram/
Dengan menggunakan mikropipet,
Bagan Alir Persiapan Teteskan secara berurutan sample yang
Alat dan positip 80l, 40l, 20l, 10l, dan 5l
Pasien serum yang tidak diencerkan diatas slide
atau keramik putih

Dengan droper masukkan satu tetes antigen yang

sudah dicampur kemasing-masing serum

Campur dengan pengaduk beberapa detik dengan

membentuk bundaran, secara perlahan goyangkan slide
dan baca aglitunasi pada satu menit.

Hasil reaksi dapat ditentukan dengan terjadinya

aglutinasi dengan pengenceran serum sebagai berikut
: 1/20, 1/40, 1/80, 1/160, 1/320.

Catat titer pengenceran

pada serum yang
diperiksa

7. Unit Terkait 1. Laboratorium

2. Rawat Jalan
3. Rawat Inap
4. UGD

Nengah Mahendra Risanu,Amd.AK

Koordinator Laboratorium
Dibuat oleh
dr. Agus Putu Agung,S.Ked
Koordinator UKP

dr. I Ketut Apriantara,S.Ked

Disetujui oleh
WMM

4 /4
5 /4