MEMBUAT BIBIT Acetobacter xylinum DARI ALAM

Mia Multifa¹, Rizal Maulana Hasby², Nursiah Wilda³

JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI, UIN SUNAN GUNUNG DJATI BANDUNG
Jl. A. H. Nasution no. 105. Cipadung, Cibiru, Kota Bandung, Jawa Barat 40164
miamultifa10@gmail.com
ABSTRAK
Acetobacter xylinum adalah salah satu jenis bakteri yang banyak bermanfaat dalam dunia industri
seperti nata de coco, nata de cassava, nata de soya, tepung mocaf, dan lain-lain. Nata de coco adalah
sejenis jelly kenyal berwarna putih susu atau bening, yang berasal dari proses fermentasi air kelapa.
Praktikium ini dilakukan di Laboratorium Instruksional 1 UIN Sunan Gunung Djati Bandung. Tujuan
dari praktikum ini yaitu mengisolasi bakteri Acetobacter xylinum dari alam. Alat yang digunakan
padapraktikum ini aitu botol, pisau, blender, kompor, saringan. Sedangkan bahan yang digunakan
adalah aquadest, glukosa, yeast ekstrak, bacto agar, KH2PO4, (NH4)2 SO4, MgSO4, A. Acetat 99%.
Metode yang di gunakan yaitu menggunakan filtrat nanas, dengan cara nanas di blender kemudian di
ambil filtratnya dengan cara di saring kemudian filtrate di panaskan sampai mendidih lalu di saring
kembali dan di masukan ke dalam botol gelas, dan ampasnya di masukan ke dalam botol jam.
Kemudian di kultur selama kurang lebih 2 minggu. Setelah di kultur 2 minggu di dapatkan hasil
bahwa di permukaan dan terdapat lapisan lapisan putih, dimana itu merupakan bibit dari Acetobacter
xilinum, dan pada botol jam pada ampas nanas terdapat koloni berwarna hitam..

Kata kunci: Acetobacter xylinum, Nata De Coco, Fermentasi.

I. PENDAHULUAN dapat tumbuh pada pH 3,5 – 7,5, namun

Nata De Coco merupakan jenis
komponen minuman yang terdiri dari
senyawa selulosa (dietry fiber), yang
dihasilkan dari air kelapa melalui proses
fermentasi, yang melibatkan jasad renik
(mikrobia), yang selanjutnya dikenal
sebagai bibit nata. Pada prinsipnya untuk
menghasilkan nata de coco yang bermutu
baik, maka perlu disediakan media yang
dapat mendukung aktivitas Acetobacter
xylinum untuk memproduksi selulosa
ekstra-seluler atau yang kemudian di sebut
nata de coco (Purnomo,2011).
Bibit nata adalah bakteri Acetobacter
xylinum yang akan dapat membentuk serat
nata jika ditumbuhkan dalam air kelapa
yang sudah diperkaya dengan karbon dan
nitrogen melalui proses yang terkontrol.
Dalam kondisi demikian, bakteri tersebut
akan menghasilkan enzim yang dapat
menyusun zat gula menjadi ribuan rantai
serat atau selulosa. Dari jutaan renik yang
tumbuh pada air kelapa tersebut, akan
dihasilkan jutaan lembar benang-benang
selulosa yang akhirnya nampak padat
berwarna putih hingga transparan, yang
disebut sebagai nata.Acetobacter xylinum
akan tumbuh optimal bila pH nya 4,3,
sedangkan suhu ideal bagi pertumbuhan
bakteri Acetobacter xylinum pada suhu
28°– 31 °C. Bakteri ini sangat memerlukan
oksigen. Asam asetat atau asam cuka
digunakan untuk menurunkan pH atau
meningkatkan keasaman air kelapa. Asam
asetat yang baik adalah asam asetat glacial
(99,8 %). Asam asetat dengan konsentrasi
rendah dapat digunakan, namun untuk
mencapai tingkat keasaman yang
diinginkan yaitu pH 4,5 – 5,5 dibutuhkan
dalam jumlah banyak. Selain asan asetat,
asam-asam organik dan anorganik lain bisa
digunakan. (Saragih,2004).
Bakteri Acetobacter xylinum
mengalami pertumbuhan sel. Pertumbuhan
sel didefinisikan sebagai pertumbuhan
secara teratur semua komponen di dalam
sel hidup. Bakteri Acetobacter xylinum
mengalami beberapa fase pertumbuhan sel
yaitu fase adaptasi, fase pertumbuhan
awal, fase pertumbuhan eksponensial, fase
pertumbuhan lambat, fase pertumbuhan
tetap, fase menuju kematian, dan fase
kematian. Apabila bakteri dipindah ke
media baru maka bakteri tidak langsung
tumbuh melainkan beradaptasi terlebih
dahulu. Pad fase terjadi aktivitas
metabolismedan pembesaran sel, meskipun
belum mengalami pertumbuhan. Fase
pertumbuhan adaptasi dicapai pada 0-24
jam sejak inokulasi. Fase pertumbuhan
awal dimulai dengan pembelahan sel
dengan kecepatan rendah. Fase ini
berlangsung beberapa jam saja. Fase
eksponensial dicapai antara 1-5 hari. Pada
fase ini bakteri mengeluarkan enzim
ektraselulerpolimerase sebanyak-
banyaknya untuk menyusun polimer
glukosa menjadi selulosa (matrik nata).
Fase ini sangat menentukan kecepatan
suatu strain Acetobacter xylinum dalam
membentuk nata.( Susilawati L, 2002).
Fase pertumbuhan lambat terjadi
karena nutrisi telah berkurang, terdapat
metabolik yang bersifat racun yang
menghambat pertumbuhan bakteri dan
umur sel sudah tua. Pada fase in
pertumbuhan tidak stabil, tetapi jumlah sel
yang tumbuh masih lebih banyak
disbanding jumlah sel mati. Fase
pertumbuhan tetap terjadi keseimbangan
antara sel yang tumbuh dan yang mati.
Matrik nata lebih banyak diproduksi pada
fase ini. Fase menuju kematian terjadi
akibat nutrisi dalam media sudah hamper
habis. Setelah nutrisi harbi, maka bakteri
akan mengalami fase kematian. Pada fase
kematian sel dengan cepat mengalami
kematian. Bakteri hasil dari fase ini tidak
baik untuk strain nata(Jumadi, 2015).
Faktor-faktor yang mempengaruhi
Acetobacter xylinum mengalami
pertumbuhan adalah nutrisi, sumber
karbon, sumber nitrogen, serta tingkat
keasaman media temperatur, dan udara
(oksigen). Senyawa karbon yang
dibutuhkan dalam fermentasi nata berasal
dari monosakarida dan disakarida. Sumber
dari karbon ini yang paling banyak
digunakan adalah gula. Sumber nitrogen
bias berasal dari bahan organic seperti ZA,
urea. Meskipun bakteri Acetobacter
xylinum dapat tumbuh pada pH 3,5 – 7,5,
namun akan tumbuh optimal bila pH nya
4,3. sedangkan suhu ideal bagi
pertumbuhan bakteri Acetobacter xylinum
pada suhu 28 – 31 0 C. bakteri ini sangat
memerlukan oksigen. Sehingga dalam
fermentasi tidak perlu ditutup rapat namun
hanya ditutup untuk mencegah kotoran
masuk kedalam media yang dapat
mengakibatkan kontaminas. di dalam
pertumbuhannya, Acetobacter xylinum
memerlukan sumber nutrisi C, H, dan N
serta mineral dan dilakukan dalam proses
yang terkontrol dalam medium air kelapa.
Air kelapa mengandung sebagian sumber
nutrisi yang dibutuhkan akan tetapi
kebutuhan akan substrate makro seperti
sumber C dan N masih harus tetap
ditambah agar hasil nata yang dihasilkan
optimal, sehingga kekurangan nutrisi yang
diperlukan harus ditambahkan dalam
proses fermentasi. Sebagai sumber carbon
dapat ditambahkan sukrosa, glukosa,
fruktosa, dan tepung (Suryani, Ani.2005).
Selama fermentasi bakteri Acetobacter
xylinum memecah gula (sukrosa) menjadi
glukosa dan fruktosa. Glukosa diubah
melalui reaksi heksokinase menjadi
glukosa-6fosfat. Acetobacter xylinum
dapat mensintesa sebagian gula menjadi
selulosa dan sebagian lainnya diuraikan
menjadi asam asetat yang akan
menurunkan pH medium. Lama fermentasi
akan berpengaruh pada kadar asam yang
dihasilkan dan tebal tipisnya
nata.(Shismwati, 2014).
Fermentasi merupakan suatu cara yang
telah dikenal dan digunakan sejak lama
sejak jaman kuno. Fermentasi merupakan
suatu cara untuk mengubah substrat
menjadi produk tertentu yang dikehendaki
dengan menggunakan bantuan mikroba.
Bioteknologi berbasis fermentasi sebagian
besar merupakan proses produksi barang
dan jasa dengan menerapkan teknologi
fermentasi atau yang menggunakan
mikroorganisme untuk memproduksi
makanan dan minuman seperti: keju,
yoghurt, minuman beralkohol, cuka,
sirkol, acar, sosis, kecap, dll (Nurcahyo,
2011).
 Tujuan dari praktikum ini yaitu nenas kemudian direbus dan setelah
mengisolasi bakteri Acetobacter xylinum mendidih disaring untuk mendapatkan
dari alam. filtratnya. Sebanyak 4 liter filtrat diambil
untuk bahan media. Filtrat dipanaskan
II. METODE KERJA sampai mendidih kemudian ditambah
2.1 Alat dan Bahan dengan bahan kimia seperti formula diatas
Alat yang digunakan padapraktikum dan tambahkan Natrium acetat atau sedikit
ini aitu botol, pisau, blender, kompor, demi sedikit acetid acid glasial sampai pH
saringan. Sedangkan bahan yang 3. Masukkan dalam botol steril masing-
digunakan adalah aquadest, glukosa, yeast masing 600 ml dan tiap wadah ditutup
ekstrak, bacto agar, KH2PO4, (NH4)2 dengan kertas koran steril dan diikat
SO4, MgSO4, A. Acetat 99%,. dengan karet gelang. Dinginkan dan
2.2 Prosedur Kerja inkubasikan di ruang inkubasi selama 6
Prosedur yang dilakukan adalah dua hari.Penambahan Natrium acetat pada hari
buah nenas lewat masak dikupas, dicuci, ke-3 sudah terlihat pertumbuhan,
dan dipotong–potong. Potongan buah sedangkan menggunakan asam asetat
nenas tersebut, kemudian dihancurkan pertumbuhan terlihat pada hari ke-5.
dengan menggunakan blender dan
ditambahkan dengan 4 liter air. Hancuran

III. HASIL PENGAMATAN DAN PEMBAHASAN

No Foto Literatur Keterangan
1. A : Bibit Acetobacter
xilinum Pada ampas
nanas.

B : Bibit Acetobacter
xilinum berbentuk
lembaran pada
medium cair.

A A
(Documen pribadi, 2018) (Rofa, 2012).

2.

B
B (Rofa, 2012).
(Dokumen Pribadi 2018)
Pada praktikum ini menumbuhkan Kulit nanas dalam pembuatan Nata de
bakteri Acetobacter xilinum. coco berfungsi untuk membuat bakteri
Acetobacter xylinum karena pada kulit
nanas bersifat asam. Tempat yang asam
adalah media tumbuh dari bakteri tersebut.
Sumber karbon merupakan faktor
penting dalam proses fermentasi. Bakteri
untuk menghasilkan nata membutuhkan
sumber karbon bagi proses
metabolismenya. Sumber dari karbon yang
paling banyak digunakan adalah gula.
Glukosa akan masuk ke dalam sel dan
digunakan bagi penyediaan energi yang
dibutuhkan dalam perkembangbiakannya.
Fruktosa yang ada akan disintesis menjadi
selulosa. Jumlah gula yang ditambahkan
harus diperhatikan sehingga mencukupi
untuk metabolisme dan pembentukan
pelikel nata. Meskipun pada air kelapa
terdapat gula namun gula yang ada belum
mencukupi untuk pembentukan pelikel
sehingga perlu ditambahkan dari luar.
Selain gula, sumber nitrogen
merupakan faktor penting pula. Nitrogen
diperlukan dalam pembentukan protein
yang penting pada pertumbuhan sel dan
pembentukan enzim. Kekurangan nitrogen
menyebabkan sel kurang tumbuhan dengan
baik dan menghambat pembentukan enzim
yang diperlukan sehingga proses
fermentasi dapat mengalami kegagalan
atau tidak sempurna. Nitrogen yang
digunakan untuk pembuatan nata
umumnya adalah pupuk ZA yang relatif
murah dan cenderung asam dibandingkan
urea. pH medium dibuat sekitar 4,3
menggunakan asam cuka dan suhu
inkubasi sekitar 28 – 300C atau suhu
kamar dan dijaga dari kontaminan,
misalnya dengan ditutup kain saring atau
kertas koran. Bak fermentasi umumnya
dibuat bertingkat untuk menghemat
tempat.
Sumber nitrogen yang dapat
digunakan untuk mendukung pertumbuhan
aktivitas bakteri nata dapat berasal dari
nitrogen organik seperti misalnya protein
dan ekstrak yeast, maupun Nitrogen
anorganik seperti misalnya ammonium
fosfat, urea, dan ammonium slfat. Namun,
sumber nitrogen anorganik sangat murah
seperti ammonium sulfat & urea. Namun
tentunya bukan merupakan bahan makanan
alami.
Acetobacter xylinum merupakan
bakteri gram negative, aerobik berbentuk
batang pendek, dengan permukaan dinding
yang berlendir. Bakteri ini bisa
membentuk rantai pendek dengan satuan
6-8 sel. Bersifat nonmotil. Sebuah sel
tunggal Acetobacter xylinum mampu
polimerisasi molekul glukosa 200 000 per
detik ke β-1 ,4-glukan rantai yang
kemudian diekskresikan ke dalam
membentuk sekitar menengah pita seperti
bundle mikrofibril. Bakteri ini tidak
membentuk endospora maupun pigmen.
Pada kultur sel yang masih muda, individu
sel berada sendiri-sendiri dan transparan.
Koloni yang sudah tua membentuk lapisan
menyerupai gelatin yang kokoh menutupi
sel koloninya. Pertumbuhan koloni pada
medium cair setelah 48 jam inokulasi akan
membentuk lapisan pelikel dan dapat
dengan mudah diambil dengan jarum ose.
(Saxena, dkk. 1995)
Bakteri ini dapat membentuk asam
dari glukosa, etil alkohol, dan propel
alcohol, tidak membentuk indol dan
mempunyai kemampuan mengoksidasi
asam asetat menjadi CO2 dan H2O. sifat
yang paling menonjol dari bakteri itu
adalah memiliki kemampuan untuk
mempolimerisasi glukosa sehingga
menjadi selulosa. Selanjutnya selulosa
tersebut membentuk matrik yang dikenal
sebagai nata. Factor lain yang dominant
mempengaruhi sifat fisiologi dalam
pembentukan nata adalah ketersediaan
nutrisi, derajat keasaman, temperature, dan
ketersediaan oksigen.
Pada pengamatan dapat di lihat bahwa
Acetobacter xilinum pada media cair
berbentuk seperti lembaran-lembaran putih
dan pada media padat berbentuk seperti
kapas. Dan pada media padat
pertumbuhannya llebih cepat dibanding
media cair.
Dalam pertumbuhannya bakteri ini
sangat di pengaruhi faktor lingkungan
terutama ketersediaan nutrisi pada media,
menurut (Majunatha, 2012). Faktor-faktor
yang mempengaruhi Acetobacter xilinum Nucifera L) WATER AND IS
mengalami pertumbuhan adalah nutrisi, CONCENTRATES. India :
sumber karbon, sumber nitrogen, serta Departeman Of Fruits and
tingkat keasaman media temperatur, dan Vegetables Technology. Defence
udara (oksigen) senyawa karbon yang di Food Research Laboratory.
butuhkan dari fermentasi nata berasal dari Nurcahyo, Heru. 2011. Diktat
monosakarida dan disakarida. Sumber dari Bioteknologi. Yogyakarta:
karbon ini yang banyak di gunakan adalah Universitas Negeri Yogyakarta.
dari gula. Sumber nitrogen yang dapat di Purnomo, Bambang, 2011. Penuntun
gunakan untuk mendukung pertumbuhan Praktikum Mikrobiologi. Bengkulu:
aktivitas bakteri nata dapat berasal dari Fakultas Pertanian UNIB.
nitrogen organik. Seperti misalnya protein, Saragih, Y.P. 2004. Membuat Nata De
ekstrax yeast maupun nitrogen organik Coco. Jakarta: Puspa Swara.
seperti amonium posfat, urea dan amonium Shismwati, Rini Rahayu. 2014. Aspek
sulfat. Mutu Produk Nata de coco Dengan
Penambahan Sari Buah
IV. KESIMPULAN Mangga. Jurnal Teknik Industri
Dari praktikum kali ini dapat HEURISTIC. Vol. 11 No. 2
disimpulkan bahwa Bakteri Acetobacter Suryani, Ani. Dkk. 2005. Membut Aneka
xilinum adalah bakteri yang dapat Nata. Bogor: Penebar Swadaya
digolongkan pada famili bakter asam Susilawati L, Mubarik NR. 2002.
asetat yang lain karena dapat mensintesis Pembuatan Nata de Coco dan Nata
dan menghasilkan fibril, dapat di de Radia. Bogor:Laboratorium
tumbuhkan pada media buah nanas, karena Mikrobiologi, Jurusan Biologi
buah nanas memiki nutrisi yang bagus FMIPA IPB.
untuk pertumbuhan Acetobacter xilinum.
Pada media padat Acetobacter xilinum
akan membentuk koloni seperti kapas dan
pada media cair akan membentuk koloni
berupa lembara putih.
V. DAFTAR PUSTAKA
Jagannath, A dan Kalaiselvan, A. 2008.
The effect of Ph, sucrose and
ammonium sulphate concentrations
the production of bacterial cellulose
(Nata de coco) by Acetobacter
xylinum. World J Microbiol
Biotechinol. 24: 2693-2599.
Jumadi, Oslan dkk. 2015. Penuntun
Praktikum Mikrobiologi. Makassar:
Jurusan Biologi FMIPA UNM.
Lapus, M.M dan GollardoE.G. 2013. The
Organism and Culture Requirements,
Characteristics andidentity. The
Philipphine J. Science. 98 (2): 191-
198.
Majhunatha, Rajhu, P.S. 2012.
MODELING THE REOLOGICAL
OF TONDER COCONUT (Coco
LAMPIRAN