Aplikasi Response Surface Methodology (RSM) Pada Optimasi Ekstraksi Antosianin Kulit Kakao
(Theobroma cacao L)
Istiqomah Rahmawati1*, Boy Arief Fachri1, Yakub Hendrikson Manurung1, Nurtsulutsiyah1, Muhammad Reza2
1Chemical Engineering Department, University of Jember, Jember, Indonesia
2Chemistry Departement, Institut Teknologi Bandung, Bandung, Indonesia
*Corresponding author: istiqomah.rahmawati@unej.ac.id
ABSTRACT
Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi
hubungan variabel input dan mengembangkan
model prediksi yang digunakan untuk
mengoptimalkan kondisi saat proses antosianin.
Ekstraksi antosianin dari limbah kulit kakao
dilakukan dengan metode maserasi dengan ethanol
96% sebagai pelarut. Response surface
methodology merupakan sekumpulan teknik
matematika dan statistika yang digunakan untuk
menganalisa permasalahan dimana beberapa
variabel independen mempengaruhi variabel respon
yang bertujuan untuk mengoptimalkan respon.
Variabel yang digunakan dalam proses ekstraksi
yaitu ukuran partikel, bahan / pelarut ratio (w / v),
dan waktu ekstraksi optimum. Program Desain
Expert vs11 dengan Response Surface
Methodology (RSM) Box-Behnken Desain
digunakan untuk kondisi penelitian dan pilih proses
dari kombinasi faktor-faktor yang menghasilkan
respon yang optimal. Berdasarkan Box-Behnken
RSM Desain diketahui bahwa efek utama dari
ukuran partikel, bahan / pelarut rasio, dan waktu
ekstraksi optimum dalam proses ekstraksi adalah
faktor yang sangat mempengaruhi respon
konsentrasi antosianin yang dihasilkan. hubungan
antara variabel respon konsentrasi antosianin
dimodelkan
Y=0,000217-7,25468E-07A-0,001522B-
0,000048C+0,000035AB+2,88104E-07AC+0,000729BC
(A adalah ukuran partikel, B adalah rasio kakao
kulit / etanol; dan C adalah waktu ekstraksi)
Nilai respon optimal konsentrasi antosianin adalah
0,479 mM, dengan kondisi ukuran partikel pada
proses ekstraksi adalah 0,25 mm; rasio kakao kulit /
etanol adalah 0,0625 w / v, dan waktu ekstraksi 3
hari.
Kata kunci: Antosianin, Ethanol, Response Surface
Methodology
PENDAHULUAN
Indonesia adalah negara urutan ketiga sebagai
penghasil kakao dibawah Pantai Gading dan Ghana.
Tahun 2010/2011 jumlah hasil panen kakao
mencapai 450.000 ton dan mengalami kenaikan
pada tahun 2011/2012 hingga 500.000 ton (World
Cocoa Foundation, 2019). Besarnya produksi kakao
Indonesia mendorong nilai ekspor kakao Indonesia
menghasilkan devisa terbesar ketiga subsektor
perkebunan dibawah komoditi kelapa sawit ataupun
karet (Dirjen Bina Produksi Perkebunan, 2019).
Kakao dengan nama latin Theobroma cacao
L, Theobroma merupakan genus dari yang pohon
buah-buahan yang ditanam berbagai kawasan
tropitermasuk family dari Malvacae. Kakao
(Theobroma cacao L.) merupakan tumbuhan
berdaun lebar dengan buah berwarna kuning
kemerahan. Kakao memiliki kandungan senyawa
aktif yang dapat dipergunakan sebagai antiseptik,
antioksidan, antiinflamasi, dan diuretik. Kakao juga
dimanfaatkan sebagai obat tradisional yang
berfungsi untuk mengobati luka bakar, gigitan ular,
demam, bibir kering, batuk, rematik, dan kelelahan
(Albertini et al., 2015; Arlorio et al., 2005).
Struktur buah kakao terbagi menjadi empat
bagian utama yakni biji, plasenta, pulp, dan kulit.
Kulit kakao adalah komponen limbah dari pengolah
biji kakao dengan jumlah yang paling besar. Massa
kulit kakao mencapai 75% dari total keseluruhan
massa buah. Kulit buah kakao belum dimanfaatkan
secara optimal karena hanya dipergunakan sebagai
pakan ternak, dibakar, atau bahkan dibuang
sehingga menjadi limbah pertanian. Kulit kakao
banyak mengandung zat aktif yakni senyawa
feenolik seperti pirogalol, tanin, kuersetin, epitekin-
3-galat, resorsinol, serta lignin. Polifenol yang
terkandung dalam kulit kakao memiliki komponen
utama katekin, proantosianidin, dan antosianin.
Kandungan antosianin dalam 600 gram kulit buah
kakao mencapai 39,82% (Lubis et al., 2018;
Corcuera et al., 2012).
Pada penelitian ini digunakan Program
Design Expert 11 dengan Response Surface
Methodology (RSM) Box-Behnken Design
digunakan untuk penelitian dan memilih kondisi
proses dari kombinasi faktor-faktor yang
menghasilkan respons optimal. Berdasarkan Desain
RSM Box-Behnken diketahui bahwa efek utama
dari ukuran partikel, rasio bahan / pelarut, waktu
ekstraksi yang optimal, dan daya gelombang mikro
dalam proses ekstraksi adalah faktor-faktor yang
sangat mempengaruhi respons konsentrasi
anthocyanin yang dihasilkan.
Program Design Expert 11 dengan
Response Surface Methodology (RSM) Box-
Behnken Design dalam penelitian digunakan untuk
menganalisa pemodelan dari suatu permasalahan
dengan satu atau lebih perlakuan (Montgomery,
2001; Bas & Boyaci, 2007; Raissi & Farsani,
2009). Menurut Radojkovic et al. (2012), RSM
adalah kumpulan statistik dan matematika teknik
yang berguna untuk mengembangkan,
meningkatkan, dan mengoptimalkan proses, di
mana respon dipengaruhi oleh beberapa faktor
(variabel independen). Response Surface
Methodology (RSM) tidak hanya mendefinisikan
pengaruh variabel independen, tetapi juga
menghasilkan model matematis, yang menjelaskan
proses kimia atau biokimia. Gagasan utama dari
metode ini adalah mengetahui pengaruh variabel
bebas terhadap respon, mendapatkan model
hubungan antara variabel bebas dan respon serta
mendapatkan kondisi proses yang menghasilkan
respon terbaik. Di samping itu, keunggulan metode
RSM ini di antaranya tidak memerlukan data-data
percobaan dalam jumlah yang besar dan tidak
membutuhkan waktu lama (Iriawan & Astuti,
2006).
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk
mengidentifikasi hubungan antara variabel input
dan mengembangkan model prediksi yang
digunakan dalam mengoptimalkan kondisi proses
ekstraksi antosianin.
METODE
Metode Penelitian ini diawali dengan
ekstraksi zat warna. Tahap kedua penelitian ini
adalah optimasi kondisi ekstraksi antosianin pada
kulit kakao, dimana terdii dari 3 tahap, yaitu
pembuatan rancangan formulasi dan respon;
analisis respon; dan optimasi. Kemudian
dilanjutkan ke tahap verifikasi, sebagai pembuktian
terhadap prediksi dari nilai respon solusi formula
optimum.
Ekstraksi zat warna kulit kakao
Variabel yang akan dianalisis meliputi ukuran
partikel (0,105; 0,125; 0,149; 0,177; 0,25 mm),
rasio kulit kakao:pelarut (1:2; 1:4; 1:6; 1:8 b/v),
waktu maserasi (1,2,3 hari untuk metode maserasi
dan pelarut etanol. Tahapan ekstraksi zat warna
kulit kakao terdiri atas:
1. Kulit kakao dengan halus dimaserasi dalam
campuran pelarut (Lubis et al., 2018).
2. Sampel dimaserasi secara konvensional
3. Hasil rendaman disaring
4. Supernatan dikarakterisasi dengan
spektrofotometri UV-Vis (Supernatan disimpan
dalam wadah tertutup dan tidak tembus cahaya
di dalam freezer).
Optimasi Kondisi ekstraksi antosianin pada
kulit kakao
Dalam mengaplikasikan metode Response
Surface Methodology RSM ada 3 tahap, yaitu :
a). Tahap pembuatan rancangan formulasi dan
respon
Rancangan formulasi penelitian dan analisa
respon dilakukan dengan menggunakan program
Desain-Expert v11. Pada penelitian ini yang
menjadi variabel terikat adalah konsentrasi dari
antosianin hasil ekstraksi sementara variabel
bebasnya adalah A. ukuran partikel (0,105; 0,125; b). Tahap analisis respon
0,149; 0,177; 0,25 mm), B. rasio kulit kakao:pelarut Respon dari nilai variabel terikat dianalisa
(1:2; 1:4; 1:6; 1:8 b/v), C. waktu maserasi (1,2,3 dengan ANOVA. Model ANOVA yang digunakan
hari untuk metode maserasi), Hasil rancangan dapat dipilih sesuai yang disarankan oleh program
formulasi penelitian dari program desain expert yaitu model yang memiliki tingkat tertinggi dan
diterapkan dalam pelarut etanol tertera pada Tabel menghasilkan nilai signifikan ANOVA. Model
1. untuk metode maserasi. ANOVA yang terdapat pada design ini adalah
Ukuran Rasio Waktu Linear, Quadratic, Special Cubic, dan Cubic. Model
Formula (Mesh) (b/v) (hari) yang memberikan signifikansi pada ANOVA dan
1 100 0.0375 2 non signifikansi pada Lack of fit dipilih untuk
2 100 0.0375 2 menganalisis variabel. Selain itu, program DX v11
3 100 0.0375 2 juga memberikan fasilitas plot kenormalan residual
4 60 0.0625 1 (normal plot of residual) yang mengindikasikan
5 60 0.0125 1 apakah residual (selisih antara respon aktual dengan
6 100 0.0795 2 nilai respon yang diprediksikan) mengikuti garis
7 100 0.0375 3.7 kenormalan (garis lurus). Titik-titik data yang
8 140 0.0125 3 semakin mendekati garis kenormalan menunjukkan
9 140 0.0625 1 data yang menyebar normal, yang berarti hasil
10 100 0.0375 2 aktual akan mendekati hasil yang diprediksikan
11 140 0.0625 3 oleh program (Kumari et al., 2008).
12 100 0.0045 2
13 100 0.0375 2 c). Tahap optimasi
14 160 0.0375 2 Respon (konsentrasi antioksidan) ditentukan
15 60 0.0125 3 optimasinya dalam program Desain Expert v11.
Optimasi program tersebut dilakukan sesuai data
16 140 0.0125 1
variabel dan data pengukuran respon yang
17 30 0.0375 2 dimasukkan. Keluaran dari tahap optimasi adalah
18 100 0.0375 0.32 rekomendasi beberapa formula baru yang optimal
19 60 0.0625 3 menurut program. Formula paling optimal adalah
20 100 0.0375 2 formula dengan nilai desirability maksimum. Nilai
Nilai batas minimum dan maksimum desirability merupakan nilai fungsi tujuan optimasi
yang menunjukkan kemampuan program untuk
dimasukkan ke dalam program Desain-Expert v11
memenuhi keinginan berdasarkan kriteria yang
Response Surface Methodology (RSM) Box- ditetapkan pada produk akhir. Kisaran nilainya dari
Behnken Design untuk diacak. Setelah dilakukan 0 sampai 1,0. Nilai desirability yang semakin
pengacakan kombinasi, didapatkan 20 perlakuan mendekati nilai 1,0 menunjukkan kemampuan
yang akan dianalisis untuk ekstraksi dengan metode program untuk menghasilkan produk yang
maserasi dalam setiap pelarut yang dipergunakan, dikehendaki semakin sempurna. Tujuan optimasi
bukan untuk memperoleh nilai desirability 1,0,
kadar air dibawah 7,5% tergantung pada intesitas
namun untuk mencari kondisi terbaik yang
sinar matahari (Ariyanti, 2017). mempertemukan semua fungsi tujuan (Raissi &
Kulit kakao kering selanjutnya dihaluskan Farzani, 2009).
dan diayak menggunakan ayakan yang sesuai
dengan ukuran partikel (60, 80, 100, 120, dan 140
mesh) yang diperlukan untuk eksperimen.
Alat dan bahan yang digunakan dalam
penelitian ialah sebagai berikut :
Alat yang digunakan dalam penelitian ini
meliputi peralatan gelas, hot plate dan anak
stirrer,spatula, neraca analitik, pemotong kaca,
pencacah bahan, screen printing, sonikator,
sentrifuge, oven, furnace, pinset, multimeter,
gunting, penjepit kertas, spektrofotometer UV-VIS,
dan solar simulator. Sedangkan, bahan yang
digunakan dalam penelitian ini meliputi Kulit kakao
yang berasal dari Pusat Penelitian Kopi dan Kakao
Indonesia, Asam sitrat (pa), Metanol (pa), Isopropil
alkohol (pa), Akuades, TiO2(pa), Kaca Indium Tin
Oxide (ITO), Bubuk grafit, Synthetic graphite film,
Larutan elektrolit (KI, Polietilen glikol, I2), Kaca
preparat, Asetonitril (pa), Cetyltrimethylammonium
bromide (CTAB) (pa), dan Asam asetat (pa).
HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi antosianin kulit kakao
Preparasi kulit kakao yang akan diekstraksi
diawali dengan proses pengeringan untuk
memperoleh kulit kakao kering. Kulit kakao kering
selanjutnya dihaluskan dan diayak menggunakan
ayakan (60, 80, 100, 120, dan 140 mesh) yang
sesuai dengan ukuran partikel yang diperlukan
untuk eksperimen. Proses preparasi bahan baku
kulit kakao tertera pada Gambar 1.
Gambar 1. Proses pengeringan dan pengayakan
bahan baku ekstraksi kulit kakao
Kulit kakao yang sudah halus dan
dipisahkan berdasarkan ukuran partikelnya dapat
dipergunakan untuk proses selanjutnya yakni
ekstraksi antosianin. Ekstraksi antosianin
menggunakan metode maserasi.
Ekstraksi dengan menggunakan metode
maserasi didasarkan pada pengikatan/pelarutan zat
aktif berdasarkan sifat kelarutannya dalam suatu
pelarut (like dissolved like). Pengikatan zat aktif
dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia
dalam pelarut yang sesuai pada temperatur kamar.
Pelarut akan masuk ke dalam sel melewati dinding
sel, isi sel akan larut karena adanya perbedaan
konsentrasi antara larutan di dalam sel dengan di
luar sel. Larutan yang konsentrasinya tinggi akan
terdesak keluar dan diganti oleh pelarut dengan
konsentrasi rendah (proses difusi). Peristiwa
tersebut berulang sampai terjadi keseimbangan
konsentrasi antara larutan di luar sel dan di dalam
sel.
Antosianin dalam kulit kakao dimaserasi
dengan pelarut etanol 96%. Proses ekstraksi dengan
metode maserasi meninjau pengaruh beberapa
variabel yakni A. ukuran partikel (0,105; 0,125;
0,149; 0,177; 0,25 mm), B. rasio kulit kakao:pelarut
(1:2; 1:4; 1:6; 1:8 b/v), C. waktu maserasi (1,2,3
hari) dalam setiap pelarut yang dipergunakan untuk
ekstraksi.. Hasil dari proses maserasi dianalisa
dengan menggunakan spektrofotometer UV-VIS
untuk menentukan kadar antosianin yang terdapat
pada sampel kulit kakao. Kondisi sampel pada saat
maserasi untuk setiap pelarut yang digunakan
tertera pada Gambar 2.
.
Gambar 2. Kondisi sampel ekstraksi maserasi
dalam pelarut etanol
Analisa Penentuan Panjang Gelombang
Antosianin adalah senyawa polifenol yang
memberikan warna merah-biru pada tumbuhan.
Warna terbentuk karena adanya absorpsi cahaya
pada panjang gelombang tertentu. Absorpsi cahaya
dengan panjang gelombang tertentu pada senyawa
organik terjadi karena adanya transisi п → п* dan n
→ п*. Struktur dari senyawa organik yang dapat
menghasilkan warna harus memiliki gugus tak
jenuh yang dapat mengalami transisi п → п* dan n
→ п* atau yang disebut kromofor. Jenis antosianin
yang terkandung pada kulit kakako adalah
Pelargonidin (Pg) dengan warna kuning kecoklatan.
Struktur kimia Pelargonidin (Pg) tertera pada
Gambar 3.
H
OH
HO O+
H
OH
H
Gambar 3. Struktur kimia Pelargonidin (Pg)
Ekstrak antosianin dikarakterisasi dengan
spektrofotometer UV-Vis, untuk menentukan nilai
absorbansi dari ekstrak untuk dikonversikan
menjadi konsentrasi antosianin yang ada pada
setiap sampel.
Karakterisasi antosianin diawali dengan
penentuan panjang gelombang optimum dari
ekstrak antosianin untuk metode ekstraksi maserasi
serta berbagai pelarut yang digunakan dalam proses
ekstraksi. Panjang gelombang yang digunakan pada
rentang 400 - 800 nm. Panjang gelombang
maksimum antosianin yang diekstrak dari kulit
kakao adalah 494 nm. Hasil ini sesuai dengan
warna ekstrak kulit kakao yakni kuning kecoklatan
(warna komplementer) dengan analisa warna yang
diserap adalah biru-hijau. Hasil spektrum analisa
panjang gelombang optimum dari antosianin
ekstrak kulit kakao tertera pada Gambar 4.
Gambar 4. Penentuan panjang gelombang
optimum ekstrak antosianin kulit kakao
Penentuan konsentrasi pigmen yang setara dengan
antosianin dari ketan hitam dilakukan dengan
menggunakan persamaan Lambert-Beer yaitu :
A= ɛ b c
Dengan,
A : Absorbansi
ɛ : koefisiensi absorptivitas molar (Lmol-1cm-1)
b : tebal kuvet (cm)
c : konsentrasi (M)
Dengan mengukur absorbansi dari larutan ekstrak
antosianin dapat dihitung konsentrasi larutan,
dengan syarat nilai koefisien absorptivitas molarnya
diketahui. Berdasarkan literatur koefisien
absorbansi molar (ɛ) untuk Pelargonidin (Pg) dari
ekstrak kulit kakao adalah 26900 Lmol-1cm-1.
Optimasi Kondisi Proses Pengolahan
dengan RSM
Hasil analisa konsentrasi ekstraksi kuit
kakao terhadap respon dapat dilihat pada Tabel 2.
Hasil pengukuran pengaruh kondisi ekstraksi
terhadap respon konsentrasi antosianin tertera pada
Tabel 2. Berdasarkan pada Tabel 2 dapat dilihat
nilai respon konsentrasi antosianin untuk metode
maserasi, konsentrasi antosianin adalah 0,000080-
0,000479 M untuk pelarut etanol. Hasil analisis
ragam (ANOVA) tertera pada Tabel 3. Model
persamaan matematika untuk memprediksi
konsentrasi antosianin signifikan dengan nilai p
lebih kecil dari 0,05. Hasil ANOVA juga
menunjukkan bahwa masing-masing komponen
 yaitu ukuran partikel, rasio kulit kakao:pelarut, dan Persamaan RSM untuk optimasi kondisi
waktu maserasi, berpengaruh nyata (signifikan) proses ekstraksi antosianin dengan metode maserasi
terhadap respon konsentrasi antosianin. Lack of menggunakan pelarut etanol terhadap respon
konsentrasi antosianin adalah sebagai berikut:
Fit F-Value respon rendemen dengan nilai p lebih
besar dari 0,05 menunjukkan Lack of fit yang tidak Y=0,000217-7,25468E-07A-0,001522B-
signifikan. Nilai Lack of fit yang tidak signifikan 0,000048C+0,000035AB+2,88104E-07AC+0,000729BC
merupakan syarat untuk model yang baik karena
menunjukkan adanya kesesuaian data respon Keterangan:
konsenntrasi antosianin dengan model (Keshani et al., A: ukuran partikel
2010). B: rasio kulit kakao:pelarut
C: waktu maserasi
Ukuran Konsentrasi
Rasio Waktu
RUN partikel
(gr/ml) (day)
antosanin Persamaan tersebut menunjukkan bahwa
(mesh) Larutan Induk
respon konsentrasi antosianin akan meningkat
KE 1 100 0,0375 2 0,0002439 berbanding lurus dengan peningkatan ukuran
KE 2 100 0,0375 2 0,0002335 partikel dan rasio kulit kakao:pelarut serta rasio
KE 3 100 0,0375 2 0,0002349 kulit kakao:pelarut dan waktu maserasi. Grafik
KE 4 60 0,0625 1 0,0002587 normal plot of residual yang mengindikasikan
KE 5 60 0,0125 1 0,0001145 hubungan antara nilai aktual dan nilai yang
KE 6 100 0,0795 2 0,0002677 diprediksikan pada Gambar 5., mendekati garis
KE 7 100 0,0375 3,7 0,000281 kenormalan yang menunjukkan data untuk respon
KE 8 140 0,0125 3 0,0001234 rendemen menyebar normal. Hal ini berarti bahwa
KE 9 140 0,0625 1 0,0003494
hasil aktual akan mendekati hasil yang
KE 10 100 0,0375 2 0,0002959
diprediksikan oleh Program DX vs11. Bentuk
KE 11 140 0,0625 3 0,0004788
permukaan dari hubungan interaksi antar komponen
KE 12 100 0,0045 2 8,03E-05
variabel dapat dilihat lebih jelas pada grafik tiga
KE 13 100 0,0375 2 0,0002394
dimensi yang ditunjukkan pada Gambar 6.
KE 14 160 0,0375 2 0,00029
KE 15 60 0,0125 3 0,0001249
KE 16 140 0,0125 1 0,0001636
KE 17 60 0,0375 2 0,000174
KE 18 100 0,0375 0,3 0,0002691
KE 19 60 0,0625 3 0,0002454
KE 20 100 0,0375 2 0,0002439
Gambar 5. Plot kenormalan residual respon
Tabel 3. Analisa model untuk respon konsentrasi antosianin
Respon Persamaan Matematika Signifikan Lack of R2
(p<0,05) fit
(p<0,05)
Konsentrasi Y=0,000217-7,25468E-07A- 0,0058 0,1142 0,8582
antosianin 0,001522B-
ekstraksi 0,000048C+0,000035AB+2,88104E-
maserasi 07AC+0,000729BC
etanol

Analisis respon konsentrasi antosianin ekstraksi

maserasi dengan etanol

Gambar 6. Grafik tiga dimensi hasil uji respon
konsentrasi antosianin
Gambar 7. Grafik contour plot nilai desirability
formula optimum.
Gambar 6 dan 7, menjelaskan hasil optimasi
dalam bentuk tiga dimensi (3D) dan bentuk contour
(2D). Contour plot merupakan gambaran dua
dimensi dari respon yang disajikan dengan
menggunakan model prediksi untuk nilai
konsentrasi. Garis-garis yang terdiri atas titik-titik
pada grafik contour plot menunjukkan kombinasi
dari ketiga komponen dengan jumlah berbeda yang
menghasilkan nilai konsentrasi tertentu yang sama.
Titik prediksi pada gambar tersebut menunjukkan
kombinasi waktu 3 hari yang menghasilkan nilai
konsentrasi 0.001365M. Grafik tiga dimensi (3-D)
menunjukkan proyeksi dari grafik contour plot.
Area yang rendah pada grafik tiga dimensi
menunjukkan nilai konsentrasi yang rendah,
sedangkan area yang tinggi menunjukkan nilai
konsentrasi yang tinggi.
Faktor yang mempengaruhi ekstraksi
antosianin pada kulit kakao adalah adanya pengaruh
rasio dapat meningkatkan hasil ekstraksi disinyalir
terjadi karena semakin besar jumlah kulit kakao
yang ada dalam media ekstraksi mengindikasikan
sumber zat aktif yang dapat diekstraksi juga
semakin tinggi, sehingga hasil antosianin yang
diperoleh juga semakin besar dengan meningkatnya
rasio b/v dar dari kulit kakao/pelarut. Namun, saat
jumlah kulit kakao ditingkatkan secara signifikan
kondisi jenuh akan terbentuk sehingga proses
ekstraksi balik terjadi yang mengakibatkan
konsentrasi antosianin di produk menurun.
Faktor kedua yaitu waktu ekstraksi juga
menunjukkan pengaruh terhadap konsentrasi
antosianin dimana semakin lama waktu ekstraksi
maka konsentrasi produk semakin tinggi. Hal ini
dianalisa karena lamanya proses kontak antara
antosianin dengan pelarut menyebabkan jumlah zat
aktif yang dihasilkan meningkat.
Faktor lain yang dianalisa dalam proses
ekstraksi antosianin adalah ukuran partikel kulit
kakao. Semakin kecil ukuran partikel kulit kakao
(ukuran mesh semakin besar) mengindikasikan
adanya peningkatan konsentrasi antosianin.
Penurunan ukuran partikel akan menyebabkan luas
permukaan partikel kulit kakao semakin tinggi
sehingga probabilitas kontak antara antosianin yang
terkandung dalam kulit kakao dengan pelarut
menjadi meningkat, hal ini mendorong peningkatan
laju ekstraksi sehingga kuantitas antosianin yang
dihasilkan menjadi besar.
KESIMPULAN
Berdasarkan Desain RSM Box-Behnken diketahui
bahwa ukuran partikel rasio bahan/pelarut, dan
waktu ekstraksi adalah faktor-faktor yang
mempengaruhi respon konsentrasi antosianin kulit
kakao yang dihasilkan. Hubungan antara variabel
dengan respon konsentrasi antosianin yang
dimodelkan:
Y=0,000217-7,25468E-07A-0,001522B-
0,000048C+0,000035AB+2,88104E-
07AC+0,000729BC
 DAFTAR PUSTAKA Montgomery, D.C. 2001. Design and Analysis of
Albertini, Schoubben, Guarnaccia, Pinelli, Vecchia, Experimental. John Wiley & Sons Inc, New
York.
Ricci, Renzo, and Blasi. 2015.Effect of
Radojkovic, M., Zekovic, Z., Jokic, S., and
Fermentation and Drying on Cocoa Vidovic, S. 2012. Determination of optimal
extraction parameters of mulberry leaves
Polyphenols. Journal of Agricultural and
using Response Surface Methodology
Food Chemistry. 63 (45) : 9948-9953. (RSM). Romanian Biotechnological Letters.
17(3): 7295–7308.
Ariyanti, D., Catarina, S.B., dan Cahyo, A. 2014.
Raissi, S., and Farzani, R.E. 2009. Statistical
Modifikasi Tepung Umbi Talas Bogor
(Colocasia esculenta L Schott) dengan process optimization through multi-response
Teknik Oksidasi sebagai Bahan Pangan surface methodology. World Academy of
Pengganti Tepung Terigu. Jurnal Reaktor. Science, Engineering and Technology. pp.
(on line), vol. 15 nomor 8, 267–271.
(http://ejournal.undip.ac.id, diakses 13
Maret 2016). World Cocoa Foundation. 2019.
Bas, D. and Boyaci, I.H. 2007. Modelling and
optimization I: usability of response surface
methodology. J. Food Eng. 78: 836–845.

Corcuera, L. A., S. Amézqueta, L. Arbillaga, A.

Vettorazzi, S. Touriño, J. L. Torres, and A.
López de Cerain. 2012. A Polyphenol-
Enriched Cocoa Extract Reduces Free
Radicals Produced by Mycotoxins. Food
and Chemical Toxicology 50 (3–4). Elsevier
Ltd: 989– 95. doi:10.1016/j.fct.2011.11.052.
Dirjen Bina Produksi Perkebunan. 2019.
Iriawan, N., dan Astuti, S.P. 2006. Mengolah Data
Statistik dengan Mudah Menggunakan
Minitab 14. Yogyakarta. Penerbit ANDI.
Kumari, K.S., Babu, I.S., and Rao, G.H. 2008.
Process optimization for citric acid
production from raw glycerol using
response.
Lubis, S.S., Sulastri, E., dan Zubair, M.S. 2018.
Mikroenkapsulasi Antosianin Kulit Buah
Kakao (Theobroma cacaoL.) dengan
Metode Koaservasi Kompleks. Jurnal
Farmasi Galenika. 4(2): 106-112.