ISOLASI DAN IDENTIFIKASI

A. Escherichia coli
 Kebanyakan strain merupakan flora normal intestinal mamalia
 Morfologi sel : Gram negative, basil, fakultatif anaerob, umumnya motil
 Morfologi koloni : circual, raised, entire, bbrp strain menghasilkan warna Green-
Metalic Sheen pd EMB
 Sifat biokemis : katalase +, oksidase -, lactose fermenter
 Hasil uji IMViC :+ ,+, -, -
 Specimen : feses, jaringan dari kasus septicemia, susu hewan mastitis, mid-stream
urine & swab cervix vagina
B. Salmonella sp.
 Morfologi sel : Gram negative, fakultatif anaerob, rod-shaped (basil), motil
(berflagella peritrikus) kecuali salmonella pillorum & salmonella gallinarum, tdk
membentuk spora
 Morfologi koloni : circular, raised, entire
 Uji bikemis : katalase +, oksidase -, non lactose fermenter
 Specimen : feses, darah, jaringan & isi dari intestinum pd hewan mati
1. Mac Conkey Agar
 Tujuan : untuk mengisolasi & diferensiasi anggota dari enterobacteriacea
berdasarkan kemampuannya untuk memfermentasi laktosa.
 Komposisi : lactose, bile salt, crystal violet, NaCl, neutral red, pepton pancreatic
digest digest of gelatin, agar
 Indicator pH : Neutral red (colorless > pH 6,8 & merah pd pH < 6,8)
 Prinsip : laktosa difermentasi oleh bakteri, produksi asam akan menurunkan pH
media. Penurunan pH ditunjukkan oleh perubahan indicator neutral red menjadi
merah muda.
 Interpretasi :
 (+) lactose fermenter koloni akan berwarna merah/pink
 (-) non-lactose fermenter koloni akan berwarna normal/warna media (colorless)
2. Eosin Methylene Blue
 Tujuan : digunakan untuk isolasi bakteri fecal coliform
 Komposisi : pepton (sumber energy), laktosa, sukrosa, eosin Y, methylene blue
 Indicator pH : eosin Y & methylene blue
 Prinsip : zat warna (eosin Y & methylene blue) menginhibisi pertumbuhan
organism egram-positif. Pewarnaan ini berfungsi sbg indicator diferensial pd
fermentasi karbohidrat.
 Interpretasi :
 Lactose fermenter : pink (slow), green metalik sheen/hitam (fast), krn pd ph turun
bakteri akan mengambil kompleks warna methylene blue eosin untuk diserap ked
lam koloni
 Non-fermenter : normal/warna media