Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Jurnal Farmasi Indonesia

VOL 31 (3) 2020: 171–180 | ARTIKEL PENELITIAN

Profil Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan dari Guazuma ulmifoliaEkstrak Daun

Menggunakan Ekstraksi Pelarut Yang Berbeda

Mohammad Rafi1,2,*, Nadya Meitary3, Dewi Anggraini Septaningsih2,4, Maria Bintang3

1. Jurusan
Kimia, Fakultas MIPA, IPB University, Jalan Tanjung Kampus IPB Dramaga, Bogor 16880,
Indonesia
2. PusatPenelitian Biofarmaka Tropis, IPB University, Jalan Taman Kencana No. 3 Kampus IPB Taman
Kencana, Bogor 16128, Indonesia
3. Departemen Biokimia, Fakultas MIPA, IPB University, Jalan Tanjung Kampus IPB Dramaga, Bogor
16880, Indonesia
4. Laboratorium Penelitian Lanjutan, IPB University, Jalan Palem Kampus IPB Dramaga, Bogor 16680,
Indonesia

Artikel Info ABSTRAK

Dikirim: 09-06-2020 Guazuma ulmifolia merupakan salah satu tumbuhan tropis yang umum
Diperbaiki: 07-01-2020 digunakan sebagai obat tradisional penurun berat badan sebagai herbal
Diterima: 01-09-2020 pelangsing dan penurun kolesterol dalam tubuh. Daun dariG.ulmifolia
mengandung senyawa fenolik seperti flavonoid dan tanin yang berperan dalam
* Penulis yang sesuai
aktivitas biologisnya. Dalam penelitian ini, kami menentukan kandungan total
Mohammad Rafi
fenolat, flavonoid, tanin, aktivitas antioksidan, dan profil spektrum FTIR dari
Surel: empat ekstrak.G.ulmifolia daun-daun. Metode ekstraksi yang digunakan dalam
mra@apps.ipb.ac.id penelitian ini adalah maserasi bertahap dengan pelarut yang berbedan-heksana,
etil asetat, etanol, dan air. Kandungan total fenolat dan flavonoid ditemukan
tinggi dalam ekstrak etanolG.ulmifolia pergi dengan
35,42 dan 44,85mg QE/g bubuk kering, masing-masing. Kandungan tanin total
tertinggi diperoleh pada ekstrak etil asetatG.ulmifolia daun sebesar 0,55%.
Aktivitas antioksidan dari empat ekstrakG.ulmifolia daun diukur menggunakan
metode DPPH, CUPRAC, dan daya pereduksi. Aktivitas antioksidan tertinggi
untuk metode DPPH dan CUPRAC diperoleh pada ekstrak etil asetat dengan
kapasitas antioksidan masing-masing sebesar 55,47µmol trolox/g serbuk kering.
Sedangkan menggunakan uji daya pereduksi memberikan kapasitas 176,75µmol
trolox/g bubuk kering dalam ekstrak air. Pola spektrum FTIR dari empat ekstrak
G.ulmifolia daun memberikan karakteristik yang berbeda dari setiap profil
spektrum. Analisis komponen utama menggunakan spektrum FTIR
menunjukkan pengelompokan yang baik untuk setiap ekstrak dengan
variabilitas data 94% (PC1= 77% dan PC2 = 17%). Dapat disimpulkan bahwa
setiap ekstrakG.ulmifolia daun memberikan profil fitokimia yang berbeda
(kandungan fenolat, flavonoid, tanin, dan spektrum FTIR) yang berkontribusi
terhadap aktivitas antioksidan. Aktivitas antioksidan ini terutama dipengaruhi
oleh konsentrasi senyawa fenolik yang diketahui memiliki sifat antioksidan.

Kata kunci: antioksidan, Guazuma ulmifolia, fenolat, flavonoid, tanin

PENGANTAR dari tanaman ini mengandung antiulkus

Obat tradisional yang berasal dari tumbuhan
merupakan salah satu cara memanfaatkan sumber daya alam
untuk memelihara kesehatan dan mengobati penyakit di
masyarakat. Salah satu tanaman yang umum digunakan
sebagai obat tradisional adalahGuazuma ulmifolia, yang
dikenal sebagai cedar bajingan, dan termasuk dalam famili
Sterculiaceae. Aktivitas farmakologis yang terbukti
(Berenguerdkk., 2007), antihipertensi (Magos dkk.,
2008), antidiabetes (Adnyana dkk., 2013),
antioksidan, antikolinesterase, antijamur modulasi
antibiotik (Morais dkk., 2017), aktivitas analgesik
dan antiinflamasi (Damor dkk., 2018). pemanfaatan
dariG.ulmifolia sebagai obat tradisional dapat
dikaitkan dengan adanya bahan kimia

J Pharm Indonesia 31(3), 2020, 171-180 | indonesianjpharm.farmasi.ugm.ac.id 171

Hak Cipta © 2020 THE AUTHOR(S). Artikel ini didistribusikan di bawah Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0
International (CC BY-SA 4.0)
 Profil Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan Guazuma ulmifolia
senyawa seperti flavonoid, alkaloid, glikosida,
fitosterol, dan saponin bertanggung jawab untuk
aktivitas biologis tertentu. Komposisi fitokimia dan
konsentrasinya sangat dipengaruhi oleh beberapa
faktor, seperti genetik, kondisi pertumbuhan
lingkungan, panen, dan perlakuan pasca panen.
Ekstraksi metabolit menggunakan metode yang
berbeda dan ekstraksi pelarut juga memainkan
peran penting dalam tingkat metabolit yang
diekstraksi (Rafidkk., 2020). Konsistensi komposisi
dan tingkat konsentrasi senyawa bioaktif akan
memberikan aktivitas biologis yang konsisten.
G.ulmifolia kaya akan senyawa fenolik seperti asam
fenolat, flavonoid, dan tanin, dan senyawa tersebut
telah dikenal potensinya sebagai antioksidan
(Pereira dkk., 2019). Senyawa antioksidan dalam
ekstrak tumbuhan memiliki struktur molekul dan
polaritas yang berbeda. Berdasarkan struktur
molekulnya, senyawa antioksidan dengan sifat
kimia dan polaritasnya dapat larut atau tidak dalam
suatu pelarut. Pelarut polar sering digunakan
untuk ekstraksi polifenol dari matriks tanaman
(Altemimidkk., 2017). Etanol dan air sebagai pelarut
polar dikenal untuk ekstraksi polifenol dan aman
untuk dikonsumsi manusia. Etil asetat memiliki
polaritas sedang dan toksisitas rendah yang dapat
mengekstrak banyak senyawa antioksidan dari
polar ke nonpolar.
Dari penelitian-penelitian sebelumnya, telah
banyak makalah yang melaporkan komposisi dan
konsentrasi metabolit atau golongan senyawa yang
ada dalam G.ulmifolia dengan aktivitas biologis
tertentu (Maldini dkk., 2013; Moraisdkk., 2017;
Prahastutidkk., 2020). Namun, tidak ada makalah yang
dilaporkan untuk mengekstraksi metabolit dalam
G.ulmifolia dengan ekstraksi pelarut yang berbeda
menggunakan maserasi bertahap untuk mengetahui
profil fitokimia dan aktivitas antioksidan. Dalam
penelitian ini, kami telah menyelidiki profil fitokimia
dan aktivitas antioksidan dariG.ulmifolia
menggunakan berbagai polaritas pelarut (n-heksana,
etil asetat, etanol, dan air). Kami juga membuat
korelasi antara aktivitas antioksidan dan kandungan
fitokimia (fenolik, flavonoid, dan tanin) untuk
menunjukkan kontribusinya terhadap aktivitas
antioksidan. Dengan memetakan profil fitokimia dan
aktivitas antioksidan dari berbagaiG.ulmifolia ekstrak,
kami akan memiliki informasi yang lebih baik tentang
karakteristik masing-masing ekstrak.
BAHAN DAN METODE
G.ulmifolia daun diperoleh dari
Tropical Biopharmaca Research Center (TropBRC)
IPB University, Bogor, Indonesia. Tuan Taopik
172
Ridwan mengidentifikasi tanaman tersebut, dan
spesimen voucher disimpan di TropBRC, IPB
University. Metanol, etanol,n-heksana, etil
asetat, reagen Folin-Ciocalteu (FC), natrium
karbonat, kalium permanganat, aluminium (III)
klorida, kalium asetat, tembaga (II) klorida,
kalium ferisianida (K3Fe(CN)6), asam
trikloroasetat (TCA) diperoleh dari Merck
(Darmstadt, Jerman). Asam galat, quercetin,
trolox, neocuproine, indigo carmine, 2,2-
diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) dibeli dari
Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA).
Persiapan dan ekstraksi sampel
G.ulmifolia daun dikeringkan, dihaluskan
menjadi serbuk, kemudian diayak dengan ukuran
partikel 100 mesh. Ekstraksi dilakukan dengan
menggunakan prosedur yang dijelaskan dalam
Farmakope Herbal IndonesiaNS edisi (Departemen
Kesehatan Republik Indonesia, 2008). Sebanyak 20
gram sampel dimaserasi dengan 200 mLn-heksana
selama 24 jam pada suhu kamar. Setelah sampel
diaduk terus menerus selama 6 jam, sampel dibiarkan
selama 18 jam lagi tanpa diaduk. Filtrat dikumpulkan
dan dipekatkan dengan rotary evaporator pada suhu
50ᵒC. Residu dari proses filtrasi dengann-heksana
kemudian diekstraksi dengan etil asetat, dan filtrat
yang diperoleh dipekatkan. Selanjutnya residu dari
filtrasi sebelumnya diekstraksi dengan etanol sampai
diperoleh filtrat. Residu hasil penyaringan etanol
sebelumnya kemudian dimaserasi dan diekstraksi
dengan air menggunakan metode refluks hingga
diperoleh filtrat pekat. Proses ekstraksi menggunakan
masing-masing pelarut (n-heksana, etil asetat, etanol,
dan air) diulang sebanyak tiga kali. Kemudian filtrat
pekat yang dihasilkan dari masing-masing pelarut
ditimbang untuk diukur rendemennya.
Penentuan total fenolat
Kandungan total fenolat (TPC) dalam setiap
ekstrak G.ulmifolia daun ditentukan menggunakan
metode Folin-Ciocalteu menggunakan prosedur yang
dijelaskan oleh Rafi dkk., (2018). Ekstrak n-heksana, etil
asetat, etanol, dan air masing-masing dipipet 10µL ke
dalam 96 well plate. Kemudian air suling sebanyak
160µL, 10µL reagen FC 10%, dan 20µL Na . 7,5%2
BERSAMA3 ditambahkan kemudian ke dalam setiap
ekstrak di 96 pelat sumur. Campuran kemudian
dihomogenkan dan diinkubasi selama 30 menit pada
suhu kamar. Absorbansi maksimum campuran diukur
pada 750nm menggunakan pembaca lempeng mikro
(Epoch-BioTek, Winooski, USA). Kurva kalibrasi adalah
Volume 31 Edisi 3 (2020)
Mohammad Rafi
dibuat dengan mengencerkan asam galat dalam etanol
dalam 5 konsentrasi berbeda sebagai 10, 30, 50, 70, 100
(mg/L). TFC dari masing-masing ekstrak dinyatakan
sebagai miligram asam galat yang setara per gram bubuk
keringG.ulmifolia (mg GAE/g bubuk kering).
Penentuan total flavonoid
Kandungan flavonoid total (TFC) dari masing-
masing ekstrak diselidiki menggunakan metode
kolorimetri aluminium klorida mengikuti prosedur
yang dijelaskan oleh Lee dkk., (2011). Masing-
masing dari 10µL ekstrak darin-heksana, etil asetat,
etanol, dan air dari G.ulmifolia daun ditambahkan
60µL etanol, 10µL 10% AlCl3, 10µL 1M CH3COOK,
dan 120µL aquades selanjutnya ke dalam 96 well
plate. Campuran dihomogenkan dan diinkubasi
selama 30 menit pada suhu kamar. Kemudian
absorbansi campuran berada pada 415nm
menggunakan pembaca lempeng mikro (Epoch-
BioTek, Winooski, USA). Kurva kalibrasi dibuat
dengan mengencerkan kuersetin dalam etanol
dalam 7 konsentrasi berbeda sebagai 20, 40, 60, 80,
100, 120, 140 (μg/mL). TFC dinyatakan sebagai
miligram quercetin setara per gram bubuk kering
G.ulmifolia daun (mg QCE/g bubuk kering).
Penentuan tanin total
Kandungan tanin total (TTC) dalam setiap
ekstrak ditentukan dengan menggunakan prosedur
yang dijelaskan Farmakope Herbal Indonesia 1NS
edisi (Departemen Kesehatan Republik Indonesia,
2008). Masing-masing dari 0,2 g ekstrak dari
G.ulmifolia daun ditambahkan ke dalam labu
Erlenmeyer 250 mL dan dipanaskan selama 30 menit.
Kemudian campuran dibiarkan selama 10 menit dan
disaring hingga diperoleh residu. Proses ini diulangi
untuk memastikan semua tanin terekstraksi dari
residu. Selanjutnya, 2,5 mL campuran ditambahkan
dengan 2,5 mL indigo carmine dan diencerkan hingga
volume 100 mL dengan air. Kemudian larutan dititrasi
dengan 0,1N KMnO4 sampai diperoleh larutan warna
berubah menjadi kuning keemasan. Larutan blanko
dibuat dengan prosedur yang sama tetapi tanpa
penambahan ekstrak. Sekitar 1mL 0,1N KMnO4 setara
dengan 0,004g tanin. Total tanin dapat dihitung
sebagai berikut:
V KMnO4 sampel – V KMnO4 kosong
total
(mL)
Tanin =
ekstrak berat (g)
0,004g
x x 100%
1 mL
Volume 31 Edisi 3 (2020)
Aktivitas pemulungan radikal DPPH
Aktivitas antioksidan ekstrak diukur dengan
metode DPPH mengikuti prosedur yang dijelaskan
oleh Salazar-Arandra dkk., (2009). Masing-masing 40µL
ekstrak ditambahkan dengan 120µL 125µmol/L
larutan DPPH yang baru disiapkan ke dalam 96 well
plate. Kemudian campuran diinkubasi dalam gelap
selama 30 menit pada suhu kamar. Penurunan
absorbansi diukur pada 515nm menggunakan
pembaca lempeng mikro (Epoch-BioTek, Winooski,
USA). Kontrol negatif dibuat dengan mencampur 40µL
etanol dengan 120µL 125µmol/L larutan DPPH yang
baru disiapkan. Sedangkan kontrol positif
menggunakan trolox dan dibuat dalam 9 konsentrasi
berturut-turut yaitu 50, 75, 100, 150, 200, 250, 300,
350, 400µM. Pengukuran diulang tiga kali, dan
kapasitas untuk mengais radikal DPPH dinyatakan
dalam mol trolox/g bubuk kering.
Ion tembaga mengurangi kapasitas antioksidan
Kapasitas antioksidan pereduksi ion tembaga
(CUPRAC) dari ekstrak ditentukan dengan metode
CUPRAC yang dijelaskan oleh Ozturk dkk., (2011).
Untuk masing-masing sumur, dalam pelat sumur 96,
40 L ekstrak, 50µL 10mM CuCl2, 50µL neokuproin
7,5mM, dan 60µL NH4CH3Larutan buffer COO (1M, pH
7) ditambahkan kemudian. Kemudian campuran
diinkubasi selama 1 jam pada suhu kamar. Setelah 1
jam, absorbansi pada 450nm dicatat terhadap blanko
reagen dengan menggunakan pembaca pelat mikro
96-sumur (Epoch-BioTek, Winooski, USA). Kurva
kalibrasi disiapkan dengan trolox dalam 5 konsentrasi
berbeda sebagai 100, 200, 300, 400, 600 (µM).
Kapasitas antioksidan dinyatakan dalam mol trolox/g
bubuk kering.
Mengurangi uji daya
Kemampuan ekstrak untuk mereduksi ion
besi (Fe3+) dinilai dengan metode yang dijelaskan
oleh Benslama dan Harrar (2006). Sekitar 400µL
ekstrak ditambahkan 200µL buffer fosfat (0,2M,
pH 6,6) dan 400µL 1% potassium ferricyanide [K3
Fe(CN)6] kemudian campuran diinkubasi pada
suhu 50ᵒC selama 20 menit. Selanjutnya, sekitar
400µL asam trikloroasetat ditambahkan ke
dalam campuran dan disentrifugasi selama 10
menit pada 3000 rpm. Akhirnya, 200µL larutan
supernatan dicampur dengan 400µL air suling,
dan 40µL FeCl 0,1%3 dan absorbansi dicatat pada
700nm menggunakan pembaca pelat mikro.
Kurva kalibrasi disiapkan menggunakan larutan
trolox dalam 5 konsentrasi berbeda sebagai 200,
400, 600, 800, 1000 (µM).
173
 Profil Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan Guazuma ulmifolia
Kapasitas antioksidan dinyatakan dalam mol
trolox/g bubuk kering.
Spektrum FTIR dan Klasifikasi G.ulmifolia
ekstrak
Sekitar 2mg dari G.ulmifolia ekstrak daun sirih
dicampur dengan 200mg KBr kemudian dihomogenkan
dan dibentuk menjadi pelet menggunakan hand press
Shimadzu (tekanan 8 ton selama 10 menit). Pengukuran
spektrum FTIR dilakukan pada daerah IR tengah
(4000-400 cm-1) yang melibatkan komputer pribadi yang
dilengkapi dengan perangkat lunak OPUS versi 4.2.
Spektrum IR direkam dengan kecepatan pemindaian 32
detik/menit, dan resolusi 4cm-1
dengan tampilan data berisi 1866 titik serapan.
Spektrum IR selanjutnya digunakan untuk
klasifikasiG.ulmifolia ekstrak. Kami menggunakan
analisis komponen utama (PCA) untuk
mengklasifikasikanG.ulmifolia ekstrak dengan
perangkat lunak The Unscrambler X versi 10.1
(CAMO, Oslo, Norwegia). Sebelum dikenakan PCA,
spektra IR diproses terlebih dahulu menggunakan
standar normal variate (SNV).
Analisis statistik
Data eksperimen dilakukan dalam tiga kali
pengukuran dan dilaporkan sebagai mean ± standar
deviasi. Perbandingan statistik dilakukan dengan
menggunakan analisis varians satu arah (ANOVA)
dilanjutkan dengan uji Duncan. Sebuah perbedaan
yang signifikan didefinisikan pada tingkat
kepercayaan 95% (p<0,05). Korelasi kandungan
fitokimia dengan aktivitas antioksidan dan
pengelompokan senyawaG.ulmifolia ekstrak dilakukan
dengan menggunakan korelasi Pearson dan analisis
komponen utama (PCA), masing-masing. Semua
analisis statistik dilakukan di Unscrambler X versi 10.1
(CAMO, Oslo, Norwegia).
HASIL DAN DISKUSI
Hasil ekstraksi
Ekstraksi merupakan langkah awal untuk
memulihkan dan mengisolasi senyawa fitokimia
bioaktif dari bahan tanaman. Efisiensi ekstraksi
dari bahan tanaman dipengaruhi oleh beberapa
faktor, termasuk sifat kimia fitokimia, metode
ekstraksi yang digunakan, ukuran partikel
sampel, dan adanya zat pengganggu (Stalikas
2007). Hasil ekstraksi tergantung pada pH, suhu,
waktu ekstraksi, polaritas pelarut, dan komposisi
sampel. Komposisi sampel dan polaritas pelarut
dianggap sebagai parameter kritis di bawah
ekstraksi waktu dan suhu yang sama (Dodkk.,
2014).
174
Dalam karya ini, ekstrak G.ulmifolia daun diperoleh
dengan menggunakan berbagai polaritas pelarut dari
nonpolar (n-heksana) menjadi polar (air). Hasil
ekstraksi berkisar antara 18,24% untuk ekstrak etanol
hingga 5,73% untukn-ekstrak heksana. Terlihat juga
bahwa rendemen ekstraksi air (10,94%) lebih tinggi
dibandingkan etil asetat (9,08%). Hasil rata-rata
ekstraksi dengan berbagai pelarut menurun dengan
urutan sebagai berikut: etanol > air > etil asetat >n
-heksana. Hasil ini menunjukkan bahwa hasil ekstraksi
meningkat dengan meningkatnya polaritas pelarut
yang digunakan dalam proses ekstraksiG.ulmifolia
daun-daun. Senyawa seperti protein dan karbohidrat
mungkin telah diekstraksi dalam air dan etanol dan
berkontribusi pada hasil yang lebih tinggi daripada
dalam etil asetat dann-heksana.
Total fenolat, total flavonoid dan tanin total
G.ulmifolia ekstrak daun
Kandungan total fenolik dari ekstrak yang
berbeda (n-heksana, etil asetat, etanol, dan air) dari
G.ulmifolia daun (Tabel I). TPC ekstrak yang berbeda
diukur dengan metode FC menggunakan asam galat
sebagai kontrol positif. TPC ekstrak berkisar dari 13,00
mg GAE/g bubuk kering untukn-ekstrak heksana
menjadi 35,42 mg GAE/g bubuk kering untuk ekstrak
etanol, dan penurunannya dengan urutan sebagai
berikut: etanol > air > etil asetat
> n-heksana. TPC ekstrak etil asetat
(16,74 mg GAE/g bubuk kering) tidak jauh lebih
tinggi dari ekstrak air (16,97 mg GAE/g bubuk
kering), sedangkan TPC dari n- ekstrak heksana
secara signifikan kurang dari pelarut lainnya
(p<0,05). Hal ini dapat disebabkan oleh kelarutan
senyawa non-fenolik yang lebih tinggi seperti
karbohidrat dalam ekstrak air daripada dalam etil
asetat dann-ekstrak heksana. TPC ekstrak etanol
memberikan nilai tertinggi karena kemungkinan
pembentukan kompleks beberapa senyawa fenolik
dalam ekstrak yang larut dalam pelarut ini.
Senyawa fenolik ini mungkin memiliki berat
molekul yang lebih tinggi yang larut dalam etanol
dan mengandung lebih banyak gugus fenolik
daripada fenolik dalam ekstrak air (Dodkk., 2014).
Dapat disimpulkan dari hasil TPC dari ekstrak yang
berbeda, dan etanol merupakan pelarut ekstraksi
terbaik untuk melarutkan senyawa fenolik dari
ekstrakG.ulmifolia daun-daun.
Kandungan flavonoid total dari ekstrak
yang berbeda (n-heksana, etil asetat, etanol, dan
air) dari G.ulmifolia daun (Tabel I). TFC dari
ekstrak yang berbeda diukur menggunakan AlCl
3reagen dan kuersetin sebagai kontrol positif
menggunakan metode spektrofotometri UV-Vis.
Volume 31 Edisi 3 (2020)
Mohammad Rafi
Tabel I. Kandungan total fenolat, flavonoid dan tanin pada keempat ekstrak G.ulmifolia daun (n = 3)
Total fenolik
Ekstrak
(mg GAE/g bubuk kering)
n-heksana 13.00A±0.84
Etil asetat 17.74B±1.11
etanol 35.42C±2,67
Air 16.97B±2,41
* huruf tersebut menunjukkan uji signifikansi pada p<0,05 metode Duncan
Tabel II. Kapasitas aktivitas antioksidan dengan metode DPPH, CUPRAC, dan daya pereduksi yang berbeda
(n = 3)
Kapasitas antioksidan (μmol trolox/g bubuk kering)
Ekstrak
DPPH
n-heksana 9.03A±0,44
Etil asetat 55.47D±1,87
etanol 21.36B±0,30
Air 37.41C±3,88
TFC ekstrak berkisar dari 14,15mg QE/g bubuk kering
untuk ekstrak air hingga 44,85mg QE/g bubuk kering
untuk ekstrak etanol dan penurunannya dengan urutan
sebagai berikut: etanol > etil asetat > n-heksana
> air. Hasil TFC diG.ulmifolia daun-daun
sepenuhnya sinkron dengan yang diperoleh dari
analisis total fenolik dalam ekstrak yang berbeda. Itu
berhasil menunjukkan bahwa sampel dengan
kandungan fenolik tinggi dalam ekstrakG.ulmifolia
Daunnya juga mengandung flavonoid dalam jumlah
yang cukup banyak. Tanaman kaya flavonoid dapat
menjadi sumber antioksidan yang sangat baik yang
akan membantu meningkatkan kapasitas antioksidan
total suatu organisme dan mencegahnya dari
peroksidasi lipid (Esmailidkk., 2015).
Kandungan tanin total dari ekstrak G.
ulmifolia daun dalam pelarut yang berbeda (Tabel
I). TTC dari ekstrak diukur menggunakan titrasi
permanganometri dengan indigo carmine
sulphonate sebagai indikator pewarna. Kadar tanin
total dari berbagai ekstrak daun G. ulmifolia
memiliki kadar yang lebih rendah dibandingkan
dengan total fenolat dan flavonoid. Dengan
membandingkan hasil dengan berbagai pelarut
(Tabel II), kita dapat melihat bahwa kandungan
total fenolat, flavonoid, dan tanin sangat
tergantung pada polaritas pelarut. Maserasi dan
ekstraksiG.ulmifolia Daun dengan pelarut etanol
memberikan kandungan total fenolat, flavonoid,
dan tanin tertinggi dalam ekstrak.
Volume 31 Edisi 3 (2020)
Flavonoid total Total tanin
(mg QE/g bubuk kering) (%)
21.46B±0,59 0.14A±0,06
31.71C±0,01 0,55C±0,06
44.85D±3,55 0,45SM±0,06
14.15A± 1.10 0.35B± 0,16
CUPRAC Mengurangi daya
21.86A± 1,86 70.90ab±5.61
98.17D±7.89 50.35A±5.72
35.52B±1,68 92.11C±5.34
58.79C±2.81 176,75D±13,26
Aktivitas Antioksidan dari G.ulmifolia Ekstrak
Daun
Aktivitas antioksidan dari G.ulmifolia ekstrak
ditentukan menggunakan tiga metode, yaitu DPPH,
CUPRAC, dan uji daya pereduksi. Pada metode
DPPH, 2,2-Difenil-1-pikrilhidrazil digunakan sebagai
pereaksi radikal bebas organik yang stabil dengan
pita serapan tertinggi pada 517nm. Penyerapan
spesies radikal ini hilang ketika elektron atau
spesies radikal bebas diterima, menghasilkan
perubahan warna visual dari ungu menjadi kuning.
Spesies radikal ini juga dapat bergabung dengan
banyak sampel dalam waktu singkat dan sensitif
untuk membedakan bahan aktif pada konsentrasi
rendah (Esmailidkk., 2015).
Kemampuan scavenging radikal DPPH secara
in vitro dari ekstrak G.ulmifolia daun dengan pelarut
ekstraksi yang berbeda (Tabel II). NSn- ekstrak
heksana dari G.ulmifolia daun menunjukkan
pembacaan radikal DPPH scavenging terendah (9,03
mol trolox/g bubuk kering), sedangkan yang tertinggi
adalah ekstrak etil asetat (55,47µmol trolox/g bubuk
kering). Meskipun aktivitas pemulungan radikal DPPH
dari ekstrak pelarut yang berbeda kurang dari yang
diamati di Trolox sebagai senyawa referensi standar,
penelitian ini mengungkapkan bahwaG.ulmifolia daun
memiliki pemulung radikal bebas atau inhibitor
mungkin bertindak sebagai antioksidan utama.
175
 Profil Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan Guazuma ulmifolia
Tabel III. Korelasi Pearson fenolik, flavonoid, kandungan tanin dan aktivitas antioksidan.
Ekstrak Variabel Mengurangi Daya
Tanin 0,552
n-Heksana Flavonoid 0,986
Fenol - 0,978
Tanin 0.306
Etil Asetat Flavonoid - 0,977
Fenol - 0,746
Tanin - 0,434
etanol Flavonoid - 0,979
Fenol 0,673
Tanin - 0,411
Air Flavonoid - 0,007
Fenol 0,360
Metode lain yang sederhana dan serbaguna
untuk mengukur kapasitas antioksidan dari ekstrak
G.ulmifolia daun adalah metode CUPRAC
menggunakan neokuproin tembaga (2,9-dimetil-1,10-
phenanthroline) chelate-disingkat (Cu(II)- Nc)
sebagai oksidan kromogenik. Metode ini
didasarkan pada reaksi redoks dengan senyawa
antioksidan yang menghasilkan kupro-
neokuproin khelat disingkat (Cu(I)-Nc)-
menunjukkan serapan cahaya maksimum pada
450nm (Apakdkk., 2004). Reaksi reagen
kromogenik dengan n-electron reductant (AO)
dari senyawa antioksidan menghasilkan warna
kuning jingga yang stabil dalam waktu 30 menit
berikut caranya (Apakdkk., 2008).
Senyawa antioksidan yang diharapkan dapat
ditemukan pada G.ulmifolia daun, yaitu fenolat,
flavonoid, dan tanin digunakan dalam larutan standar
dan diuji menggunakan normal (pada suhu kamar)
dan diinkubasi terhadap troloks sebagai senyawa
referensi standar. Pada penelitian ini, kapasitas
antioksidan menggunakan metode CUPRAC dari
ekstrak daun G. ulmifolia berkisar antara
21.86µmol trolox/g bubuk kering untuk n-ekstrak
heksana menjadi 98,17µmol trolox/g bubuk kering
untuk ekstrak etil asetat. Kapasitas antioksidan ekstrak
yang dinilai dengan metode CUPRAC menurun dengan
urutan sebagai berikut: etil asetat > air > etanol >n
-heksana. Pembentukan kapasitas antioksidan dari
G.ulmifolia daun akan mempromosikan penelitian
tentang identifikasi dan kuantisasi senyawa aktif
tanaman ini, yang dapat membantu melindungi
konsumen terhadap penyakit yang berhubungan
dengan stres oksidatif.
Daya reduksi dari ekstrak G.
ulmifolia daun, yang berpotensi berfungsi sebagai
aktivitas antioksidan yang signifikan, dihitung
176
Cuprac DPPH
- 0,907 - 0,927
- 0,314 - 0,908
0,350 0,924
- 0,858 0,914
- 0,015 - 0.107
- 0,818 0,741
- 0,987 0,009
- 0,395 - 0,968
0.992 0,276
- 0,392 - 0,925
0,014 - 0,692
0.341 0,903
menggunakan Fe3+ ke Fe2+ uji reduksi, di mana warna
awal kuning berubah menjadi berbagai nuansa hijau
dan biru tergantung pada daya reduksi sampel. Dalam
pengujian ini, adanya senyawa antioksidan
menyebabkan Fe3+/ferricyanide kompleks direduksi
menjadi Fe2+ bentuk, dan Fe2+ dapat dipantau melalui
pengukuran pembentukan Perl's Prussian blue pada
700nm (Qingming dkk., 2010). Kapasitas antioksidan
dari ekstrakG.ulmifolia daun dengan metode daya
reduksi divariasikan dari 50,35µmol troloks/g serbuk
kering untuk ekstrak etil asetat hingga 176,75µmol
troloks/g serbuk kering untuk ekstrak air. Dapat
disimpulkan bahwa ekstrak air dapat berperan
sebagai donor elektron dan mengubah radikal bebas
menjadi produk yang lebih stabil (Tabel II). Beberapa
senyawa fenolik, seperti flavonoid dan asam fenolik
dalam ekstrak air menunjukkan aktivitas antioksidan
yang kuat melalui kapasitas reduktifnya dalam Fe.3+-
Fe2+ sistem.
Hubungan antara kandungan fitokimia dan
aktivitas antioksidan
Korelasi antara fitokimia
tingkat aktivitas antioksidan dari empat
G.ulmifoliaekstrak daun dilakukan dengan
menggunakan korelasi Pearson. Parameter yang
digunakan adalah koefisien korelasi (R) antara
kadar senyawa fitokimia (total fenolat, flavonoid,
dan tanin) pada masing-masing ekstrak dengan
aktivitas antioksidan. Semakin tinggi nilai R,
semakin tinggi korelasi antar variabel. Regresi
linier dengan sumbu X (kadar senyawa fitokimia)
dan sumbu Y (kapasitas antioksidan) digunakan
untuk melihat hubungan senyawa fitokimia
terhadap aktivitas antioksidan pada empat
G.ulmifolia ekstrak (Tabel III).
Volume 31 Edisi 3 (2020)
Mohammad Rafi

Gambar 1. Representasi spektrum FTIR yang berasal dari ekstrak G.ulmifolia daun-daun (- air, - etanol, -etil
asetat, - n-heksana)

Gambar 2. Plot skor (A) dan plot pemuatan (B) PCA yang berasal dari ekstrak Daun G.ulmifolia
menggunakan area IR tengah variabel (4000-400 cm-1) (● = etanol, ■ = air, - = n-heksana, ▲= etil asetat)

Volume 31 Edisi 3 (2020) 177

 Profil Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan Guazuma ulmifolia
Berdasarkan korelasi Pearson, korelasi
positif ditunjukkan oleh kadar total flavonoid dan
fenolatnekstrak -heksana pada daya pereduksi dan
kapasitas antioksidan metode DPPH. Kapasitas
antioksidan ekstrak etil asetat dipengaruhi oleh
kadar tanin total dan fenolat dengan korelasi
positif masing-masing sebesar 0,914 dan 0,741
dengan menggunakan metode DPPH. Sedangkan
pada ekstrak etanol dan air, kandungan total
fenolat berkorelasi positif dengan kapasitas
antioksidan dengan ketiga metode yang digunakan
dengan nilai tertinggi pada metode CUPRAC dan
DPPH. Hasil tersebut menjelaskan bahwa senyawa
golongan fenolik berpengaruh nyata terhadap
aktivitas antioksidan pada ekstrak etanol dan air
dibandingkan dengan ekstrak lainnya. Peranan
metabolit sekunder nonfenolik juga dapat
mempengaruhi penentuan aktivitas antioksidan
daun jati karena ketiga metode aktivitas
antioksidan yang dilakukan tidak spesifik terhadap
senyawa golongan fenolik. Juga, senyawa fenolik
individu mungkin memiliki aktivitas antioksidan
yang berbeda, dan interaksinya dengan
makromolekul seperti karbohidrat dan protein
mungkin sinergis atau antagonis (Odabasogludkk.,
2005).
Klasifikasi dari G.ulmifolia Ekstrak Daun dengan
Analisis Spektrum FTIR dan Kemometrika
Klasifikasi dari G.ulmifolia Ekstrak daun dengan
pelarut yang berbeda ekstraksi dilakukan menggunakan
spektrum FTIR yang dikombinasikan dengan kemometrik.
Perbandingan spektrum ekstrak yang berbeda
menggunakann- heksana, etil asetat, etanol, dan pelarut
air dari G.ulmifolia daun (Gambar 1). Perbedaan spektral
diamati antara ekstrak yang berbeda dari
G.ulmifolia meninggalkan sampel pada 3500-3000,
3000- 2800, 1750-1500, dan 1200-1000cm-1 (Gambar 1).
Absorbansi puncak pada 3500-3000cm-1 sesuai dengan
penyerapan hidroksil, 3000-2800cm-1 terkait dengan
getaran peregangan asimetris metilen CH,
1750-1500cm-1 disebabkan oleh vibrasi ulur gugus
karbonil, dan puncaknya sekitar 1000 m-1 adalah
puncak vibrasi CO sebuah gugus alkohol.
Analisis komponen utama (PCA) dari
data spektral FTIR dengan 1866 variabel
ditampilkan dalam plot dua dimensi menggunakan
dua komponen utama pertama (Gambar 2A), yang
bersama-sama menyumbang PC1 (77%) dan PC2
(17%) dari total variasi 94%. Plot skor PCA
menunjukkan bahwa PCA memiliki daya pembeda
yang relatif tinggi antaraG.ulmifolia daun dengan
empat pelarut yang berbeda untuk proses ekstraksi
sebagai cara dependen. sampel dariG.
178
ulmifolia daun dapat diklasifikasikan
menggunakan nilai pemuatan untuk variabel
spektral penting (yaitu, mereka dengan variasi
tertinggi pada skor PC1 dan PC2). Plot pemuatan
menunjukkann-ekstrak heksana daun G.
ulmifolia dibedakan dari ekstrak lain pada
bilangan gelombang 2900-2950 cm-1. Ekstrak etil
asetat, etanol, dan air didiferensiasikan pada
2800-2870 cm-1, 3000-3300 cm-1, dan 1000-1050
cm-1 (daerah sidik jari IR). Hasil ini menunjukkan
bahwa perubahan kualitatif dan kuantitatif
senyawa fitokimia dalamG.ulmifolia daun yang
sesuai dengan daerah spektral ini dalam
spektrum FTIR adalah variasi yang signifikan
terkait dengan pilihan ekstraksi pelarut.
KESIMPULAN
Dalam penelitian ini, ekstrak etanol G.
ulmifolia Daun memiliki kandungan total fenolat dan
flavonoid tertinggi. Sebaliknya, ekstrak etil asetat
memiliki kadar tanin total yang lebih tinggi
dibandingkan dengan ekstrak lain yang digunakan
dalam penelitian ini. Selain itu, kami menunjukkan
bahwa kapasitas antioksidan tertinggi dariG.ulmifolia
daun yang ditemukan dalam ekstrak etil asetat dinilai
dengan metode DPPH dan CUPRAC. Klasifikasi dari
G.ulmifolia ekstrak daun menggunakan spektrum FTIR
dan PCA menunjukkan pengelompokan yang baik
dengan 94% dari total data varians antara 4 pelarut
yang berbeda (n-heksana, etil asetat, etanol, dan air)
untuk proses ekstraksi. Dapat disimpulkan bahwa
setiap ekstrakG.ulmifolia daun memberikan profil
fitokimia yang berbeda (fenol total, flavonoid total,
tanin total, dan spektrum FTIR) yang berkontribusi
terhadap aktivitas antioksidan. Aktivitas antioksidan ini
terutama dipengaruhi oleh konsentrasi senyawa
fenolik yang diketahui memiliki aktivitas antioksidan.
Oleh karena itu, kami menyarankan bahwa penapisan
senyawa fitokimia terkait dengan penilaian
bioaktivitasnya dan dikombinasikan dengan analisis
kemometrik yang berasal dari spektrum FTIR dari
ekstrak sampel dapat memberikan pengetahuan yang
lebih komprehensif tentang studi tanaman obat.
PENGAKUAN
REFERENSI
Adnyana IK., Sukandar EY., Susanto Y., Kurniati NF.
2013. Aktivitas antidiabetes ekstrak daun
berair dari Guazuma ulmifolia lamk., ekstrak
etanolik dari Curcuma xanthorrhizadan
kombinasinya pada tikus diabetes yang
diinduksi aloksan. Res. J. Med. Tanaman. 7
(3): 158- 164
Volume 31 Edisi 3 (2020)
Mohammad Rafi
Altemimi A., Lakhssassi N., Baharlouei A., Watson
DG., Lightfoot DA. 2017. Fitokimia:
ekstraksi, isolasi, dan identifikasi senyawa
bioaktif dari ekstrak tumbuhan. Tanaman.
6(4), 42-64.
Apak R., Güclü K., zyürek M., Karademir SE. 2004.
Indeks kapasitas antioksidan total baru untuk
polifenol makanan dan vitamin C dan E,
menggunakan kemampuan pengurangan ion
kuprinya dengan adanya neocuproine: metode
CUPRAC. J. Pertanian. Kimia Makanan
52(26):7970- 7981.
Apak R., Güclü K., zyürek M., Celik SE. 2008.
Mekanisme uji kapasitas antioksidan dan
uji CUPRAC (kapasitas antioksidan
pengurang ion tembaga). Microchim.
Akta. 160:413-419.
Benslama A., Harrar A. 2016. Radikal bebas
aktivitas pemulungan dan pengurangan
daya dua ekstrak tanaman obat sahara
aljazair. Int. J. Herbal. Med. 4(6)::158-161.
Berenguer B., Sánchez-Fidalgo S., Trabadela C.,
Quiles AM. 2007. Bagian udara dari
Guazuma ulmifolia Lam. melindungi
terhadap legiun lambung yang diinduksi
NSAID. J. Etnofarmaka. 114(2):153-60.
Damor B., Gaur K., Dashora A., Parra SA. 2018.
Evaluasi aktivitas analgesik dan
antiinflamasi ekstrak metanol Guazuma
ulmifolia. J. Aplikasi Farmasi. Sci. Res. 1 (4):
23-29.
Do QD., Angkawijaya AE., Tran-Nguyen PL., Huynh
LH., Soetaredjo FE., Ismadji S., Ju YH. 2014.
Pengaruh pelarut ekstraksi terhadap
kadar fenol total, kadar flavonoid total,
dan aktivitas antioksidanLimnofilia
aromatik. J. Makanan Obat Anal. 22(3):296-
302.
Esmaili AK., Taha RM., Mohajer S., Banisalam B.
2015. Aktivitas antioksidan dan kandungan total
fenolik dan flavonoid berbagai ekstrak pelarut
yang ditumbuhkan secara in vivo dan in vitro
Trifolium pratense L. (semanggi merah). Bioma.
Res. Int. 643285.
Lee SH., Sancheti SA., Bafna MR., Sancheti SS., Seo
SY. 2011. Sifat penghambatan asetilkolineterase
dan antioksidan Rhododendron yedoense var.
Kulit pohon poukhanense. J. Med. Tanaman Res.
5(2):248-254.
Magos GA., Mateos JC., Páez E., Fernández G., Lobato
C., Marquez C., Enriquez RG. 2008. Efek
hipotensi dan vasorelaksan dari fraksi
procyanidin dariGuazuma
ulmifolia menggonggong dalam keadaan normotensi dan
Volume 31 Edisi 3 (2020)
tikus hipertensi. J. Etnofarmaka. 117(1):
58-68.
Maldini M., Di Micco S., Montoro P., Darra E.,
Mariotto S., Bifulco G., Pizza C., Piacente S.
2013. Flavanocoumarins dari Guazuma
ulmifolia kulit dan evaluasi afinitas mereka
untuk STAT1. Fitokimia. 86: 64-71.
Kementerian Kesehatan Republik Indonesia. 2008.
Farmakope Herbal Indonesia Ed.1. Jakarta
(ID): Kementerian Kesehatan Republik
Indonesia.
Morais SM., Calixto-Júnior JT., Ribeiro LM., Sousa
HA., Silva AAS., Figueiredo FG., Matias FFF.,
Boligon AA., Athayde ML., Morais-Braga
MFB., Coutinho HDM. 2017. Komposisi
fenolik dan antioksidan,
antikolinesterase dan antibiotika-
memodulasi aktivitas antijamur Guazuma
ulmifolia Lam. (Malvaceae) ekstrak etanol. S.
Af. J. Bot. 110: 251-257.
Odabasoglu F, Aslan A, Cakir A, Suleyman H,
Karagoz Y, Bayir Y, Halici M. 2005. Aktivitas
antioksidan, mengurangi daya dan kandungan
total fenolik dari beberapa spesies lumut.
Fitoterapi. 76.
ztürk M., Ermin MD., Kivrak S., Mercan-Doğan N.,
Türkoglu A., zler MA. 2011. Antioksidan in
vitro, antikolinesterase dan
studi aktivitas antimikroba pada tiga
spesies Agaricus dengan komposisi asam
lemak dan kandungan besi: studi
perbandingan pada tiga jamur yang
paling dapat dimakan. Kimia Makanan
racun. 49:1353- 1360.
Pereira GA., Araujo NMP., Arruda HS., Farias DP.,
Molina G., Pastore GM. 2019. Fitokimia dan
aktivitas biologis mutamba (Guazuma
ulmifolia Lamk.): sebuah ulasan. Makanan
Res. Int. 126: 108713.
Prahastuti S., Hidayat M., Hasiana, ST., Widowati W.,
Widodo WS., Handayani RAS., Rizal R.,
Kusuma HSW. 2020. Ekstrak etanol cedar
bajingan (Guazuma ulmifolia L.) sebagai
antioksidan. Farmasi. 10 (1): 77-88. Rafi M.,
Febriany S., Wulandari P., Suparto IH.,
Ridwan T., Rahayu S., Siswoyo DM. 2018.
Kandungan total fenolat, flavonoid, dan
antosianin enam Vireya Rhododendron
asal Indonesia dan evaluasi aktivitas
antioksidannya. J. Aplikasi Farmasi. Sci.
8(9): 49-54.
Rafi M., Devi AF., Syafitri UD., Heryanto R., Suparto
IH., Amran MB., Rohman A., Prajogo B.,
Lim LW. 2020. KlasifikasiAndrografis
179
 Profil Fitokimia dan Aktivitas Antioksidan Guazuma ulmifolia
panikulata ekstrak dengan ekstraksi pelarut
menggunakan sidik jari HPLC dan analisis
kemometrik. BMC Res. Catatan. 13: 56-61.
Salazar-Arandra R., Perez-Lopez LA., Loppez
Arroyo J., Alanis-Garza BA., Torres NW. 2009.
Aktivitas antimikroba dan antioksidan tanaman
dari Timur Laut Meksiko. jelas. Alternatif
Komplemen Berbasis. Med. 1-6.
180
CD Stalika. 2007. Ekstraksi, Pemisahan, dan
metode deteksi untuk asam fenolik dan
flavonoid. J.Sep.Sci. 30: 3268-3295. Qingming
Y., Xianhui P., Weibao K., Hong Y., Yidan
S., Li Z., Yanan Z., Yuling Y., Lan D., Guoan L.
2010. Aktivitas antioksidan ekstrak malt dari
jelai (Hordeum vulgar L.) terhadap berbagai
stres oksidatif in vitro dan in vivo. Kimia
Makanan 118(1): 84-89.
Volume 31 Edisi 3 (2020)