Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

[Diunduh gratis dari http://www.jcytol.org pada Rabu, 22 September 2021, IP: 103.111.137.66]

Artikel asli

Perbandingan Metode Ziehl-Neelsen Konvensional Basil Tahan

Asam dengan Metode Pemutih Modifikasi pada Tuberkulosis
Limfadenitis
Mani Krishna, Sheetal G. Gole1

Departemen Patologi, UP University of Medical Sciences, Saifai Etawah, Uttar Pradesh, 1Departemen Patologi, World College of Medical Sciences & Research
& Rumah Sakit, Gurawar, Jhajjar, Haryana, India

Abstrak

Pengantar: Tuberkulosis yang disebabkan oleh Mycobacterium tuberculosis adalah penyakit menular kronis dan masalah kesehatan utama di negara
berkembang, dengan limfadenopati menjadi presentasi yang paling umum. Limfadenitis tuberkulosis dapat didiagnosis pada sitologi aspirasi jarum
halus kelenjar getah bening. Metode Ziehl-Neelsen konvensional untuk basil tahan asam memainkan peran kunci dalam diagnosis dan pemantauan
pengobatan tuberkulosis, namun dengan sensitivitas rendah. Penelitian ini menekankan peran metode konsentrasi pemutih dalam sitologi aspirasi
jarum halus kelenjar getah bening dibandingkan mikroskopi apusan langsung konvensional.Bahan dan metode: Penelitian ini melibatkan 75 pasien
dengan dugaan klinis limfadenopati tuberkulosis yang dirujuk ke Departemen Patologi di rumah sakit perawatan tersier, Faridabad. Data mengenai usia,
jenis kelamin, durasi dan lokasi pembengkakan, sifat aspirasi, dan diagnosis sitomorfologi didokumentasikan untuk setiap pasien.Hasil: Dari total 75
kasus, 15 positif baik dalam metode Ziehl-Neelsen konvensional dan metode konsentrasi pemutih. Dengan metode konsentrasi pemutih, 34 kasus
tambahan menunjukkan positif yang tidak diungkapkan dengan metode Ziehl-Neelsen konvensional. Dengan demikian, total 49 kasus positif basil tahan
asam.Kesimpulan: Ada masalah dalam mencapai diagnosis absolut dalam kasus-kasus tertentu limfadenitis tuberkulosis ketika aspirasi menunjukkan
gambaran polimorf dengan sel epiteloid sesekali dan tidak adanya sel raksasa Langhans yang khas atau nekrosis kaseosa. Dalam penelitian ini,
kepositifan basil tahan asam ditemukan pada 65,33% kasus dengan metode pemutih. Metode pemutih untuk deteksi basil tuberkel memiliki tingkat
deteksi kasus yang tinggi dibandingkan metode Ziehl-Neelsen konvensional.

Kata kunci: Teknik pemutih, pewarnaan konvensional, tuberkulosis

Sayapengenalan Limfadenitis merupakan tantangan diagnostik dan terapeutik karena

Tuberkulosis (TB) adalah penyakit menular kronis yang disebabkan oleh
Mycobacterium tuberculosis dan terus menjadi masalah
kesehatan utama di negara berkembang. India memiliki
beban TB tertinggi. Statistik Organisasi Kesehatan Dunia
(WHO) untuk tahun 2015 memberikan perkiraan kejadian 2,2
juta kasus TB untuk India dari insiden global 9,6 juta.
Tuberkulosis dapat melibatkan semua sistem organ dalam
tubuh. Sementara TB paru adalah presentasi yang paling luas,
tuberkulosis ekstrapulmoner (EPTB: mempengaruhi di luar paru-
paru) juga merupakan masalah klinis penting yang merupakan
15-20% dari semua kasus TB. Limfadenopati adalah presentasi
EPTB yang paling umum.[1,2] Limfadenitis tuberkulosis terlihat
pada hampir 35% EPTB. Limfadenitis tuberkulosis dapat
didiagnosis secara morfologis pada sitologi aspirasi jarum halus
(FNAC) kelenjar getah bening.
Akses artikel ini secara online
meniru proses patologis lainnya dan menghasilkan temuan fisik dan
laboratorium yang tidak konsisten. Diagnosis sulit seringkali
membutuhkan biopsi. Anamnesis dan pemeriksaan fisik yang
menyeluruh, pewarnaan untuk basil tahan asam (BTA), dan reaksi
berantai polimerase (PCR) sangat membantu dalam mendapatkan
diagnosis dini. Penting juga untuk membedakan limfadenitis
mikobakteri tuberkulosis dari nontuberkulosis karena protokol
pengobatannya bervariasi. Pemantauan pengobatan lebih kompleks
karena perilaku khas kelenjar getah bening TB. Situasi telah
memburuk karena peningkatan tajam dalam insiden
Alamat korespondensi: Dr Sheetal G. Gole,
Departemen Patologi, World College of Medical Sciences & Research &
Rumah Sakit, Gurawar, Jhajjar, Haryana, India.
Email: drsheetalgole@rediffmail.com
Ini adalah artikel akses terbuka yang didistribusikan di bawah persyaratan CreativeCommons Attribution-
NonCommercial-ShareAlike 3.0 License, yang memungkinkan orang lain untuk me-remix, mengubah, dan

Kode Respon Cepat: membangun karya secara non-komersial, selama penulis dikreditkan dan kreasi baru dilisensikan dengan

Situs web: persyaratan yang sama.

www.jcytol.org
Untuk cetak ulang hubungi: reprints@medknow.com

DOI: Cara mengutip artikel ini: Krishna M, Gole SG. Perbandingan metode Ziehl-
10.4103/JOC.JOC_84_16 Neelsen konvensional basil tahan asam dengan metode pemutih yang dimodifikasi
pada limfadenitis tuberkulosis. J Cytol 2017;34:188-92.

188 © 2017 Jurnal Sitologi | Akademi Sitologi India | Diterbitkan oleh Wolters Kluwer - Medknow
[Diunduh gratis dari http://www.jcytol.org pada Rabu, 22 September 2021, IP: 103.111.137.66]
Krishna dan Gole: Perbandingan ZN Konvensional dan Metode Pemutih Modifikasi dalam TB
atipikal mikobakteri, HIV yang tidak terkontrol dengan baik, dan
peningkatan limfadenitis TB yang resistan terhadap obat. Adenitis
tuberkulosis paling baik diobati sebagai penyakit sistemik dengan
obat antituberkulosis. Terapi bedah bersama dengan obat
antituberkulosis dapat bermanfaat pada pasien tertentu.
Parameter klinis untuk diagnosis TB di kelenjar getah bening
tidak spesifik juga tidak menyingkirkan keterlibatan TB. Metode
Ziehl-Neelsen (ZN) konvensional untuk BTA memainkan peran
kunci dalam diagnosis dan pemantauan pengobatan TB.
Kerugian utamanya adalah sensitivitasnya yang rendah, mulai
dari 20% hingga 43%.[3,4]
Mikroskopi memiliki banyak keuntungan dalam hal kelayakan
kecepatan, dan jika sensitivitasnya dapat ditingkatkan, ia
berpotensi menjadi alat yang lebih berharga untuk program
pengendalian TB di seluruh dunia. Kebutuhan akan metode
baru dan lebih baik tidak dapat terlalu ditekankan. Metode
konsentrasi pemutih adalah salah satu metode konsentrasi
paling aman untuk meningkatkan sensitivitas mikroskop
langsung untuk mendeteksi BTA. Pencairan spesimen dengan
natrium hipoklorit (NaOCl, pemutih) dan konsentrasi basil
melalui sentrifugasi secara signifikan meningkatkan sensitivitas
mikroskop langsung. Penelitian ini dilakukan untuk menekankan
peran metode konsentrasi pemutih pada FNAC kelenjar getah
bening dibandingkan mikroskop apusan langsung konvensional.
Mbahan dan Mcara
Penelitian ini melibatkan 75 pasien dengan dugaan klinis
limfadenopati tuberkulosis yang dirujuk ke Departemen
Patologi di rumah sakit perawatan tersier, Faridabad. Kasus
limfadenitis tuberkulosis yang diduga secara klinis milik semua
kelompok umur dipertimbangkan. Pasien yang sudah
didiagnosis dengan TB dan terapi antituberkular dimulai
sebelum kelenjar getah bening FNAC dikeluarkan dari
penelitian. Pasien dengan limfadenopati menjadi sasaran
pemeriksaan klinis singkat. Data mengenai usia, jenis kelamin,
durasi, dan deskripsi situs seperti pembengkakan
didokumentasikan untuk setiap pasien. FNAC dilakukan dengan
jarum 23-gauge dan jarum suntik sekali pakai 10 ml.
Limfadenitis tuberkulosis didiagnosis berdasarkan
gambaran sitomorfologi dari apusan FNA. Kriteria
sitomorfologi yang menentukan diagnosis sitologi dari
limfadenitis reaktif, supuratif, dan granulomatosa adalah –
limfadenitis reaktif menunjukkan populasi campuran sel
limfoid dalam proporsi yang bervariasi bersama dengan
histiosit yang tersebar dengan puing-puing nuklir
intracytoplasmic (makrofag tubuh yang dapat dilihat);
limfadenitis supuratif mengungkapkan sel limfoid bersama
dengan banyak polimorf utuh dan degenerasi dengan latar
belakang puing-puing nekrotik; limfadenitis granulomatosa
menunjukkan granuloma sel epiteloid dengan atau tanpa
kehadiran sel raksasa berinti banyak Langhans dan nekrosis
kaseosa. Pola sitologi pada kasus yang didiagnosis sebagai
limfadenitis tuberkulosis adalah (1) granuloma epiteloid
dengan nekrosis luas,
Jurnal Sitologi Volume 34 Edisi 4 Oktober-Desember 2017
Teknik sitologi konvensional
Setelah FNA kelenjar getah bening, sekitar 5-6 apusan disiapkan pada
slide kaca bersih. Satu atau dua apusan difiksasi dalam etanol 95% dan
diwarnai dengan pewarnaan Papanicolaou (Pap) dan pewarnaan
hematoxylin dan eosin (H dan E). Apusan yang dikeringkan dengan udara
diwarnai dengan pewarnaan May-Grunwald-Giemsa (MGG) dan metode
ZN rutin .
Apusan bernoda ZN diperiksa untuk keberadaan basil
tuberkel. Pap lain dipelajari untuk bukti sitomorfologi
TB.
Teknik konsentrasi pemutih
Bahan sisa aspirasi di dalam jarum dibuang dan
dicairkan dengan 5% natrium hipoklorit (NaOCl,
pemutih) dan diwarnai dengan metode ZN rutin.
Prosedur pewarnaan rutin Ziehl‑metode Neelsen
Apusan dibuat dari spesimen kelenjar getah bening pada kaca
objek bersih dan difiksasi dengan pemanasan pada api
pembakar Bunsen. Slide yang difiksasi panas ditempatkan pada
rak atau batang pewarnaan dan apusan dibanjiri dengan
pewarnaan Carbol-fuchsin yang berfungsi. Kaca objek
dipanaskan perlahan di atas api pembakar Bunsen sampai
terlihat uapnya. Perebusan dihindari dan pemanasan
dilanjutkan selama kurang lebih 5 menit. Dipastikan noda tidak
mengering pada slide. Lebih banyak noda ditambahkan jika
perlu. Noda dicuci dari slide dengan air dan pembilasan
dilanjutkan sampai air menjadi tidak berwarna. Untuk
penghilangan warna, slide ditutup dengan asam sulfat 20%
selama kurang lebih 1 menit. Kompleks berwarna kuning
terkuras sepenuhnya. Slide ditutup dengan pewarna biru
metilen selama 1 menit untuk counterstaining. Cuci dengan air
keran dan biarkan air mengalir. Keringkan slide atau blot
dengan hati-hati. Slide diamati di bawah tujuan daya rendah dan
kemudian diperiksa di bawah tujuan minyak imersi.
Teknik konsentrasi pemutih
Aspirasi yang tersisa dari jarum dibilas dengan 2 ml NaOCl 5% dalam
tabung reaksi kaca yang bersih. Setelah campuran tercampur rata,
tabung reaksi dibiarkan selama 20 menit pada suhu kamar untuk
inkubasi. Spesimen disentrifugasi pada 3000 rpm selama 15 menit
dan supernatan dibuang. Sedimen diambil di atas kaca objek yang
bersih dan dikeringkan di udara, dan panas difiksasi secara perlahan
di atas api pembakar Bunsen. Smear disiapkan dan diwarnai dengan
pewarnaan ZN rutin. Pasang di
Slide DPX diamati di bawah tujuan daya rendah dan
kemudian diperiksa di bawah tujuan minyak imersi.
Rhasil
Limfadenopati tuberkulosis adalah bentuk TBEP yang paling
umum. Penelitian ini dilakukan untuk menekankan peran
metode konsentrasi pemutih di atas mikroskop apusan
langsung konvensional untuk mendeteksi basil tuberkel
dalam bahan FNA kelenjar getah bening. Secara klinis
dicurigai 75 kasus limfadenitis tuberkulosis dievaluasi.
189
[Diunduh gratis dari http://www.jcytol.org pada Rabu, 22 September 2021, IP: 103.111.137.66]

Krishna dan Gole: Perbandingan ZN Konvensional dan Metode Pemutih Modifikasi dalam TB

Mayoritas pasien berada pada kelompok usia 16-30
tahun (48%) dan 0-15 tahun (33,33%). Pasien termuda
berusia 1 tahun, dan pasien tertua berusia 75 tahun
[Tabel 1].
Menurut distribusi jenis kelamin, ada 43 laki-laki (57,33%)
dan 32 perempuan (42,67%). Rasio pria:wanita adalah 1,34:1.
Sebagian besar pasien mengalami limfadenopati dengan
durasi kurang dari 3 bulan (58% kasus), durasi 3-6 bulan
(20% kasus), dan durasi lebih dari 6 bulan (22% kasus).
Sebagian besar pasien datang dengan limfadenopati regio
servikal (53%) diikuti regio aksila (15%).
Aspirasi berwarna putih pucat dan granular pada 33 (44%)
kasus, diikuti oleh aspirasi purulen pada 22 (29,33%) kasus.
Aspirasi hemoragik terlihat pada 20 (26,67%) kasus. Semua
apusan diwarnai dengan pewarnaan H dan E, Pap, dan ZN.
Sebagian besar kasus [44 (58,67%)] secara sitomorfologis
didiagnosis sebagai limfadenopati granulomatosa, diikuti
oleh 22 kasus (29,33%) sebagai limfadenopati supuratif dan
9 kasus (12%) sebagai limfadenopati reaktif.
Di antara 44 kasus yang didiagnosis sebagai limfadenopati
tuberkulosis, pola sitologinya adalah sebagai berikut: granuloma
epiteloid dengan nekrosis luas (23), granuloma epiteloid saja (14),
dan hanya nekrosis (7).
Dalam penelitian ini dengan metode ZN konvensional, total 15
(20%) kasus adalah BTA positif dan 60 (80%) kasus adalah BTA
negatif [Gambar 1a].
Metode konsentrasi pemutih
Dalam penelitian ini, metode konsentrasi pemutih yang baru
direkomendasikan digunakan untuk mendeteksi BTA dalam
diagnosis limfadenitis tuberkulosis. Aspirasi dari semua 75 kasus
yang diduga limfadenitis tuberkulosis menjadi sasaran metode
konsentrasi pemutih dan apusan diwarnai dengan metode ZN
dan disaring secara menyeluruh untuk AFB.
Dalam penelitian ini, dengan metode konsentrasi
pemutih, total 49 (65,33%) kasus BTA positif dan 26
(34,67%) BTA negatif [Gambar 1b dan Tabel 2, 3].
Dari total 75 kasus, 15 kasus positif baik pada metode ZN
konvensional maupun metode konsentrasi pemutih. Dengan
metode konsentrasi pemutih, 34 kasus tambahan menunjukkan
kepositifan yang tidak diungkapkan oleh metode ZN konvensional.
Dengan demikian, total 49 kasus positif BTA dengan metode
konsentrasi Bleach. Tak satu pun dari kasus yang didiagnosis positif
pada pewarnaan ZN rutin terlewatkan dengan metode konsentrasi
pemutih. AFB positif dengan metode konsentrasi pemutih lebih
banyak dibandingkan dengan pewarnaan ZN rutin.
DDiskusi
TB dapat mempengaruhi semua organ tubuh.
Limfadenitis TB adalah jenis TBEP yang paling umum.
Diagnosis TB mudah dan sederhana bila penyakitnya
rumit atau menyebar, namun keterlibatan lokal organ
atau jaringan ekstrapulmoner kadang-kadang dapat
menimbulkan masalah diagnostik. Parameter klinis
untuk diagnosis TB di kelenjar getah bening tidak
spesifik juga tidak menyingkirkan keterlibatan
tuberkulosis. Diagnosis dini TB dan memulai
pengobatan yang optimal tidak hanya akan
memungkinkan kesembuhan seorang pasien tetapi
juga akan mencegah penularan infeksi dan penyakit
kepada orang lain di masyarakat. Modalitas
diagnostik juga harus disesuaikan dengan kebutuhan
populasi dan epidemiologi TB di wilayah tersebut. Ini
termasuk mikroskop ditingkatkan, penggunaan kultur
cair untuk masa kanak-kanak dan EPTB,

Tabel 1: Distribusi usia

Distribusi umur (dalam tahun) Jumlah kasus Persentase
0-15 25 33.33
16-30 36 48 A B
31-45 7 9.33
Gambar 1: (a) Pewarnaan positif Ziehl–Neelsen konvensional: Fotomikrograf
46-60 6 8
((pewarnaan ZN x100)) menunjukkan basil tahan asam. (b) Metode konsentrasi
61-75 1 1.33
pemutih Ziehl-Neelsen pewarnaan positif: Photomicrograph (ZN
Total 75 100 noda x100) menunjukkan asam basil tahan

Tabel 2: Korelasi diagnosis sitomorfologi dengan pemutih dan metode Ziehl‑Neelsen konvensional

Sitomorfologi Metode pemutih Ziehl konvensional Metode Neelsen Total Persentase

diagnosa
Positif untuk Negatif untuk Positif untuk asam‑ Negatif untuk
asam, basil tahan asam, basil tahan asam basil cepat (basil cepat)
Limfadenitis reaktif 2 7 0 9 9 12
Limfadenitis supuratif 12 10 4 18 22 29.33
Limfadenitis tuberkulosis 35 9 11 33 44 58.67
Total 49 (65,33%) 26 15 (20%) 60 75 100

190 Jurnal Sitologi Volume 34 Edisi 4 Oktober-Desember 2017

[Diunduh gratis dari http://www.jcytol.org pada Rabu, 22 September 2021, IP: 103.111.137.66]
Krishna dan Gole: Perbandingan ZN Konvensional dan Metode Pemutih Modifikasi dalam TB
Tabel 3: Perbandingan Metode Ziehl‑Neelsen Konvensional
dengan Metode Pemutih untuk Deteksi Tahan Asam
basil
Konvensional Metode pemutih Total
Ziehl Metode Neelsen Positif Negatif
Positif 15 0 15
Negatif 34 26 60
Total 49 26 75
Berbagai teknik selain pewarnaan ZN konvensional dan
metode konsentrasi pemutih untuk menunjukkan AFB
adalah pewarnaan Pap, pewarnaan auramine rhodamine
(ARS), pewarnaan autofluorescence (AF), pewarnaan vital
fluorescein-diacetate (FDA), mikroskop light emitting diodes
(LED), dan teknik reaksi berantai polimerase (PCR).
Kultur mikobakteri adalah metode referensi dan memakan
waktu. Ini membutuhkan prosedur keselamatan khusus di
laboratorium. Teknik serologis tidak memiliki sensitivitas dan
spesifisitas.[3] PCR, meskipun cepat, mahal untuk digunakan
secara rutin di negara berkembang di mana TB lazim.[5]
Teknik Pap, ARS, FDA, dan LED memerlukan mikroskop fluoresen.
Ketersediaan mikroskop fluoresen di laboratorium dengan pengaturan
terbatas sumber daya sulit. Keuntungan mikroskop fluoresen adalah
dapat digunakan pada perbesaran yang lebih rendah dan waktu yang
dibutuhkan lebih sedikit untuk memeriksa area yang jauh lebih besar per
satuan waktu. Pewarnaan pap menghindari penggunaan zat beracun
atau karsinogenik seperti fenol dan rhodamin yang digunakan dalam
metode ARS.
Metode ZN untuk basil BTA memainkan peran kunci dalam diagnosis
serta dalam pemantauan pengobatan TB.[6,7] Kerugian utamanya
adalah sensitivitas rendah, mulai dari 20% hingga 43%.[3,4]
Metode konsentrasi pemutih adalah salah satu metode paling aman
untuk meningkatkan sensitivitas mikroskop langsung untuk mendeteksi
BTA. Beberapa penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa
pencairan sputum oleh NaOCl dan konsentrasi basil melalui sentrifugasi
secara signifikan meningkatkan sensitivitas mikroskop langsung.[8,9] Pada
akhir 1940-an, pencairan sputum dengan NaOCl diikuti dengan
konsentrasi menggunakan sentrifugasi sebelum pewarnaan tahan asam
diterapkan untuk meningkatkan kepositifan apusan untuk mendeteksi
BTA. Metode ini sedikit dimodifikasi dan diterapkan pada aspirasi kelenjar
getah bening.
Penelitian ini mengungkapkan ketidaksesuaian antara diagnosis
sitomorfologi dan hasil positif BTA dengan metode pemutih
dalam beberapa kasus. Dua spesimen adalah limfadenitis reaktif
[Gambar 2a dan b] dan 12 spesimen adalah limfadenitis
supuratif akut; namun, ini positif untuk BTA dengan metode
pemutih. Penjelasan yang mungkin untuk diagnosis limfadenitis
reaktif pada sitologi tetapi positif untuk BTA dengan metode
pemutih dalam kasus mungkin karena hilangnya sel epiteloid
yang tersebar di antara populasi polimorf sel limfoid. Semua
pasien merespon dengan baik terhadap terapi antituberkular. Di
antara 12 spesimen yang didiagnosis sebagai supuratif
Jurnal Sitologi Volume 34 Edisi 4 Oktober-Desember 2017
A B
Gambar 2: (a) Fotomikrograf menunjukkan populasi polimorf sel limfoid
pada limfadenitis reaktif (pewarnaan Pap x40). (b) Metode konsentrasi
pemutih Ziehl Neelsen pewarnaan positif: Fotomikrograf menunjukkan
basil tahan asam dalam kasus limfadenitis reaktif (pewarnaan ZN x100)
limfadenitis, ini positif BTA dengan metode pemutih,
kemungkinan penyebabnya adalah hilangnya basil di tengah-
tengah puing-puing nekrotik.
Khubnani dkk. mempelajari 55 kasus TBEP, termasuk 18 aspirasi
dari cairan tubuh, 18 dari abses yang dikeluarkan dari berbagai
tempat tubuh, 17 dari kelenjar getah bening, dan 2 dari kerokan
kulit. Ditemukan bahwa keseluruhan 43,36% kasus sugestif TB
pada sitologi, 21,8% kasus positif BTA dengan pewarnaan ZN
konvensional, dan 70,90% kasus positif BTA dengan metode
pemutih.[10]
Gangana dkk. mempelajari 100 kasus limfadenitis TB dan
menyimpulkan bahwa metode konsentrasi pemutih menunjukkan
positif BTA pada 72% kasus. Nilai positif AFB secara signifikan lebih
tinggi dibandingkan dengan pewarnaan ZN rutin membuat basil
mudah terlihat dengan waktu penyaringan yang lebih singkat.
Metode pemutihan murah, mudah dilakukan, dan lebih sensitif dan
lebih aman daripada pewarnaan ZN rutin.[11]
Annam dkk. mempelajari 93 kasus limfadenopati. Di antara 93
aspirasi, 33,33% positif BTA pada metode ZN konvensional dan
hasil olesan positif meningkat menjadi 63,44% pada metode
pemutih. Mereka menyimpulkan bahwa metode pemutih itu
sederhana dan murah.[12]
Chandrasekhar dkk. mempelajari 112 kasus limfadenopati.
Di antara 112 aspirasi, 12,5% positif untuk BTA dalam
metode ZN konvensional dan positif smear meningkat
menjadi 60,7% pada metode pemutih [Tabel 4].[13]
Penelitian ini menunjukkan bahwa pencairan spesimen yang
disedot dengan NaOCl diikuti dengan sentrifugasi secara
signifikan meningkatkan hasil BTA. Temuan ini sangat menarik
di negara berkembang di mana BTA BTA-negatif menjadi
semakin umum. Pemulihan AFB yang lebih baik setelah
perlakuan dengan NaOCl mungkin disebabkan oleh perubahan
sifat permukaan AFB (yaitu, muatan dan hidrofobisitas) dan/
atau denaturasi spesimen, yang menyebabkan flokulasi dan
selanjutnya peningkatan laju sedimentasi AFB. Selain itu,
peningkatan kepositifan apusan dengan metode pemutih
disebabkan oleh kepadatan basil yang lebih tinggi per bidang
mikroskopis yang diperoleh dengan metode ini dan
pengurangan puing-puing, meninggalkan bidang yang jelas
untuk mikroskop. Dengan demikian, persiapan sampel
191
[Diunduh gratis dari http://www.jcytol.org pada Rabu, 22 September 2021, IP: 103.111.137.66]
Krishna dan Gole: Perbandingan ZN Konvensional dan Metode Pemutih Modifikasi dalam TB
Tabel 4: Perbandingan kepositifan basil tahan asam dalam penelitian
yang berbeda dengan metode konvensional dan pemutih
Pengarang Konvensional
metode (%)
Khubnani dkk.[10] 21.8
Gangana dkk.[11] 27.0
Annam dkk.[12] 33.33
Chandrasekhar dkk.[13] 12.5
Studi saat ini 20.0
dengan metode pemutih mengurangi waktu yang diperlukan untuk
pemeriksaan slide untuk mendeteksi BTA.
Pemeriksaan apusan tahan asam dengan metode pemutih
tidak membedakan basil tuberkel dengan mikobakteri lain.
Namun, ini bukan masalah utama di negara berkembang.
Pertama, karena sebagian besar pasien dengan BTA
menderita TB dan, kedua, karena mikobakteri lain biasanya
tidak ada dalam konsentrasi yang cukup untuk dideteksi
dengan mikroskop langsung. Mycobacteria memiliki berat
jenis yang rendah dan dapat tetap mengapung selama
sentrifugasi. Dengan terjadinya TB yang resistan terhadap
banyak obat, risiko infeksi laboratorium menjadi perhatian
utama. Penggunaan metode pemutih pasti akan
menurunkan risiko infeksi laboratorium. Karena NaOCl
(pemutih) membunuh mikobakterium, metode ini tidak
dapat digunakan pada sampel yang dimaksudkan untuk
kultur, namun metode ini sangat disarankan untuk semua
laboratorium yang hanya melakukan mikroskop langsung.
Penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh berbagai penulis dan
penelitian ini mengungkapkan bahwa metode pemutihan untuk
deteksi BTA sederhana, aman, hemat biaya, dan memiliki tingkat
deteksi kasus yang tinggi. Hasil akan lebih tertata dengan baik jika
konsentrasi larutan pemutih, RCF, dan perlakuan pemutih sesuai
jadwal waktu dan sebanding. Penerapan metode pemutih jelas
meningkatkan deteksi mikroskopis dan dapat menjadi pengaruh
yang berguna untuk sitologi rutin. Ini akan menjadi keuntungan
bagi pasien dalam menerima pengobatan dini dan efektif.
Cpenyertaan
Ada masalah dalam mencapai diagnosis absolut pada kasus
limfadenitis tuberkulosis tertentu ketika aspirasi menunjukkan
gambaran polimorf dengan sel epiteloid sesekali dan tidak
adanya sel raksasa Langhans yang khas atau nekrosis kaseosa,
sehingga perlu untuk diagnosis definitif. Dalam kasus tersebut,
pewarnaan ZN rutin menunjukkan sensitivitas rendah karena
jarang mendeteksi AFB dalam aspirasi. Namun, dalam penelitian
ini, kami dapat menetapkan kepositifan AFB pada 65,33% kasus
dengan metode pemutih. Tingkat deteksi ini jauh lebih baik
daripada pewarnaan ZN rutin.
192
Juga diamati bahwa, dengan pewarnaan ZN rutin, sebagian
besar aspirasi memiliki sedikit AFB positif dan mencarinya
merupakan latihan yang membosankan dan memakan waktu
Pemutih dibandingkan dengan metode pemutih. Dengan metode
metode (%) pemutih, pada sebagian besar kasus positif BTA, BTA mudah
70.9 terlihat dan terdeteksi. Morfologi BTA diamati lebih baik
72.0 diawetkan dalam metode pemutih.
63.44
60.7 Dengan demikian, metode pemutih untuk mendeteksi basil tuberkel
65,33 pada aspirasi kelenjar getah bening lebih bermanfaat daripada
metode ZN konvensional. Selain itu, metode pemutihan aman,
murah, dan mudah dilakukan tanpa memerlukan peralatan
tambahan.
Dukungan finansial dan sponsor
Nol.
Konflik kepentingan
Tidak ada konflik kepentingan.
Referensi
1. Dandapat MC, Mishra BM, Dash SP, Kar PK. TBC kelenjar getah bening
perifer: Tinjauan 80 kasus. Sdr J Surg 1990;77:911-2.
2. Lau SK, Kwan S, Lee J, Wei WI. Sumber basil tuberkel di kelenjar getah bening
serviks: Sebuah studi prospektif. J Laringol Otol 1991;105:558-61.
3. Daniel TM. Diagnosis cepat tuberkulosis: Teknik laboratorium
yang berlaku di negara berkembang. Rev Infect Dis 1989;11
Suppl 2:S471-8.
4. Balows A, Hausler WJ, Hermann KL, Shadomy HJ. Manual Mikrobiologi
Klinik. 5th ed. Washington: DC: Masyarakat Amerika untuk
Mikrobiologi; 1991. hal. 308-11.
5. Savic B, Sjobring U, Alugupalli S, Larsson L, Miorner H. Evaluasi reaksi
berantai polimerase, analisis asam tuberculostearic, dan mikroskop
langsung untuk mendeteksi Mycobacterium tuberculosis dalam dahak. J
Menginfeksi Dis 1992;166:1177-80.
6. Friede T. Tuberculosis adalah Kasus deteksi, pengobatan, dan
pemantauan tanya jawab. 2dan ed. Jenewa: WHO; 2004. hal. 14-20.
7. Paria KK, Astaga RK, De PK, Sengupta J, Mukherjee AC, Pradhan MC. Studi
tentang limfadenitis serviks tuberkulosis yang didiagnosis secara klinis
tidak menanggapi kemoterapi antituberkulosis standar. Indian J Tuberc
1985;32:133-44.
8. Wilkinson D, Sturm AW. Mendiagnosis tuberkulosis di rangkaian miskin
sumber daya: Nilai konsentrasi dahak. Trans R Soc Trop Med Hyg
1997;91:420-1.
9. Habenzuu C, Lubasi D, Fleming AF. Peningkatan sensitivitas mikroskop
langsung untuk mendeteksi basil tahan asam dalam dahak di negara
berkembang. Trans R Soc Trop Med Hyg 1998;92:415-6.
10. Khubnani H, Munjal K. Penerapan metode pemutih dalam
diagnosis tuberkulosis ekstra paru. Mikrobiol J Pathol India
2005;48:546-50.
11. Gangane N, Anshu, Singh R. Peran metode Bleach yang dimodifikasi dalam
pewarnaan basil tahan asam pada aspirasi kelenjar getah bening. Acta Cytol
2008;52:325-8.
12. Annam V, Karigoudar MH, Yelikar BR. Peningkatan deteksi mikroskopis basil tahan
asam dengan metode pemutih yang dimodifikasi dalam aspirasi kelenjar getah
bening. Mikrobiol J Pathol India 2009;52:349-52.
13. Chandrasekhar B, Prayaga AK. Utilitas metode konsentrasi
dengan teknik pemutih yang dimodifikasi untuk demonstrasi
basil tahan asam dalam diagnosis limfadenopati tuberkulosis. J
Cytol 2012;29:165-8.
Jurnal Sitologi Volume 34 Edisi 4 Oktober-Desember 2017