JURNAL AWAL PRAKTIKUM TEKNOLOGI SEDIAAN FARMASI

STERIL

PRAKTIKUM I DAN II

PERSIAPAN PEMBUATAN SEDIAAN OBAT STERIL DAN

STERILISASI ALAT DAN BAHAN

Nama Praktikan : I Kadek Rama Putra Yasa

NIM Praktikan : 201021022

Kelas : A5A

Kelompok :2

Program Studi : Farmasi Klinis

Hari, Tgl Praktikum : Selasa, 4 April 2023

Nama Dosen : I Gusti Ngurah Agung Windra Wartana. S. Farm.,

M.Se., Apt

Asisten Dosen :

PROGRAM STUDI FARMASI KLINIS

FAKULTAS ILMU-ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS BALI INTERNASIONAL

DENPASAR

2023
 PRAKTIKUM I DAN II

PERSIAPAN PEMBUATAN SEDIAAN OBAT STERIL DAN

STERILISASI ALAT DAN BAHAN

I. TUJUAN PRAKTIKUM
1.1 Mahasiswa mampu menjelaskan spesifikasi ruang bersih.
1.2 Mahasiswa mampu memperagakan cara mencuci tangan sesuai
prosedur yang telah ditentukan.
1.3 Mahasiswa mampu memperagakan cara menggunakan baju kerja
di grey area sesuai prosedur yang berlaku.
1.4 Mahasiswa mampu memperagakan cara menggunakan baju kerja
di white area sesuai prosedur yang berlaku.
1.5 Mahasiswa mampu memperagakan cara menggunakan Bio Safety
Cabinet (BSC) yang merupakan area dengan tingkat kebersihan
paling tinggi (kelas A latar B).

II. DASAR TEORI

Istilah sanitasi yang digunakan untuk pengaturan obat menyiratkan

pemusnahan total semua mikroorganisme dan spora mereka atau pengusiran total
organisme dari kesiapan. Uap (panas lembab), sterilisasi panas kering, sterilisasi
filter, sterilisasi gas, dan sterilisasi radiasi pengion adalah lima metode yang
paling umum untuk mensterilkan produk farmasi. Sifat sediaan dan bahan aktif
yang dikandungnya memiliki pengaruh yang signifikan terhadap metode yang
digunakan untuk menjamin sterilitas sediaan farmasi. Namun, terlepas dari
metode yang digunakan, produk akhir harus lulus uji sterilitas sebagai bukti
keefektifan metode, peralatan, dan personel (Panduan Praktikum Steril, 2019).

Tindakan atau proses menghilangkan zat atau objek dari semua kehidupan
dikenal sebagai sterilisasi. Volume dan jenis sterilisasi menentukan berapa lama.
Pembersihan media yang terlalu lama menyebabkan: Penguraian gula, pemecahan
vitamin dan asam amino, inaktivasi sitokinin zeatin ribosida, dan perubahan pH
yang menyebabkan agar (jelly) terdepolimerasi adalah contohnya (Fauzi, 2013).

Sterilisasi adalah istilah yang hanya dapat digunakan berdasarkan proyeksi

kinetik laju kematian mikroorganisme dan memiliki arti relatif dalam hal
kemungkinan terciptanya kondisi yang benar-benar bebas dari mikroorganisme.
Prosedur yang dimaksudkan untuk menghasilkan keadaan steril adalah sterilisasi.
Secara umum, keadaan steril adalah keadaan langsung yang terjadi karena
pemusnahan dan pengusiran setiap mikroorganisme hidup. ( 2008, Lakhman)
 Aseptik mengacu pada siklus atau kondisi terkontrol di mana tingkat
polusi mikroba dikurangi ke tingkat tertentu di mana mikroorganisme dapat
disingkirkan dalam suatu produk, sedangkan pembersihan mengacu pada kondisi
yang memungkinkan peluang total mikroorganisme dengan batasan tertentu. (
2008, Lakhman)

Ada dua pendekatan yang berbeda untuk sterilisasi: pendekatan sterilisasi

dingin dan pendekatan sterilisasi panas. Metode untuk sterilisasi dingin dapat
dibagi menjadi dua kategori: yang membunuh bakteri dengan menggunakan
radiasi (radiasi sinar gamma dengan isotop radioaktif kobalt 60) dan gas, dan yang
menghilangkan bakteri dengan menggunakan filtrasi dengan membran filter
berpori 0,22 m . etilen oksida (pada porsi 25 KGy). Waktu distilasi panas kering
yang dilakukan dalam oven pada suhu 160 sampai 1800 derajat Celcius selama 30
sampai 40 menit merupakan metode sterilisasi panas. Karena memiliki efek toksik
pada bahan yang disterilkan, maka tidak dapat digunakan untuk membunuh
bakteri dengan formaldehida. Elisma 2016)

Metode sterilisasi Kondisi

Autoclaf Suhu 121°C dengan waktu selama 15
(dengan menggunakan cara panas basa) menit dan 134°C dengan waktu selama
3 menit
Oven Suhu 160°C selama 120 menit
(Oven menggunakan cara panas kering Suhu 170°C selama 60 menit
) Suhu 180°C selama 30 menit
Radiasi sinar V, elekron dipercepat Cobalt 60 dengan menggunakan dosis
(metode yang digunakan adalah cara 25 KGy
dingin
Gas Etilen Oksida 800-1200 mg/L 45-63°C, RH 30-70%
(menggunakan cara dingin adalahb 1-4 jam
metode dari Gas Etilen Oksida )
Filtrasi Membran filter steril dengan pori ≤
(removal Bakteri ) 0,22 µm

Pemilihan metode sterilisasi yang tepat berdasarkan sifat fisikokimia

bahan aktif, terutama ketahanan panas alat atau bahan, merupakan aspek sterilisasi
yang paling krusial. Peralatan tahan panas, misalnya: Gelas kimia, gelas
Erlenmeyer, batang pengaduk, batang pipet, dan barang-barang lainnya dapat
disterilkan menggunakan metode panas—panas basah dalam autoklaf atau panas
kering dalam oven. Tutup penetes dan wadah pengukur plastik, yang merupakan
instrumen tahan panas, dapat disterilkan dingin dengan mengalirkan gas etilen
oksida melaluinya atau menggunakan radiasi. Instrumen dapat didesinfeksi
dengan merendamnya dalam alkohol 70% selama 24 jam jika tidak ada metode
sterilisasi yang tersedia. meskipun tidak menjamin instrumen akan tetap steril)
Elisma 2016).
 Kami benar-benar ingin fokus pada keadaan material dan pertentangan
intensitas material untuk tujuan disinfeksi material. untuk bubuk, semipadat, dan
cairan yang tidak berbahan dasar air, seperti cairan licin. Stabil terhadap panas,
menjadikan sterilisasi oven sebagai metode yang disukai. Autoklaf adalah metode
sterilisasi yang paling umum untuk cairan berbahan dasar air yang perlu
disterilkan. Elisma 2016).

Menurut Elisma (2016), jika bahan yang akan disterilkan berupa cairan
dengan aqueous transporter, maka:

1. Jika bahan dapat disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121°C selama 15
menit, digunakan metode pembersihan panas. Cuci kering dalam autoklaf
selama 15 menit.

2. Jika tidak, kami ingin melihat apakah bahan tersebut dapat menahan
disinfeksi autoklaf; awalnya, kami menghitung nilai F0. Kita perlu
mengetahui jumlah mikroorganisme yang disiapkan dan oposisi mikroba
saat ini terhadap bahan untuk menentukan nilai F0. Dengan menggunakan
teknik autoclave dan bioburden, kami mendisinfeksi area tersebut
berdasarkan pengetahuan kami tentang jumlah dan resistensi
mikroorganisme dalam rencana sanitasi sebelumnya.

3. Filtrasi, yang melibatkan pemisahan mikroorganisme menggunakan

lapisan saluran kira-kira, akan dipilih sebagai teknik pembersihan jika
metode kedua tidak efektif karena kepekaan bahan terhadap panas. 0,22
µm. Biasanya, film saluran 0,45 m digunakan untuk memisahkan saluran
dengan ukuran ini sebelum digunakan.

4. Jika cara ketiga tidak masuk akal, maka pada saat itu kerangka pesta
diselesaikan dengan prosedur aseptik, tanpa disinfeksi definitif. Berbeda
dengan persyaratan dari banyak preparat lain, persyaratan sterilitas
merupakan nilai mutlak.
Jika bahannya bubuk, setengah padat, cair dengan pembawa tidak berair, maka:

1. Metode desinfeksi yang lebih disukai adalah strategi intensitas kering,

dimana ayam broiler digunakan selama dua jam pada suhu 1600 derajat
Celcius.

2. Disinfeksi lengkap dapat dilakukan dalam waktu yang lebih singkat

dengan ayam pedaging jika metode utama tidak memungkinkan.

3. Iradiasi dengan porsi 25 kGy senyawa Cobalt-60 dipilih jika metode

kedua tidak memungkinkan.

4. Metode iradiasi, yang menggunakan radiasi lebih sedikit, digunakan

untuk mengatasi masalah jika tidak memungkinkan.

5. Interaksi dilakukan dengan pembersihan saluran jika strategi penyinaran

tidak berhasil.

6. Jika prosedur pembersihan filtrasi tidak dapat diselesaikan, pengaturan

tanpa pembersihan akhir dilakukan setelah metode aseptik selesai.

Di masa lalu, uji sterilitas lengkap resmi digunakan untuk menentukan

sterilitas; namun, beberapa tes sterilitas diperlukan untuk persiapan akhir.
Fakta bahwa uji sterilitas ini secara inheren berbahaya mengharuskan
pemilihan sampel acak secara statistik dari seluruh populasi adalah batasan
yang paling jelas. Cara seseorang mengeluarkan kata bahwa unit 1000 unit
terkontaminasi (yaitu, tingkat kontaminasi = 0,1%) dan 20 unit dalam
contoh sporadis 1000 unit, kemungkinan unit kotor dari 20 contoh itu
adalah 0,02. Pada akhirnya, dari jumlah 1000 unit, hanya 20 tes delegasi
dengan kemungkinan polusi 2% yang akan dipilih. Salah satu dari dua
puluh sampel yang dipilih untuk uji sterilitas ternyata masih
terkontaminasi, meskipun faktanya unit tersebut terkontaminasi.
Akibatnya, uji sterilitas mungkin tidak lulus. Mikroorganisme dengan
konvergensi zat asing yang rendah mungkin tidak dikenali selama jangka
waktu merenung, atau mungkin tidak berkembang dengan cara apa pun
karena kurangnya media dan penetasan. (Lukas, 2006)

Metode fisik dan kimia dapat digunakan untuk mensterilkan (Tille, 2017).

A. Strategi nyata harus memungkinkan sterilisasi dengan:

1) Pemanasan

a) Pemanasan kering
a) Pemijaran Metode ini melibatkan pemanasan
perangkat dengan menempatkannya dalam
lingkaran di atas api Bunsen sehingga sisa lingkaran
bersinar.

Gambar pemijaran

b).Pembakaran

Pembakaran digunakan untuk membuat alat-

alat berbahan dasar logam atau kaca dengan
cara disambungkan ke API Bunsen, tetapi tidak
wajib. Misalnya: a) mengeluarkan beberapa
silinder yang terletak di API Bunsen; b) setelah
slide diinstal, lampirkan ke mesin pencari api;
c) Pinset digunakan untuk membentuk lapisan
antimikroba pada cawan petri yang berisi objek
mikroskopi untuk pengobatan tanggap
antitoksin.
c) Oven udara panas Disinfeksi menurut
strategi ini dapat digunakan untuk memanggang
adonan yang terbuat dari kaca/kaca, petri,
tabung erlenmeyer, atau elastis atau plastik.
Suhu ayam pedaging pada suhu 160 hingga
1800 C selama 1,5 hingga 3 menit. Perangkat
pertama kali ditutup dengan kertas sebelum
didesinfeksi.
 Gambar Hot air oven

d) Insinerator Insinerator digunakan untuk

mendisinfeksi bahan yang tidak dapat disimpan,
seperti darah dan jarum infus bekas yang disimpan
dalam kotak pengaman biohazard. Asap atau residu
dari pemanasan pada suhu antara 8700 dan 9800 C
akan mengeluarkan racun. Kerugian dari metode
desinfeksi pembakaran adalah ini. Namun, metode
ini dapat menjamin bahwa bahan yang tidak dapat
ditolak akan dibuang dengan cara yang tidak dapat
dilakukan oleh metode lain.

A. Pemanasan Basis Pemanasan Basah menggunakan

voltase tinggi untuk memanaskan, dan satu model
menggunakan autoklaf. Disinfektan biohazard (limbah
mikroba) dan peralatan aman intensitas (bluetips,
mikropipet), persiapan media, dan cairan pembersih adalah
semua aplikasi yang mungkin dari metode sanitasi ini.
Pemanasan dilakukan pada suhu 1210C selama 15 menit
(Tille, 2017).
Pemanasan basah dapat digunakan
a) Autoklaf manual Metode ini memanfaatkan
ketinggian air di dalam autoklaf yang harus selalu
dapat diakses. Tidak mungkin meninggalkan
pembersihan autoklaf manual terlalu lama. Setelah
15 menit, matikan autoklaf secara manual saat suhu
 mencapai 1210C; jika tidak, suhu akan terus naik,
air bisa habis, dan wadah bisa meledak.
b) Digital Autoclave : Alat ini dapat diset selama 15
menit pada suhu 1210 C. Setelah suhu tercapai
maka akan terus turun hingga mencapai 500 derajat
Celcius dan tetap di sana. Suhu ini wajar untuk
sanitasi media karena media dibuat pada suhu antara
50 sampai 700 C untuk membuat media

2. Radiasi

Sebelum digunakan, radiasi pengion digunakan untuk membersihkan

peralatan plastik seperti kateter, jarum infus yang terbuat dari plastik, dan
sarung tangan. Metode pemanfaatan gelombang mikro, khususnya yang
memanfaatkan sinar gamma dengan energi tinggi dan frekuensi pendek,
merupakan gambaran dari radiasi pengion.

3. Pemisahan atau filtrasi

digunakan untuk membersihkan radioisotop dan sintetis beracun, di antara

bahan halus berintensitas tinggi lainnya.

1) Filtrasi cairan melalui lapisan selulosa nitrat atau turunan asam selulosa
asetat menggunakan standar pengaturan.

2) Untuk mengangkut makhluk hidup yang lebih besar dari 0,3

mikrometer dari pusat penelitian ilmiah (BSC), penyaringan udara
menggunakan udara partikulat efektif tinggi (HEPA).

ALAT DAN BAHAN

3. 1 Alat Dan Bahan Prosedur Mencuci Tangan
3.1. 1 Alat
1. Tempat cuci tangan berikut kran air
2. Tissue atau handuk bersih atau alat pengering
tangan
3. Sikat kuku tangan
4. Lap yang tidak melepaskan partikel
5. Alat – alat gelas untuk peraga
3.1. 2 Bahan
1. Cairan desinfektan, misal: Alkohol 70% atau
Isopropilalkohol
2. Sabun cair dan wadah
 3. 2 Alat Dan Bahan Prosedur Menggunakan Baju Kerja Pada Ruang
Bersih Greyarea
3.2. 1 Alat
1. Baju kerja
2. Masker
3. Sarung tangan

3.2. 2 Bahan
1. Alkohol 70 %
2. Lysol
3. 3 Alat Dan Bahan Prosedur Menggunakan Biosafety Cabinet (Bsc)
3.3. 1 Alat
1. Bio Safety Cabinet (BSC)
3.3. 2 Bahan
1. Lysol
3. 4 Alat Dan Bahan Prosedur Melakukan Sterilisasi Dengan Metode
Panas Basah
3.4. 1 Alat
1. Autoklaf
3.4. 2 Bahan
1. Bahan – bahan praktikum yang akan disterilkan
III. PROSEDUR PRAKTIKUM
4.1 Prosedur Mencuci Tangan

Tiap personel yang masuk ke area pembuatan obat

hendaklah menggunakan sarana mencuci tangan dan
mencuci tangannya sebelum memasuki area produksi
sesuai prosedur mencuci tangan sebelum menggunakan
baju kerja untuk area bersih

Cuci tangan secara menyeluruh di sarana cuci tangan yang

disediakan dengan menggunakan sabun cair yang
disediakan.

Gunakan sikat yang disediakan bila sela-sela kuku kotor.

Sikat sela-sela kuku sampai bersih.

Kuku harus pendek pada waktu cuci tangan.

4.2 Prosedur Menggunakan Baju Kerja Pada Ruang
 4.2 Bersih Greyarea

Untuk produksi sediaan steril, tiap personel yang bekerja di

Kelas A/B harus menggunakan pakaian kerja steril
(disterilkan atau disanitasi dengan memadai) dan hendaknya
disediakan untuk tiap sesi kerja.

Dalam proses pembuatan obat steril, sarung tangan harus

secara rutin dilakukan disinfeksi selama bekerja,
menggunakan alkohol 70%, biasanya isopropil

alkohol (IPA).

Masker dan sarung tangan hendaklah diganti paling sedikit

tiap sesi kerja.

Arloji, kosmetika dan perhiasan hendaklah tidak dipakai di

area bersih.

4.3 Prosedur Menggunakan Biosafety Cabinet (Bsc)

4.3. 1 Sebelum Menggunakan BSC
Matikan lampu UV (bila menyala)

Hidupkan BSC dengan menekan tombol ON hingga

terdengar bunyi dari alat (tekan terus hingga terdengar
bunyi)

Hidupkan lampu fluorescent dan blower

Biarkan kabinet selama 5 menit tanpa aktivitas

Buka kaca hingga tanda (alarm akan berbunyi bila

setting kaca belum sesuai)

Bersihkan permukaan tempat kerja dengan cairan

desinfektan yang sesuai seperti 70% isopropyl alkohol
 Bersihkan semua item dengan cairan desinfektan
sebelum memasukkannya ke dalam kabinet

Letakkan semua alat dalam kabinet minimal 10 cm dari

kaca

Jangan meletakkan alat diatas grill (penyedot udara)

karena akan mengganggu aliran udara dalam cabinet

4.3. 2 Selama Proses Kerja

1 Bagi kabinet menjadi tiga area, area bersih, area kerja, dan
area kotor.
2 Pergerakan tangan dan lengan dalam kabinet:

Usahakan melakukan pergerakan tangan dengan

perlahan.

Minimalisir gerakan tangan keluar-masuk kabinet.

Pergerakan lengan dan tangan dengan arah lurus, jangan

ke samping kanan-kiri

Pergerakan tangan untuk masuk-keluar cabinet lurus.

3 Ikuti prosedur kerja secaraaseptik:

Letakkan botol atau vial yang terbuka paralel terhadap
aliran udara dalam kabinet.

Buka pembungkus alat/ bahan, hanya yang akan

dikerjakan saja. Lainnya biarkan

tertutup.
Bila terjadi kesalahan kerja: misalnya terdapat cairan
yang tumpah, biarkan beberapa menit supaya udara yang
terkontaminasi digantikan oleh udara baru yang bersih
dari HEPA filter.

Buang sarung tangan dan baju kerja terluar yang

terkontaminasi, cuci tangan, kemudian ganti dengan
sarung tangan dan baju kerja yang bersih.

Bersihkan cairan yang tumpah dengan lap steril dan

cairan desinfektan.

Bersihkan permukaan kerja dengan air steril dan

bersihkan lagi dengan cairan desinfektan.

Bila terdapat pecahan kaca, jangan membersihkannya

dengan tangan, gunakan pinset atau alat lain yang sesuai.

Setelah membersihkan tempat kerja, buang sarung tangan

dan ganti dengan yang baru.

Biarkan kabinet beberapa saat untuk proses purging dan

lanjutkan kerja seperti biasa.

4.3. 3 Setelah Proses Kerja

Semprot alat yang akan digunakan lagi dengan cairan

desinfektan dan bersihkan dengan lap.

Letakkan semua alat yang terkontaminasi dalam wadah

untuk pembuangan.

Buang sarung tangan yang gunakan, cuci tangan, dan

gunakan yang baru.
 Keluarkan alat yang telah digunakan dari dalam kabinet.

Desinfeksi interior kabinet dan lap permukaan lampu UV.

Matikan lampu fluorescent dan blower.

Tutup kaca kabinet dan nyalakan lampu UV. Biarkan

selama 60 menit.

4.4 Melakukan Sterilisasi Dengan Metode Panas Basah

Alat-alat yang akan disterilisasi menggunakan metode

panas basah yaitu erlenmeyer di cuci dengan bersih dan
dikeringkan.

Lubang yang terdapat dalam erlenmeyer di tutup dengan

kapas steril dan dibungkus menggunakan kertas perkamen
sebanyak 2 lapis.

Erlenmeyer yang telah dibungkus dimasukkan dan ditata

kedalam keranjang autoklaf.

Ditekan tombol ON pada autoklaf, ditunggu sampai alat

siap digunakan.

Dibuka pintu autoklaf dengan menggeser kunci kesebelah

kanan.

Dikontrol air yang ada di dalam chamber autoklaf, bila

kurang ditambahkan air dengan aqua DM sampai tanda
batas.

Dimasukkan keranjang autoklaf yang berisi alat/bahan yang

akan disterilkan.
Ditutup autoklaf dan digeser kunci kesebelah kiri.

Ditekan tombol start pada autoklaf yang sebelumnya telah di

set waktu dan temperaturnya yaitu 121o C selama 20 menit.

Setelah 20 menit dibuka buangan gas sampai bunyi yang ada

didalam autoklaf tidak terdengar lagi dan ditunggu sampai
suhu mencapai 70o C.

Setelah mencapai 70o C dibuka kunci autoklaf dengan

menggesernya kekanan.

Lalu keranjang yang ada didalam autoklaf dikeluarkan dari

chamber.

Alat yang telah disetrilisasi dimasukkan ke dalam box

isolator steril.

Lalu dimasukkan ke dalam lemari penyimpanan steril.

 DAFTAR PUSTAKA

Elisma, S. 2016. Praktikum Teknologi Sediaan Steril. Pusat Pendidikan Sumber

Daya Manusia Kesehatan Badan Pengembangan Dan Pemerdajaan
Sumber Daya Manusia Kesehatan

Panduan praktikum Steril 2019. Pemanfaatan Plastic Polipropilen Standing Pouch

Sebagai Salah Satu Kemasan Sterilisasi Peralatan Laboratorium. Indonesia
Journal Of Laboratory. Volume 2 Nomor 3.

Lukas, S. 2006. Formulasi Steril. Yogyakarta: Penerbit Andi. Hal. 9- 14; 82-84;
86-99

Lachman L., Lieberman And Heberrt. A 2008. Pharmaceutical Dosage Form:

Tablets. Pharmaceutical Press. New York

Syah, I. S. K. 2016 Penentuan Tingkatan Jaminan Sterilisasi Pada Autoklaf

Dengan Indicator Biologi Spore. Farmaka. Volume 14 No 1

Tille, P. M. (2017). Bailey & Scott’s Diagnostic Microbiology. In Basic Medical

Microbiology (Fourteenth, P. 45). St. Louis Missouri: Elsevier