IDENTIFIKASI KANDUNGAN ASAM RETINOAT PADA KRIM MALAM YANG

BEREDAR DI KABUPATEN TEGAL DENGAN SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

IDENTIFICATION OF RETINOIC ACID CONTENT IN NIGHT CREAMS CIRCULATING
IN TEGAL DISTRICT USING SPECTROPHOTOMETRY UV-VIS
1)
Siti Nur Hanifah, 2)Ery Nourika Alfiraza, 3)Girly Risma Firsty
1)
Mahasiswa Program Studi Farmasi Program Sarjana (S-1)
2,3)
Dosen Program Studi Farmasi Program Sarjana (S-1)
Universitas Bhamada Slawi
Email: sitinurhanifah557@gmail.com

ABSTRAK
Asam retinoat merupakan bahan pemutih berbahaya yang dilarang digunakan dalam krim
pemutih karena dapat menyebabkan kulit kering, rasa terbakar, kanker kulit serta teratogenik.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kandungan dan kadar asam retinoat pada sampel krim
malam yang beredar di Kabupaten Tegal. Analisis kualitatif dilakukan dengan Kromatografi Lapis
Tipis (KLT) dengan fase gerak n-heksan : aseton (7:3), dan analisis kuantitatif menggunakan
spektrofotometri UV-Vis. Berdasarkan validasi yang dilakukan diperoleh hasil akurasi 101%, presisi
0,44%, linieritas dengan koefisien korelasi (r) 0,9941, batas deteksi dan batas kuantifikasi 15 ppm
dan 50 ppm. Hasil KLT menunjukkan noda bercak gelap dibawah sinar UV 254 nm dengan nilai Rf
sampel A=0,525; B=0,537; C=0,562 dan 0,687; D=0,625 dan 0,812; E=0,812 dan 0,937; nilai Rf
pembanding 0,562. Hasil uji kuantitatif 5 sampel positif mengandung asam retinoat dengan kadar
sampel A=0,2924% ± 0,002; sampel B=0,3585% ± 0,007; sampel C=0,3272% ± 0,003; sampel
D=0,2042% ± 0,001 dan sampel E=0,298% ± 0,045. Berdasarkan hasil tersebut maka kelima sampel
krim malam tidak memenuhi persyaratan BPOM karena dijual bebas tanpa resep dokter.
Kata Kunci: Asam Retinoat, KLT, Spektrofotometri UV-Vis

ABSTRAC
Retinoic acid is a dangerous bleaching agent that is prohibited from being used in whitening
creams because it can cause dry skin, burning sensation, skin cancer and is teratogenic. This study
aims to determine the content and levels of retinoic acid in samples of night cream circulating in
Tegal Regency. Qualitative analysis using Thin Layer Chromatography (TLC) with n-hexane :
acetone (7:3) mobile phase, and quantitative analysis using UV-Vis spectrophotometry. Based on
the validation carried out, the results obtained were accuracy of 102.5%, 100.3% and 100.9%,
precision of 0.44%, linearity with a correlation coefficient (r) of 0.9941, limits of detection and
quantification limits of 15 ppm and 50 ppm. TLC results showed dark blotches under 254 nm UV
light with an Rf value of sample A=0.525; B=0.537; C=0.562 and 0.687; D=0.625 and 0.812;
E=0.812 and 0.937; Rf value comparator 0.562. Quantitative test results for 5 positive samples
contained retinoic acid with sample A=0.2924% ± 0.002; sample B=0.3585% ± 0.007; sample
C=0.3272% ± 0.003; sample D=0.2042% ± 0.001 and sample E=0.298% ± 0.045. Based on these
results, the five night cream samples did not meet BPOM requirements because they were sold freely
without a doctor's prescription.
Keywords: Retinoic Acid, TLC, UV-Vis Spectrophotometry

PENDAHULUAN bibir, organ genital bagian luar atau gigi

Kosmetik merupakan sediaan yang (Fatmawati et al., 2021). Berbagai fungsi
dimaksudkan untuk digunakan pada tubuh kosmetik yaitu untuk membersihkan,
manusia bagian luar seperti rambut, kuku, mengubah penampilan, memperbaiki tubuh
dan memelihara kondisi yang baik
(Dwicahyani, Isrul & Noviyanti, 2019). Salah
satu produk kosmetik yang sering digunakan
yaitu sediaan krim.
Krim pemutih merupakan produk
kosmetik yang mengandung campuran bahan
kimia dan bahan lain untuk mencerahkan kulit
atau meringankan bintik hitam pada kulit
(Leswana & Sinaga, 2022). Krim pemutih
mengandung banyak zat-zat yang
membahayakan untuk kulit antara lain adalah
hidrokuinon, merkuri, pewarna rhodamin B
dan asam retinoat. Zat zat tersebut dilarang
ditambahkan dalam kosmetik oleh Peraturan
Menteri Kesehatan Republik Indonesia No.
455/MENKES/PER/V/1998. Zat kimia yang
paling umum ditambahkan dalam sediaan
krim yaitu asam retinoat yang diberi label
sebagai tretinoin pada kemasanya (Wardana,
Lestari & Aprilianti, 2022). Digunakan dalam
formulasi topikal yaitu dalam sediaan gel,
krim dan salep mengandung dosis asam
retinoat dengan konsentrasi 0,001-0,4%,
namun seringnya digunakan dosis 0,1%
(Afifah, Hadisubroto & Budiman, 2017).
Asam retinoat adalah zat asam dan
bentuk aktif dari retinol atau vitamin A
(Pradika, Djasfar & Christiani, 2022).
Menurut BPOM RI Tahun 2008
No.HK.05.42.1018, penggunaan asam
retinoat dalam kosmetik khususnya krim
pencerah dapat mengakibatkan kulit menjadi
kering dan terbakar, serta dapat menyebabkan
teratogenisitas dan kelainan janin, sehingga
dilarang penggunaannya dalam kosmetik
(Leswana & Sinaga, 2022).
Menurut penelitian yang dilakukan
Hadriyati, Hartesi & Fitri (2020) berdasarkan
pengamatan kasus bayi yang lahir dari wanita
yang menggunakan asam retinoat 0,05%
untuk mengobati jerawat wajah sebelum dan
selama kehamilan, kelainan bentuk langit-
langit, bibir sumbing, fusi blepharoplasty,
hipertermia dilaporkan menderita malformasi
wajah yang parah, hidrosefalus dan kecacatan.
Kasus yang berbeda adalah dialami oleh
perempuan yang mengonsumsi asam retinoat
dengan kadar sebesar 0,05% satu bulan
sebelum periode menstruasi terakhirnya serta
selama 11 minggu awal kehamilan. Bayi yang
terlahir dikabarkan mengalami cacat pada
telinga (Leswana & Sinaga, 2022).
Berdasarkan penelitian sebelumnya yang
dilakukan Suhartini, Fatimawali &
Citraningtyas (2013) tiga dari lima sampel
krim pencerah kulit yang beredar di pasar
Kota Manado dinyatakan positif mengandung
retinoic acid yang tidak memenuhi syarat
BPOM dengan kadar 0,016%-0,026%.
Sedangkan penelitian lain yang dilakukan
oleh Wardhani, Styawan & Mustofa (2019)
diperoleh hasil lima dari lima sampel krim
malam dari toko X Klaten dinyatakan positif
asam retinoat dengan kadar 0,014%-0,025%,
kadar tersebut telah melebihi batas yang
diperkenankan. Dalam penelitian Wardana,
Lestari & Aprilianti (2022) juga melaporkan
diperoleh hasil penelitian empat dari lima
sampel krim malam pencerah kulit di Kota
Malang dinyatakan positif asam retinoat
dengan kadar 0,060%-0,165%.
Mengetahui larangan BPOM akan
adanya asam retinoat dalam krim pemutih,
serta banyaknya asam retinoat yang
digunakan dalam krim pencerah yang
didistribusikan secara bebas di masyarakat,
sehingga penulis hendak melaksanakan
penelitian ini dengan tujuan untuk mendapati
kandungan dan kadar asam retinoat pada
sampel krim malam yang beredar bebas di
Kabupaten Tegal dengan metode
Spektrofotometri UV-Vis.
METODE PENELITIAN
Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian ini
adalah Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu
2450), kuvet, lampu UV 254 nm, timbangan
analitik (Ohaus), labu ukur (Pyrex),
erlenmeyer (Pyrex), gelas kimia (Pyrex),
corong (Pyrex), pipet volume, pipa kapiler,
batang pengaduk, pipet tetes.
Bahan
Bahan yang digunakan pada penelitian
ini adalah asam retinoat, metanol p.a (Smart-
Lab), n-heksan p.a (Merck), aseton p.a
(Merck), sampel krim malam, lempeng KLT
silika gel GF254, alumunium foil dan kertas
saring Whatman No. 41. Sampel yang
digunakan adalah krim malam yang terdapat
di Kabupaten Tegal. Sampel krim malam
berjumlah 5 sampel yaitu sampel A, B, C, D
dan E yang di ambil dari beberapa toko di
Kabupaten Tegal.
Prosedur Penelitian
Pengambilan Sampel Krim Malam
Sampel krim malam diambil dengan
menggunakan teknik purposive sampling,
yang merupakan pengambilan sampel
berdasarkan inferensi peneliti ataupun
kriteria-kriteria yang telah ditatapkan
(Komala & Nellyaningsih, 2017).
Pengambilan sampel dilakukan di beberapa
toko Kabupaten Tegal berdasarkan informasi
yang tidak lengkap atau informasi yang
seharusnya diberikan pada label wadah atau
kemasan, antara lain: Kode pabrikasi (nomor
batch), bulan ataupun tahun kadaluarsa serta
nomor izin edar. Setiap toko diambil sampel
lima merek meliputi Sampel A, B, C, D dan E.
Analisis Kualitatif dengan KLT
1. Pembuatan Larutan Fase Gerak
Fase gerak dibuat dari 10 mL
campuran n-heksana-aseton (7:3).
Larutan fase gerak kemudian
ditambahkan ke dalam chamber dan
disegel untuk menjenuhkan eluen
(Afifah, Hadisubroto & Budiman, 2017).
2. Pembuatan Larutan Uji
Sampel uji ditimbang sebanyak 3 g,
dimasukkan kedalam beaker glass,
dibungkus menggunakan aluminium foil.
Kemudian ditambahkan 10 mL metanol,
kocok agar larutan tercampur merata.
Selanjutnya dinginkan dalam es batu
dalam waktu 15 menit, kemudian saring
menggunakan kertas Whatman No.41.
Lalu larutan tersebut dipindahkan ke
dalam labu ukur 25 mL dan ditambahkan
metanol hingga batas miniskus
(Suhartini, Fatimawali & Citraningtyas,
2013).
3. Pembuatan Larutan Baku Asam Retinoat
Asam retinoat ditimbang sebanyak
0,01 g selanjutnya dimasukkan dalam
labu ukur 10 mL. Kemudian
ditambahkan kembali hingga batas
miniskus dengan larutan metanol
(Leswana & Sinaga, 2022).
4. Identifikasi Sampel dengan KLT
Plat KLT diaktifkan dengan
memanaskan dalam oven pada suhu
1050C selama 30 menit. Larutan baku
pembanding asam retinoat dan larutan uji
ditotolkan pada plat KLT menggunakan
white tips. Kemudian dimasukkan ke
dalam chamber yang sudah dijenuhkan
dengan larutan fase gerak. Selanjutnya
setelah fase gerak naik sampai batas
elusi, kemudian plat KLT diambil dan
keringkan. Plat KLT dilihat di bawah
sinar UV 254 nm. Noda menjadi
berpendar dan gelap bila teridentifikasi
mengandung asam retinoat (Leswana &
Sinaga, 2022).
Analisis Kuantitatif Asam Reinoat dengan
Spektrofotometri UV-Vis
1. Pembuatan Larutan Baku 500 ppm Asam
Retinoat
Asam retinoat ditimbang 0,0125 g,
kemudian dilarutkan dengan metanol
dalam labu ukur 25 mL dan kocok hingga
homogen (Leswana & Sinaga, 2022).
2. Penentuan Panjang Gelom*bang
Maksimum Asam Retinoat
Larutan asam retinoat 500 ppm
diambil sejumlah 0,3 mL dan
dimasukkan ke dalam labu ukur 5 mL
dengan konsentrasi 30 ppm. Selanjutnya
dilarutkan dengan metanol sampai batas
miniskus dan kocok agar tercampur
merata. Absorbansi maksimal diukur
pada panjang gelombang antara 200 dan
400 nm. Gunakan metanol sebagai
blanko (Wardana, Lestari & Aprilianti,
2022).
3. Penentuan linieritas kurva kalibrasi
Asam retinoat konsentrasi 500 ppm
dimasukkan ke dalam labu ukur 5 mL
yaitu 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1 dan 1,2 mL (20,
40, 60, 80, 100 dan 120 ppm).
Ditambahkan ke dalam labu ukur,
kemudian dilarutkan dengan metanol
sampai batas miniskus. Kocok sampai
larutan tercampur merata dan ukur
absorbansi pada panjang gelombang
 maksimal yang didapatkan dengan
metanol sebagai blanko (Wardana,
Lestari & Aprilianti, 2022).
4. Penetapan kadar sampel
Sampel uji ditimbang sebanyak 1 g,
dimasukkan dalam beaker glass,
dibungkus menggunakan alumunium
foil, ditambahkan 3 mL metanol dan
kocok agar larutan tercampur merata.
Selanjutnya larutan didinginkan dengan
menggunakan es batu selama 15 menit.
Kemudian disaring dengan kertas
Whatman No. 41. Filtrat hasil
penyaringan ditampung dalam labu ukur
25 mL dan dilarutkan dengan metanol
sampai batas miniskus dan kocok sampai
larutan tercampur merata. Absorbansi
diukur pada panjang gelombang
maksimal yang diperoleh (Suhartini,
Fatimawali & Citraningtyas, 2013).
Validasi Metode
1. Akurasi
Uji akurasi dilakukan dengan
menggunakan metode penambahan
standar dengan menambahkan larutan
asam retinoat 20 ppm, 60 ppm, dan 100
ppm ke dalam larutan sampel. Analit uji
ditempatkan dalam kuvet dan absorbansi
pada panjang gelombang maksimum
diukur menggunakan spektrofotometer
UV-Vis. Pengukuran serapan untuk tiga
konsentrasi (20 ppm, 60 ppm, dan 100
ppm) diulang sebanyak tiga kali (Triplo).
Nilai yang diperoleh dihitung sebagai
nilai recovery (%) (Irnawati, Handoyo &
Dewi, 2016).
2. Presisi
Uji presisi dilakukan dengan
menyiapkan larutan standar yang
mengandung asam retinoat 40 ppm.
Kemudian dapat mengukur absorbansi
pada panjang gelombang maksimum,
ulangi dengan 10 kali pengukuran, dan
tentukan nilai (SD) standar deviasi dan
(RSD) relative standard deviation dari
data yang diperoleh (Musiam & Alfian,
2017).
3. Linieritas
Uji linieritas didasarkan pada nilai
koefisien korelasi (r) dari persamaan
regresi linier. Data yang diperoleh diolah
dengan menggunakan metode kuadrat
terkecil untuk menentukan slope,
intercept dan koefisien korelasi (Saria &
Kuntari, 2019).
4. LOD & LOQ
LOD dan LOQ dihitung dengan cara
statistik menggunakan persamaan regresi
linier untuk kurva standar. Perhitungan
ini dilakukan dengan mensubstitusikan
absorbansi hasil dari larutan standar
pengukuran ke dalam persamaan regresi
linier yang didapatkan (Harmita, 2004).
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil Uji Organoleptis
Uji organoleptis bertujuan untuk
mengamati warna, bau dan tekstur pada
sediaan krim. Kriteria krim yang mengandung
asam retinoat yaitu berwarna kuning pucat
hingga kuning cerah, berbau asam dan
menyengat, tekstur lengket, dan terlihat
mengkilat (Leswana & Sinaga, 2022). Data
hasil uji organoleptis dari kelima sampel krim
malam dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Hasil Uji Organoleptis
Hasil Analisis Asam Retinoat dengan
Metode Kromatografi Lapis Tipis
Metode KLT dilakukan untuk
memisahkan senyawa pada suatu campuran.
Prinsip Kromatografi Lapis Tipis yaitu
pemisahan senyawa multi komponen dengan
menggunakan dua fase, yaitu fase diam dan
fase gerak (Oktaviantari, Feladita & Agustin
2019).
Pada metode Kromatografi Lapis Tipis,
plat KLT diaktifkan terlebih dahulu dengan
cara dipanaskan di dalam oven pada suhu
1050C selama 30 menit bertujuan untuk
mengurangi kadar air pada silika gel serta
untuk mengaktifkan gugus silanol dan
siloksan dari plat (Dewi et al., 2018), sehingga
pada proses elusi lempeng tersebut dapat
menyerap dan berikatan dengan sampel. Plat
dielusi di dalam chamber yang berisi fase
gerak, yaitu n-heksan : aseton dengan
perbandingan (7:3). Penggunaan fase gerak
berupa campuran dua pelarut organik ini
karena campuran dari kedua pelarut tersebut
mempunyai daya elusi yang mudah diatur
sehingga didapatkan pemisahan yang optimal.
Sedangkan fase diam yang digunakan berupa
silika gel GF 254 yang bersifat polar sehingga
sampel dan pembanding dapat dipisahkan
karena adanya kelarutan yang berbeda
(Pradika, Djasfar & Christiani, 2022).
Pemeriksaan dilakukan dengan cara
menotolkan sampel pada plat KLT kemudian
di elusi dengan menggunakan n-heksan :
aseton (7:3). Noda hasil KLT dilihat di bawah
penyinaran lampu UV 254. Suatu senyawa
yang mengandung asam retinoat yang diamati
dibawah penyinaran lampu UV akan
berfluorensi memberikan bercak gelap
(Afifah, Hadisubroto & Budiman, 2017).
Gambar 1. Kromatogram asam retinoat
Keterangan : (Kuning) bercak pembanding,
(merah) bercak sampel krim
malam, (a) sampel A, (b)
sampel (B), (c) sampel C, (d)
sampel D, (e) sampel E.
Data yang diperoleh berupa nilai Rf dan
bercak noda pada kromatogram sebagai hasil
dari elusi lempeng KLT yang akan
memberikan informasi mengenai senyawa
asam retinoat yang terkandung dalam sampel
krim malam. Pengamatan bercak dengan nilai
Rf yang diperoleh dengan cara membagi jarak
yang ditempuh zat terlarut dengan jarak yang
ditempuh pelarut. Hasil perhitungan nilai Rf
dapat dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Harga Rf dan Warna noda KLT
Sampel dikatakan positif (+) apabila
selisih nilai Rf dengan baku pembanding ≤
0,050 dan sampel dikatakan negatif (-) apabila
selisih nilai Rf dengan baku pembanding >
0,050 (Wardana, Lestari & Aprilianti, 2022).
Pada Tabel 2 menunjukkan hasil uji asam
retinoat pada plat KLT didapatkan nilai Rf
untuk baku pembanding asam retinoat dengan
nilai 0,562. Sampel A diperoleh nilai Rf 0,525;
sampel B diperoleh nilai Rf 0,537; sampel C
diperoleh nilai Rf 0,562 dan 0,687; sampel D
diperoleh nilai Rf 0,625 dan 0,812 dan sampel
E diperoleh nilai Rf 0,812 dan 0,937; Dari
hasil tersebut sampel A, B, C memiliki nilai Rf
≤ 0,050 maka dapat disimpulkan bahwa
sampel tersebut positif mengandung asam
retinoat. Sedangkan sampel D dan E memiliki
nilai Rf yang jauh berbeda dengan baku
pembanding > 0,050 yang artinya kedua
sampel tersebut negatif mengandung asam
retinoat.
Hasil Analisis Asam Retinoat dengan
Spektrofotometri UV-Vis
Dalam penentuan tahap awal dilakukan
pengukuran panjang gelombang maksimum,
dimana pengukuran dilakukan pada variasi
panjang gelombang 200-400 nm. Diperoleh
hasil penentuan panjang gelombang
maksimum dari larutan standar asam retinoat
sebesar 269,40 nm dengan nilai absorbansi
0,798. Pada penelitian yang dilakukan oleh
Wardhani, Styawan & Mustofa (2019)
diperoleh panjang gelombang maksimum 341
nm. Secara teoritis panjang gelombang
maksimum asam retinoat yaitu 352 nm.
Perbedaan panjang gelombang maksimum
antara teoritis dan penelitian ini dapat
disebabkan oleh pergeseran puncak serapan
ke panjang gelombang yang lebih kecil atau
sering disebut pergeseran hipsokromik
(Maharani, Mahmudin & Iqbal, 2018). Hasil
dari panjang gelombang maksimum
selanjutnya digunakan untuk pengukuran
serapan pada sampel.
Pada tahap kedua dilakukan pembuatan
kurva baku asam retinoat dengan larutan asam
retinoat pada konsentrasi 20, 40, 60, 80, 100
dan 120 ppm. Kurva dapat dilihat pada
Gambar 2.
Kurva Baku Asam Retinoat
0,8
Absorbansi
0,6
0,4
y = 0,004x + 0,1332
0,2 R² = 0,9941
0 Setiap sampel mendapatkan tiga kali
0 50 100 150
Konsentrasi
Gambar 2. Kurva Baku Asam Retinoat
Dari hasil kurva yang diperoleh pada
Gambar 2 menunjukkan bahwa nilai
absorbansi yang dihasilkan meningkat seiring
dengan peningkatan konsentrasi asam
retinoat. Berdasarkan kurva kalibrasi standar
asam retinoat didapatkan persamaan y =
0,004x + 0,1332 dengan nilai koefisien
korelasi yaitu 0,9941. Koefisien korelasi yang
dapat diterima yaitu apabila nilai (R2) ≥ 0.99
(Rahma, Sari & Nurfajriah, 2023). Sehingga
dapat disimpulkan bahwa hasil yang diperoleh
pada penelitian ini terdapat hubungan antara
konsentrasi dengan absorbansi dengan nilai
korelasi yang baik serta memenuhi
persyaratan.
Selanjutnya dilakukan pengukuran
absorbansi pada sampel. Preparasi dilakukan
dengan melarutkan sampel menggunakan
metanol. Penggunaan pelarut metanol
bertujuan untuk melarutkan asam retinoat
yang terdapat dalam basis krim. Selain itu
alasan digunakan metanol sebagai pelarut
karena metanol bersifat polar dan universal
sehingga dapat melarutkan analit yang bersifat
polar dan non polar dan senyawa asam
retinoat bersifat semi polar. Sehingga sesuai
dengan hukum like dissolve like yaitu
senyawa polar akan larut dalam pelarut polar
dan senyawa non polar akan larut dalam
pelarut non polar (Mariana et al., 2018).
Pendinginan untuk memisahkan fase basis
dengan fase asam retinoat-metanol (fase cair)
(Gabriela, Linden & Leswana, 2022).
Kemudian saring menggunakan kertas saring
Whatman No. 41. Penyaringan bertujuan
untuk menyaring adanya partikel-partikel
kecil yang ikut terbawa sehingga dapat
mempengaruhi proses pemisahan. Filtrat
ditampung dalam labu ukur 25 mL, kemudian
ditambahkan metanol sampai garis tanda dan
homogenkan. Larutan tersebut digunakan
sebagai larutan uji atau larutan sampel yang
kemudian diukur serapannya pada panjang
gelombang maksimum yang telah diperoleh
yaitu 269,40 nm.
perlakuan, hal ini bertujuan untuk
memperkecil kesalahan dalam perhitungan
karena jika mengukur hanya 2 kali, maka jika
terjadi penyimpangan dalam hasil dan
pengukuran ketiga dapat membantu
penentuan hasil akhir.
Hasil pada penetapan kadar dari seluruh
sampel yang telah diperiksa akan
menghasilkan data absorbansi. Kadar asam
retinoat dalam sampel dapat dihitung
menggunakan persamaan linier yang didapat
dari kurva kalibrasi yaitu y = 0,004x + 0,1332.
Kadar Asam Retinoat (%)
0,4
Kadar (%)
0,3
0,2
0,1
0
Sampel Sampel Sampel Sampel Sampel
A B C D E
Gambar 3. Kadar Asam Retinoat
 Tabel 4. Hasil Pengukuran Sampel memiliki efek sebagai zat teratogen yang
Kadar Kadar rata- dapat menyebabkan cacat pada janin
Sampel Abs Asam rata (%) ± (Wardana, Lestari & Aprilianti, 2022).
Retinoat SD
(%) Hasil Validasi Metode
0,598 0,2905 0,2924 ±
Validasi metode analisis merupakan
A 0,605 0,2947 0,002
suatu tindakan penilaian terhadap parameter
0,601 0,2922
tertentu, berdasarkan percobaan laboratorium,
0,694 0,3505 0,3585 ±
untuk membuktikan bahwa parameter tersebut
B 0,710 0,3605 0,007
memenuhi persyaratan untuk penggunaannya.
0,717 0,3647
Hasil Uji Validasi metode dapat dilihat pada
0,655 0,3260 0,3272 ± Tabel 5.
C 0,653 0,3247 0,003 Tabel 5. Hasil Uji Validasi Metode
0,663 0,3310
0,461 0,2048 0,2042 ± Kriteria Hasil Standar yang
D 0,458 0,2030 0,001 Validasi dipersyaratkan
0,462 0,2050
Akurasi 102,5%, 90-120%
0,542 0,2555 0,2981 ± 100,3%, (Anngela et al.,
E 0,603 0,2935 0,045 100,9% 2021)
0,686 0,3455 Presisi 0,44 % <1% (Sulistyani
et al., 2021).
Berdasarkan Tabel 4 diperoleh penetapan Linieritas 0,9941 >0,99 (Rahma et
kadar asam retinoat pada sediaan krim malam al., 2023)
dalam sampel A memiliki persentase sebesar
LOD 15 ppm -
0,2924% ± 0,002, persentase kadar sampel B LOQ 50 ppm -
sebesar 0,3585% ± 0,007, persentase kadar
sampel C sebesar 0,3272% ± 0,003, Linieritas
persentase kadar sampel D sebesar 0,2042% ± Berdasarkan Gambar 2 pada kalibrasi
0,001 dan persentase kadar sampel E sebesar standar asam retinoat didapatkan hasil linier
0,298% ± 0,045. Sehingga perolehan kadar antara konsentrasi dan absorbansi. Persamaan
asam retinoat dapat diurutkan: sampel B > C regresi linier yang diperoleh pada pengukuran
> E > A > D. absorbansi adalah y = 0,004x + 0,1332 dengan
Menurut BPOM RI (2011), bahwa nilai koefisien korelasi R2 = 0,9941.
rentang dosis asam retinoat yang dapat Koefisien korelasi dapat dikatakan sebagai
digunakan yaitu antara 0,001%-0,40% dengan persamaan regresi linier yang baik jika R2 ≥
pengawasan dokter. Menurut BPOM RI 0.99 (Rahma, Sari & Nurfajriah, 2023).
(2007), melalui Peraturan Menteri Kesehatan Berdasarkan persamaan regresi linier tersebut
RI No. 445/MENKES/PER/V/1998, asam koefisien korelasi yang dicapai dapat
retinoat termasuk zat kimia yang dilarang dikategorikan sebagai persamaan regresi
pada produk krim pemutih. Penggunaan asam linier yang baik dan memenuhi persyaratan.
retinoat hanya diperbolehkan apabila disertai
dengan resep dokter. Berdasarkan hasil LOD dan LOQ
penelitian tersebut, sampel sediaan krim Batas deteksi adalah jumlah terkecil
pemutih malam tidak aman digunakan karena analit dalam sampel yang dapat dideteksi yang
dijual secara bebas tanpa pengawasan dokter. masih memberikan respon signifikan,
Asam retinoat dapat menimbulkan risiko sedangkan batas kuantitasi merupakan
berbahaya bagi tubuh, diantaranya dapat parameter pada analisis sebagai jumlah
menimbulkan peradangan pada kulit seperti terkecil analit dalam sampel yang masih dapat
rasa terbakar, menyengat, kemerahan, eritema memenuhi kriteria cermat dan seksama
dan pengerasan kulit. Asam retinoat juga (Irnawati, Sahumena & Dewi, 2016). Batas
deteksi dan kuantitasi dihitung secara statistik Presisi
melalui garis linear yang dibentuk dari kurva
standar. Pada penelitian ini didapatkan batas Presisi diukur sebagai simpangan baku
deteksi sebesar 15 ppm serta batas kuantitasi atau simpangan baku relatif berdasarkan
sebesar 50 ppm. penelitian yang dilakukan terhadap replikasi
sampel yang diambil dari campuran yang
Akurasi homogen (Arikalang, Sudewi & Rorong,
2018).
Uji akurasi dilakukan untuk mengetahui Tabel 7. Hasil Uji Presisi
seberapa besar tingkat kesalahan pengukuran
yang dapat terjadi pada suatu alat ukur. Pada Kons Kadar Kadar %
penelitian ini uji akurasi dilakukan dengan (ppm) yang sebenarnya recovery
menggunakan metode spiking (metode diperoleh (ppm)
standar adisi). Pada metode spiking, dilakukan (ppm)
penambahan larutan standar asam retinoat 20 40 48,5 40 121
ppm, 60 ppm dan 100 ppm ditambahkan pada 40 47,7 40 119
sampel krim malam. Kemudian dibaca 40 47,7 40 119
absorbansi dengan spektrofotometer UV-Vis 40 47,5 40 118
pada panjang gelombang maksimum yang 40 48,5 40 121
telah diperoleh 269,40 nm dan dihitung % 40 47,7 40 119
recovery (Anngela, Muadifah & Nugraha, 40 48 40 120
2021). Hasil perhitungan % recovery dapat 40 47,7 40 119
dilihat pada tabel 6. 40 47,7 40 119
40 47,5 40 118
Tabel 6. Persen Recovery Standar Adisi Rata-rata 119,3
SD 0,00144
Kons Kadar Kadar %
%RSD 0,44
(ppm) yang sebenarnya recovery
diperoleh (ppm) Rata-
Pada Tabel 7 merupakan hasil uji presisi,
(ppm) rata
pengujian dilakukan dengan mengukur
19,7 20
absorbansi dari satu konsentrasi larutan
20 20,4 20 102,5
standar asam retinoat sebanyak sepuluh kali.
21,4 20
Nilai Relative Standar Deviasion (RSD) yang
57,4 60
diperoleh dalam penelitian ini yaitu 0,44 %.
60 59,9 60 100,3
RSD menunjukkan ketelitian dari metode uji
63,4 60
yaitu jika RSD ≤ 1% artinya sangat teliti, jika
99,2 100 1% < RSD ≤ 2% artinya teliti, jika 2% < RSD
100 99,9 100 100,9 ≤ 5% artinya ketelitian sedang dan jika RSD >
103,7 100 5% artinya tidak teliti (Sulistyani et al., 2021).
Berdasarkan Tabel 6 hasil rata-rata Analisis Data
perolehan kembali yang diperoleh adalah Dari hasil pengujian one way anova
102,5%, 100,3% dan 100,9%. Hasil perolehan menunjukkan nilai sig sebesar 0,01 < 0,05
kembali (recovery) dikatakan memenuhi sehingga dapat disimpulkan bahwa rata-rata
syarat apabila menunjukkan nilai persentase kelima kadar sampel tersebut berbeda secara
antara 90-120% (Anngela, Muadifah & signifikan.
Nugraha, 2021). Dapat disimpulkan bahwa
pada penelitian ini persen perolehan kembali
(recovery) yang diperoleh dapat diterima dan
memenuhi persyaratan.
KESIMPULAN Bandar Lampung With Thin Layer
Chromatography And Uv-Vis
Berdasarkan hasil analisis dari penelitian Spectrophotometry. Jurnal Analis
yang telah dilakukan, dapat disimpulkan Farmasi, 4(2), 91–97.
sebagai berikut. Fatmawati, S., Situmorang, A., Pitria, A. N.,
1. Sampel A, B, C, D dan E positif & Rosyidah, N. S. (2021). Analisis
mengandung asam retinoat. Timbal Pada Pensil Alis dan Perona
2. Kandungan asam retinoat sampel A Mata Lokal Yang Beredar di Toko
sebesar 0,2924% ± 0,002, sampel B Online Menggunakan Metode
0,3585% ± 0,007, sampel C 0,3272% ± Spektrofotometri Visible. Jurnal Unpad,
0,003, sampel D 0,2042% ± 0,001 dan 9(2), 50–57.
sampel E 0,298% ± 0,045. Gabriela, C. M., Linden, S., & Nurillahi
Febria Leswana. (2022). Analisis Kadar
DAFTAR PUSTAKA Asam Retinoat dalam Krim Pemutih di
Pasar Pagi Kota Samarinda dengan
Afifah, G. R. N. H., Hadisubroto, G., &
Spektrofotometri Uv-Visible. Jurnal
Budiman, S. (2017). Analisis Kualitatif
Farmasi Etam, 2(2), 158–166.
dan Kuantitatif Asam Retinoat Pada
Hadriyati, A., Hartesi, B., & Fitri, S. (2020).
Sediaan Krim Pemutih yang Beredar di
Analisis Asam Retinoat Pada Krim
Kota Bandung. Isbn: 978-602-73060-
Pemutih Malam Yang Beredar Di Klinik
11, 322–327.
Kecantikan Kota Jambi Pada Kecamatan
Anngela, O., Muadifah, A., & Nugraha, D. P.
Jelutung. Jurnal Media Farmasi, 17(1),
(2021). Validasi Metode Penetapan
1–12.
Kadar Boraks pada Kerupuk Puli
Haerani, A. (2017). Krim Pemutih dan
Menggunakan Spektrofotometer UV-
Penyimpanannya. Majalah Farmasetika,
Vis. Jurnal Sains Dan Kesehatan, 3(4),
2(2), 1–4.
375–381.
Harmita. (2004). Petunjuk Pelaksanaan
Arikalang, T. G., Sudewi, S., & Rorong, J. A.
Validasi Metode dan Cara
(2018). Optimasi Dan Validasi Metode
Perhitungannya. Majalah Ilmu
Analisis Dalam Penentuan Kandungan
Kefarmasian, I(3), 117–135.
Total Fenolik Pada Ekstrak Daun Gedi
Irnawati, Handoyo, S. M., & Nur, D. W. O.
Hijau (Abelmoschus Manihot L.) Yang
(2016). Analisis Hidrokuinon Pada Krim
Diukur Dengan Spektrofotometer Uv-
Pemutih Wajah Dengan Metode
Vis. Jurnal Pharmacon Lmiah Farmasi,
Spektrofotometri UV-Vis. Pharmacon
7(3), 14–21.
Jurnal Ilmiah Farmasi, 5(3), 229–237.
Dewi, Adnyani, Pratama, Yanti, Manibuy, &
Leswana, N. F., & Sinaga, C. R. (2022).
Warditiani. (2018). Pemisahan, Isolasi,
Identification Retinoic Acid Content in
dan Identifikasi Senyawa Saponin dari
Online Whitening Cream Sold in
Herba Pegagan ( Centella asiatica L.
Samarinda City Using Thin Layer
Urban). Jurnal Farmasi Udayana, 7(2),
Chromatography (TLC) and
68–76.
Spectrophotometry UV-Visible
Dwicahyani, U., Isrul, M., & Noviyanti, W. O.
Methods. Journal of Pharmaceutical
N. (2019). Formulasi Sediaan Lipstik
And Sciences, 5(2), 174–180.
Ekstrak Kulit Buah Ruruhi (Syzygium
Maharani, D., Mahmudin, L., & Iqbal. (2018).
policephalum Merr) Sebagai Pewarna.
Pengaruh Konsentrasi Zat Pereduksi
Jurnal Mandala Pharmacon Indonesia,
Trinatrium Sitrat
5(02), 91–103.
(Na3C6H5O7)Terhadap Sifat Optik
Eka Oktaviantari, D., Feladita, N., & Agustin,
Nanopartikel Perak. 17(2), 34–42.
R. (2019). Identification Of
Mariana, E., Cahyono, E., Rahayu, E. F., &
Hydrocuinones In Cleaning Bleaching
Nurcahyo, B. (2018). Validasi Metode
Soap Face At Three Beauty Clinics In
 Penetapan Kuantitatif Metanol dalam Kefarmasian Dan Gizi, 1(2), 58–68.
Urin Menggunakan Gas Wardhani, Y. K., Styawan, A. A., & Mustofa,
Chromatography-Flame Ionization C. H. (2019). Analisis Kandungan Asam
Detector. Indonesian Journal of Retinoat Pada Sediaan Krim Malam
Chemical Science, 7(3), 277–284. Yang Beredar Di Toko X Kota Klaten
Musiam, S., & Alfian, R. (2017). Validasi Dengan Spektrofotometri UV-Vis.
Metode Spektrofotometri Uv pada Jurnal Ilmu Farmasi, 10(2), 61–66.
Analisis Penetapan Kadar Asam
Mefenamat dalam Sediaan Tablet
Generik. Jurnal Ilmiah Ibnu Sina, 2(1),
31–43.
Neldawati, Ratnawulan, & Gusnedi. (2013).
Analisis Nilai Absorbansi dalam
Penentuan Kadar Flavonoid untuk
Berbagai Jenis Daun Tanaman Obat.
Pillar Of Physics, 2, 76–83.
Pradika, Y., Djasfar, S. P., & Christiani, T.
(2022). Analisis Asam Retinoat Pada
Krim Pemutih Yang Beredar Di E-
Commerce Kota Jakarta. Jurnal
MedLab, 1(2), 21–27.
Rahma, D. A., Sari, E. M., & Nurfajriah, S.
(2023). Identifikasi Kandungan Boraks
Pada Bakso Yang Beredar Di Pasar
Tradisional Kecamatan Tambun Selatan.
Journal of Research and Education
Chemistry (JREC), 5(1), 59–73.
Saria, A. I. N., & Kuntari. (2019). Penentuan
Kafein dan Parasetamol dalam Sediaan
Obat Sakit Kepala Secara Simultan
Menggunakan Spektrofotometer UV-
Vis. Ind. J. Chem. Anal, 02(01), 20–27.
Suhartini, S., Fatimawali, & Citraningtyas, G.
(2013). Analisis asam retinoat pada
kosmetik krim pemutih yang beredar di
pasaran kota manado. Pharmacon:
Jurnal Ilmiah Farmasi, 2(01), 1–8.
Sulistyani, M., Kusumastuti, E., Huda, N., &
Mukhayani, F. (2021). Indonesian
Journal of Chemical Science Method
Validation on Functional Groups
Analysis of Geopolymer with Polyvinyl
Chloride ( PVC ) as Additive Using
Fourier Transform Infrared ( FT-IR ).
Indonesian Journal of Chemical Science,
10(3), 199–205.
Wardana, F. Y., Lestari, Y. S., & Aprilianti,
R. G. (2022). Analisis Kadar Asam
Retinoat dalam Krim Pemutih Malam di
Kota Malang. Pharmademica: Jurnal