Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.
com
Lampiran F: Pedoman untukPersyaratan
Kinerja Metode Standar
Isi
Perkenalan padaPersyaratan Kinerja Metode Standar
Lampiran A: Format aPersyaratan Kinerja Metode
Standar
Lampiran B: Klasifikasi Metode
Lampiran C: Memahami Model POD
Lampiran D: Definisi dan Perhitungan Nilai HorRat dari
Data Intralaboratorium
Lampiran E: Tinjauan Akurasi Metode AOAC
Lampiran F: Pengembangan dan Penggunaan Bahan Referensi
In-House
Perkenalan pada
Persyaratan Kinerja Metode Standar
Persyaratan Kinerja Metode Standar(SMPR®) adalah konsep
unik dan baru untuk komunitas metode analisis. SMPR adalah
standar konsensus sukarela, yang dikembangkan oleh
pemangku kepentingan, yang menetapkan persyaratan kinerja
analitis minimum untuk kelas metode analitis. Di masa lalu,
metode analisis dievaluasi dan hasilnya dibandingkan dengan
metode “standar emas”, atau jika metode standar emas tidak
ada, maka peninjau akan memutuskan secara retrospektif
apakah kinerja analisis dapat diterima. Seringkali, pengembang
metode berkonsentrasi pada proses evaluasi parameter kinerja
suatu metode, dan jarang menetapkan kriteria penerimaan.
Namun, sebagaiPanduan Eurakhemmenunjukkan: " . . .
penilaian kesesuaian metode untuk tujuan penggunaan juga
sama pentingnya. . .” (1) untuk proses evaluasi.
Standar Konsensus Sukarela Internasional
SMPR adalah suatu bentuk standar konsensus internasional yang bersifat
sukarela. Standar adalah cara yang disepakati dan dapat diulang dalam
melakukan sesuatu yang dipublikasikan sebagai dokumen yang berisi
spesifikasi teknis atau kriteria tepat lainnya yang dirancang untuk digunakan
secara konsisten sebagai aturan, pedoman, atau definisi. SMPR adalah a
konsensusstandar yang dikembangkan oleh pemangku kepentingan dalam
proses yang sangat terkendali yang memastikan bahwa pengguna, organisasi
penelitian, departemen pemerintah, dan konsumen bekerja sama untuk
menciptakan standar yang memenuhi tuntutan komunitas analitis dan
teknologi. SMPR jugasukarelastandar. AOAC tidak bisa, dan tidak,
memaksakan penggunaan SMPR. Pengguna bebas menggunakan SMPR
sesuai keinginan mereka. AOAC sangat berhati-hati dalam mengikutsertakan
peserta dari sebanyak mungkin wilayah di dunia agar SMPR dapat diterima
internasionalstandar.
Panduan Persyaratan Kinerja Metode Standar
Umumnya dikenal sebagai “Pedoman SMPR.” Versi pertama Pedoman
SMPR dirancang pada tahun 2010 sebagai respons terhadap meningkatnya
penggunaan dan popularitas SMPR sebagai sarana untuk menggambarkan
persyaratan analitis suatu metode. Beberapa dokumen “kriteria
penerimaan” awal telah disiapkan untuk diterbitkan pada akhir tahun
1
2009, namun format dokumen kriteria penerimaan berbeda secara
signifikan satu sama lain dalam format dasar. AOAC menyadari bahwa
5 dokumen panduan diperlukan untuk mendorong keseragaman.
Versi awal Pedoman SMPR digunakan dalam sebuah proyek
11
untuk menentukan persyaratan analitis bagi pengganggu endokrin
12 dalam air minum. Pedoman tersebut terbukti sangat berguna dalam
memandu pekerjaan para ahli dan menghasilkan SMPR yang
seragam. Versi selanjutnya dari Pedoman SMPR digunakan dalam
13
proyek AOAC Stakeholder Panel on Infant Formula and Adult
15 Nutritionals (SPIFAN) dengan hasil yang sangat positif. Pedoman
SMPR diterbitkan diJurnal AOAC INTERNASIONALDan Metode
Analisis Resmi.
16
Pengguna pedoman ini disarankan bahwa mereka adalah: (1) Apanduan
dokumen, bukan undang-undang yang harus dipatuhi oleh pengguna; Dan (2)
dokumen “hidup” yang diperbarui secara berkala, sehingga pengguna harus
memeriksa situs web AOAC untuk versi terbaru sebelum menggunakan pedoman ini.
Pedoman SMPR dimaksudkan untuk memberikan informasi dasar
bagi kelompok kerja yang ditugaskan untuk mempersiapkan SMPR.
Pedoman tersebut terdiri dari format standar SMPR, diikuti dengan
serangkaian tabel informatif dan lampiran.
Format SMPR
Format umum untuk SMPR disediakan diLampiran A. Setiap
SMPR diidentifikasi dengan nomor SMPR unik yang terdiri
dari tahun diikuti dengan nomor identifikasi berurutan
(YYYY.XXX). Nomor SMPR diberikan ketika standar disetujui.
Berdasarkan konvensi, nomor SMPR menunjukkan tahun
disetujuinya suatu standar (bukan tahun dimulainya standar).
Misalnya, SMPR 2010.003 menunjukkan SMPR ketiga yang
diadopsi pada tahun 2010.
Nomor SMPR diikuti dengan nama metode yang harus
menyertakan analit, matriks, dan teknik analisis (kecuali SMPR
benar-benar dimaksudkan untuk tidak bergantung pada teknologi
analisis). Nama metode juga dapat merujuk pada nama
“umum” (misalnya, metode “Kjeldahl”).
Nomor SMPR dan nama metode diikuti dengan nama panel
pemangku kepentingan atau panel peninjau ahli yang menyetujui SMPR,
serta persetujuan dan tanggal berlakunya.
Informasi tentang persyaratan metode dirinci menjadi
sembilan kategori: (1) penggunaan yang dimaksudkan; (2)
penerapan; (3) teknik analisis; (4) definisi; (5) persyaratan kinerja
metode; (6) kesesuaian sistem; (7) bahan referensi; (8) panduan
validasi; Dan (9) waktu penentuan maksimum.
SMPR untuk metode kualitatif dan/atau identifikasi dapat
mencakup hingga tiga lampiran tambahan: (1) panel inklusivitas/
selektivitas; (2) panel eksklusivitas/reaktivitas silang; Dan (3) panel
bahan lingkungan. Lampiran ini tidak diperlukan.
Tabel yang informatif.—Pedoman SMPR berisi tujuh tabel
informatif yang mewakili pengetahuan hasil evaluasi metode
selama bertahun-tahun, dan dimaksudkan sebagai panduan
bagi kelompok kerja SMPR. Tabel informatif belum tentu AOAC
© 2016 AOAC INTERNASIONAL
Gpedoman untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan
Lampiran F, hal. 2
kebijakan. Kelompok kerja SMPR diharapkan dapat menerapkan keahliannya
dalam pengembangan SMPR.
TabelA1: Persyaratan Kinerja. Memberikan parameter kinerja
yang direkomendasikan untuk dimasukkan ke dalam SMPR. Tabel
A1 disusun berdasarkan lima klasifikasi metode: (1) komponen
utama metode kuantitatif; (2) metode kuantitatif penelusuran atau
kontaminan; (3) komponen utama metode kualitatif; (4) metode
kuantitatif penelusuran atau kontaminan; Dan (5) metode
identifikasi. Tabel ini dirancang untuk mengakomodasi metode
mikrobiologi dan kimia. Istilah mikrobiologi/kimia alternatif
disediakan untuk konsep yang setara.
Tabel A2: Definisi yang Direkomendasikan. Memberikan
definisi istilah standar dalam Pedoman SMPR. AOAC
bergantung pada Kosakata Internasional Metrologi Konsep
Dasar dan Umum serta Istilah Terkait(VIM) dan Organisasi
Internasional untuk Standadisasi (ISO) untuk definisi istilah yang
tidak termasuk dalam Tabel A2.
Tabel A3: Rekomendasi untuk Evaluasi. Memberikan
panduan umum untuk evaluasi parameter kinerja. Panduan
evaluasi lebih rinci dapat ditemukan diLampiran D, Pedoman
Prosedur Studi Kolaboratif untuk Memvalidasi Karakteristik
Suatu Metode Analisis(2);Lampiran I, Pedoman Validasi Metode
dan/atau Prosedur Agen Ancaman Hayati(3); Lampiran K,
Pedoman AOAC untuk Validasi Laboratorium Tunggal Metode
Kimia untuk Suplemen Makanan dan Tumbuhan(4); Manual
Prosedur Codex Alimentarius Codex (5); dan Standar ISO
5725-1-1994 (6).
Tabel A4: Presisi yang Diharapkan (Pengulangan) sebagai
Fungsi Konsentrasi Analit. Ketepatan suatu metode adalah
kedekatan hasil pengujian independen yang diperoleh dalam
kondisi yang ditentukan. Presisi biasanya dinyatakan dalam istilah
Gambar 1. Diagram alir skema proses pengembangan SMPR.
© 2016 AOAC INTERNASIONAL
AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016)
ketidaktepatan dan dihitung sebagai deviasi standar relatif (RSD)
dari hasil pengujian. Ketidaktepatan suatu metode meningkat
seiring dengan menurunnya konsentrasi analit. Tabel ini
memberikan RSD target untuk berbagai konsentrasi analit.
Tabel A5: Pemulihan yang Diharapkan sebagai Fungsi Konsentrasi
Analit. Pemulihan didefinisikan sebagai rasio hasil tes rata-rata yang
diamati dengan nilai sebenarnya. Kisaran perolehan rata-rata yang dapat
diterima meluas seiring dengan menurunnya konsentrasi analit. Tabel ini
memberikan rentang perolehan rata-rata target untuk konsentrasi analit
dari 1 ppb hingga 100%.
Tabel A6: Prediksi Deviasi Standar Relatif
Reproduksibilitas (PRSD).
R
Tabel ini memberikan PRSD yang
dihitung
R
menggunakan rumus Horwitz:
PRSD R= 2C–0,15
di mana C dinyatakan sebagai fraksi massa.
Tabel A7: POD dan Jumlah Bagian Pengujian. Tabel ini memberikan
perhitungan probabilitas deteksi (POD) untuk ukuran sampel dan kejadian
(deteksi) tertentu. Pengembang metode dapat menggunakan tabel ini untuk
menentukan jumlah analisis yang diperlukan untuk mendapatkan POD
tertentu.
Lampiran informatif.—Pedoman SMPR berisi lampiran informatif
tentang topik klasifikasi metode, model POD, nilai HorRat, bahan
referensi, serta akurasi dan tinjauan metode. Seperti halnya tabel
informatif, lampiran ini dimaksudkan untuk memberikan panduan
dan informasi kepada kelompok kerja.
Inisiasi SMPR
MelihatGambar 1 untuk diagram alur skema proses
pengembangan SMPR.
AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016) Gpedoman
Panel penasehat.—Paling umum, SMPR dibuat sebagai respons terhadap
kebutuhan analitis yang diidentifikasi oleh panel penasihat. Panel penasehat
biasanya terdiri dari sponsor dan pemangku kepentingan utama yang telah
terorganisir untuk mengatasi permasalahan analitis. Biasanya, panel
penasehat mengidentifikasi masalah analitis umum, seperti kebutuhan untuk
memperbarui metode analisis untuk penentuan nutrisi dalam susu formula
bayi. Sebuah panel penasihat, dengan masukan dari para ahli di bidangnya,
juga memprioritaskan masalah analitis spesifik dalam topik umum. Panel ini
sangat penting dalam perencanaan pertemuan panel pemangku kepentingan.
Panel pemangku kepentingan.—Setelah panel penasehat
mengidentifikasi masalah analitis umum, AOAC mengumumkan
kegiatan pengembangan standar, mengidentifikasi pemangku
kepentingan, dan mengatur panel pemangku kepentingan.
Keanggotaan dalam panel pemangku kepentingan terbuka bagi
siapa saja yang terkena dampak signifikan oleh standar yang
diusulkan. AOAC merekrut ilmuwan untuk berpartisipasi dalam
panel pemangku kepentingan berdasarkan keahlian mereka
dengan masalah analitis yang diidentifikasi oleh panel
penasihat. Para ahli direkrut dari akademisi, pemerintah,
organisasi non-pemerintah (seperti ISO), industri, organisasi
penelitian kontrak, pengembang metode, dan produsen
instrumen/peralatan. AOAC menggunakan model panel
pemungutan suara yang representatif untuk memastikan
keseimbangan dalam perspektif pemangku kepentingan, dan
untuk memastikan bahwa tidak ada perspektif pemangku
kepentingan tertentu yang mendominasi proses panel
pemangku kepentingan.
Panel pemangku kepentingan sangatlah penting karena memiliki beberapa
fungsi: (1) mengidentifikasi topik analitis spesifik dalam kerangka masalah
analitis umum yang dijelaskan oleh panel penasihat; (2) membentuk kelompok
kerja untuk membahas topik analitis tertentu; (3) mengidentifikasi ahli
tambahan yang diperlukan untuk kelompok kerja; (4) melakukan pengawasan
terhadap pembangunan SMPR; Dan (5) secara formal mengadopsi SMPR yang
awalnya dirancang oleh kelompok kerja.
Kelompok kerja.—Kelompok kerja dibentuk oleh panel pemangku
kepentingan ketika topik analitis tertentu telah diidentifikasi. Tujuan
utama dari kelompok kerja adalah untuk menyusun SMPR. Kelompok
kerja juga dapat dibentuk untuk membuat rekomendasi umum, seperti
mengembangkan definisi umum yang akan digunakan oleh beberapa
kelompok kerja. Misalnya, SPIFAN membentuk kelompok kerja untuk
membuat definisi “susu formula bayi” yang dapat dibagikan dan
digunakan oleh seluruh kelompok kerja SPIFAN.
Proses penyusunan SMPR biasanya memerlukan waktu beberapa bulan,
serta beberapa kali pertemuan dan conference call. SMPR yang dirancang oleh
kelompok kerja dipresentasikan kepada panel pemangku kepentingan. Panel
pemangku kepentingan dapat merevisi, mengubah, atau mengadopsi usulan
SMPR atas nama AOAC.
Pernyataan Kebugaran-untuk-Tujuan dan Panggilan untuk Metode
Salah satu langkah pertama dalam mengorganisir sebuah proyek adalah
membuat pernyataan kesesuaian untuk tujuan. Di AOAC, pernyataan kesesuaian
untuk tujuan adalah gambaran umum tentang metode yang dibutuhkan. Merupakan
tanggung jawab ketua kelompok kerja untuk menyusun pernyataan kesesuaian
untuk tujuan tersebut. Ketua kelompok kerja juga diminta menyiapkan presentasi
dengan informasi latar belakang tentang analit, matriks, dan sifat masalah analitis.
Ketua kelompok kerja menyajikan informasi latar belakang dan mengusulkan
rancangan pernyataan kesesuaian untuk tujuan kepada panel pemangku
kepentingan yang memimpin. Panel pemangku kepentingan diminta untuk
mendukung pernyataan kesesuaian untuk tujuan tersebut.
untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan
Lampiran F, hal. 3
OMS AOAC menyiapkan seruan untuk metode berdasarkan pernyataan
kesesuaian untuk tujuan yang disetujui panel pemangku kepentingan. Panggilan
untuk metode ini diposting di situs web AOAC dan/atau dikirim melalui email ke
keanggotaan AOAC dan pihak-pihak lain yang berkepentingan. Staf AOAC
mengumpulkan dan mengkompilasi kandidat metode yang diajukan sebagai
tanggapan atas permintaan metode. OMS meninjau dan mengkategorikan metode-
metode tersebut.
Membuat SMPR
Memulai proses pengembangan SMPR bisa menjadi tantangan yang berat.
Faktanya, merancang SMPR seharusnya menjadi tantangan yang berat karena
panel penasehat telah secara spesifik mengidentifikasi masalah analitis yang
belum terselesaikan. Menyelesaikan SMPR bisa menjadi pengalaman yang
sangat berharga karena anggota kelompok kerja telah bekerja dengan rekan-
rekan mereka melalui berbagai permasalahan dan mencapai konsensus yang
sebelumnya hanya ada pertanyaan.
Disarankan untuk menyediakan beberapa kandidat metode yang
representatif sebagai referensi ketika kelompok kerja mulai
mengembangkan SMPR. Metode-metode ini mungkin telah diserahkan
sebagai tanggapan atas permintaan metode, atau mungkin diketahui
oleh anggota kelompok kerja. Dalam hal apapun, apapun asal muasal
metode tersebut, metode kandidat dapat membantu anggota kelompok
kerja untuk menentukan persyaratan kinerja yang masuk akal untuk
ditentukan dalam SMPR. Kemampuan kinerja metodologi analitis yang
ada merupakan pertanyaan umum yang dihadapi kelompok kerja.
Biasanya, ketua kerja dan/atau CSO AOAC menyiapkan
rancangan SMPR. Rancangan SMPR sangat memudahkan proses
dan menyediakan struktur bagi kelompok kerja untuk bekerja.
Anggota kelompok kerja disarankan untuk terlebih dahulu
mempertimbangkan bagian “tujuan penggunaan” dan “waktu maksimum
hingga penentuan” karena hal ini akan sangat mempengaruhi ekspektasi
terhadap metode kandidat. Misalnya, metode yang digunakan untuk
surveilans mungkin harus cepat namun tidak memerlukan ketelitian yang
tinggi, dan hasil positif palsu mungkin lebih dapat ditoleransi. Meskipun
metode yang digunakan dalam penyelesaian sengketa memerlukan akurasi,
presisi, dan reproduktifitas yang lebih baik, namun waktu untuk
menentukannya tidak terlalu penting.
Setelah kelompok kerja menyepakati tujuan penggunaan
metode kandidat, maka kelompok kerja dapat mulai
menentukan penerapan metode kandidat. Bagian
penerapan SMPR adalah salah satu bagian SMPR yang
paling penting, dan terkadang paling sulit. Analit dan
matriks harus diidentifikasi secara eksplisit. Untuk analit
kimia, nomenklatur Persatuan Internasional Kimia Murni
dan Terapan (IUPAC) dan/atau nomor registrasi Layanan
Abstrak Kimia (CAS) harus dicantumkan. Matriks harus
diidentifikasi dengan jelas termasuk bentuk matriks seperti
mentah, matang, tablet, bubuk, dll. Sifat matriks dapat
mempengaruhi analit spesifik. Mungkin bermanfaat untuk
mengidentifikasi dan mendeskripsikan matriks secara
lengkap sebelum menentukan analit spesifik.
Tabel 1. Contoh tabel kinerja metode untuk analit tunggal
Rentang analitis 7,0–382,6 g/mL
Batas kuantisasi (LOQ) ≤7,0 g/mL
Pengulangan (RSD) R <10 g/mL ≤8%
≥10 μg/mL ≤6%
© 2016 AOAC INTERNASIONAL
Gpedoman untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016)
Lampiran F, hal. 4

Tabel 2. Contoh tabel kinerja metode untuk beberapa analit

Analit 1 Analit 2 Analit 3
Rentang analitis 10–20 g/mL 100–200 g/mL 200–500 g/mL
Batas kuantisasi (LOQ) ≤10 μg/mL ≤100 μg/mL ≤200 μg/mL
Pengulangan (RSD) R <10 g/mL ≤8% <10 g/mL ≤8% <200 g/mL ≤10%
≥10 μg/mL ≤6% ≥10 μg/mL ≤6% ≥200 μg/mL ≤8%

Untuk proyek dengan banyak analit, misalnya vitamin A, D, Kesimpulan

E, dan K dalam susu formula bayi, mungkin berguna untuk membentuk
kelompok kerja terpisah untuk mendeskripsikan matriks secara lengkap
sehingga deskripsi umum matriks dapat diterapkan pada semua analit.
Untuk SMPR analit tunggal, yang paling umum adalah mengatur
persyaratan kinerja metode ke dalam tabel dengan 2-3 kolom seperti
diilustrasikan pada Tabel 1. Untuk SMPR analit ganda, seringkali lebih mudah
untuk menyajikan persyaratan dalam tabel yang diperluas dengan analit
membentuk tambahan kolom seperti yang diilustrasikan pada Tabel 2.
Setelah tujuan penggunaan, teknik analisis, dan persyaratan
kinerja metode telah ditentukan, maka kelompok kerja dapat
melanjutkan untuk mempertimbangkan parameter pengendalian
mutu, seperti persyaratan validasi minimum, prosedur kesesuaian
sistem, dan bahan referensi (jika tersedia). Tidak jarang bahan
referensi yang sesuai tidak tersedia. Lampiran FPedoman SMPR
memberikan panduan komprehensif untuk pengembangan dan
penggunaan bahan referensi internal.
Sebagian besar kelompok kerja mampu menyiapkan SMPR konsensus dalam
waktu sekitar 3 bulan.
Periode Komentar Terbuka
Setelah kelompok kerja menghasilkan rancangan standar, AOAC membuka periode
komentar untuk standar tersebut. Periode komentar memberikan kesempatan bagi
pemangku kepentingan lainnya untuk menyampaikan pandangan mereka terhadap
rancangan SMPR. Seluruh komentar yang dikumpulkan akan ditinjau oleh CSO AOAC dan
ketua kelompok kerja, dan komentar-komentar tersebut direkonsiliasi. Jika ada perubahan
signifikan yang diperlukan terhadap rancangan standar sebagai hasil dari komentar-
komentar tersebut, kelompok kerja akan berkumpul untuk berdiskusi dan permasalahan apa
pun yang belum terselesaikan akan dipresentasikan untuk didiskusikan pada pertemuan
panel pemangku kepentingan.
Penyerahan Draf SMPR ke Panel Pemangku Kepentingan
Panel pemangku kepentingan bertemu beberapa kali dalam setahun di berbagai
lokasi. Ketua kelompok kerja (atau yang ditunjuk) menyajikan rancangan SMPR
kepada panel pemangku kepentingan untuk ditinjau dan didiskusikan. Ketua
kelompok kerja diharapkan mampu menjelaskan kesimpulan kelompok kerja,
mendiskusikan komentar yang diterima, dan menjawab pertanyaan dari panel
pemangku kepentingan. Anggota panel pemangku kepentingan dapat merevisi,
mengubah, menyetujui, atau menunda keputusan mengenai usulan SMPR. Mayoritas
super dari 2/3 atau lebih dari mereka yang memberikan suara diperlukan untuk
mengadopsi SMPR sebagai standar konsensus sukarela AOAC.
SMPR adalah konsep unik dan baru untuk komunitas metode analisis.
SMPR adalah standar konsensus sukarela yang dikembangkan oleh pemangku
kepentingan yang menentukan persyaratan kinerja analitis minimum untuk
kelas metode analitis. Pedoman SMPR menyediakan struktur yang dapat
digunakan oleh kelompok kerja ketika mereka mengembangkan SMPR.
Pedoman ini telah diterapkan di beberapa proyek AOAC dan telah terbukti
sangat berguna. Pedoman ini bukanlah sebuah undang-undang yang harus
dipatuhi oleh pengguna; ini adalah dokumen “hidup” yang diperbarui secara
berkala, sehingga pengguna harus memeriksa situs web AOAC untuk versi
terbaru sebelum menggunakan pedoman ini.
Referensi
(1) Eurakhem,Kesesuaian Tujuan Metode Analisis: Panduan
Laboratorium untuk Validasi Metode dan Terkait
Topik, Validasi, http://www.eurachem.org/guides/pdf/
valid.pdf, diposting Desember 1998, diakses Maret 2012
(2)Pedoman Prosedur Studi Kolaboratif untuk Memvalidasi
Karakteristik Suatu Metode Analisis(2012) Metode
Analisis Resmi, Lampiran D, AOAC INTERNASIONAL,
Gaithersburg, MD
(3)Pedoman Komite Metode INTERNASIONAL AOAC untuk
Validasi Metode dan/atau Prosedur Agen Ancaman
Hayati(2012)Metode Analisis Resmi,Edisi ke-19,
Lampiran I, Perhitungan Nilai CPOD dan dCPOD dari
Data Studi Kolaboratif Metode Kualitatif, AOAC
INTERNASIONAL, Gaithersburg, MD
(4)Pedoman AOAC untuk Validasi Laboratorium Tunggal
Metode Kimia untuk Suplemen Makanan dan Tumbuhan
(2012)Metode Analisis Resmi, Edisi ke-19,Lampiran K,
AOAC INTERNASIONAL, Gaithersburg, MD
(5) Pedoman Prosedur Codex Alimentarius Codex
(6) Organisasi Internasional untuk Standardisasi,
Jenewa, Swiss

Publikasi

SMPR yang diadopsi disiapkan untuk dipublikasikan oleh staf AOAC,

dan dipublikasikan diJurnal AOAC INTERNASIONALdan di AOACMetode
Analisis ResmiSMringkasan. Seringkali, OMS AOAC dan ketua kelompok
kerja menyiapkan artikel pendamping untuk memperkenalkan SMPR dan
menjelaskan permasalahan analitis yang dipertimbangkan dan
diselesaikan oleh SMPR. SMPR biasanya diterbitkan dalam waktu 6 bulan
setelah diadopsi.

© 2016 AOAC INTERNASIONAL

AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016)
LAMPIRAN A
Format a
Persyaratan Kinerja Metode Standar
AOAC SMPR® YYYY.XXX
(YYYY = Tahun; XXX = nomor identifikasi urut)
Nama Metode: Harus menyertakan analit, matriks, dan teknik analisis
[kecualiPersyaratan Kinerja Metode Standar(SMPR®) benar-benar
dimaksudkan untuk tidak bergantung pada teknologi analitik]. Nama
metode dapat mengacu pada nama “umum” (misalnya, metode
“Kjeldahl”).
Disetujui oleh:Nama panel pemangku kepentingan atau panel peninjau ahli
Tanggal Versi Akhir: Tanggal
Tanggal berlaku:Tanggal
1. Tujuan Penggunaan:Informasi tambahan tentang metode dan
ketentuan penggunaan.
2. Penerapan:Daftar matriks jika lebih dari satu. Berikan
rincian tentang matriks seperti spesies spesifik untuk analit
biologi, atau nomenklatur Persatuan Kimia Murni dan Terapan
Internasional (IUPAC) dan nomor registrasi Layanan Abstrak
Kimia (CAS) untuk analit kimia. Tentukan bentuk matriks seperti
mentah, matang, tablet, bubuk, dll.
3. Teknik Analisis:Memberikan penjelasan rinci mengenai teknik
analisis jika SMPR akan diterapkan pada teknik analisis tertentu;
atau nyatakan bahwa SMPR berlaku untuk metode apa pun yang
memenuhi persyaratan kinerja metode.
4. Definisi:Daftar dan tentukan istilah yang digunakan dalam tabel
parameter kinerja (melihatTabel A2 untuk daftar istilah standar).
Gpedoman untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan
Lampiran F, hal. 5
5. Persyaratan Kinerja Metode:Buat daftar parameter
kinerja dan kriteria penerimaan yang sesuai untuk setiap
metode/analit/matriks.MelihatTabel A1 untuk persyaratan
kinerja yang sesuai.
Jika lebih dari satu analit/matriks, dan jika kriteria penerimaan berbeda
untuk kombinasi analit/matriks, maka susunlah tabel yang mencantumkan
setiap kombinasi analit/matriks dan kriteria penerimaan minimumnya untuk
setiap kriteria kinerja.
6. Uji Kesesuaian Sistem dan/atau Pengendalian Mutu
Analitik:Jelaskan kontrol sistem minimum dan prosedur QC.
7. Bahan Referensi:Identifikasi bahan referensi yang sesuai jika
ada, atau nyatakan bahwa bahan referensi tidak tersedia. Mengacu
padaLampiran E(Tinjauan Akurasi Metode AOAC) untuk petunjuk
penggunaan bahan referensi dalam evaluasi.
8. Panduan Validasi:Rekomendasi untuk jenis program
evaluasi atau validasi seperti validasi laboratorium tunggal
(SLV),Metode Analisis ResmiSM(OMA), atau Metode yang Diuji
KinerjaSM(PTM).
9. Waktu Penentuan Maksimum:Waktu maksimum yang
diperbolehkan untuk menyelesaikan suatu analisis mulai dari persiapan
bagian pengujian hingga penentuan atau pengukuran akhir.
Lampiran I: Panel Inklusivitas/Selektivitas. Direkomendasikan
untuk metode kualitatif dan identifikasi SMPR.
Lampiran II: Panel Eksklusivitas/Reaktivitas Silang.
Direkomendasikan untuk metode kualitatif dan identifikasi SMPR.
Lampiran III: Panel Bahan Lingkungan. Direkomendasikan
untuk metode kualitatif dan identifikasi SMPR.
© 2016 AOAC INTERNASIONAL
Gpedoman untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016)
Lampiran F, hal. 6

Tabel A1. Persyaratan kinerja

Klasifikasi metodeA
Metode kuantitatif Metode kualitatif
Komponen utamaB Jejak atau kontaminanC Komponen utamaB Jejak atau kontaminanC Metode identifikasi
Parameter
Validasi laboratorium tunggal

Kisaran yang berlaku Kisaran yang berlaku Inklusivitas/selektivitas Inklusivitas/selektivitas Inklusivitas/selektivitas

BiasD BiasD Eksklusivitas/reaktivitas silang Eksklusivitas/reaktivitas silang Eksklusivitas/reaktivitas silang

Presisi Presisi Gangguan lingkungan Gangguan lingkungan Gangguan lingkungan

Pemulihan Pemulihan Varians laboratorium Varians laboratorium

Batas kuantisasi (LOQ) LOQ

Probabilitas deteksi POD di AMDLF Probabilitas identifikasi

(POD)e (POI)
Reproduksibilitas

RSD atau
R
target RSD atau
R
target POD (0) POD (0) POI (c)
pengukuran pengukuran
ketakpastian ketakpastian POD (c) POD (c)

POD LaboratoriumG POD LaboratoriumG POI Laboratorium

A
Lihat Lampiran Buntuk informasi tambahan tentang klasifikasi metode.
B
≥100g/kg.
C
<100 gram/kg.

D
Jika bahan referensi tersedia.
e
Pada tingkat kritis.

F
AMDL = Tingkat deteksi minimum yang dapat diterima.

G
LPOD = CPOD.

© 2016 AOAC INTERNASIONAL

AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016) Gpedoman untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan
Lampiran F, hal. 7

Tabel A2. Definisi yang direkomendasikan

Bias Perbedaan antara ekspektasi hasil tes dan nilai referensi yang diterima. Bias adalah kesalahan
sistematik total, berbeda dengan kesalahan acak. Mungkin ada satu atau lebih komponen kesalahan
sistematis yang berkontribusi terhadap bias.
Gangguan lingkungan Kemampuanpengujian untuk mendeteksi organisme target dengan adanya zat lingkungan dan
bebas dari reaksi silang dari zat lingkungan.
Eksklusivitas Strain atau isolat atau varian dari agen target yang tidak boleh dideteksi oleh metode ini.

Inklusivitas Strain atau isolat atau varian dari agen target yang dapat dideteksi oleh metode ini.
Probabilitas deteksi laboratorium (POD) Respon fraksional keseluruhan (rata-rata POD = CPOD) untuk metode ini dihitung dari gabungan
respons
J
POD dari masing-masing laboratorium (J=1, 2, ...,L).ALihat Lampiran C.
Batas kuantisasi (LOQ) Konsentrasi minimum atau massa analit dalam matriks tertentu yang dapat dilaporkan sebagai
hasil kuantitatif.

POD (0) Probabilitas metode memberikan respon (+) padahal sampel benar-benar tanpa analit.
POD (c) Probabilitas metode memberikan respon (–) padahal sampel benar-benar tanpa analit.
Proporsi hasil analisis positif untuk metode kualitatif untuk matriks tertentu pada tingkat atau konsentrasi
POLONG
analit tertentu. BerkonsultasiLampiran Cuntuk penjelasan lengkap.

Probabilitas identifikasi (POI) Fraksi yang diharapkan atau diamati dari bagian pengujian pada konsentrasi tertentu yang
memberikan hasil positif bila diuji pada konsentrasi tertentu. BerkonsultasiProbabilitas Identifikasi
(POI): Model Statistik untuk Validasi Metode Identifikasi Botani Kualitatif.C
Presisi Kedekatan kesepakatan antara hasil uji independen yang diperoleh dengan syarat
yang ditentukan. Ukuran presisi biasanya dinyatakan dalam ketidaktepatan dan
dihitung sebagai deviasi standar hasil pengujian.D
Pemulihan Fraksi atau persentase analit yang diperoleh kembali ketika sampel uji dianalisis menggunakan
metode keseluruhan. Adadua jenis pemulihan: (1) Perolehan total berdasarkan perolehan bahan asli
ditambah analit tambahan, dan (2) perolehan marjinal hanya berdasarkan analit yang ditambahkan
(analit asli dikurangi pembilang dan penyebutnya).e

Pengulangan Presisi dalam kondisi pengulangan.

Kondisi pengulangan Kondisi dimana diperoleh hasil pengujian mandiri dengan metode yang sama pada benda uji yang identik dalam
laboratorium yang sama oleh operator yang sama dengan menggunakan peralatan yang sama dalam selang waktu
yang singkat.

Reproduksibilitas Presisi dalam kondisi reproduktifitas.

Kondisi reproduksibilitas Kondisi dimana diperoleh hasil pengujian mandiri dengan metode yang sama pada benda uji yang identik di
laboratorium yang berbeda dengan operator yang berbeda dan menggunakan peralatan yang berbeda.

Deviasi standar relatif (RSD) RSD = s ×Saya

100/x

Deviasi standar Saya

s Saya
= [Σ(x –Saya
x)2/N]0,5
A
Pedoman Komite Metode INTERNASIONAL AOAC untuk Validasi Metode dan/atau Prosedur Agen Ancaman Hayati(Perhitungan Nilai CPOD dan dCPOD dari
Data Studi Kolaboratif Metode Kualitatif),J.AOAC Int.94, 1359(2011) danMetode Resmi Analisis AOAC INTERNATIONAL (edisi saat ini),Lampiran I.

B
Kosakata Metrologi Internasional (VIM)—Konsep Dasar dan Umum serta Istilah Terkait(2008) JCGM 200:2008, Komite Bersama untuk Panduan Metrologi (JCGM),
www.bipm.org.
C
LaBudde, RA, & Harnly, JM (2012)J.AOAC Int.95, 273–285.
D
ISO 5725-1-1994.
e
Metode Analisis Resmi(edisi saat ini)Lampiran D(Pedoman Prosedur Studi Kolaboratif untuk Memvalidasi Karakteristik Suatu Metode Analisis), AOAC
INTERNASIONAL, Rockville, MD, AS.

© 2016 AOAC INTERNASIONAL

Gpedoman untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016)
Lampiran F, hal. 8

Tabel A3. Rekomendasi untuk evaluasi

Bias (jika bahan referensi tersedia) Minimal lima analisis ulangan dari Bahan Referensi Bersertifikat.A
Gangguan lingkungan Analisis bagian uji yang mengandung konsentrasi tertentu dari satu anggota panel bahan lingkungan. Bahan-
bahan dapat dikumpulkan. Konsultasikan dengan ahli statistik AOAC.

Eksklusivitas/reaktivitas silang Analisis satu bagian pengujian yang mengandung konsentrasi tertentu dari satu anggota panel eksklusivitas. Lebih
banyak ulangan dapat digunakan. Konsultasikan dengan ahli statistik AOAC.

Inklusivitas/selektivitas Analisis satu bagian pengujian yang berisi konsentrasi tertentu dari satu anggota panel inklusivitas. Lebih banyak
ulangan dapat digunakan. Konsultasikan dengan ahli statistik AOAC.

Batas kuantisasi (LOQ) Perkirakan LOQ = rata-rata (kosong) + 10×s (kosong).

0
Ukur sampel kosong dengan analit pada
perkiraan LOQ. Hitung rata-rata rata-rata dan deviasi standar hasilnya. PanduanB: Untuk ML ≥
100 ppb (0,1 mg/kg): LOD = ML×1/5. Untuk ML < 100 ppb (0,1 mg/kg): LOD = ML×2/5.

Ketidakpastian pengukuran Gunakan ISO 21748:Panduan penggunaan estimasi keterulangan, keterulangan, dan kebenaran dalam estimasi
ketidakpastian pengukuran untuk menganalisis data yang dikumpulkan untuk mengetahui bias, keterulangan, dan
presisi menengah untuk memperkirakan ketidakpastian pengukuran.

POD(0)
Gunakan data dari studi kolaboratif.
POD (c)
Pengulangan Siapkan dan homogenkan tiga sampel yang tidak diketahui pada konsentrasi berbeda untuk mewakili
keseluruhan metode yang diklaim. Analisis setiap sampel yang tidak diketahui dengan metode kandidat
sebanyak tujuh kali, mulai setiap analisis mulai dari menimbang bagian pengujian hingga hasil akhir tanpa
replikasi tambahan (kecuali dinyatakan demikian dalam metode). Semua analisis untuk satu sampel yang tidak
diketahui harus dilakukan dalam jangka waktu sesingkat yang diperbolehkan oleh metode ini. Hal yang tidak
diketahui kedua dan ketiga dapat dianalisis dalam periode waktu singkat lainnya. Ulangi untuk setiap matriks
yang diklaim.

Tentukan POD yang diinginkan pada konsentrasi kritis. Lihat Tabel A7 untuk menentukan jumlah bagian
Probabilitas deteksi (POD)
pengujian yang diperlukan untuk menunjukkan POD yang diinginkan.

Probabilitas identifikasi (POI) BerkonsultasiProbabilitas Identifikasi (POI): Model Statistik untuk Validasi Metode
Identifikasi Botani KualitatifC.
Pemulihan Ditentukan dari blanko atau sampel berduri dengan setidaknya tujuh analisis independen per
tingkat konsentrasi pada minimal tiga tingkat konsentrasi yang mencakup rentang analitik. Mandiri
artinya setidaknya pada waktu yang berbeda. Jika tidak tersedia blanko (alami) yang dikonfirmasi,
rata-rata kadar analit yang melekat (mengandung secara alami) harus ditentukan pada setidaknya
tujuh ulangan independen.

% pemulihan marjinal = (C –F C )×100/C

kamu
TotalA
% pemulihan = 100(C )/(C F +C)
kamu A

dimana C F= konsentrasi sampel yang difortifikasi, C = = konsentrasi sampel yang tidak difortifikasi, dan C
kamu A
konsentrasi analit yang ditambahkan pada sampel uji.D

Biasanya pemulihan total digunakan kecuali jika analit asli terdapat dalam jumlah yang lebih besar dari sekitar 10% dari
jumlah yang ditambahkan, dalam hal ini gunakan metode penambahan.e

Reproduksibilitas Metode kuantitatif: Rekrut 10–12 kolaborator; harus memiliki delapan set data yang valid; dua duplikat
(studi kolaboratif atau antar laboratorium) buta direplikasi pada lima konsentrasi untuk setiap kombinasi analit/matriks untuk setiap kolaborator.

Metode kualitatif: Rekrut 12–15 kolaborator; harus memiliki 10 set data yang valid; enam ulangan pada lima
konsentrasi untuk setiap kombinasi analit/matriks untuk setiap kolaborator.
A
Panduan bagi Industri untuk Validasi Metode Bioanalitik(Mei 2001) Departemen Kesehatan dan Layanan Kemanusiaan AS, Badan Pengawas Obat dan
Makanan AS, Pusat Evaluasi dan Penelitian Obat (CDER), Pusat Kedokteran Hewan (CVM).
B
Manual Prosedur Codex Alimentarius Codex.

C
LaBudde, RA, & Harnly, JM (2012)J.AOAC Int.95, 273–285.

D
Pedoman Prosedur Studi Kolaboratif untuk Memvalidasi Karakteristik Suatu Metode Analisis(edisi saat ini)Metode Analisis Resmi,Lampiran D, AOAC
INTERNASIONAL, Rockville, MD, AS.
e
Pedoman AOAC untuk Validasi Laboratorium Tunggal Metode Kimia untuk Suplemen Makanan dan Tumbuhan(edisi saat ini)Metode Analisis Resmi, Lampiran K,
AOAC INTERNASIONAL, Rockville, MD, AS.

© 2016 AOAC INTERNASIONAL

AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016) Gpedoman untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan
Lampiran F, hal. 9

Tabel A4. Ketepatan yang diharapkan (pengulangan) sebagai Tabel A5. Pemulihan yang diharapkan sebagai fungsi
fungsi konsentrasi analitA konsentrasi analitA
Analis, % Fraksi massa (C) Satuan RSD, R% Berarti
Analis, % Fraksi massa (C) Satuan pemulihan, %
100 1 100% 1.3
100 1 100%
10 10–1 10% 1.9 98–102
10 10–1 10%
1 10–2 1% 2.7
1 10–2 1% 97–103
0,1 10–3 0,1% 3.7
0,1 10–3 0,1% 95–105
0,01 10–4 100 ppm (mg/kg) 5.3
0,01 10–4 100 ppm (mg/kg) 90–107
0,001 10–5 10 ppm (mg/kg) 7.3
0,001 10–5 10 ppm (mg/kg)
0,0001 10–6 1 ppm (mg/kg) 11
0,0001 10–6 1 ppm (mg/kg) 80–110
0,00001 10–7 100 ppb (μg/kg) 15
0,00001 10–7 100 ppb (μg/kg)
0,000001 10–8 10 ppb (μg/kg) 21
0,000001 10–8 10 ppb (μg/kg) 60–115
0,0000001 10–9 1 ppb (μg/kg) 30
0,0000001 10–9 1 ppb (μg/kg) 40–120
A Tabel dikutip dariProgram Metode Terverifikasi Sejawat AOAC, Manual aktif
Kebijakan dan prosedur(1998) AOAC INTERNASIONAL, Rockville, MD, AS. A
Tabel dikutip dariProgram Metode Terverifikasi Sejawat AOAC, Manual tentang
Kebijakan dan Prosedur(1998) AOAC INTERNASIONAL, Rockville, MD, AS.

Ketepatan suatu metode adalah kedekatan hasil pengujian independen

yang diperoleh dalam kondisi yang ditentukan. Presisi biasanya
dinyatakan dalam ketidaktepatan dan dihitung sebagai deviasi standar
relatif dari hasil pengujian. Ketidaktepatan suatu metode meningkat
seiring dengan menurunnya konsentrasi analit. Tabel ini memberikan
target RSD untuk berbagai konsentrasi analit.
Pemulihan didefinisikan sebagai rasio hasil tes rata-rata yang diamati dengan nilai
sebenarnya. Kisaran perolehan rata-rata yang dapat diterima meluas seiring dengan
menurunnya konsentrasi analit. Tabel ini memberikan rentang perolehan rata-rata
target untuk konsentrasi analit dari 100% hingga 1 ppb.

Tabel A6. Deviasi standar relatif reproduksibilitas

yang diprediksi (PRSD)RA
Analis, % Fraksi massa (C) Satuan RSD, R%
100 1 100% 2
10 10–1 10% 3
1 10–2 1% 4
0,1 10–3 0,1% 6
0,01 10–4 100 ppm (mg/kg) 8
0,001 10–5 10 ppm (mg/kg) 11
0,0001 10–6 1 ppm (mg/kg) 16
0,00001 10–7 100 ppb (μg/kg) 22
0,000001 10–8 10 ppb (μg/kg) 32
0,0000001 10–9 1 ppb (μg/kg) 45
A Tabel dikutip dariDefinisi dan Perhitungan Nilai HorRat
dari Data Intralaboratorium, HorRat untuk SLV.doc, 2004-01-18,
AOAC INTERNATIONAL, Rockville, MD, AS.

Deviasi standar relatif atau reproduktifitas yang diprediksi = PRSD

R
.
Deviasi standar relatif reprodusibilitas dihitung dari rumus Horwitz:

PRSD =R 2C–0,15

di mana C dinyatakan sebagai fraksi massa.

Tabel ini memberikan PRSD yang dihitung untuk

R
berbagai konsentrasi. Melihat
Lampiran D untuk informasi tambahan.

© 2016 AOAC INTERNASIONAL

Gpedoman untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016)
Lampiran F, hal. 10

Tabel A7. POD dan jumlah porsi tesa,b

Ukuran sampel diperlukan untuk proporsi

Menganggap 1. Hasil biner (terjadi/tidak terjadi). 2. Probabilitas konstan suatu peristiwa terjadi. 3. Uji coba independen (misalnya sampel acak sederhana). 4. Jumlah percobaan tetap (N) 95% Interval kepercayaan

Kesimpulan seluruhnya berada pada atau di atas rho minimum yang ditentukan

Diinginkan Ukuran sampelNdiperlukan

1 sisi lebih rendah Diharapkan lebih rendah Diharapkan bagian atas

Kemungkinan minimal Jumlah minimum acara Jumlah Maksimum. batas kepercayaan pada batas kepercayaan pada batas kepercayaan pada Efektif
rho, % Ukuran sampel (N) (X) tidak ada kejadian (kamu) rhoC, % rho, % rho, % AOQLDrho, %
50 3 3 0 52.6 43.8 100,0 71.9
50 10 8 2 54.1 49.0 94.3 71.7
50 20 14 6 51.6 48.1 85.5 66.8
50 40 26 14 52.0 49.5 77.9 63.7
50 80 48 32 50.8 49.0 70.0 59.5
55 4 4 0 59.7 51.0 100,0 75.5
55 10 9 1 65.2 59.6 100,0 79.8
55 20 15 5 56.8 53.1 88.8 71.0
55 40 28 12 57.1 54.6 81.9 68.2
55 80 52 28 55.9 54.1 74.5 64.3
60 5 5 0 64.9 56.5 100,0 78.3
60 10 9 1 65.2 59.6 100,0 79.8
60 20 16 4 62.2 58.4 91.9 75.2
60 40 30 10 62.4 59.8 85.8 72.8
60 80 56 24 61.0 59.2 78.9 69.1
65 6 6 0 68.9 61.0 100,0 80,5
65 10 9 1 65.2 59.6 100,0 79.8
65 20 17 3 67.8 64.0 94.8 79.4
65 40 31 9 65.1 62.5 87.7 75.1
65 80 59 21 65.0 63.2 82.1 72.7
70 7 7 0 72.1 64.6 100,0 82.3
70 10 10 0 78.7 72.2 100,0 86.1
70 20 18 2 73.8 69.9 97.2 83.6
70 40 33 7 70.7 68.0 91.3 79.7
70 80 63 17 70.4 68.6 86.3 77.4
75 9 9 0 76.9 70.1 100,0 85.0
75 10 10 0 78.7 72.2 100,0 86.1
75 20 19 1 80.4 76.4 100,0 88.2
75 40 35 5 76.5 73.9 94.5 84.2
75 80 67 13 75.9 74.2 90.3 82.2
80 11 11 0 80.3 74.1 100,0 87.1
80 20 19 1 80.4 76.4 100,0 88.2
80 40 37 3 82.7 80.1 97.4 88.8
80 80 70 10 80.2 78.5 93.1 85.8
85 20 20 0 88.1 83.9 100,0 91.9
85 40 38 2 86.0 83.5 98.6 91.1
85 80 74 6 86.1 84.6 96,5 90.6
90 40 40 0 93.7 91.2 100,0 95.6
90 60 58 2 90.4 88.6 99.1 93.9
90 80 77 3 91.0 89,5 98.7 94.1
95 60 60 0 95.7 94.0 100,0 97.0
95 80 80 0 96.7 95.4 100,0 97.7
95 90 89 1 95.2 94.0 100,0 97.0
95 96 95 1 95,5 94.3 100,0 97.2
98 130 130 0 98.0 97.1 100,0 98.6
98 240 239 1 98.2 97.7 100,0 98.8
99 280 280 0 99.0 98.6 100,0 99.3
99 480 479 1 99.1 98.8 100,0 99.4
A
Tabel dikutip dari Laporan Teknis TR308,Pengambilan sampel berencana untuk memverifikasi proporsi suatu peristiwa yang melebihi atau berada di bawah nilai yang ditentukan, LaBudde, R. (4 Juni 2010)
(tidak diterbitkan). Tabel ini dibuat sebagai bagian dari laporan informatif untuk Kelompok Kerja untuk Validasi Metode Identitas Bahan Baku Tumbuhan yang ditugaskan oleh Satuan Tugas Presiden
bidang Suplemen Makanan AOAC INTERNATIONAL. Proyek ini didanai oleh Kantor Suplemen Diet, Institut Kesehatan Nasional.
B
Hak Cipta 2010 oleh Least Cost Formulations, Ltd. Semua hak dilindungi undang-
C
undang. Berdasarkan interval kepercayaan 1 sisi skor Wilson yang dimodifikasi.
D
AOQL = Rata-rata tingkat kualitas keluar.

© 2016 AOAC INTERNASIONAL


Gambar A1. Hubungan antara presisi versus bias (kebenaran). Kebenaran
dilaporkan sebagai bias. Bias didefinisikan sebagai perbedaan antara
hasil tes dan nilai referensi yang diterima.
Gambar A2. Hubungan antara LOD dan LOQ. LOD didefinisikan
sebagai jumlah terendah suatu zat yang dapat dibedakan dari
ketiadaan zat tersebut (nilai kosong) dalam batas
kepercayaan yang ditentukan. LOQ adalah tingkat di atas
mana hasil kuantitatif dapat diperoleh dengan tingkat
keyakinan tertentu.
Gambar A3. Kurva Horwitz, menggambarkan eksponensial
peningkatan koefisien variasi seiring dengan menurunnya
konsentrasi analit [J.AOAC Int. 89, 1095(2006)].
hodPkinerjaRperlengkapan
Lampiran F, hal. 11
LAMPIRAN B
ifikasi Metode
ance dapat digunakan untuk menentukan rs mana
pada Tabel A1 yang berlaku untuk ds yang
berbeda. AOAC INTERNATIONAL tidak melakukan
miquantitatif” sebagai metode klasifikasi.
mengidentifikasi diri sebagai semikuantitatif akan
menjadi lima jenis berikut:
itu
hasilnya adalah angka kontinu.
persyaratan kinerja yang ditentukan untuk
komponen n atau jejak). Gunakan variasi rentang
pemulihan pada Tabel A4 dan A5.
Untuk tujuan saya, mungkin ada metode yang
kurang akurat yang dijelaskan pada Tabel A4 dan A5
Para pekerja harus berkonsultasi dengan ahli yang
tepat jika rekomendasi dalam Tabel sesuai dengan
metode mereka.
Tipe II: Metode yang Laporannya Berkisar
Karakteristik: Menghasilkan indikator “rentang” seperti 0, rendah,
sedang, dan tinggi.
Rekomendasi: Gunakan persyaratan kinerja yang ditentukan untuk metode
kualitatif (komponen utama). Tentukan rentang POD untuk setiap indikator
“rentang” rentang.
Tipe III: Metode dengan Nilai Batas
Karakteristik: Metode dapat menghasilkan angka kontinu sebagai hasil
sementara (seperti nilai CT untuk metode PCR), yang tidak dilaporkan
namun dikonversi menjadi hasil kualitatif (ada/tidaknya) dengan
menggunakan nilai batas.
Rekomendasi: Gunakan persyaratan kinerja yang ditentukan untuk
metode kualitatif.
Tipe IV: Metode Kualitatif
Karakteristik: Metode analisis yang responsnya berupa ada tidaknya
analit yang terdeteksi baik secara langsung maupun tidak langsung
pada bagian pengujian tertentu.
Rekomendasi: Gunakan persyaratan kinerja yang ditentukan untuk
metode kualitatif.
Tipe V: Metode Identifikasi
Ciri-ciri: Metode analisis yang tujuannya untuk mengetahui
identitas suatu analit.
Rekomendasi: Gunakan persyaratan kinerja yang ditentukan untuk
metode identifikasi.
© 2016 AOAC INTERNASIONAL
Gpedoman untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016)
Lampiran F, hal. 12

LAMPIRAN C POD selalu dianggap bergantung pada konsentrasi analit.

Memahami Model POD
Disarikan dari Pedoman Komite Metode INTERNASIONAL
AOAC untuk Validasi Metode dan/atau Prosedur Agen
Ancaman Hayati, J. AOAC Int.94, 1359(2011) dan Metode
Resmi Analisis AOAC INTERNATIONAL (edisi saat ini),
Lampiran I.
Model Probability of Detection (POD) adalah cara untuk
mengkarakterisasi kinerja metode kualitatif (biner). Metode
kualitatif biner adalah metode yang memberikan hasil sebagai salah
satu dari dua kemungkinan hasil, positif atau negatif, ada/tidaknya,
atau +/–.
Parameter tunggal yang menarik adalah POD, yang didefinisikan
sebagai probabilitas pada konsentrasi tertentu untuk memperoleh
Kurva POD adalah representasi grafis dari kinerja metode,
dimana probabilitas diplot sebagai fungsi konsentrasi (
melihat, misalnya Gambar C1).
Model POD dirancang untuk memungkinkan deskripsi obyektif dari
respon metode tanpa mempertimbangkan ekspektasi apriori dari
probabilitas pada konsentrasi tertentu. Model ini cukup umum untuk
memungkinkan perbandingan terhadap fungsi probabilitas teoretis apa
pun.
Model POD juga dirancang untuk memungkinkan deskripsi
respon metode secara independen tanpa mempertimbangkan
respon metode referensi. Model ini cukup umum untuk
memungkinkan perbandingan antara respons metode referensi dan
kandidat, jika diinginkan.

respon positif dengan metode deteksi. POD diasumsikan bergantung
pada konsentrasi, dan umumnya, kemungkinan respons positif akan
meningkat seiring dengan meningkatnya konsentrasi.
Misalnya, pada konsentrasi yang sangat rendah, diharapkan metode
tersebut tidak sensitif terhadap analit, dan pada konsentrasi yang sangat
tinggi, diinginkan kemungkinan besar untuk memperoleh respons
positif. Tujuan validasi metode adalah untuk mengkarakterisasi
bagaimana respons metode bertransisi dari konsentrasi rendah/respon
rendah ke konsentrasi tinggi/respon tinggi.
Gambar C1. Kurva POD teoretis untuk metode
deteksi kualitatif.
Model validasi lama telah menggunakan istilah “sensitivitas”,
“spesifisitas”, “positif palsu”, dan “negatif palsu” untuk
menggambarkan kinerja metode. Model POD menggabungkan
semua konsep kinerja sistem ini ke dalam satu parameter, POD.
Misalnya, positif palsu telah didefinisikan oleh beberapa
model sebagai probabilitas respons positif, mengingat
sampelnya benar-benar negatif (konsentrasi = 0). Titik ekivalen
pada kurva POD untuk karakteristik kinerja ini adalah nilai kurva
pada Conc = 0.
Demikian pula, negatif palsu terkadang didefinisikan sebagai
probabilitas respons negatif ketika sampel benar-benar positif
(konsentrasi >0). Dalam kurva POD, nilai ini akan selalu spesifik
untuk konsentrasi sampel tertentu, namun akan direpresentasikan
sebagai jarak dari kurva POD ke sumbu atas horizontal POD = 1
pada semua konsentrasi kecuali C = 0.
Model POD menggabungkan semua karakteristik metode ini ke dalam
satu parameter, yang selalu diasumsikan bervariasi berdasarkan
konsentrasi. Dalam model lain, istilah “positif palsu”, “negatif palsu”,
“sensitivitas”, dan “spesifisitas” telah didefinisikan dalam berbagai cara,
biasanya tidak bergantung pada konsentrasi. Karena alasan ini, istilah-
istilah ini tidak berlaku lagi dalam model ini (melihatTabel C1).
Istilah “sensitivitas”, “spesifisitas”, “positif palsu”, dan “negatif palsu”
sudah tidak berlaku lagi dalam model POD (melihatGambar C2).

Tabel C1. Terminologi

Terminologi tradisional Konsep Setara dengan POD Komentar
Positif palsu Probabilitas metode memberikan respon (+) POD(0) Nilai kurva POD pada konsentrasi
padahal sampelnya benar-benar tidak ada POD pada konsentrasi = 0 = 0; “Y-intersep” dari kurva POD
analit
Kekhususan Probabilitas metode memberikan respon (-) 1-POD(0) Jarak sepanjang sumbu POD dari POD = 1
padahal sampelnya benar-benar tidak ada dengan nilai kurva POD
analit
Negatif palsu Probabilitas respons (–) pada suatu waktu tertentu 1-POD(c) Jarak dari kurva POD ke POD =
(pada waktu tertentu konsentrasi 1 "sumbu atas" dalam arah vertikal
konsentrasi)
Kepekaan Probabilitas respons (+) pada suatu waktu tertentu POD(c) Nilai kurva POD pada waktu tertentu
(pada waktu tertentu konsentrasi konsentrasi
konsentrasi)
Benar-benar negatif Sampel yang tidak mengandung analit C=0 Titik pada sumbu konsentrasi dimana c = 0

Benar-benar positif Sampel yang mengandung analit di beberapa bagian C>0 Rentang konsentrasi dimana c > 0
konsentrasi positif

© 2016 AOAC INTERNASIONAL

AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016) Gpedoman untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan
Lampiran F, hal. 13

Gambar C2. Perbandingan terminologi model POD dengan istilah usang lainnya.

LAMPIRAN D 1.4 Standar Deviasi

Definisi dan Perhitungan
Nilai HorRat dari Data Intralaboratorium sSaya (x)2/N]0,5
= [Σ(x –Saya

Dikutip dari Definisi dan Perhitungan Nilai HorRat dari Data 1.5 Deviasi Standar Relatif
Intralaboratorium, AOAC INTERNATIONAL, HorRat untuk
SLV.doc, 18-01-2004.
RSD = s×100/x
Saya
1. Definisi

1.1 Replikasi Data 1.5.1 Pengulangan Deviasi Standar Relatif [RSD(r) atau RSD ] R

Data dikembangkan dalam kondisi umum di laboratorium yang sama: Deviasi standar relatif dihitung dari data laboratorium.
kinerja simultan, atau, jika perlu untuk memperoleh nilai yang memadai,
seri yang sama, analis yang sama, hari yang sama. Data tersebut 1.5.2 Deviasi Standar Relatif Reproduksibilitas [RSD(R) atau RSD ] R

memberikan “parameter statistik keterulangan.”

Deviasi standar relatif dihitung dari data laboratorium.
1.2 Data yang Dikumpulkan

Replikasi data yang dikembangkan di laboratorium yang sama dalam kondisi

yang berbeda namun dianggap cukup mirip sehingga, untuk tujuan analisis statistik, Tabel D1. Deviasi standar relatif yang diprediksi
data tersebut dapat dipertimbangkan secara bersamaan. Ini mungkin mencakup Konsentrasi (C) Fraksi massa (C) PRSD ,R%
proses yang berbeda, instrumen yang berbeda, analis yang berbeda, dan hari yang 100% 1.0 2
berbeda. 1% 0,01 4
1.3 Rata-rata 0,01% 0,0001 8

0 = Jumlah nilai individual, x, dibagi dengan jumlah nilai 1 ppm 0,000001 16

Saya
individual,N. 10 hal 0,00000001 32
1 hal 0,000000001 45
N
0 = (Σ x )/Saya

© 2016 AOAC INTERNASIONAL

Gpedoman untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016)
Lampiran F, hal. 14

1.6 Fraksi Massa

Tabel D2. Deviasi standar relatif yang diprediksi
Konsentrasi, C, dinyatakan sebagai pecahan desimal. Untuk Konsentrasi (C) PRSD ,R% PRSD ,R%
menghitung dan melaporkan parameter statistik, data dapat dinyatakan 100% 2 1
dalam satuan apa pun yang sesuai (misalnya, %, ppm, ppb, mg/g, μg/g;
1% 4 2
μg/kg; μg/L, μg/μL, dll.). Untuk melaporkan nilai HorRat, data harus
0,01% 8 4
dilaporkan sebagai pecahan massa dengan satuan pembilang dan
penyebut yang sama: misalnya, untuk 100% (bahan murni), pecahan 1 ppm 16 8
massa C = 1,00; untuk 1 μg/g (ppm), C = 0,000001 = (E-6).MelihatTabel D1 10 hal 32 16
untuk contoh lainnya. 1 hal 45 22
1.7 Prediksi Deviasi Standar Relatif [PRSD(R) atau PRSD ] R

Deviasi standar relatif reproduktifitas dihitung dari rumus

2.1.1 Keterbatasan
Horwitz:
– 0,15
Nilai HorRat tidak berlaku untuk analit yang ditentukan
PRSD(kanan) = 2C metode (empiris) (kelembaban, abu, serat, karbohidrat
berdasarkan perbedaan, dll.), sifat fisik atau metode fisik (pH,
di mana C dinyatakan sebagai fraksi massa.MelihatTabel D1. viskositas, berat terkuras, dll.), dan analit yang tidak jelas
(polimer, produk reaksi enzim).
Dalam notasi spreadsheet: PRSD(R) = 2 * C ^(–0.15).
2.2 Untuk Studi Intralaboratorium
1.8 Nilai HorRat

Rasio deviasi standar relatif reproduktifitas yang dihitung 2.2.1 Pengulangan

dari data terhadap PRSD(R) yang dihitung dari rumus Nilai target prediksi yang dapat diterima di dalam laboratorium untuk
Horwitz: keterulangan diberikan pada Tabel D2 pada 1/2 PRSD(R), yang mewakili
kasus terbaik.
HorRat = RSD(R)/PRSD(R)
2.2.2 HorRat(kanan)

Untuk membedakan nilai HorRat biasa yang dihitung dari data

reprodusibilitas dengan nilai HorRat yang dihitung dari data keterulangan,
lampirkan R untuk data pertama dan r untuk data keterulangan. Namun perlu
diingat bahwa penyebutnya selalu menggunakan PRSD(R) yang dihitung dari
data reproducibility karena parameter ini lebih dapat diprediksi dibandingkan
parameter yang dihitung dari data repeatability:
HorRat(R) = RSD R/PRSD(R)
HorRat(r) = RSD /PRSD(R)
R rata-rata yang tidak dilaporkan atau pengetahuan sebelumnya tentang
Beberapa standar deviasi relatif yang diharapkan dan diprediksi diberikan pada
Tabel D1.
Berdasarkan pengalaman dan untuk tujuan eksplorasi
ekstrapolasi nilai HorRat pada studi SLV, ambillah akseptabilitas
minimal 1/2 dari batas bawah (0,5×0,5 ≈ 0,3) dan sebagai
akseptabilitas maksimum 2/3 dari batas atas (0,67×2,0 ≈ 1,3).
Hitung HorRat(r) dari data SLV:
HorRat(r) = RSD(r)/PRSD(R)
Nilai HorRat(r) yang dapat diterima adalah 0,3–1,3. Nilai-nilai ekstrem harus
ditafsirkan dengan hati-hati. Dengan serangkaian nilai yang rendah, periksa
kandungan analit; dengan serangkaian nilai tinggi, periksa kekurangan
metode seperti waktu, suhu, massa, volume, dan konsentrasi yang tidak
dibatasi; pengotor yang tidak dikenali (residu deterjen pada peralatan gelas,

2Nilai HorRat yang Dapat Diterima peroksida dalam eter); ekstraksi dan transfer yang tidak lengkap dan
parameter yang tidak terkontrol dalam teknik instrumental tertentu.
2.1 Untuk Studi Antar Laboratorium 2.3 Keterbatasan dan Ekstrapolasi Lainnya

HorRat(R): Data asli yang dikembangkan dari studi antar
laboratorium (antar laboratorium) menetapkan nilai HorRat
sebesar 1,0 dengan batas penerimaan 0,5 hingga 2,0.
Deviasi standar relatif dalam laboratorium biasanya 1/2
hingga 2/3 dari deviasi standar relatif antar laboratorium.
Nilai HorRat adalah ringkasan yang sangat kasar namun berguna
mengenai presisi dalam kimia analitik. Hal ini melebih-lebihkan presisi
pada titik ekstrem, memperkirakan lebih banyak variabilitas daripada
yang diamati pada skala tertinggi (C > ca 0,1; yaitu >10%) dan pada skala
terendah (C < E-8; yaitu 10 ng/g; 10 ppb).

© 2016 AOAC INTERNASIONAL

AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016) Gpedoman
LAMPIRAN E
Tinjauan Akurasi Metode AOAC
Keakuratan Metode Berdasarkan Bahan Referensi
Bahan referensi (RM) yang digunakan.—Penggunaan RM harus dilihat
sebagai bagian integral dari proses pengembangan metode, validasi, dan
evaluasi kinerja. RM bukan satu-satunya komponen sistem mutu, namun
penggunaan RM yang benar sangat penting untuk manajemen mutu yang
tepat. RM dengan atau tanpa nilai kuantitas yang ditetapkan dapat digunakan
untuk kontrol presisi pengukuran, sedangkan hanya RM dengan nilai kuantitas
yang ditetapkan yang dapat digunakan untuk kalibrasi atau kontrol kebenaran
pengukuran. Pengembangan metode dan validasi matriks dalam lingkup
metode dilakukan untuk mengkarakterisasi atribut seperti pemulihan,
selektivitas, “kebenaran” (akurasi, bias), presisi (keterulangan dan
reproduktifitas), estimasi ketidakpastian, kekasaran, LOQ atau LOD, dan
dinamis jangkauan. RM harus dipilih yang sesuai dengan tujuannya. Ketika
bahan referensi bersertifikat (CRM) tersedia dengan matriks yang sesuai
dengan ruang lingkup metode, sebagian besar pekerjaan yang terlibat dalam
pengembangan metode telah selesai, dan pekerjaan tersebut
didokumentasikan melalui sertifikat. Diperlukan RM dengan nilai analit dalam
rentang sampel uji, serta RM matriks “kosong”, dengan nilai di bawah atau
mendekati batas deteksi.
Ketersediaan RM.—Pertimbangan perlu diberikan pada ketersediaan RM yang
dipilih di masa mendatang. Metode yang terdokumentasi dengan baik namun tidak
dapat diverifikasi di masa depan karena kurangnya bahan dapat kehilangan
kredibilitas atau dianggap inferior.
Sesuai dengan cakupan metode.—CRM matriks alami memberikan jaminan
terbesar bahwa metode ini mampu memberikan hasil yang akurat untuk
matriks tersebut. Saat memilih RM untuk melakukan validasi metode, analis
harus mempertimbangkan kesesuaian metode secara material. Contoh
kecocokan yang baik adalah metode untuk molekul organik tertentu dalam
susu formula bayi dan penggunaan susu formula bayi atau susu bubuk RM.
Kesesuaian yang buruk adalah metode untuk molekul organik tertentu dalam
susu formula bayi dan menggunakan bahan sedimen.
Stabilitas.-Memberikan RM yang stabil dapat menjadi
tantangan jika analit aktif secara biologis, mudah teroksidasi,
atau berinteraksi dengan komponen matriks lainnya. Produsen
CRM memberikan jaminan stabilitas material, serta
homogenitas. CRM disertai dengan sertifikat yang mencakup
kriteria utama berikut:
(1) Nilai yang ditetapkan dengan ketidakpastian pengukuran dan
ketertelusuran metrologi
(2) Homogenitas
(3) Stabilitas, dengan tanggal berakhirnya sertifikat (4)
Persyaratan penyimpanan
(5) Informasi tentang tujuan
penggunaan (6) Identitas matriks
Untuk beberapa RM, seperti RM botani, sumber dan/atau keaslian
dapat menjadi informasi yang sangat penting yang harus disertakan
dalam sertifikat. Bahkan dalam kondisi penyimpanan ideal, banyak analit
mempunyai tingkat perubahan tertentu. Sertifikasi ulang dapat
dilakukan oleh pemasok, dan sertifikat diterbitkan kembali dengan
tanggal kedaluwarsa yang berbeda dan dengan data analit tertentu
diperbarui atau dihapus.
Dokumen,Tinjauan Akurasi Metode AOAC, disiapkan oleh Divisi
Teknis Bahan Referensi AOAC (TDRM) dan disetujui oleh Dewan
Metode Resmi AOAC pada bulan Juni 2012.
untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan
Lampiran F, hal. 15
Definisi CRM.—Lihat dokumen AOAC TDRM untuk definisi
dari ISO Guide 30, Amd. 1 (2008), http://www.aoac. org/
divisi/Referensi.pdf.
Informasi tentang sumber RM tersedia.—Produser materi
bertanggung jawab untuk memberikan otentikasi RM yang dapat
diandalkan dan membuat pernyataan yang jelas dalam dokumentasi
yang menyertainya. Daftar ini harus dibuat sedetail mungkin, termasuk
penanganan bahan, identifikasi bahan tanaman selengkap mungkin
(spesies, tipe, subtipe, wilayah tumbuh), dll. Hal ini sebanding dengan
informasi lain yang diperlukan pada RM untuk menilai kesesuaiannya.
untuk tujuan aplikasi tertentu (misalnya, mengandung berapa banyak
analit yang ditargetkan, distabilkan dengan menambahkan asam—oleh
karena itu tidak cocok untuk parameter/prosedur tertentu, dll.).
RM terpisah yang digunakan untuk kalibrasi dan validasi.—RM
tunggal tidak dapat digunakan untuk kalibrasi dan validasi hasil dalam
prosedur pengukuran yang sama.
RM kosong digunakan jika diperlukan.—RM matriks kosong berguna untuk
memastikan kinerja pada atau mendekati batas deteksi. Hal ini sangat berguna
untuk pengendalian kualitas rutin dalam metode pengukuran, misalnya,
penelusuran tingkat alergen, mikotoksin, atau residu obat.
Persyaratan penyimpanan dipertahankan.—Pengembang metode harus
memelihara dokumentasi yang baik yang menunjukkan bahwa kondisi
penyimpanan yang direkomendasikan produsen RM telah diikuti.
Biaya.—Biaya pemeriksaan metode yang berkelanjutan harus dipertimbangkan.
Penggunaan CRM sehari-hari dapat memakan biaya yang mahal. Analisis bulanan atau
triwulanan terhadap materi-materi ini mungkin bisa menjadi pilihan.
Konsentrasi analit sesuai dengan metode yang dimaksudkan.
—Konsentrasi analit yang diminati sesuai untukPersyaratan
Kinerja Metode Standar(SMPR®).
Ketidakpastian tersedia.—Setiap hasil pengukuran memiliki ketidakpastian
yang terkait dengannya, dan kontribusi individu terhadap gabungan
ketidakpastian tersebut muncul dari berbagai sumber. Pencapaian target
ketidakpastian pengukuran yang ditetapkan oleh pelanggan untuk masalah
yang mereka minati sering kali menjadi salah satu kriteria yang digunakan
dalam memilih metode untuk aplikasi tertentu. Estimasi ketidakpastian
pengukuran dapat dilakukan dengan pendekatan yang berbeda, namun
penggunaan RM sangat memudahkan bagian validasi metode ini.
Demonstrasi Akurasi Metode ketika Tidak Ada Bahan
Referensi Tersedia
Jika RM tidak tersedia, bagaimana keakuratannya ditunjukkan? Ada
banyak analit yang tidak tersedia CRM dengan matriks yang sesuai.
Hal ini membuat analis hanya mempunyai sedikit pilihan. Untuk
beberapa metode, mungkin ada program pengujian profisiensi yang
menyertakan matriks yang diinginkan untuk analitnya. Uji profisiensi
memungkinkan analis membandingkan hasil dengan hasil dari
laboratorium lain, yang mungkin menggunakan metode serupa atau
tidak. Spiking adalah teknik lain yang dapat digunakan. Ketika metode
alternatif tersedia, hasilnya dapat dibandingkan antara metode yang
berbeda. Alternatif-alternatif ini tidak memberikan tingkat jaminan yang
sama seperti yang diperoleh melalui penggunaan CRM.
Pemulihan lonjakan.—Dengan tidak adanya CRM, salah satu teknik yang
terkadang digunakan untuk menilai kinerja adalah dengan menambahkan
matriks RM dengan jumlah analit yang diketahui. Ketika metode ini digunakan,
tidak dapat diasumsikan bahwa analit terikat dengan cara yang sama seperti
dalam matriks alami. Namun demikian, RM blanko bersertifikat akan menjadi
pilihan yang lebih disukai untuk membuat material berduri.
Saat menyiapkan larutan referensi, standar murni harus larut
sempurna dalam pelarut. Untuk bahan yang tidak larut dalam
suspensi cair atau untuk bahan kering berbentuk bubuk, validasi
diperlukan untuk menunjukkan bahwa analitnya homogen.
© 2016 AOAC INTERNASIONAL
Gpedoman untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan
Lampiran F, hal. 16
terdistribusi dan respon sistem deteksi terhadap analit tidak dipengaruhi
oleh matriks atau teknik preparasi. Ketika material matriks dipilih untuk
spiking, material tersebut harus dikarakterisasi secara wajar untuk
menentukan bahwa material tersebut cukup mewakili matriks yang
diinginkan. Sampel berduri harus dilakukan melalui semua langkah
metode ini. Banyak analit terikat dalam matriks alami dan apakah analit
berduri akan berperilaku sama seperti analit dalam matriks alami tidak
diketahui.
Lainnya.—Penggunaan RM pengganti melibatkan penggantian CRM
dengan matriks alternatif RM yang sedekat mungkin mencocokkan
matriks yang diinginkan berdasarkan pengetahuan teknis.
LAMPIRAN F
Pengembangan dan Penggunaan
Bahan Referensi In-House
Penggunaan bahan referensi adalah bagian penting dari setiap program
penjaminan mutu analitis. Namun, Anda mungkin memiliki pertanyaan tentang
pembuatan dan penggunaannya. Tujuan dari dokumen ini adalah untuk membantu
menjawab banyak dari pertanyaan-pertanyaan ini.
• Apa yang dimaksud dengan bahan referensi?
• Mengapa menggunakan bahan referensi?
• Bahan referensi bersertifikat (CRM) apa yang tersedia
saat ini?
• Mengapa menggunakan bahan referensi internal?
• Bagaimana cara membuat bahan referensi internal?
• Bagaimana cara menggunakan data dari bahan referensi internal?
Apa Itu Bahan Referensi?
Organisasi Internasional untuk Standardisasi (ISO)
mendefinisikan bahan referensi sebagai “bahan atau zat yang satu
atau lebih nilai propertinya cukup homogen dan mapan untuk
digunakan untuk kalibrasi peralatan, penilaian metode pengukuran,
atau untuk memberikan nilai pada material” (1). Dalam bahasa
Inggris yang sederhana, bahan referensi matriks natural, seperti
bahan yang mungkin Anda persiapkan untuk digunakan sendiri,
dapat digunakan untuk memvalidasi metode analisis atau untuk
jaminan kualitas saat Anda menggunakan metode Anda untuk
menganalisis sampel. (Bahan matriks alami umumnya tidak
digunakan sebagai kalibran karena meningkatnya ketidakpastian
yang akan ditambahkan pada analisis.) Nilai yang ditetapkan untuk
analit target dari bahan referensi internal dapat digunakan untuk
menentukan ketepatan metode analisis Anda Dan,
ISO mendefinisikan CRM sebagai “bahan referensi, disertai dengan
sertifikat, satu atau lebih nilai propertinya disertifikasi melalui prosedur
yang menetapkan ketertelusuran hingga realisasi akurat dari unit di
mana nilai properti dinyatakan, dan untuk setiap unit yang disertifikasi.
nilai disertai dengan ketidakpastian pada tingkat kepercayaan yang
dinyatakan” (1).
Mengapa Menggunakan Bahan Referensi?
CRM dapat digunakan di seluruh cakupan metode analisis dan dapat memberikan
ketertelusuran hasil ke Sistem Satuan Internasional (SI). Selama pengembangan
metode, CRM dapat digunakan untuk mengoptimalkan metode Anda. Selama validasi
metode, validasi metode dapat digunakan untuk memastikan bahwa metode Anda
mampu menghasilkan jawaban yang “benar”, dan untuk menentukan seberapa dekat
hasil Anda dengan jawaban tersebut.
Dikutip dariPengembangan dan Penggunaan Bahan Referensi
In-House, Rev. 2, 2009. Hak Cipta 2005 oleh Divisi Teknis Bahan
Referensi AOAC (TDRM).
© 2016 AOAC INTERNASIONAL
AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016)
menjawab. Selama penggunaan rutin, metode ini dapat digunakan untuk
menentukan keterulangan dalam sehari dan antar hari, sehingga menunjukkan
bahwa metode Anda terkendali dan menghasilkan hasil yang akurat setiap kali
digunakan.
Bahan acuan matriks natural harus meniru sampel nyata yang akan
dianalisis dengan suatu metode. Mereka harus berperilaku sama seperti
sampel Anda selama prosedur, jadi jika Anda mendapatkan nilai yang
akurat dan tepat untuk bahan referensi Anda, Anda juga harus
mendapatkan nilai yang akurat dan tepat untuk sampel Anda.
Bahan Referensi Tersertifikasi Apa yang Saat Ini Tersedia?
CRM tersedia dari sejumlah sumber, termasuk (namun tidak
terbatas pada):
• Asosiasi Ahli Kimia Sereal Amerika (AACC)
• Masyarakat Ahli Kimia Minyak Amerika (AOCS)
• Badan Energi Atom Internasional (IAEA)
• Lembaga Bahan Referensi dan Pengukuran (IRMM)
• Promochem LGC
• Institut Standar dan Teknologi Nasional (NIST)
• Dewan Riset Nasional Kanada (NRC Kanada)
• Program Penilaian Kemahiran Analisis Pangan Inggris (FAPAS)
Sejumlah situs web menyediakan gambaran umum dan katalog
bahan referensi produsen dan distributor:
http://www.aocs.org/tech/crm/
http://www.comar.bam.de http://
www.erm-crm.org
http://www.iaea.org/oregrammeslaqcs
http://www.aaccnet.org/checksample
http://www.irmm·ire.be/mrm.html http://
www.lgcpromochem.com http://
www.naweb.iaea.org/nahu/nmrm/ http://
www.nist.gov/srm
http://www.fapas.com/index. cfm
http://www.virm.net.
Karena bahan referensi baru diproduksi secara berkala, penting untuk
memeriksa situs web ini untuk menentukan apa yang tersedia saat ini.
Mengapa Menggunakan Bahan Referensi In-House?
Ada banyak manfaat menggunakan CRM. CRM telah disiapkan
agar homogen dan, jika disimpan dalam kondisi yang tepat, stabil.
Anda diberikan nilai bersertifikat serta data statistik untuk
konsentrasi analit Anda; ini sedekat mungkin dengan mengetahui
nilai sebenarnya dari konsentrasi analit. Materi tersebut telah diuji
oleh analis berpengalaman di laboratorium terkemuka, sehingga
Anda yakin bahwa metode Anda menghasilkan nilai yang serupa
dengan yang dihasilkan di laboratorium kompeten lainnya. CRM
dari sumber-sumber yang disebutkan di atas diakui secara nasional
dan/atau internasional, jadi ketika Anda memperoleh hasil yang
dapat diterima untuk CRM menggunakan metode analitis, Anda
memberikan kredibilitas pada metodologi Anda dan ketertelusuran
terhadap hasil Anda.
Namun ada beberapa kelemahan yang terkait dengan CRM.
Sayangnya, banyak kombinasi analit/matriks yang saat ini tidak tersedia.
Saat menguji kandungan nutrisi produk makanan, misalnya,
laboratorium dapat diminta untuk menganalisis apa pun yang mungkin
ditemukan di dapur atau toko kelontong. Bahan referensi yang mewakili
semua jenis makanan yang perlu diuji tidak tersedia, dan sebagian besar
CRM disertifikasi untuk jumlah analit yang terbatas. Penting untuk
mencocokkan matriks bahan referensi dengan matriks sampel Anda.
(Contoh makanan mendominasi diskusi
AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016) Gpedoman untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan
Lampiran F, hal. 17

Sektor Nomor RM. Matriks

NIST 1563 Minyak kelapa

1 NIST 3274 Asam lemak dalam minyak nabati

1 NIST 3276 Ekstrak wortel dalam minyak

1 LGC 7104 Krim yang disterilkan

2 NIST 2384 Memanggang coklat

3 NIST 2387 Selai kacang

4 NIST 1546 Homogenat daging

4 LGC 7106 Keju yang diawetkan

4 LGC 7000 Daging sapi/babi

4 LGC 7150 Daging olahan

4 LGC 7151 Daging olahan
4 LGC 7152 Daging olahan
di bawah ini, namun proses yang sama berlaku untuk pengembangan
4 SMRD 2000 Daging segar
bahan referensi internal di bidang kimia analitik lainnya.)
Untuk mendemonstrasikan penerapan metode analisis pada berbagai 4 LGC 7101 pasta makarel
macam matriks makanan, Satuan Tugas Metode Pelabelan Gizi AOAC 4 LGC QC1001 Pasta daging 1
INTERNATIONAL mengembangkan segitiga yang dibagi menjadi 4 LGC QC1004 Terasi ikan 1
beberapa sektor di mana makanan ditempatkan berdasarkan kandungan
5 BCR-382 Tepung terigu
protein, lemak, dan karbohidratnya (2, 3 ). Karena abu tidak mempunyai
dampak yang besar terhadap kinerja metode analisis untuk bahan 5 BCR-381 tepung gandum

pangan organik, dan air dapat ditambahkan atau dihilangkan, maka 5 LGC 7103 Biskuit pencernaan yang manis

dapat diasumsikan bahwa perilaku metode analisis sebagian besar 5 LGC 7107 kue Madeira
ditentukan oleh proporsi relatif abu. orang-orang terdekat ini. AOAC
5 LGC QC1002 Tepung 1
INTERNATIONAL mengantisipasi bahwa satu atau dua pangan di sektor
6 NIST 1544 Asam lemak
tertentu akan mewakili pangan lain di sektor tersebut dan oleh karena
itu akan berguna untuk penilaian metode. Demikian pula, satu atau dua 6 NIST 1548a Pola makan yang khas

bahan referensi di suatu sektor tertentu (atau yang berdekatan di sektor- 6 NIST 1849 Formula nutrisi bayi/dewasa
sektor yang berdekatan) harus berguna untuk menjamin mutu analisis 6 LGC 7105 Puding beras
yang melibatkan pangan lain di sektor tersebut. Posisi dari banyak CRM
7 LGC 7001 Daging babi
matriks makanan dari sumber yang tercantum di atas ditunjukkan dalam
segitiga dan disediakan dalam daftar. 7 NIST 1566b tisu tiram
Bahan referensi matriks makanan ini tersebar di seluruh sektor 7 NIST 1570a Daun bayam
segitiga, sehingga memungkinkan Anda menemukan CRM yang sesuai 7 NIST 2385 Bayam
untuk dicocokkan dengan sampel Anda. Namun pada akhirnya,
8 NIST 1946 Ikan trout danau
penggunaan CRM secara rutin dapat memakan biaya yang mahal, dan
8 LGC 7176 Makanan hewan kalengan
sebenarnya bukan tujuan dari CRM. Misalnya, untuk menggunakan
Bahan Referensi Standar (SRM) 2387 Selai Kacang NIST untuk semua 9 NIST 1974a Jaringan kerang

analisis pelabelan nutrisi wajib, Anda dapat membeli satu unit penjualan
(tiga botol, masing-masing berisi 170 g bahan) seharga $649 (harga
tahun 2009). Jika Anda menagih pelanggan Anda sekitar $1000 untuk
analisis semua nutrisi wajib dalam bahan uji, bahan kontrol akan
menyumbang lebih dari 60% biaya Anda. Karena itu, banyak
laboratorium merasa lebih hemat biaya untuk membuat bahan referensi
internal untuk pengendalian kualitas rutin dan mengkarakterisasinya
bersamaan dengan analisis CRM (4). Anda dapat menyiapkan bahan
referensi dalam jumlah yang lebih besar dengan menyiapkannya sendiri,
dan Anda memiliki lebih banyak fleksibilitas dalam jenis matriks yang
dapat Anda gunakan. Tidak banyak batasan tentang apa yang bisa dibeli.
Bagaimana Saya Membuat Materi Referensi In-House?
Pada dasarnya ada tiga langkah untuk menyiapkan bahan
referensi internal: seleksi (termasuk pertimbangan
homogenitas dan stabilitas), persiapan, dan karakterisasi.
Panduan tambahan melalui langkah-langkah ini dapat diberikan
dari Divisi Teknis Bahan Referensi (TDRM) AOAC, serta dalam
Panduan ISO 34 (5) dan 35 (6).
9 NIST 3244 Bubuk protein
Referensi
(1) JCGM 200:2008,Kosakata internasional metrologi—Konsep
dasar dan umum serta istilah terkait (VIM), Biro Berat dan
Ukuran Internasional (www.bipm.org)
(2) Serigala, WR, & Andrews, KW (1995)Fresenius' J. Anal.
kimia.352, 73–76
(3) Serigala, WR (1993)Metode Analisis Pelabelan Gizi,
DR Sullivan & DE Carpenter (Eds), AOAC
INTERNASIONAL, Gaithersburg, MD
(4) Bahan Referensi Eropa (2005)Perbandingan Hasil
Pengukuran dengan Nilai Tersertifikasi, Catatan
Aplikasi 1
(5)Panduan ISO 34 Persyaratan Umum Kompetensi
Produsen Bahan Referensi(2009) ke-2, Organisasi
Internasional untuk Standardisasi, Jenewa, Swiss

© 2016 AOAC INTERNASIONAL

Gpedoman untukStandardMetodePkinerjaRperlengkapan AOAC OresmiMetos dariAanalisis(2016)
Lampiran F, hal. 18

(6)Panduan 35 Sertifikasi Bahan Referensi—Prinsip Umum

dan Statistik(2006) Organisasi Internasional untuk
Standardisasi, Jenewa, Swiss
Untuk informasi lebih lanjut tentang TDRM, kunjungi http://aoac.org/
divisions/tdrm.

© 2016 AOAC INTERNASIONAL