ANALISIS KADAR TOTAL

GOLONGAN SENYAWA
KIMIA
BY KELOMPOK 3
Martina maming
Helni Febriani
Hasmeidar
Nurcahyani
Nurhasanah
Reka Lapali
A. DEFENISI
Kadar total golongan Tujuan dilakukannya
senyawa kimia adalah jumlah pengujian kadar total golongan
total kandungan kimia yang ada senyawa kimia untuk
dalam tanaman yang dapat memberikan informasi kadar
memberikan informasi kadar kandungan golongan kimia
kandungan golongan kimia sebagai parameter mutu ekstrak
sebagai parameter mutu ekstrak dalam kaitannya dengan efek
farmakologis.
B. PRINSIP KERJA METODE ANALISIS
2. METODE KOLORIMETRI
1. METODE EKSTRAKSI ALUMUNIUM KLORIDA DAN
Sebanyak 700 gram tanaman KLT
yang digunakan (sampel) dipisahkan
kedalam 4 botol toples dengan berat › Prinsip penetapan flavonoid dengan metode
kolorimetri AlCl3 adalah terbentuknya
masing-masing 200 gram dalam 3 kompleks antara AlCl3 dengan gugus keton
botol dan 1 botol lainnya berisi 100 pada atom C-4 dan juga dengan gugus
gram, kemudian diekstraksi dengan hidroksi pada atom C-3 atau C-4 yang
cara maserasi (tanpa panas) dengan bertetangga dari flavon dan flavonol
menggunakan pelarut etanol 96% › KLT menggunakan fase stasioner berupa
selama 24 jam dengan cara di lapisan tipis suatu adsorben, misalnya gel
goyang (shaker) dan diulang 3 kali silika dilapiskan pada pelat dan fase mobilnya
adalah berupa campuran pelarut. Sampel
(3 x 24 j am). Setiap 24 jam filtrat diaplikasikan pada pelat kemudian pelat
etanol dipisahkan kemudian diberdirikan dengan ujung bawah dengan
dipekatkan dengan vakum pelarut. Ketika pelarut naik akibat aksi kapiler
evaporator. Ekstrak pekat etanol pada adsorben, komponen sampel terbawa
dengan kecepatan yang berbeda, dapat dilihat
kemudian ditimbang bobotnya. sebagai deretan titik-titik setelah pelatnya
dikeringkan atau diwarnai atau dilihat di
bawah cahaya UV.
Lanjutan...
3. Spektofotometer UV-Vis
Dapat digunakan untuk analisis kuantitatif dalam penentuan
jumlah flavonoid yang terdapat dalam ekstrak metanol.
Spektrum flavonoid biasanya ditentukan dalam larutan dengan
pelarut metanol atau etanol. Spektrum khas flavonoid terdiri atas
dua maksimal pada rentang 230-295 nm (pita II) dan 300-560
nm (pita I). Sebagai pembanding dapat digunakan kuersetin
yang merupakan flavonoid golongan flavonol yang mempunyai
gugus keto pada C-4 dan memiliki gugus hidroksi pada atom C-
3 atau C-5 yang bertetangga dari flavon dan flavonol.
C. JENIS SENYAWA YANG DI ANALISIS
Metabolit sekunder ini antara lain:
 Alkaloid
 Flavonoid
 Kuinon
 Tanin
 Minyak atsiri
D. BAKU PEMBANDING GOLONGAN SENYAWA
1. Untuk Alkaloid
Larutan standar reserpin dengan konsentrasi 25 µg/mL
diambil 4,0 ; 5,0 ; 6,0 ; 7,0 ; 8,0 ; 9,0 ;10,0 mL kemudian
masukkan dalam corong pisah ditambah dengan 5,0 mL dapar
fosfat pH 2,2 dan 5,0 mL larutan BCG, kemudian diekstraksi
dengan 5,0 mL kloroform (2 kali) dan diambil fase kloroform.
Hasil ekstraksi dikumpulkan dalam labu takar 10,0 mL,
kemudian tambahkan dengan kloroform sampai tanda. Kemudian
diperiksa absorbansinya pada panjang gelombang maksimum dan
OT.
LANJUTAN...
2. Untuk Flavonoid
Sebanyak 20 mg sampel ditimbang dan dilarutkan dalam 10
ml etanol sehingga diperoleh konsentrasi 2000 bpj, sebanyak 0,5
ml sampel uji ditambahkan dengan 0,1 ml aluminium (III)
klorida 10%, 0,1 ml natrium asetat 1 M dan 2,8 ml air suling. Di
inkubasi selama 30 menit, absorbansi dari larutan standar
kuarsetin diukur menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada
panjang gelombang 436 nm. Flavonoid total dihitung dengan
menggunakan persamaan regresi linier dari kurva kalibrasi
kuarsetin yang telah diukur sebelumnya.
SUMBER :
› Noer, S., Rosa, D.P., Efri, G. 2014. Penetapan Kadar Senyawa
Fitokimia (Tanin, Saponin Dan FlavonoidSebagai Kuersetin) Pada
Ekstrak Daun Inggu (Ruta angustifolia L.). Jurnal Ilmu-ilmu MIPA.
ISSN: 2503-2364.
› Nurung, S.H.H. 2016. Penentuan Kadar Total Fenolik, Flavonoid, Dan
Karotenoid Ekstrak Etanol Kecambah Kacang Hijau (Vigna Radiata
L.) Menggunakan Spektrofometer Uv-Vis. Fakultas Kedokteran Dan
Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar.
› Salamah, N., Miftahul, R., Muhti, A.A. 2017. Pengaruh metode
penyarian terhadap kadar alkaloid total daun jembirit
(Tabernaemontana sphaerocarpa. BL) dengan metode
spektrofotometri visibel. Pharmaciana. Vol.7, No.1.