BY : DIANA

NIM :

“Effect of Thymoquinone on P53 Gene

Expression and Consequence Apoptosis in Breast
Cancer Cell Line”
“Pengaruh Thymoquinone terhadap Ekspresi Gen
P53 dan Konsekuensi Apoptosis di Sel Kanker
Payudara”
 PENULIS DAN ASAL PENELITIAN

Mehdi Nikbakht Dastjerdi, Ebrahim Momeni

Mehdiabady, Farhad Golshan Iranpour, Hamid
Bahramian
Department of Anatomical Sciences and Molecular
Biology, Medical School, Isfahan University of Medical
Sciences, Isfahan, Iran
 PENDAHULUAN

Nigella sativa telah menjadi faktor penyembuh nutrisi dan

pengobatan alami banyak penyakit selama bertahun-tahun dalam
ilmu kedokteran.
Penelitian sebelumnya telah dilaporkan thymoquinone (TQ),
senyawa aktif dari benihnya, mengandung khasiat antikanker.
Sebelumnya penelitian telah menunjukkan bahwa TQ
menginduksi apoptosis pada sel kanker payudara namun tidak
jelas perannya dari P53 di jalur apoptosis.
 Dengan ini, penelitian ini melaporkan potensi TQ untuk
ekspresi gen supresor tumor P53 dan apoptosis induksi di sel
kanker payudara Michigan Cancer Foundation-7 (MCF-7).
 METODE PENELITIAN

Metode penelitian ini menggunakan metode PCR

Dimana Garis sel MCF-7 dikultur dan diolah dengan TQ, dan 3-
(4,5-dimethylthiazol-2-yl) - 2,5-diphenyltetrazolium bromide
(MTT) dilakukan untuk mengevaluasi setengah-maksimal
nilai konsentrasi inhibitor (IC50) setelah 24 jam pengobatan.
Persentase apoptosis Sel diukur dengan flow cytometry.
Real-time polymerase chain reaction (PCR) adalah dilakukan
untuk memperkirakan ekspresi RNA pembawa pesan dari P53
pada sel MCF-7 yang waktu yang bereda.
 REAKSI RANTAI POLIMERASE REAL-TIME

Efek penghambatan dari 25 μmol / L TQ (berdasarkan indeks IC50) pada

waktu yang berbeda pada ekspresi mRNA P53 pada sel MCF-7.
Ekspresi gen P53 diatur secara dramatis dengan waktu naik, khususnya, pada
72 jam perawatannya Ekspresi meningkat secara signifikan [Gambar 3, P
<0,05].
Menggunakan uji Dunnett, rata - rata ekspresi gen P53 pada
Waktu yang berbeda dibandingkan dengan kelompok kontrol.
Kelompok 48 jam dan 72 jam memiliki perbedaan yang signifikan
kelompok kontrol (* P <0,05).
 PRIMER AND REFERS

Sequences for P53 and GAPDH were as follow:[29]

• PF GAPDH: CACCACCATGGAGAAGGCTGG
• PR GAPDH: CCAAAGTTGTCATGGATGACC
• PF P53: CGAGTCCCGCGGTAATTCTT
• PR P53: TGCAGAAGAGGTGCAAGACC.
 HASIL

Nilai IC50 untuk TQ pada sel MCF-7 adalah 25 μM

yang ditentukan dengan MTT pengujian kadar logam.
Aliran cytometry dan hasil PCR real-time menunjukkan
bahwa TQ dapat menyebabkan apoptosis pada Sel MCF-
7, dan ekspresi gen P53 secara dramatis diatur oleh
waktu naik, masing-masing. Oleh karena itu, ada
perbedaan yang signifikan pada 48 dan 72 jam.
 UJI KONSENTRASI PENGHAMBATAN SETENGAH MAKSIMAL UNTUK
ANALISIS KONSENTRASI HAMBAT MAKSIMAL SETENGAH THYMOQUINONE
DI MICHIGAN CANCER FOUNDATION-7 SEL KANKER SETELAH 24 JAM
PENGOBATAN.
 KESIMPULAN

Hasilnya menunjukkan bahwa efek obat itu signifikan

pada 48 dan 72 jam. Akhirnya, perawatan TQ selama 72
jam harus memanfaatkan ekspresi apoptosis secara
maksimal gen P53 dan itu dilanjutkan dengan aktivitas
apoptosis.
Mengingat sifat obat yang berharga, bisa jadi
Semoga kemunculan strategi baru dalam pertarungan
melawan kanker
TERIMA KASIH