Uji kepekaan kuman

terhadap Antibiotik

ALFITRIANA KHOIRUNNISA
1913453007
RESISTENSI TES

Pemeriksaan ini bertujuan untuk :

1. Untuk mengetahui obat-obat yg paling cocok ( paling poten ) utk
kuman penyebab penyakit, terutama pada kasus-kasus penyakit yang
kronis.
2. Mengetahui adanya resistensi bakteri terhadap berbagai antibiotik .

Resistensi bakteri terhadap antibiotik dapat disebabkan :

● Secara alamiah bakteri resisten terhadap antibiotik yang
diberikan
● Akibat pemberian dosis dibawah dosis yg diberikan.
● Akibat penghentian obat sebelum kuman tersebut benar-benar
mati dengan antibiotik.
01
DIFUSI
 Cara Kirby Bauer
01
Diambil beberapa koloni kuman dari pertumbuhan
24 jam pada agar, disuspensikan ke dalam 0,5 ml
BHI cair, diinkubasikan 4 jam pada 370C
03
Lidi kapas steril dicelupkan kedalam suspensi
kuman lalu ditekan-tekan pada dinding tabung
hingga kapasnya tidak terlalu basah,kemudian
dioleskan pada permukaan media hingga rata.
02
Suspensi tersebut disamakan kekeruhannya
dengan standar mac farland. Jika lebih keruh
dari standar mf tambah dengan aquadest steril,
sampai kekeruhannya sama dengan mac
farland. / 10 CFU/ ml
8
04
Kemudian diletakkan disk antibiotik , dengan jarak antar
disk 15-20 mm. Interpretasi hasil :
Zona radikal :
Suatu daerah disekitar, sama sekali tdk ada pertumbuhan
bakteri.
Zona iradikal :
Suatu daerah di sekitar disk menunjukkan pertumbuhan
bakteri dihambat oleh antibiotik tsb, tetapi tdk
dimatikan.
Cara sumuran
a – c = Kirby Bauer
Pada agar tersebut dibuat
sumuran dengan diameter ttt.
Kedalam sumuran larutan
antibiotik yang akan diujikan.
Diinkubasi 370C selama 18 – 24
jam.
Hasilnya dibaca = cara Kirby
Bauer.
Cara pour plate
a – b = Kirby Bauer
01
Dengan menggunakan ose
02
Homogenkan suspensi
khusus, diambil 1 mata ose bakteri, kemudian dituang
dan dimasukkan 4 ml agar pd media Mueller Hinton
base 1,5 % pada suhu 560C . agar.

Tunggu
03 sampai agar
04
Inkubasi suhu 370C selama 18 – 24 jam.
membeku, lalu letakkan disk Baca hasilnya sesuai dengan standart masing-
antibiotik masing antibiotik.
02
DILUSI
Berbagai cara Resistensi tes :
Dilusi cair atau dilusi padat :
Prinsip : antibiotik diencerkan hingga beberapa konsentrasi .
Untuk dilusi cair :
masing-masing konsentrasi obat ditambah suspensi kuman dalam
media cair .
Untuk dilusi padat :
tiap konsentrasi obat dengan media agar lalu ditanami kuman.
 Tujuan pengujian ini untuk mengetahui :

● Konsentrasi minimal dari antibiotik /kombinasi antibiotik/bahan lain yg

mampu menghambat pertumbuhan bakteri.
● Daya hambat dinyatakan dalam KHM ( kadar hambat minimal ) atau MIC
( minimal inhibition consentration ) dan KBM ( kadar bunuh minimal )
atau MBC ( minimal bacteriocid consentration ).
● KHM 99,9 % : < 0,1 % bakteri yg diinokulasi tetap hidup
● KHM 90 % : < 10 % bakteri yg diinokulasi tetap hidup
● KHM 50 % : < 50 % bakteri yg diinokulasi tetap hidup
● Kadar antibiotik dalam serum atau cairan tubuh.
 Pembuatan larutan induk
Cara pengujian : Konsentrasi antibiotik dalam larutan induk adalah
100 mg antibiotik aktif/ml. Setiap jenis antibiotik
menggunakan pelarut dan pengencer yg berbeda-
beda
Cara membuat pengenceran
A. Broth dilution :
1. Ditimbang 50 mg obat didalam
erlenmeyer steril + kan pelarut sampai 50
ml, ini menjadi larutan obat yg akdarnya
1000mcg/ml.
2. Larutan obat tsb dipipet 2 ml + 8 ml BHI
broth. Diperoleh larutan dgn kadar 200
mcg/ml. Selanjutnya dibuat pengenceran
sbb:
Cara Agar dilution :
1. Satu jenis obat yg digunakan dibuat larutan dengan pelarutnya sehingga kadar ttt. Misalnya 100
mcg/m
2. Disediakan beberapa labu media agar yg cocok, steril suhu 50 0C dengan vol.ttt
3. Kemudian masing2 di+kan larutan obat dgn vol yg berbeda-beda, kemudian dituang kedlm
petridis steril.
TERIMAKASH