3/17/2011

PERTEMUAN 2

Kromatografi ?
Manfaat teknik kromatografi?
Parameter dalam kromatografi ?
Elusi, eluat, eluen?

3/17/2011

Pemisahan campuran

Identifikasi
Analisis kuantitatif
Analisis preparatif

inte
nsit
as

Waktu retensi (tr), menit

Parameter yang digunakan:

waktu retensi (tr)
volume retensi (Vr)

3/17/2011

Waktu retensi (tr)

Volume retensi (Vr)
Faktor kapasitas (k)
Efisiensi kolom (N, H)
Faktor pemisahan/
I/
selektivitas ()
A
Resolusi (R)

Waktu retensi (tr), menit

Soal :
tr (1) = 2,3 menit
Tr (2) = 5,3 menit
Tr (3) = 10,7 menit
Tr(0) = 0,97 menit

Hitung faktor
kapasitas masingmasing.
Apa artinya?

Faktor kapasitas, k`
t t
r
r (0)
k `
t
r (0)
tr(o)= waktu retensi senyawa yang tidak
tertahan dalam kolom
= waktu retensi fasa gerak

3/17/2011

Efisiensi kolom

Soal :

Tr = 2,5 menit

Ukuran efisiensi:

Tr = 2,5 menit

Jumlah pelat (N) atau

H (HETP)
Puncak (1) :
Tr (1) = 2,5 menit
W (1) = 5 menit
Tr (2) = 2,5 menit
W (2) = 0,2 menit
L = 12,5 cm

Puncak mana yg menghasilkan

efisien kolom yang lebih baik?

t
t
N 16( r )2 5,54( r )2
W
w1 / 2

HETP = L/N
High Equivalent to Teoritical Plate
= tinggi pelat teori

Kolom efisien: N besar, HETP kecil

3/17/2011

Perbedaan distribusi komponen

diantara fasa gerak dan fasa diam
yang menyebabkan migrasi diferensial
komponen-komponen analit dalam kolom
kromatografi

Kemampuan kolom untuk

membedakan suatu komponen dari
komponen lain
Dasar : perbedaan harga faktor
kapasitas

3/17/2011

1. Faktor Selektivitas ( )

K2
K1

K adalah Koef partisi komponen

1 dan 2

'
t
t
r ( 2)
r (0)
r2

t
t
t'
r (1)
r (0)
r1
t

Untuk Pemisahan:
>>1

11

3,2

4,5

T0= 0,99
Tr, menit

:
menjamin pemisahan bagian atas
kromatogram

(puncak)

Tidak memperhitungkan overlap puncakpuncak

Parameter lain : R (resolusi)

12

3/17/2011

RESOLUSI

Soal
Bagaimana kalau
puncaknya seperti ini?

t r ( 2 ) t r (1)
1
( w1 w2 )
2

Rs

W1/2

Rs

2(t r ( 2 ) t r (1) )
1,699( w1 / 2 (1) w1 / 2 ( 2 ) )

Rs ideal = 1,25
(97,5% terpisah)
14

3/17/2011

Cara lain menghitung Rs :

memperhitungkan
selektivitas
efisiensi
faktor kapasitas
k`
1
1
(
)(
)
4 1 k`

Faktor
kapasitas

Faktor
selektivitas

N
Faktor
efisiensi

15

Data retensi campuran 3 senyawa adalah sebagai

berikut:
(1)

(2)

(3)

(0)

Tr

3,50

4,9

6,8

0,23

W1/2

0,04

0,5

0,8

k
R