BAB 3.

METODOLOGI PRAKTIKUM

3.1 Alat dan Bahan

3.1.1 Alat
a. Tabung reaksi dan raknya
b. Cawan petri
c. Pipet ukur 1 ml
d. Pipet ukur 5-10 ml
e. Pipet volume 1,5,10, dan 25 ml
f. Inkubator
g. Kuvet spektrofotometer
h. Lampu Bunsen dan sinar UV
i. Colony counter
j. Neraca analitk
k. Botol semprot
l. Oven
3.1.2 Bahan
a. Tape singkong
b. Tape ketan
c. Tempe
d. Daging ayam
e. Sosis
f. OMEA
g. PDA
h. PCA
i. Na-Ca
j. Aquades
k. Alcohol
l. Biakan khamir dalam agar miring Na
3.2 Skema Kerja dan Fungsi Perlakuan
3.2.1 Skema Kerja Penyiapan Kurva Standar

4 Biakan khamir

Pengenceran 50 ml

Tahap preparasi awal

Pengambilan 1,2,3,4,5,6,7 ml
Beaker glass 50 ml

Pengenceran sd 10 ml
Pengovenan 30 menit

Penghitungan adsorbansi
Eksikator 15 menit λ 600 nm

Penimbangan (a gram) 20 ml

Pengovenan 70˚ 4-5 jam

Eksikator 15 menit

Penimbangan (b gram)
3.2.2 Skema Kerja Penyiapan Sampel dalam MEB

2 ose isolat S. + gula

cerevisiae 1,25 g/25 ml
MEB 25 ml
Shaker suhu ruang 48 jam

Sentrifuse (@12,5 ml)

Endapan

Pencucian aquades

Sentrifuse 2x

Endapan

Penambahan aquades

Vortex

Tera labu takar 25

ml
Homogenisasi

Pengambilan cuplikan 1 ml

Peneraan 10 ml

Adsorbansi λ 600 nm
3.2.3 Skema Kerja Perhitungan Jumlah Koloni

0,1 ml 0,1 ml 1 ml 1 ml 1 ml

1 gr
1 ml

9 ml 9,9 ml 9,9 ml 9 ml 9 ml 9 ml
10-1 10-3 10-5 10-6 10-7 10-8 PCA
1 ml 1 Na-Ca
1 ml
ml -8
10

PDA PDA PDA

OMEA PCA PCA
-5
10 OMEA OMEA
-6
10 10-7