Ekstraksi dan Isolasi

Metabolisme
sekunder Tanaman

Yohanes Susanto NIM : 16.44238.1010

Ekstraksi adalah pemisahan bagian aktif dari
tumbuhan atau hewan jaringan dari komponen aktif
dengan menggunakan pelarut selektif dalam prosedur
ekstraksi standar.
Produk yang diperoleh dari tanaman adalah cairan
yang relatif tidak murni, semisolid atau serbuk yang
ditujukan hanya untuk penggunaan oral atau
eksternal.
Termasuk decoctions (jamu-jamu rebusan, infus,
ekstrak cairan, tincture, pilular (setengah padat)
ekstrak dan ekstrak bubuk.
Tujuannya adalah untuk mencapai bagian yang
diinginkan secara terapi dan untuk menghilangkan
bahan lemah dalam pengobatan menggunakan
pelarut selektif yang dikenal sebagai menstrum.

Jens Martensson 1
Metode Ekstraksi Tanaman Obat
Teknik Ekstraksi Teknik Ekstraksi Baru
• Maserasi • Ekstraksi Ultrasound
• Infusa • Ekstraksi Cairan
Superkritis
• Digestasi
• Proses Phytonics
• Dekokta
• Ekstraksi Microwave
• Perkolasi
• Soxhlet (penyarian
berulang)
• Ekstraksi alkohol Berair
dengan Fermentasi
• Ekstraksi arus balik
• hidrodistilasi

Jens Martensson 2
A. Maserasi
• Maserasi adalah teknik lama digunakan
untuk persiapan obat maserasi adalah
metode ekstraksi padat-cair di mana
senyawa bioaktif (zat terlarut) dalam bahan
tanaman diekstraksi dengan merendam
bahan tanaman dalam pelarut tertentu untuk
jangka waktu. Khasiat proses maserasi
ditentukan oleh dua faktor utama, kelarutan
dan difusi efektif (Choon;2014).
• Dalam proses ini, seluruh atau simplisia
kasar bubuk ditempatkan dalam wadah
bertutup dengan pelarut dan didiamkan
pada suhu kamar untuk jangka waktu
minimal 3 hari sambil diaduk sampai materi
larut larut. Campuran kemudian disaring,
ditekan, dan setelah itu dilakukan
penyaringan.

Jens Martensson 3
 Keuntungan dan Kerugian Maserasi

Keuntungan
• Maserasi merupakan metode
sederhana menggunakan alat
dan peralatan yang tidak rumit
dan untuk alasan ini adalah
pilihan yang populer bagi para
peneliti.
Kerugian
• Durasi waktu ekstraksi panjang
dan kadang-kadang memakan
waktu sampai minggu (Choon;
2014).

Jens Martensson 4
B. Infusa
• Dalam metode ini, ekstraksi dengan cara
merendam padatan tanaman bubuk dingin
atau air mendidih untuk waktu singkat
(Bimakr; 2010).
• Infusa adalah sediaan cair yang dibuat
dengan menyari simplisia nabati dengan air
pada suhu 90’C selama 15 menit, kecuali
dinyatakan lain, dilakukan dengan cara
sebagai berikut : simplisia dengan derajat
kehalusan tertentu dimasukkan kedalam
panci dan ditambahkan air secukupnya,
panaskan diatas penangas air selama 15
menit, dihitung mulai suhu 90oC sambil
sesekali diaduk, serkai selagi panas melalui
kain flanel, tambahkan air panas
secukupnya melalui ampas sehingga
diperoleh volume infus yang dikehendaki.

Jens Martensson 5
C. Digestasi
• Digestasi adalah proses penyarian yang
sama seperti maserasi dengan
menggunakan pemanasan pada suhu 30’-
40’C. Metode ini digunakan untuk simplisia
yang tersari baik pada suhu biasa.
• Cara ini hanya dapat digunakan untuk
simplisia yang zat aktifnya tahan terhadap
pemanasan.

Jens Martensson 6
D. Dekokta
• Dalam proses ini, simplisia direbus dalam
volume tertentu air untuk waktu yang
ditentukan; itu kemudian didinginkan dan
disaring atau disaring.
• Proses ini biasanya digunakan dalam
persiapan ekstrak Ayurvedic disebut
“quath” atau “kawath”.
• Selama perebusan, air suling ditambahkan
ke ekstrak kering dan campuran mengalami
pemanasan terus-menerus selama periode
waktu pada suhu 100 ° C.
• Dekokta membutuhkan waktu pemanasan
yang lebih lama dibanding metode infus,
yaitu 30 menit dihitung setelah suhu
mencapai 90’C. Metoda ini jarang digunakan
karena proses penyarian kurang sempurna
dan tidak dapat digunakan untuk
mengekstraksi senyawa yang termolabil.

Jens Martensson 7
 Keuntungan dan Kerugian Dekokta

Keuntungan Kerugian
• Metode ini tidak memerlukan • Tidak disarankan untuk
peralatan yang banyak dan ekstraksi konstituen yang
mahal dan mudah untuk sensitif panas.
melakukan.

Jens Martensson 8
E. Perkolasi
• Prosedur yang paling sering digunakan untuk
mengekstrak bahan aktif dalam penyusunan tincture dan
ekstrak cairan.
• Prinsip Perkolator :
1. Dilakukan dg merendam 10 bagian sampel dg derajat kehalusan
tertentu dg cairan penyari sebyk 2,5- 5 bagian, perendaman
sekurang-kurangnya selama 3 jam dalam bejana tertutup.
2. Pindahkan masa sedikit demi sedikit ke dlm perkolator, sambil
sesekali ditekan secara hati-hati, tuang dg cairan penyari
secukupnya hingga cairan penyari menetes (bahan harus
terendam cairan penyari).
3. Tutup perkolator biarkan selama 24 jam. Biarkan cairan menetes
selam 1 ml/menit, tambahkan berulang-ulang cairan penyari
secukupnya hingga diperoleh 100 bagian perkolat.
4. Tutup dan biarkan selama 2 hari ditempat sejuk dan terlindung
dari cahaya.
5. Pada cara ini pelarut dialirkan melewati sampel sehingga
penyarian lebih sempurna. Tapi metoda ini membutuhkan
pelarut yang relatif banyak.

Jens Martensson 9
F. Soxhlet (penyarian berulang)
• Ekstraksi Soxhlet adalah metode yang sederhana
dan nyaman untuk siklus jauh berulang ekstraksi
dengan pelarut segar sampai kelelahan lengkap
dari zat terlarut dalam bahan baku (Grigonis et al.,
2005)
• Terdiri dari pemanasan solusi hingga mendidih
dan kemudian dikondensasi mengirim kembali ke
labu asli (Bart; 2011).
• Prinsip Sokletasi :
Prinsipnya adalah penyarian yang dilakukan
berulang-ulang sehingga penyarian lebih sempurna
dan pelarut yang digunakan relatif sedikit. Bila
penyarian telah selesai maka pelarutnya dapat
diuapkan kembali dan sisanya berupa ekstrak yang
mengandung komponen kimia tertentu. Penyarian
dihentikan bila pelarut yang turun melewati pipa
kapiler tidak berwarna dan dapat diperiksa dengan
pereaksi yang cocok.

Jens Martensson 10
 Keuntungan dan Kekurangan Soxhlet

Keuntungan Kekurangan
• Sejumlah besar obat dapat diekstraksi
dengan kuantitas yang jauh lebih kecil dari • Durasi panjang dan jumlah ekstraksi
pelarut. Ini efek ekonomi yang luar biasa yang tinggi pelarut dikonsumsi, yang
dalam hal waktu dan biaya. menyebabkan kerugian ekonomi dan
• Sampel cepat berkomunikasi dengan porsi masalah lingkungan.
pelarut segar, yang membantu untuk • Tidak cocok untuk senyawa- senyawa
memindahkan keseimbangan untuk transfer
pelarut. yang tidak stabil terhadap panas
(senyawa termolabil), contoh : Beta
• Sampel terekstraksi secar sempurna, karena karoten.
dilakukan berulang kali dan kontinu.
• Pelarut yang digunakan tidak akan habis,
karena selalu didinginkan dengan kondenser
dan dapat digunakan lagi setelah hasil isolasi
dipisahkan.

Jens Martensson 11
G. Ekstraksi Alkohol berair dengan Fermentasi

• Prosedur ekstraksi melibatkan merendam

simplisia, dalam bentuk baik bubuk atau rebusan (
kasaya), untuk jangka waktu tertentu dan
menghasilkan alkohol, sehingga berfungsi
sebagai pengawet.
• Jika fermentasi dilakukan dalam bejana dari tanah
liat, maka bejana tersebut sebaiknya bukan yang
baru atau bejana tersebut harus pernah
digunakan terlebih dahulu untuk merebus air.
• Dalam skala besar, tong kayu, ceret porselin atau
tangki dari logam digunakan sebagai pengganti
bejana dari tanah liat. Dalam Aryuveda, teknik
ekstraksi ini belum dibakukan. Namun dengan
perkembangan teknologi fermentasi yang
semakin mutakhir, teknik ekstraksi ini dapat
dibakukan dalam produksi bahan aktif dari
tanaman obat.

Jens Martensson 12
H. Ekstraksi Arus Balik
• Bahan baku basah ditumbuk menggunakan
disintegrators disc bergigi untuk
menghasilkan bubur halus.
• Bahan yang akan diekstraksi dipindahkan
dalam satu arah (biasanya dalam bentuk
bubur halus) dalam extractor silinder di
mana terjadi kontak dengan pelarut ekstraksi.
Proses ekstraksi ini memiliki keuntungan yang
signifikan:
• Jumlah unit bahan tanaman dapat
diekstraksi dengan volume jauh lebih kecil
dari pelarut dibandingkan dengan metode
lain seperti maserasi, rebusan, perkolasi.
• CCE umumnya dilakukan pada suhu kamar,
cocok untuk sediaan yang thermolabil.
• Penumbukan obat dilakukan di bawah
kondisi basah, panas yang dihasilkan
selama kominusi dinetralkan oleh air, cocok
untuk sediaan yang thermolabil.
• Prosedur ekstraksi telah dinilai lebih efisien
dan efektif daripada ekstraksi panas terus-
menerus.
Jens Martensson 13
I. Hidrodistilasi
• Destilasi air adalah metode tradisional untuk
ekstraksi tanaman metabolit yang tidak
digunakan pelarut organik.
• Bahan tanaman yang dikemas dan
ditambahkan air dalam jumlah yang cukup,
dan kemudian dipanaskan hingga mendidih.
• Air panas dan uap bertindak sebagai faktor
yang berpengaruh utama untuk
membebaskan senyawa bioaktif dari
jaringan tanaman.
• Kekurangannya adalah :
Suhu ekstraksi yang tinggi dapat
menyebabkan kehilangan beberapa
komponen volatil sehingga membatasi
penggunaannya untuk ekstraksi senyawa
yang sensitif terhadap panas.

Jens Martensson 14
J. Ekstraksi Ultrasound

• Prosedur ini melibatkan penggunaan

ultrasound dengan frekuensi mulai dari 20
kHz sampai 2000 kHz yang meningkatkan
permeabilitas dinding sel dan menghasilkan
kavitasi.
• Proses ini berguna dalam beberapa kasus,
seperti ekstraksi akar rauwolfia, aplikasi
skala besar adalah terbatas karena biaya
yang lebih tinggi.
• Proses ekstraksi tergantung pada ukuran
partikel ekstrak tanaman, kadar air dan
pelarut yang digunakan.

Jens Martensson 15
 Keuntungan dan Kekurangan Ekstraksi Ultrasound

Keuntungan Kekurangan
• Pengurangan waktu ekstraksi,
energi dan penggunaan pelarut, • Teknik ini memiliki efisiensi yang
pencampuran lebih efektif, transfer lebih rendah dibandingkan dengan
energi lebih cepat, mengurangi teknik lainnya.
ukuran peralatan, respon lebih • Efek merusak energi ultrasound
cepat untuk memproses kontrol (lebih dari 20 kHz) pada tanaman
ekstraksi, obat melalui pembentukan radikal
bebas dan perubahan yang tidak
diinginkan dalam molekul obat.

Jens Martensson 16
K. Ekstraksi Cairan Superkritis
• Ekstraksi fluida superkritis (SFE) merupakan
metode persiapan sampel alternatif dengan tujuan
umum mengurangi penggunaan pelarut organik.
• Faktor-faktor yang perlu dipertimbangkan adalah
suhu, tekanan, volume sampel, koleksi analit,
pengubah (cosolvent).
• Beberapa pelarut dapat digunakan untuk SFE,
seperti, heksana, pentana, butana, nitrous oxide,
sulfur heksafluorida, dan hidrokarbon fluorinated.
Karbon dioksida adalah pelarut ekstraksi yang
paling umum digunakan di SFE.
• Akhir-akhir ini, bukan hanya karbon dioksida,
namun argon sedang digunakan karena murah dan
lebih inert. Tingkat pemulihan komponen umumnya
meningkat dengan meningkatnya tekanan atau
suhu: tingkat pemulihan tertinggi dalam kasus
argon diperoleh pada 500 atm dan 150 ° C.

Jens Martensson 17
 Keuntungan dan Kekurangan Ekstraksi Cairan Superkritis

Keuntungan Kekurangan
• Cairan superkritis memiliki koefisien difusi yang • Kerugian utama ekstraksi
lebih tinggi dan viskositas dan tegangan
permukaan yang lebih rendah daripada pelarut cair, superkritis terutama menyangkut
yang mengarah ke lebih banyak penetrasi ke aspek ekonomi karena metode ini
matriks sampel. dan transfer massa yang dianggap lebih mahal daripada
menguntungkan.
proses ekstraksi tradisional (Wang
• Waktu ekstraksi dapat dikurangi secara substansial dan Waller; 2006).
oleh SFE dibandingkan dengan metode
konvensional • Teknologi ini memerlukan
• Selektivitas cairan superkritis lebih tinggi dari konsumsi energi yang tidak dapat
pelarut cair karena daya solvasinya dapat disetel diabaikan untuk menetapkan
baik dengan mengubah suhu dan / atau tekanan; tekanan dan suhu selama langkah-
• Pemisahan zat terlarut dari pelarut dalam proses langkah yang berbeda (ekstraksi,
ekstraksi konvensional dapat dengan mudah pemisahan, dan daur ulang
dilewati oleh depresurisasi cairan superkritis, yang
akan menghemat waktu pelarut).
• SFE adalah metode yang cocok untuk senyawa
thermo labil karena dioperasikan pada suhu kamar.
• Daur ulang dan penggunaan kembali cairan
superkritis dimungkinkan dan dengan demikian
meminimalkan timbulan sampah.

Jens Martensson 18
L. Proses Phytonics
• Merupakan teknologi baru dengan pelarut baru
yaitu hydrofluorocarbon-134a yang
mengoptimalkan sifat yang luar biasa dari ekstraksi
bahan tanaman yang menawarkan keuntungan
lingkungan yang signifikan, manfaat kesehatan dan
keselamatan atas proses tradisional untuk produksi
kualitas tinggi minyak wangi alami, rasa dan ekstrak
biologis.
• Sifat-sifat pelarut fluorokarbon generasi baru telah
diterapkan pada ekstraksi bahan tanaman.
• Inti dari pelarut adalah 1,1,2,2-tetrafluoroetana, lebih
dikenal sebagai hydrofluorocarbon-134a (HFC-
134a).
• Proses phytonik dapat digunakan untuk ekstraksi
dalam bioteknologi (misalnya untuk produksi
antibiotik), dalam industri obat herbal, dalam
industri makanan, minyak atsiri dan rasa, dan dalam
produksi produk-produk aktif farmakologi lainnya.
Keuntungan dari Proses:
• Tidak seperti proses lain yang menggunakan suhu
tinggi, proses phytonik itu dingin dan lembut dan
produknya tidak pernah rusak oleh paparan suhu
yang melebihi ambien.
• Tidak diperlukan pengupasan vakum yang, dalam
proses lain, menyebabkan hilangnya volatil
berharga.
• Proses ini dilakukan sepenuhnya pada pH netral
dan, tanpa adanya oksigen, produk tidak pernah
mengalami kerusakan atau oksidasi hidrolisis asam.
• Teknik ini sangat selektif, menawarkan pilihan
kondisi operasi dan karenanya pilihan produk akhir.
• Tidak terlalu mengancam lingkungan.
• Pelarut yang digunakan dalam teknik ini tidak
mudah terbakar, beracun atau ozon yang menipis.
• Pelarut benar-benar didaur ulang di dalam sistem.
Jens Martensson 19
M. Ekstraksi Microwave
• Metode yang digunakan untuk ekstraksi produk
larut ke dalam cairan dari berbagai bahan
menggunakan microwave (medan
elektromagnetik non-pengion dalam rentang
frekuensi dari 300 MHz ke 300 GHz) energi.
• Prinsip pemanasan menggunakan microwave
didasarkan pada dampak langsung terhadap
bahan polar, energi elektromagnetik dikonversi
menjadi panas berikut konduksi ionik dan
mekanisme rotasi dipol.
• Mekanisme ekstraksi microwave dibantu
ekstraksi melibatkan tiga langkah :
1. zat terlarut dari situs aktif dari matriks sampel
dipisahkan di bawah peningkatan suhu dan tekanan
2. pelarut disebarkan di seluruh matriks sampel
3. zat terlarut dilepaskan dari matriks sampel untuk pelarut
(Alupului; 2012)

Jens Martensson 20
 Keuntungan dan Kekurangan Ekstraksi Microwave

Keuntungan Kekurangan

• Metode MAE sedikit memakan waktu, • Suhu operasi teknik ini relatif
pelarut, dan memiliki mekanisme tinggi (100 - 150 ° C), yang
pemanasan khusus (Heng et al., 2013). menyebabkan masalah ketika
digunakan untuk ekstraksi
antioksidan .
• Teknik ini menyajikan hasil yang
rendah ketika zat terlarut atau
pelarut nonpolar membutuhkan
tahap penyaringan atau
sentrifugasi untuk menghilangkan
residu padat dari ekstrak.

Jens Martensson 21
Parameter untuk Memilih Metode Ekstraksi tepat
 Otentikasi bahan tanaman harus dilakukan sebelum melakukan ekstraksi.
 Gunakan bagian tanaman yang tepat untuk tujuan kontrol kualitas, catat usia tanaman dan waktu, musim dan
tempat pengumpulan.
 Kondisi yang digunakan untuk mengeringkan bahan tanaman sangat bergantung pada sifat konstituen
kimianya. Aliran udara panas atau dingin untuk pengeringan umumnya lebih disukai. Jika obat mentah
dengan kadar air yang tinggi akan digunakan untuk ekstraksi, koreksi berat badan yang sesuai harus
dimasukkan.
 Metode penggilingan harus ditentukan dan teknik yang menghasilkan panas harus dihindari sebisa mungkin.
 Serbuk bahan tanaman harus dilewatkan melalui saringan yang cocok untuk mendapatkan partikel yang
dibutuhkan ukuran seragam.
 Sifat konstituen:
A. Jika nilai terapeutik terletak pada konstituen non-polar, pelarut non-polar dapat digunakan.
B. Jika konstituennya adalah thermolabile, metode ekstraksi seperti maserasi dingin, perkolasi dan CCE
lebih disukai.
C. Tindakan pencegahan yang sesuai harus diambil ketika berhadapan dengan konstituen yang
terdegradasi saat disimpan dalam pelarut organik, mis. flavonoid dan propanoid fenil.
D. Dalam hal ekstraksi panas, lebih tinggi dari suhu yang diperlukan harus dihindari.
E. Standarisasi waktu ekstraksi penting.
F. Jumlah ekstraksi yang diperlukan untuk ekstraksi lengkap sama pentingnya dengan durasi setiap
ekstraksi.

Jens Martensson 22
Identifikasi dan Teknik Karakterisasi
Teknik kromatografi
Kromatografi adalah teknik untuk pemisahan dan / atau identifikasi komponen dalam campuran. Prinsip
dasarnya adalah bahwa komponen dalam campuran memiliki kecenderungan yang berbeda untuk
menyerap ke permukaan atau larut dalam suatu pelarut.
 Kromatografi Gaz (GC)
GC paling berguna untuk analisis jumlah jejak senyawa yang dapat diekstraksi secara organik, non-polar, mudah menguap
dan sangat mudah menguap. Selain itu, penggunaan GC-MS dalam mode scan memungkinkan untuk profiling metabolik non-
target dan penemuan senyawa dan metabolit baru.
 Kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC)
HPLC adalah teknik kromatografi serbaguna, kuat, dan banyak digunakan untuk isolasi produk alami, HPLC dapat
memisahkan campuran senyawa dan digunakan dalam kimia fitokimia dan analitik untuk mengidentifikasi, mengukur dan
memurnikan individu komponen campuran .Entitas aktif secara biologis sering hadir hanya sebagai komponen minor dalam
ekstrak dan kekuatan penyelesaian HPLC sangat ideal untuk pemrosesan cepat dari sampel multikomponen tersebut baik
pada skala analitik dan preparatif.
 Kromatografi lapis tipis (TLC)
TLC adalah metode umum untuk analisis herbal karena kesederhanaan, kecepatan dan ekonominya. Keuntungan utama dari
TLC adalah dapat memberikan gambar cahaya dan gambar fluoresensi, yang merupakan satu parameter visual lebih dari
Chromatogram, dan juga memberikan tingkat profil yang berbeda dan data integral yang sesuai dengan pemindaian
kromatografi dan pemrosesan digital. Tapi analisis TLC juga memiliki kekurangan: resolusi rendah, sensitivitas rendah dan
kesulitan mendeteksi komponen jejak.

Jens Martensson 23
Identifikasi dan Teknik Karakterisasi

Teknik non-kromatografi pada pemeriksaan skrining fitokimia

 Phytoconstituents hadir di tanaman disebut metabolit sekunder. Mereka dapat dideteksi dalam ekstrak
tumbuhan dengan uji kimia yang berbeda (skrining fitokimia). Skrining fitokimia adalah prosedur
sederhana, cepat, dan murah yang memberikan peneliti jawaban cepat untuk berbagai jenis fitokimia
hadir dalam ekstrak mentah atau fraksi aktif dari bahan tanaman.

Jens Martensson 24
Launch