PENETAPAN KADAR VITAMIN B1 DAN B2 SECARA HPLC MENGGUNAKAN KURVA BAKU

Metode Pengujian :
Buat deret konsentrasi baku ---> timbang 10 mg --> labu 100 mL
pipet 10 mL --> ad 100 mL
buret, ambil 1, 2, 4, 8 mL --> ad 100 mL
ambil 1.2 dan 1.6 mL --> ad 10 mL
5 g sampel di larutkan dalam labu 100 mL, disaring --> inject 20 µL

Cx(kurva baku) x F
Rumus : Csp =
W

Perhitungan ketidakpastian

Cx F
T
µ kurva kalibrasi µ kalibrasi V

Cspl
µ kalibrasi mg presisi timbangan

W Presisi metode

1. Ketidakpastian asal kurva baku

Sy/x √1 + 1 + (ysampel - yrata2)2
Sx =
b n b2∑[xi-xrata2]2
Sy/x = √ ∑(yi-yc)2/(n-2)
∑ (xi-x) (yi-y)
b=
∑ (xi-x)2
Persamaan kurva baku : y = 63062,0364x+52729,1997
Kadar Area Kadar-Rata2 Area-Area Rata2
Xi yi xi-x (xi-x)2 yi-y (yi-y)2 (xi-x) * (yi-y) yc
19.711 1264242 -101.3695 10275.7842 -6424153.29 41269745438353.70 651213481.82
39.422 2503827 -81.6585 6668.1176 -5184568.29 26879748309234.40 423364291.55
78.844 5079703 -42.2365 1783.9256 -2608692.29 6805275441545.22 110182143.53
118.266 7571129 -2.8145 7.9217 -117266.29 13751381765.22 330050.99
157.688 9966556 36.6075 1340.1059 2278160.71 5190016240114.80 83397670.71
197.1009 12490835 76.0204 5779.0947 4802439.71 23063427209348.70 365083182.24
236.5319 14942475 115.4514 13329.0159 7254079.71 52621672501211.50 837493347.84
∑ 847.5638 53818767 39183.9655 2471064168.6719
Rata-Rata 121.0805 7688395.29

Ketidak pastian Garis Regresi (Sy/x) Akar ∑(Y1-Yc)2 / (n-2)

Xi yi Yc (Yi-Yc) (yi-yc)2
1 19.711 1264242 1295745 -31503 992438957
2 39.422 2503827 2538761 -34934 1220370289
3 78.844 5079703 5024792 54911 3015174254
4 118.266 7571129 7510824 60305 3636693437
5 157.688 9966556 9996856 -30300 918065490
6 197.1009 12490835 12482313 8522 72618860
7 236.5319 14942475 14968912 -26437 698940733
∑ 847.5638 53818767 563.3952 10554302020 2110860403.96154 ∑(Y1-Yc)2 / (n-2)
Rata-Rata 121.0805 7688395.29 45944.1008613895 (Sy/x) atau µ regresi kurva baku

Sampel Xi yi Xi-Xrata Yi-Yrata (Xi-Xrata)2 (Yi-Yrata)2

1 217.91 1402607 0.79 -36470 0.62 1330085213
2 216.16 1455383 -0.96 16306 0.93 265874765
3 217.3 1459242 0.18 20165 0.03 406613782
Jml 651.37 4317232 0.0000 0.0000 1.5781 2002573760.6667
Rata-Rata 217.1233 1439077 0.0000 0.0000 0.5260 667524586.8889

S y/x (Y sampel-Yrata2)2
Sx = √ 1+(1/n)+
b b2 ∑(Xi-Xrata)2
= 0.728554 1.2854701938
= 0.94
b= 2471064168.6719
121.0805
20408433.183087
2. Ketidakpastian asal penimbangan
µ kalibrasi timbangan (T2) = 0.15 mg
Presisi timbangan (s) = 0.000089 mg

Dari sertifikat kalibrasi diperoleh : ± 0.15 mg,

µ sertifikat
µ kalibrasi =
2

0.15
µ kalibrasi =
2
= 0.08
Dari data presisi penimbangan (S) = 0.000089 mg

µ massa = √(0.08)2 + (0.000089)2

= √(0.0064 + 7.921E-09 )
= 0.080

3. Ketidakpastian asal volume

µ kalibrasi labu 10 mL = 0.025 mL
Presisi labu (s) = 0.09 mL

Dari sertifikat kalibrasi diperoleh : ± 0.025 mg,

µ kalibrasi = µ sertifikat
2

µ kalibrasi = 0.025
2
= 0.01
Dari data presisi penimbangan (S) = 0.09 mL

Ekspansi vol air umum lab = 4o C suhu pengukuran : 27.1

Koefisien muai air = 2.1 x 10-4/der C
Volume air : 10 mL
Ekspansi air = 10 mL x 7.1 x 2.1 x 10-4
= 0.01491
µ efek T = 0,01491/1,96
= 0.0076

µ volum = √(0.01)2 + (0.09)2 + (0.0076)2

= √(0.0001 + 0.0081 + 5.776E-05
= 0.09

Ketidak Pastian Gabungan

Sumber Nilai x Satuan µx Sat µx/X (µx/X)2
Bobot spl 1 mg 0.08 mg 0.08 0.0064
Cx 217.3 mg/kg 0.86 mg/kg 0.00 0.0000
F 10 0.09 0.01 0.0001

µCs
= √(µx/X)2+(µCx/CX)2+(µf/f)2
Cs
0.08

Ketidak Pastian Diperluas (µe) = 2 x µCs/Cs

= 0.16
 PERHITUNGAN KETIDAKPASTIAN
PENETAPAN KADAR ACESULFAM DALAM SOFT DRINK SECARA HPLC MENGGUNAKAN KURVA BAKU

Metode Pengujian :
1. Buat deret konsentrasi baku ---> timbang 100 mg --> labu 100 mL
buret 10, ambil 0,5; 1; 2; 3; 4; 5; 6 mL --> ad 25 mL

2. Sampel : 1 g sampel di larutkan dalam labu 10 mL, disaring --> inject 20 µL Perhitungkan semua penimbangan, p

Cx(kurva baku) x F
Rumus : Csp =
W

Perhitungan ketidakpastian

Cx F
T
µ kurva kalibrasi µ kalibrasi V

Cspl
µ kalibrasi mg presisi timbangan

W Presisi metode

1. Ketidakpastian asal kurva baku

Persamaan kurva baku : y = bx + a
= 63062,0364x+52729,1997
Ketidak pastian Garis Regresi ((Sy/x)) = √ ∑(Y1-Yc)2 / (n-2)
N Xi yi Yc (Yi-Yc) (yi-yc)2
1 19.711 1264242 1295745 -31503 992438957
2 39.422 2503827 2538761 -34934 1220370289
3 78.844 5079703 5024792 54911 3015174254
4 118.266 7571129 7510824 60305 3636693437
5 157.688 9966556 9996856 -30300 918065490
6 197.1009 12490835 12482313 8522 72618860
7 236.5319 14942475 14968912 -26437 698940733
∑ 847.5638 53818767 563.3952 10554302020
Rata-Rata 121.080543 7688395.29
∑(Y1-Yc)2 / (n-2) 2110860403.96154
(Sy/x) 45944.1008613895

Sampel Xi yi Xi-Xrata Yi-Yrata (Xi-Xrata)2 (Yi-Yrata)2

1 217.91 833420 0.79 -415928 0.62 172996378469
2 216.16 1455383 -0.96 206035 0.93 42450283868
 3 217.3 1459242 0.18 209894 0.03 44055351307
Jml 651.37 3748045 0.0000 0.0000 1.5781 259502013644.6670
Rata-Rata 217.12333 1249348 0.0000 0.0000 0.5260 86500671214.8889

S y/x (Y sampel-Yrata2)2
Sx = X √ 1+(1/n)+
b b2 ∑(Xi-Xrata)2
= 0.728554 6.53327665
= 4.76

2. Ketidakpastian asal penimbangan

a. Dari sertifikat kalibrasi diperoleh : ± 0.15 mg,
µ kalibrasi = µ sertifikat
2
0.15
µ kalibrasi =
2
= 0.08

b. Dari data presisi penimbangan (S) = 0.000089 mg

µ massa = √(0.08)2 + (0.000089)2

= √(0.0064 + 7.921E-09 )
= 0.08

3. Ketidakpastian asal volume

a. Dari kalibrasi labu
µ kalibrasi = µ sertifikat
2
µ kalibrasi = 0.025
2
= 0.01

b. Dari data presisi penimbangan (S) = 0.09 mL

c. Ekspansi vol air umum lab = 4 o C suhu pengukuran : 27.1

Koefisien muai air = 2.1 x 10-4/der C
Volume air : 10 mL
Ekspansi air = 10 mL x 7,1 x 2,1 x 10-4
= 0.01491
µ efek T =0,01491/1,96
= 0.0076

µ volum = √(0.01)2 + (0.09)2 + (0.0076)2

= √(0.0001 0.0081 + 5.776E-05
= 0.09
Ketidak Pastian Gabungan
Sumber Nilai x Satuan µx Sat µx/X (µx/X)2
Bobot (w) 1 mg 0.08 mg 0.08 0.01
Cx 217.3 mg/kg 0.86 mg/kg 0.00 0.00
V 10 ml 0.09 ml 0.01 0.00

µCs/Cs (µ) = √(µw/w)2+(µCx/CX)2+(µv/v)2

= 0.08

Ketidak Pastian Diperluas (µe) = 2 x µCs/Cs

= 0.16
 Penimbangan dan pemipetan tidak diperhatikan
ketidakpastian di dapat dari kurva baku

an semua penimbangan, pemipetan dan labu ukur

 PERHITUNGAN KETIDAKPASTIAN
PENETAPAN KADAR VITAMIN B2 DALAM TEPUNG TERIGU SECARA HPLC MENGGUNAKAN KURVA BAKU

Metode Pengujian :
1. Buat deret konsentrasi baku ---> timbang 10.2 mg --> labu 100 mL Penimbangan dan pemipetan tidak diperhatikan
pipet 2 mL --> ad 50 mL ketidakpastian di dapat dari kurva baku
Pipet, ambil 0.5 ,1,2,3,4,5,6,7,8,9 mL --> ad 25 mL

2. Sampel : 2 g sampel di larutkan dalam labu 50 mL, disaring --> inject 20 µL Perhitungkan semua penimbangan, pemipetan dan labu ukur
Cx(kurva baku) x F
Rumus : Csp =
W

Perhitungan ketidakpastian

Cx F
T
µ kurva kalibrasi µ kalibrasi V

Cspl
µ kalibrasi mg presisi timbangan

W Presisi metode

1. Ketidakpastian asal kurva baku

Persamaan kurva baku : y = bx + a
= 5000000x + 16802
Ketidak pastian Garis Regresi ((Sy/x)) = √ ∑(Y1-Yc)2 / (n-2)
N Xi yi Yc (Yi-Yc) (yi-yc)2
1 0.0016 6467 24812 -18345 336539025
2 0.0801 393416 417302 -23886 570540996
3 0.1602 777757 817802 -40045 1603602025
4 0.3204 1540030 1618802 -78772 6205027984
5 0.4806 2314605 2419802 -105197 11066408809
6 0.6408 3080254 3220802 -140548 19753740304
7 0.8010 3862695 4021802 -159107 25315037449
8 0.9612 4563955 4822802 -258847 67001769409
9 1.1214 5366352 5623802 -257450 66280502500
10 1.2816 6114535 6424802 -310267 96265611289
11 1.4418 6857096 7225802 -368706 135944114436
∑ 7.290702 34877162 -1761170 430342894226
Rata-Rata 0.6627910909091 3170651.09
2 1/2
∑(Y1-Yc) / (n-2) 47815877136.2222

(Sy/x) 218668.41824146

absorbsi sampel = Y = 1072988 setelah di plot diperoleh Cx = 0.2112

Sampel Xi yi Xi-Xrata Yi-Yrata (Xi-Xrata)2 (Yi-Yrata)2
1 2.0159 1072988 -0.0199 -944.3333 0.00040 891765
2 2.0601 1073833 0.0243 -99.3333 0.00059 9867.11
3 2.0315 1074976 -0.0043 1043.667 0.00002 1089240
Jml 6.1075 3221797 0.00000 0.0000 0.00100 1990872.6667
Rata-Rata 2.0358 1073932 0.00000 0.0000 0.00033 663624.2222

S y/x (Y sampel-Yrata2)2
Sx = X √ 1+(1/n)+
b b2 ∑(Xi-Xrata)2
= 0.0437336836 1.1547348497
 = 0.05

2. Ketidakpastian asal penimbangan

a. Dari sertifikat kalibrasi diperoleh : ± 0.15 mg,
µ sertifikat
µ kalibrasi =
2
µ kalibrasi = 0.15
2
= 0.08

b. Dari data presisi penimbangan (S) = 0.000089 mg

µ massa = √(0.08)2 + (0.000089)2

= √(0.0064 + 7.921E-09 )
= 0.08
3. Ketidakpastian asal volume
a. Dari kalibrasi labu 50 mL : ± 0.1 mL,
Presisi labu (s) = 0.09 mL
a. dari sertifikat kalibrasi diperoleh : ± 0.1 mL,

µ kalibrasi = µ sertifikat
2
µ kalibrasi = 0.1
2
= 0.05

b. Dari data presisi penimbangan (S) = 0.09 mL

c. Ekspansi vol air umum lab = 4o C suhu pengukuran : 80 °C

Koefisien muai air = 2.1 x 10-4/der C
Volume air : 50 mL
Ekspansi air = 50 mL x 80.0 x 2,1 x 10-4
= 0.840
µ efek T = 46.2/1,96
= 0.4286

µ volum = √(0.05)2 + (0.09)2 + (23.57)2

= √(0.0025 + 0.0081 + 0.1837
= 0.44

Ketidak Pastian Gabungan

Sumber Nilai x Satuan µx Sat µx/X (µx/X)2
Bobot (w) 2g 0.08 g 0.0400 0.0016
Cx 0.2112 mg/kg 0.05 mg/kg 0.2367 0.0560
V 50 ml 0.44 ml 0.0088 0.0001

= √(µw/w)2+(µCx/CX)2+(µv/v)2
µCs/Cs (µ)
= 0.24

Ketidak Pastian Diperluas (µe) = 2 x µCs/Cs

= 0.48

Pelaporan : 5.2396 µg/g ± 0.48 µg/g

RVA BAKU

imbangan dan pemipetan tidak diperhatikan

dakpastian di dapat dari kurva baku

mbangan, pemipetan dan labu ukur