Rekayasa jamur berfilamen untuk konversi lignoselulosa yang efisien: Alat, kemajuan dan prospek terkini

Pengembangan jalur teknis untuk produksi bahan bakar dan bahan kimia dari bioresources yang terbarukan telah menarik perhatian yang luas. Lignoselulosa sebagai sumber daya organic
terbarukan yang paling melimpah di Bumi merupakan bahan baku potensial untuk tujuan ini ( Lynd dkk., 2008 ). Namun, konversi lignoselulosa skala besar menjadi produk masih menantang
karena heterogenitas dan rekalsitensi bahan lignoselulosa dan oleh karena itu tingginya biaya pemrosesan ( Balan,

Enzim lignoselulolitik yang saat ini digunakan dalam industri terutama diproduksi oleh jamur berfilamen untuk tingkat produksi yang tinggi dan komposisi enzim yang lengkap.

Salah satu pendekatan populer untuk mengubah lignoselulosa menjadi produk terutama melibatkan tiga langkah ( Schubert, 2006 ). Pada langkah pertama, bahan lignoselulosa diolah sebelumnya
dengan metode fisik, kimiawi atau biologi untuk menghancurkan struktur lignoselulosa dan untuk meningkatkan daya cerna enzimatik selulosa ( Gambar 1 Sebuah). Setelah pretreatment, enzim
lignoselulolitik digunakan untuk mendegradasi selulosa dan hemiselulosa menjadi gula sederhana ( Gambar 1 c). Selain itu, bahan lignoselulosa yang telah diolah sebelumnya dapat digunakan
sebagai sumber karbon untuk produksi enzim sakarselulosa ( Gambar 1 b). Gula yang diperoleh kemudian difermentasi menjadi produk yang diinginkan (misalnya etanol) oleh mikroorganisme
( Gambar 1 d). Dalam beberapa jalur teknologi, sakarifikasi enzimatik dan langkah-langkah fermentasi mikroba dapat dilakukan secara bersamaan.

roduksi enzim lignoselulolitik berbiaya rendah untuk sakarifikasi ( Gambar 1 b) membutuhkan konstruksi galur jamur dengan kemampuan menghasilkan enzim yang tinggi. rekayasa transkripsi
gen dan proses sekresi protein telah menjadi strategi utama untuk meningkatkan produksi enzim lignoselulolitik dalam jamur.
bawah ini, rekayasa transkripsi gen dan proses sekresi protein telah menjadi strategi utama untuk
meningkatkan produksi enzim lignoselulolitik dalam jamur. Selain itu, rekayasa morfologi miselium
untuk mengurangi viskositas dalam kultur terendam (misalnya gangguan

Alat manipulasi genetik yang efisien sangat penting untuk rekayasa produksi enzim dan jalur
metabolisme pada jamur lignoselulolitik. Metode transformasi DNA yang umum digunakan, pembuat
seleksi dan promotor, dan strategi untuk ekspresi protein heterolog dalam jamur berfilamen telah
ditinjau secara komprehensif ( Singh dkk., 2015 ; Su et al., 2012 ). Oleh karena itu, kami hanya akan
fokus pada perkakas yang baru dikembangkan di area ini.

6. Perspektif masa depan

6.1. Pemahaman yang lebih dalam tentang biokonversi lignoselulosa
Pengetahuan kita tentang proses seluler yang terlibat dalam konversi lignoselulosa oleh jamur
masih sangat terbatas. Bagaimana sinyal selulosa memicu ekspresi gen selulase? Apa mekanisme
molekuler untuk transkripsi yang diatur ke bawah dari gen penyandi protein yang disekresikan pada
tekanan retikulum endoplasma ( Pakula dkk., 2003 )? Tahapan manakah dalam jalur sekretori yang
membatasi laju produksi enzim? Penjelasan proses fundamental ini akan memberikan kandidat target
rekayasa untuk meningkatkan produksi enzim lignoselulolitik. Selain itu, meskipun model
metabolisme seluruh genom telah dibangun kembali pada beberapa jamur lignoselulolitik, misalnya T.
reesei ( Castillo dkk., 2016 ), sebagai dasar rekayasa metabolik, studi eksperimental perlu dilakukan
untuk mengkarakterisasi fungsi nyata dari enzim metabolik yang diprediksi dan untuk memahami
distribusi dan regulasi fluks metabolik.

7. Kesimpulan
Rekayasa genetika rasional telah memberikan kontribusi besar untuk meningkatkan tingkat
produksi dan efisiensi penurunan enzim lignoselulolitik dalam jamur berfilamen. Selain itu, rekayasa
metabolik dari beberapa jamur lignoselulolitik menyarankan potensi untuk menggunakan organisme
ini untuk menghasilkan bahan kimia massal langsung dari bahan lignoselulosa. Di masa depan,
klarifikasi mekanisme kunci untuk produksi enzim tingkat tinggi, pengembangan sistem enzim yang
sangat efisien untuk degradasi substrat, dan pemahaman yang mendalam tentang jaringan
metabolisme, diharapkan dapat memberikan target baru untuk rekayasa lebih lanjut dari jamur
lignoselulolitik. Untuk mencapai rekayasa genetika sistem, alat canggih (terutama untuk pengeditan
gen multipleks dan fine-tuning ekspresi gen) perlu lebih dioptimalkan dalam jamur lignoselulolitik.