Histopatologi dan morfologi stadium jaringan

Haemoproteus penyebab kematian columbae

pada Columbiformes

RINGKASAN

Dua burung merpati dari kandang burung yang sama mati setelah terinfeksi parah dengan
Haemoproteus columbae. Pemeriksaan histopatologi berbagai organ mengungkapkan banyak sekali
schizonts dan megaloschizonts. Seperti ada dua siklus skizogoni, satu di dalam otot dan lainnya di
berbagai jaringan. Bentuk dan ukuran skizon merupakan fungsi dari tingkat pembentukan. Pecahnya
megaloschizonts, terutama pada otot lurik menyebabkan nekrosis serat yang meluas dan kerusakan
otot yang diakibatkannya, diyakini sebagai penyebab utama kematian.

PENGANTAR
Parasit haemosporidian burung adalah kelompok yang beragam yang terdiri dari sekitar 250 spesies
didistribusikan ke seluruh famili apicomplexan Leucocytozoidae, Plasmodiidae dan Haemoproteidae
(Bennett et al., 1982). Beberapa dari spesies ini, khususnya Leucocytozoon simondi, L. smithi dan L.
(Akiba) caulleryi dapat menyebabkan cukup banyak kematian pada kawanan bebek dan angsa
piaraan, kalkun dan unggas piaraan, masing-masing (O'Roke, 1930; Chernin, 1952; Newberne, 1955;
Kocan, 1968; Novilla dkk., 1971). Spesies Plasmodium, terutama P. relictum, P. elongatum,
P. gallinaceum dan P. durae menyebabkan kematian pada burung di kebun binatang seperti penguin,
unggas piaraan dan kawanan kalkun (Stoskopf & Beier, 1979; Cranfield et al., 1990; Huchzermeyer,
1976,1988,1991). Namun, spesies Haemoproteus selalu dianggap parasit yang relatif jinak dengan
sedikit dampak terhadap avian host (Garnham, 1966) dan hanya lima insiden kematian yang
dilaporkan (Malkani, 1936; Garnham, 1950; Markus & Oosthuizen, 1972; Kucera et al, 1982; Hartley,
1992). Atkinson dkk. (1986), dalam studi paling menyeluruh dari efek Haemoproteus pada inang
vertebrata melaporkan H. meleagridis memiliki dampak parah pada perkembangan anak kalkun.
Selama tahun 1990 tingkat kematian yang tinggi tercatat pada burung merpati dari kandang burung
di dekat Pretoria, Afrika Selatan. Sebuah kasus kematian dengan Jantung Berdarah (Gallicolumba
luzonica)diajukan untuk nekropsi dan jaringan dari burung kedua untuk pemeriksaan histopatologi.
Pemeriksaan hapusan darah pada post mortem terungkap secara masif terinfeksi H. columbae.
Makalah ini melaporkan tentang hapusan darah dan temuan patologis pada burung-burung ini.

BAHAN DAN METODE

Merpati No.1

Jantung Berdarah pada betina dewasa yang mati tiba-tiba dibawah untuk pemeriksaan nekropsi.
Apusan darah tipis dibuat dari darah jantung, udara dikeringkan, difiksasi dengan May-Grunwald-
Giemsa dan diwarnai dengan Giemsa. Apusan darah diperiksa di bawah perendaman minyak dengan
jumlah parasit per bidang mengandung rata-rata 102. Spesimen kerangka
otot dari dada, sayap dan kaki serta jantung, otak, hati, paru-paru, limpa, ginjal dan berbagai bagian
dari saluran pencernaan dikumpulkan pada larutan formalin 10% buffer untuk pemeriksaan
histopatologi. Klasifkasi dari jaringan di atas diproses secara rutin, dipotong dan diwarnai dengan
hemotoksin dan eosin.

Merpati No.2
Bagian hati, paru-paru, ginjal dan jantung diterima dan diproses seperti di atas.
HASIL

Apusan darah
Merpati No. 1, 55% eritrosit mengandung setidaknya satu H. Columbae parasit. Beberapa invasi sel
inang adalah umum dan ada artinya 61,0 parasit per 100 eritrosit (n = 25; SD = 7,3; Rentang = 52-74).
Tiga skizon exo-eritrositik terlihat pada apusan darah (Gambar 1).

Patologi kasar
Terjadi penyumbatan parah yang parah pada merpati no. 1. lebar pita nekrosis berukuran diameter
hingga 15 mm terlihat berjalan secara miring melintasi otot payudara ke arah serat otot. Serupa,
guratan atau pita yang kurang menonjol terlihat jelas pada otot-otot sayap yang lebih besar dan juga
kaki. Jarak antara pita-pita nekrosis yang lebih besar banyak ditemukan garis kuning-putih yang
panjangnya beberapa milimeter. Hal tersebut ada pada semua otot rangka termasuk otot halus di
ujung distal tungkai. Petechiae dan ekimosis sering menyertai lesi di atas.

Histopatologi
Merpati No.1
Otot rangka. Ada banyak area nekrosis multifokal yang dibuktikan dengan pembengkakan, koagulasi,
hialinisasi, fragmentasi, hilangnya lurik dan parsial atau lisis lengkap serat (Gambar 2). Beberapa
serat nekrotik mengandung butiran bahan kalsifikasi basofilik. Ada infiltrasi sel minimal, tetapi
kadang-kadang beberapa monosit, limfosit dan fibroblas itu terlihat diantara nekrotik otot serat.
Banyak megaloschizont yang dilapisi oleh sesuatu bening yang tidak jelas dan cukup tebal dimana
membran eosinofilik homogen tersebar di dalam nekrotik dan serat otot utuh. Mayoritas
megaloschizont dapat bertahan hidup, tetapi beberapa mengungkapkan tanda-tanda disintegrasi.
Pada daerah nekrosis yang luas banyak megaloschizonts dimana itu adalah nekrotik.
Megaloschizonts unilocular (Gambar 3), tetapi lebih umum multilokuler
dan septate (Gambar 4). Jumlah kompartemen sangat bervariasi, hingga 21 ditemukan di satu
megaloschizont. Septa itu menyerupai dinding luar megaloschizont. Kadang-kadang terlihat septa
yang tidak lengkap (Gambar 5).

Megaloschizonts berisi merozoit bulat yang padat, kurang lebih 1 berdiameter dengan inti gelap
pusat bahan nuklir dan tepi luar adalah sitoplasma pewarnaan bening (Gambar 6) atau pewarnaan
gelap amorf berbentuk tidak beraturan formulir (Gambar 7). Yang lain berisi campuran dari dua
bentuk di atas juga struktur bulat yang menyerupai sitomer dan rumpun protozoa yang berbutir
halus sitoplasma beberapa dengan tepi luar sitoplasma.

Perubahan degeneratif dibuktikan dengan beberapa ruang vakuolar yang terisi

bahan fibrillar ditemukan di banyak megaloschizonts. Yang lainnya menggelembung
(Gambar 8) atau menunjukkan disintegrasi fokus atau tekuk dinding. Besar
proporsi megaloschizonts diisi dengan eritrosit (Gambar 8) atau
campuran eritrosit dan merozoit (Gambar 6). Schizont atau merozoit lepas
sering hadir di dalam pembuluh darah di sekitar disintegrasi atau
pecah megaloschizonts.

Jantung. Jumlah sedang dari unilocular atau septate yang dapat hidup, berisi darah atau kadang-
kadang megaloschizonts serupa dengan morfologi dan komposisi untuk kerangka otot itu
Ada di dalam otot serat sepanjang myocardin. Mayoritas terkandung amorf protozoa,gumpalan
sitoplasma (gambar 9)
Atau bentuk pewarnaan gelap
(Angka10). Sebuah inflamasi reaksi dulu jarang dicatat di sekitar
megaloschizonts,
tapi di ada sebuah contoh ringan
degenerasi atau nekrosis serabut jantung di kutub megaloschizonts.
Tidak ada nekrosis serabut otot yang tersebar luas.’

Ampela. Seekor megaloschizont berisi merozoit unilokular yang berdinding tebal yang masih hidup
berada di lapisan otot ampela. Tidak ada kasus nekrosis atau peradangan yang hadir di sekitar
megaloschizont.

Proventrikulus. Beberapa skizon berdinding tipis terlihat jelas di kapiler mukosa.

Ini terisi oleh lumens danberbentuk bulat atau memanjang dan tergantung pada bagian parasit
kapiler. Disebabkan oleh autolisis morfologi dari struktur intern yang tidak bisa dibedakan.

Jaringan lain. Selain nefrosis sedang dan penyumbatan, tidak ada patologi penting
atau skizon yang terlihat jelas pada jaringan lain yang diperiksa.

Merpati No.2
Jantung. Beberapa megaloschizonts terutama unilocular serta septate mirip dengan yang terlihat
pada burung merpati pertama yang tersebar di seluruh miokardium.
Serat otot yang terparasit berubah bentuk, tetapi tidak menunjukkan tanda-tanda
nekrosis atau degenerasi. Kapiler di sekitar megaloschizonts kadang-kadang berisi skizon dan
merozoit yang bentuknya sesuai dengan kapiler.

Hati. Ada kongesti difus, leukositosis dan degenerasi ringan dari hepatosit. Megaloschizonts aseptate
berdinding tipis atau tidak beraturan bulat atau tidak beraturan mengandung pewarnaan gelap ada
pada sinusoid(Angka10).
Hepatosit disekitarnya sering Disebut vakuolasi, granulasi atau karyorrhexis.

Ginjal. Ada nefrosis sedang dan kongesti dengan interstisial fokal nefritis plasmacytic.
Megaloschizonts mirip dengan yang dijelaskan untuk hati yang tersebar di dalam pembuluh kortikal.

Paru-paru. Kapiler alveolar dan pembuluh paru mengalami penyumbatan yang parah.
Beberapa skizon aseptat berdinding tipis bulat atau memanjang yang mengandung warna gelap
dimana bentuk pewarnaan terlihat jelas di kapiler atau pembuluh bronkial yang lebih besar. Kadang
skizon terletak di perifer dan tampak berada di sel endotel (Gambar 11).

Otak. Tidak ada schizont yang terlihat.

DISKUSI
Meskipun infeksi Haemoproteus umumnya terjadi pada burung liar, namun jarang terjadi
kematian. Hartley (1992) bagaimanapun, terdapat laporan kematian di alam liar
Currawongs {Strepera graculind) di Australia. Infeksi berat saat ini mungkin disebabkan oleh infeksi
ulang berulang dengan H, columbae pada penangkaran tempat kutu terbang, Pseudolynchia
canariensis,dimana vektor yang diketahui H. columbae (Bennett & Peirce, 1990),
Lesi nekrotik yang luas pada otot-otot dada, sayap, dan tungkai menyerupai lesi miopati nutrisi
dikarenakan kekurangan vitamin E atau selenium.
Sesuai pemeriksaan Histologik yang mengungkapkan asosiasi antara otot lesi dan jaringan dari
H.columbae megaloschizonts.
Beberapa penulis memiliki catatan asosiasi serupa (Opitzetah,1982; Gardiner et Al., 1984;
Atkinson et Al, 1986; Atkinson & Forrester, 1987; Simpson,1991).
Aseptate berdinding tipis memanjang, membulat atau mengandung skizon berbentuk tidak
beraturan merozoit,sitomer atau bentuk lain yang digambar oleh Huff (1942) dan
Kucera et Al. (1982) terlihat dalam lumina dari pembuluh darah pada kerangka otot, paru-paru,
hati,ginjal dan proventrikulus pada burung merpati
Meskipun tidak ada asosiasi yang bisa ditemukan antara sel schizonts dan endotel dalam study ini
Ada bukti dari schizonts Pada pembuluh dari paru-paru Menunjukan perkembangan dalam sel
Sel endotel (Angka 11). Terlihat bahwa setiap schizont mungkin mulanya berkembang dari sebuah
sel endotel dan sekali membesar mereka akan pecah dan hilang ke dalam lumen dari kapiler atau
pembuluh darah Menurut Atkinson et Al. (1986) paling sedikit dua generasi dari skizogoni pada
Otot lurik dari kalkun secara eksperimental terjangkit H. meleagridis.
Skizon generasi kedua H. meleagridis tampaknya tumbuh lebih cepat pada serabut otot rangka dan
berkembang menjadi megaloschizont berdinding tebal besar
(Atkinson et Al.,1986; Atkinson & Forrester, 1987). Serupa dengan megaloschizonts itu ditemukan
dalam kerangka dan otot serat jantung dan juga pada dinding ampela yang dipelajari sekarang .
Multilokuler megaloschizonts yang diamati dalam studi saat ini. Dimana terlihat kasus menyimpang
seperti leukositozoonosis (Simpson, 1991), Arthrocystis galli (Levine et Al., 1970) dan / f. Desseri (H.
handai) (Miltgen et Al., 1981). Ilustrasi oleh Gardiner et Al. (1984) seperti kista leukositozoonosis
dari Sebuah Currawong yang muncul menjadi kista dari Haemoproteus yang dapat menjadi kerangka
otot masif secara musiman Miopati di Currawong (Hartley, 1992). A.galli dijelaskan oleh Levine et
Al. (1970) sebagai jenis yang berbeda mungkin juga mewakili megaloschizonts dari
Haemoproteus Sp.
Dia bersifat tetap dan tahap perkembangan struktur di dalam megaloschizonts tidak selalu bisa
ditentukan. Gumpalan tidak berdiferensiasi
sitoplasma dan bentuk pewarnaan gelap mungkin mewakili bentuk yang belum matang
pengembangan. Adanya struktur yang menyerupai merozoit di
tepi banyak gumpalan sitoplasma menunjukkan bahwa merozoit dapat berkembang
subdivisi di sepanjang tepi massa sitoplasma ini. Sitoplasma serupa
telah diamati pada kista H. meleagridis dan tidak teridentifikasi
parasit haemosporozoan (Gardiner et ah, 1984; Atkinson et ah, 1986). Itu
massa bola basofilik bulat menyerupai apa yang Gardiner et al. (1984) disebut
sebagai sitomer. Pembagian megaloschizont menjadi beberapa kompartemen mungkin
tumbuh ke dalam dari dinding luar sebagaimana dibuktikan dengan kehadiran beberapa
septa yang tidak lengkap dengan penampilan yang mirip dengan dinding luar. Morfologi dari
merozoit di kedua burung merpati berkorelasi baik dengan deskripsi untuk merozoit dari
H. columbae dan spesies Haemoproteus lainnya (Mohammed, 1967; Gardiner et al.,
1984; Atkinson dkk, 1986; Atkinson & Forrester, 1987).

Adanya kista bengkak berisi merozoit dengan tekuk atau dinding hancur serta kista yang pecah
sebagian atau seluruhnya berisi eritrosit menunjukkan bahwa awalnya ada pembengkakan
megaloschizonts diikuti oleh ruptur dan pelepasan merozoit dan akhirnya terisi oleh eritrosit.
Gardiner dkk. (1984), di sisi lain, menyebutkan bahwa megaloschizont dewasa menjadi
diisi dengan darah dan hanya kemudian pecah untuk melepaskan merozoit.
Studi sebelumnya tentang skizogoni H. columbae melaporkan pembentukan
skizon hanya pada jaringan paru-paru (Aragao, 1908; Acton & Knowles, 1914;
Mohammed, 1967; Ahmed & Mohammed, 1977), meskipun Mohammed (1967)
mendeteksi beberapa skizon dalam apusan hati anak domba yang terinfeksi parah. Ini adalah
bertentangan dengan temuan kami di mana skizon ditemukan di berbagai jaringan, termasuk
otot lurik. Atkinson dkk. (1986) dan Farmer (1965) menemukan megaloschizonts
dari H.meleagridis
dan
H. sacharovi.dll menjadi tidak tersentuh dan berdinging tebal
Penelitian ini menunjukkan bahwa H. columbae membentuk schizonts atau megaloschizonts di
banyak organ dan bentuknya sebagian besar merupakan produk situs
formasi bertentangan dengan Ahmed & Mohammed (1977) yang menggambarkan schizonts
berbentuk Y dan dua kali lipat. Megaloschizonta berdinding tebal sebelumnya dari H. meleagridis
memiliki hanya telah dicatat di kerangka otot (Atkinson et Al., 1986),tapi di ini Hal ini terbukti pada
otot rangka dan jantung serta dinding otot
ampela. Perbedaan ini mungkin merupakan indikasi tingkat keparahan file
infeksi dalam penelitian ini daripada keterbatasan pembentukan Haemoproteus
skizon di jaringan yang berbeda.
Sejumlah besar gametosit H. columbae hadir dalam darah tepi
menunjukkan bahwa skizon yang terpisah pada jaringan memang berasal dari H. columbae pada
kasus ini dan bukan pada Leucocytozoon sp. seperti yang disarankan oleh
Gardiner dkk. (1984).
Ada banyak laporan tentang infeksi mirip Leucocytozoon yang mematikan
mempengaruhi burung penangkaran, terutama parkit (Psittacidae) (Fowler & Forbes,
1972; Smith, 1972; Walker & Garnham, 1972; Simpson, 1991) dan burung lainnya
spesies (Hartley et al., 1981). Tak satu pun dari penelitian ini yang memasukkan apusan darah ke
menentukan apakah gamet Leucocytozoon ada dalam darah perifer,
yang bisa menjadi indikasi identitas parasit. Sepertinya begitu
bahwa setidaknya beberapa dari infeksi Leucocytozoon yang 'menyimpang' ini mungkin telah terjadi
disebabkan oleh Haemoproteus. Tampaknya hanya ada sedikit perbedaan yang diketahui di antara
keduanya
skizogoni Leucocytozoon dan Haemoproteus, dan tanpa gametosit dewasa pada periferal dan
mungkin mustahil untuk dibedakan antara dua generasi.
Multilokuler berdinding tebal megaloschizonts juga serupa seperti yang dijelaskan oleh Simpson
(1991) disajikan pada kerangka, jantung dan otot Ampela otot.
lebih lanjut mendukung bahwa Leucocytozoon ditulis oleh berbagai penulis (Pemburu burung &
Forbes, 1972; Smith, 1972; Pejalan &Garnham, 1972; Gardiner et Al, 1984; Simpson, 1991) mungkin
baik menjadi Haemoproteus.
Baik dalam penelitian ini maupun penelitian Gardiner et al. (1984) di mana H. columbae
dan H. lophortyx menjadi parasit pada inang alami mereka, terdapat jaringan yang cukup
kerusakan infeksi menjadi mematikan. Bahkan pada populasi burung liar
efek merusak dari tahapan jaringan Haemoproteus sekarang telah dikenali
(Atkinson & Forrester, 1987; Hartley, 1992) dan hanya jika burung itu bertahan hidup
miopati akut gametosit muncul di darah tepi.

UCAPAN TERIMA KASIH

Kami mengucapkan terima kasih kepada Drs L. Lopez Rebollar dan F. W. Huchzermeyer atas
Terjemahan ringkasan bahasa Spanyol, Jerman dan Prancis, Ny. L. Limper untuk
perkembangan fotografi, Bu A. Lubbe atas pengetikan naskah dan naskah
teknisi dari Bagian Patologi, Onderstepoort Veterinary Institute for
memproses bagian histopatologi.