Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021

PENETAPAN KADAR BETA KAROTEN PADA BERBAGAI TINGKAT

PERKEMBANGAN DAUN PEPAYA PENANG (Carica papaya L.) DENGAN
SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS
Mikel Waguci, Hazli Nurdin dan Dedi Nofiandi
Program Studi S1 Farmasi, Fakultas Farmasi
Universitas Perintis Indonesia
Email: wagucimikel@gmail.com

ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian tentang penetapan kadar beta karoten pada berbagai tingkat
perkembangan daun pepaya penang (Carica papaya L.) yaitu daun muda, daun tua dan daun sangat
tua dengan spektrofotometri UV-Vis. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perbedaan kadar
beta karoten pada ketiga tingkat perkembangan daun pepaya penang (Carica papaya L.)
Masingmasing daun pepaya penang diektraksi dengan menggunakan metode maserasi dengan pelarut
aseton. Selanjutnya, ekstrak aseton diberikan perlakuan saponifikasi dengan KOH 15 % dan
diekstraksi kembali dengan pelarut petroleum eter. Ekstrak yang diperoleh kemudian dilakukan uji
kualitatif dengan menggunakan metoda kromatografi lapis tipis, selanjutnya dilakukan uji kuantitatif
dengan menggunakan metoda spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang serapan maksimum
477,0 nm. Hasil uji kualitatif menunjukkan bahwa daun pepaya penang muda, daun tua dan daun
sangat tua teridentifikasi mengandung senyawa beta karoten dengan nilai Rf 0,6. Hasil uji kuantitatif
menunjukkan bahwa kadar rata-rata beta karoten pada daun pepaya penang muda daun tua dan daun
sangat tua masing-masing 21,5413 mg/100g;32,1979 mg/100g;13,3206 mg/100g. Kadar beta karoten
tertinggi terdapat pada daun pepaya tua, diikuti oleh daun pepaya muda dan daun pepaya sangat tua.
Hasil analisa data menggunakan Anova satu arah dilanjutkan dengan uji duncan (SPSS 24.0)
menunjukkan adanya perbedaan yang signifikan pada masing-masing tingkat perkembangan daun
pepaya penang (p<0,05).
Kata Kunci: Daun pepaya penang muda (Carica papaya L.), daun pepaya penang tua (Carica
papaya L.), daun pepaya penang sangat tua (Carica papaya L.), beta karoten dan
spektrofotometri UV-Vis.
ABSTRACT

The Research on beta carotene of penang papaya has been carried out. The purpose of the research
was to determine the content of beta carotene in a view levels of penang papaya leaves (Carica
papaya L.) green, dark green and yellowish green leaves, the method used was UV-Vis
Spectrophotometry. The research was also aimed to see difference of beta carotene contents on the
three levels of the leaves. The papaya leaves was extracted by using maceration method using aceton
as a solvent, more over. Aceton extract was saponified by 15 % KOH in methanol. The saponified
matter was re-extracted by petroleum eter. The extract obtaind was tested qualitative by using thin
layer chromatography (TLC) the results was tested quantitative by UV-Vis spectrophotometry
method using maximum wavelength of 477.0 nm. The qualitative test showed that green, dark green
and yellowish green leaves contained beta carotene wish Rf 0.6. Thequantitative test showed that
beta carotene in green, dark green and yellowish green leaves were 21.5413, 32.1979 and 13.3206
mg/100 g respectively. The hight beta carotene content was in dark green leaves followed by green
and yellowish green leaves. Analysis method using one way ANOVA followed by Duncan test
(SPSS 24.0) showed the significant difference in each levels of papaya leaves (p<0.05).
Keywords : Penang papaya leaves green (Carica papaya L.), penang papaya leaves dark green
(Carica papaya L.) penang papaya leaves yellowish green (Carica papaya L.), beta
carotene and UV-Vis Spectrophotometry.
Page 1
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
PENDAHULUAN
Indonesia mempunyai berbagai kekayaan
keanekaragaman hayati yang luar biasa, terdapat
sekitar 40.000 jenis tumbuhan dan sekitar 1300
diantaranya digunakan sebagai obat tradisional
yang berkhasiat dan dapat dikembangkan secara
luas (Rustam dan Yanwirasti 2007). Salah satu
nya ialah tanaman pepaya. Pepaya ialah salah
satu buah lokal unggulan Indonesia baik
konsumsi dalam negeri maupun ekspor
(Paramastri dan Anindha, 2011). produksi buah
pepaya di Indonesia tahun 2014 mencapai
830.491 ton dengan sentra produksi di Jawa
Timur, Jawa Barat Jawa Tengah dan Lampung
(Kementan, 2015).
Tanaman pepaya memiliki berbagai macam
varietas yang terdiri dari pepaya semangka,
pepaya jinggo, pepaya mas, pepaya item, pepaya
ijo, pepaya cibinong, dan pepaya Bangkok (Baga
Kalie, 1996). Berdasarkan hasil survei dilapangan
yang dilakukan di beberapa kebun pepaya di kota
Padang, ditemukan berbagai macam varietas
pepaya lainnya yaitu pepaya california, pepaya
merah delima dan pepaya penang. Dari ketiga
pepaya tersebut yang paling banyak ditanam dan
mondiminasi perkebunan pepaya ialah pepaya
penang. Pepaya penang memiliki ukuran buah
sekitar 20 cm bagian tengah buah agak berlekuk,
tangkai daun bewarna hijau kemerahan dan
pertulangan daunnya terlihat jelas.
Daun pepaya megandung berbagai macam
senyawa lain diantaranya alfa tokoferol, asam
askorbat, dan flavonoid (Maisarah,et al.,2013).
Daun pepaya dengan berat 100 g mengandug
vitamin E:136 mg, vitamin C:140 mg, vitamin
B1:0,15 g kalsium 35 g, fosfor 63 mg dan zat besi
0,80 mg, niasin 2,1 mg dan Beta karoten sebesar
11.565 μg (USDA, 2001).
Semua vitamin dan mineral yang terdapat
pada daun pepaya tentunya berguna bagi
kesehatan tubuh manusia. Daun pepaya
mempunyai banyak manfaat seperti
meningkatkan nafsu makan, memperbaiki saluran
Page 2
pencernaan dan meningkatkan kesehatan tubuh
(Murhalien dan Ani, 2015). Selain itu Enzim
papain pada daun pepaya sebagai antimikrobial
dan beta karoten pada daun pepaya dapat
berfungsi sebagai antioksidan (Sutarpa dan
Sutama, 2008). Daun pepaya juga memiliki
aktivitas anti kanker dengan cara apoptosis di
induksikan pada sel kanker (Otsuki,et al.,2010).
Daun pepaya penang mempunyai tingkat
perkembangan daun diantaranya daun pepaya
muda, daun pepaya tua dan daun pepaya sangat
tua yang ditunjukan dengan perubahan warna
daun yang mulai menguning. Adanya perbedaan
warna pada daun menunjukkan terdapatnya
perbedaan kandungan pigmen daun termasuk
Karotenoid (Hasidah, 2017).
Perbedaan kandungan komponen kimia
dipengaruhi oleh gejala metabolisme daun pada
masing-masing tingkat perkembangan daun yang
berhubungan dengan proses fotosintesis. Salah
satu faktor yang mempengaruhi kemampuan daun
dalam berfotosintesis ialah klorofil. Klorofil
merupakan pigmen daun yang berperan penting
dalam proses fotosintesis yang dapat menyerap
cahaya matahari. Meningkatnya kadar klorofil
seiring dengan bertambahnya umur daun hingga
daun berkembang penuh dan kemudian menurun
ketika daun semakin tua (Setiawati,et al., 2016).
Kandungan klorofil yang banyak akan
meningkatkan kemampuan daun dalam
melakukan fotosintesis sehingga meningkatkan
metabolisme daun yang tentunya mempengaruhi
komponen kimia pada masing-masing tingkat
perkembangan daun, seperti karotenoid
(Richardson,et al.,2002). Karotenoid ialah salah
satu kandungan fitokimia yang terdapat pada
tanaman. Kandungan fitokimia dipengaruhi oleh
faktor internal seperti gen dan faktor eksternal
seperti cahaya (Laily,2012).
Menurut penelitian yang dilakukan
sebelumnya oleh Marelli,et al.,(2008) buah
pepaya mengandung beta karoten sebesar 20,722
µg/100 g berat pepaya. Sedangkan menurut
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
penelitian yang dilakukan oleh Sutarpa dan
Sutama (2008). daun pepaya mengandung beta
karoten sebesar 11,565 µg/100 g. Dan menurut
penelitian yang dilakukan oleh Mahmud (2009) C. Prosedur Kerja
kadar beta karoten pada daun pepaya sebesar 1. Penyiapan Sampel
18,250 µg/100 g.
Penelitian mengenai penentuan kadar beta
karoten pada berbagai tingkat perkembangan
daun pepaya belum pernah dilakukan, oleh
karena itu peneliti tertarik melakukan penelitian
penentuan kadar beta karoten pada berbagai
tingkat perkembangan daun pepaya Penang
(Carica papaya L.) yaitu daun muda, daun tua
dan daun sangat tua. Hal ini berguna untuk
mengetahui apakah terdapat perbedaan
kandungan beta karoten pada berbagai tingkat
perkembangan daun pepaya penang (Carica
papaya L.). Kadar beta karoten ditentukan
menggunakan instrumen spektrofotometer UV-
Vis. Kadar beta karoten yang diperoleh kemudian
diolah dengan analisa statistik ANOVA satu arah.
METODOLOGI PENELITIAN
A. Waktu Dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan ± 6 bulan di
Laboratorium Kimia Farmasi dan Laboratorium
Kimia Bahan Alam Fakultas Farmasi, Universitas
Perintis Indonesia.
B. Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan : N-heksan : Aseton (7:3) dibuat
Spektrofotometer UV-Vis (T92+), corong pisah
(Pyrex), corong (Pyrex) gelas ukur (Pyrex), labu
Erlenmeyer (pyrex), labu ukur (Pyrex),
Kromatografi lapis tipis Rotary evaporator, oven,
timbangan analitik, pipet tetes, spatel, batang
pengaduk kertas saring, aluminium foil, dan alat-
alat gelas yang menunjang penelitian.
Bahan-bahan yang digunakan : Daun Pepaya
Penang, Aseton, Petroleum eter, Beta Karoten
murni, N-heksan, Metanol, Natrium Kalium
hidroksida (KOH), sulfat anhidrat (Na2SO4
anhidrat), Plat KLT Silika gel 60 F254, dan
Aquadest.
Page 3
a. Pengambilan Sampel
Sampel yang digunakan pada
penelitian ini ialah daun pepaya penang
yang terdiri dari daun muda, daun tua dan
daun sangat tua. Sampel daun pepaya
diperoleh dari salah satu perkebunan
pepaya warga di kabupaten Padang
Pariaman.
b. Identifikasi Sampel
Identifikasi seluruh bagian tanaman
pepaya dilakukan di Herbarium Jurusan
Biologi Universitas Andalas (UNAND)
Padang.
c. Preparasi Sampel Daun Pepaya
Masing-masing sampel daun papaya
penang yang diperoleh dibersihkan dan
pisahkan daun dari tangkainnya. Kemudian
masing-masing sampel daun pepaya
penang dipotong kecil-kecil. Selanjutnya
sampel ditimbang sebanyak 250 g
(Syarif,2013).
2. Penyiapan Larutan Pereaksi
a. Pembuatan Larutan Fase Gerak
sebanyak 10 mL, dengan cara
mencampurkan 7 mL N-heksan dengan 3
mL Aseton dalam botol eluen lalu dikocok
hingga homogen.
b. Pembuatan Larutan KOH 15% b/v
dalam methanol
Ditimbang 7,5 g KOH, dilarutkan
dalam 25 mL metanol hingga larut.
Kemudian cukupkan volumenya hingga 50
mL dengan metanol (Syarif,2013).
3. Ekstraksi Sampel
a. Daun pepaya yang sudah diberi perlakuan
ditimbang sebanyak 250 g masukkan ke
dalam wadah maserasi dan ditambahkan
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
800 mL aseton 6 jam pertama diaduk
sesekali kemudian dimaserasi selama 24
jam, lalu disaring untuk memisahkan ampas
dan ekstrak. Ampasnya kemudian di
maserasi kembali dengan aseton. Dari
proses ekstraksi ini diulangi hingga filtrat
terakhir tidak berwarna lagi.
b. Hasil dari ekstrak aseton yang diperoleh di
uapkan di Rotary evaporator sampai kental
dan hitung persentase (%) rendemen
ekstrak.
c. 5 g esktrak aseton yang telah di uapkan
kemudian dilakukan saponifikasi dengan
menambahkan KOH 15% dalam metanol
1:1 yaitu sebanyak 5 mL masukan ke dalam
labu gelap, dikocok dan diamkan selama 1
malam.
d. Hasil dari saponifikasi tersebut diekstraksi
kembali dengan petroleum eter sebanyak 3
x 25 mL, lalu dicuci dengan air suling
sampai bebas basa dilakukan dalam corong
pisah, dikocok searah selama ± 20 menit
dengan sesekali tutup corong pisah dibuka
diamkan sampai terbentuk dua lapisan
lapisan bawah (larutan aseton) dibuang dan
lapisan atas (larutan petroelum eter)
disimpan untuk perlakuan lebih lanjut.
e. Larutan petroleum eter yang sudah
diperoleh kemudian disaring dengan
Na2SO4 anhidrat yang ditaburkan diatas
kertas saring guna untuk menyerap sisa air.
Hasil ekstraksi dimasukan ke dalam labu
ukur 100 mL dan dicukupkan dengan
petroleum eter hingga tanda batas.
4. Karakteristik Ekstrak Sampel
a. Organoleptis
Pemeriksaan organoleptis meliputi
bentuk, warna, bau dan rasa (Depkes RI,
2008).
b. Rendemen
Hitung rendemen dengan rumus :
Rendemen (%) = A = Berat Krus Kosong (g)
Page 4
Berat ekstrak yang diperoleh
x 100 %
Berat Sampel
(Depkes RI, 2008).
c. Pemeriksaan Susut Pengeringan
Timbang krus porselen yang
sebelumnya telah dikeringkan selama 30
menit di dalam oven pada suhu 105oC dan
didinginkan dalam desikator (A). Timbang
ekstrak sebanyak 1 g. Masukkan ekstrak ke
dalam krus tersebut dan timbang (B).
Kemudian perlahan-lahan krus digoyang
agar ekstrak merata. Masukkan ke dalam
oven, buka tutupnya dan biarkan tutup ini
berada dalam oven. Panaskan selama 1 jam
pada suhu 105oC, dinginkan dan masukkan
ke dalam desikator, timbang kembali.
Ulangi perlakuan seperti di atas hingga
bobot tetap. Hitung susut pengeringan
dengan rumus:
( B−A )−(C− A)
% Susut Pengeringan = x
( B−A )
100%
Keterangan :
A = berat krus kosong (g)
B = berat krus + sampel sebelum di oven
(g)
C = berat krus + sampel setelah di oven (g)
d. Penetapan Kadar Abu
Ekstrak daun pepaya penang (Carica
papaya L.) ditimbang 2-3g dimasukkan
kedalam krus porselen yang telah ditara,
dipijarkan dalam furnes. Kemudian
dinaikkan secara bertahap hingga 600 ±
25oC sampai bebas karbon dan dinginkan di
dalam desikator dan ditimbang berat abu.
Kadar abu ditentukan dalam persen
terhadap berat sampel yang digunakan
(Depkes RI, 2002).
C−A
% Kadar Abu = x 100%
B− A
Keterangan :
B = Berat Krus + Sampel Sebelum Pemijaran (g)
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
C = Berat Krus + Sampel Setelah Pemijaran (g)
5. Analisa Kualitatif
Pembanding Beta Karoten murni dan
sampel ditotolkan bersama-sama pada
lempeng KLT. Setelah kering lempeng
KLT dimasukan ke dalam Chamber
kemudian dielusi dengan menggunakan
cairan pengelusi N-heksan : Aseton (7:3)
selanjutnya lempeng KLT dikeluarkan dari
chamber kemudian amati noda dengan
lampu UV 366 nm.
6. Analisa Kuantitatif
a. Pembuatan Larutan Induk Beta Karoten
1000 ppm
Ditimbang teliti 50 mg beta karoten
murni, dilarutkan dengan Petroleumeter
hingga volume 50 mL pada labu ukur.
Diperoleh larutan dengan konsentrasi 1000
ppm. Larutan induk diencerkan menjadi
500 ppm dengan mengambil 25 mL dari
larutan induk Beta Karoten lalu masukan ke
labu 50 mL cukupkan volumenya dengan
petroleum eter hingga tanda batas. Labu
ditutup dengan aluminum foil karena beta
karoten mudah teroksidasi dan tidak stabil
apabila terkena cahaya (Syarif,2013).
b. Penentuan Panjang Gelombang Serapan
Maksimum Beta Karoten
Untuk penentuan panjang gelombang
serapan maksimum beta karoten dilakukan
pada konsentrasi 120 ppm dengan cara
dipipet 2,4 mL larutan beta karoten 500
ppm, masukkan ke dalam labu ukur 10 mL.
Tambahkan petroleum eter hingga tanda
batas, homogenkan. Lapisi labu ukur
dengan aluminium foil. Kemudian diukur
panjang gelombang serapan maksimum
beta karoten dengan Spektrofotometer UV
Visibel pada rentang 400-800 nm
(Syarif,2013).
c. Pembuatan Kurva Kalibrasi Beta
Karoten
Dari konsentrasi 500 ppm dipipet 0,8
Page 5
mL, 1,6 mL, 2,4 mL, 3,2 mL dan 4 mL.
Dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL dan
dicukupkan volumenya dengan petroleum
eter hingga hingga tanda batas Diperoleh
larutan baku dengan konsentrasi 40 ppm,
80 ppm, 120 ppm, 160 ppm, dan 200 ppm.
Setelah itu diukur absorbansinya dengan
Spektrofotometer UV-Vis pada panjang
gelombang 477,0 nm. Kemudian buat kurva
kalibrasi beta karoten dan tentukan
persamaan regresi linearnya (Syarif,2013).
d. Pengukuran Kadar Beta Karoten pada
Sampel
Penetapan kadar beta karoten, dipipet
dengan teliti 2 ml dari 100 mL larutan
sampel masing-masing daun pepaya,
masukkan ke dalam labu ukur 10 ml dan
ditambahkan larutan petrolum eter hingga
tanda batas, ukur serapannya pada panjang
gelombang maksimum beta karoten 477,0
nm. Untuk blanko digunakan petroleum
eter, kemudian diukur absorbannya dengan
Spektrofotometer UV-Vis pada panjang
gelombang maksimum 477,0 nm
(Syarif,2013). Kadar beta karoten dihitung
berdasarkan persamaan regresi linear dar
kurva kalibrasi y= a + bX.
7. Analisis Data
a. Uji Linearitas
Uji linearitas dan kurva kalibrasi
dibuat dengan menggunakan persamaan
garis regresi linear (y = a + bx) antara
konsentrasi beta karoten dengan serapan.
Persamaan linier ini dapat digunakan jika
faktor korelasinya 0,98 < r < 1 (Harmita,
2006).
b. Simpangan Baku Residual, Batas deteksi
(BD) dan Batas Kuantitasi (BK)
( y− yi)2
SBr = √ ∑
n−2
3 x SBr
BD =
Slope(b)
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
10 X SBr pepeya telah diidentifikasi di Herbarium ANDA
BK =
slope(b) jurusan Biologi Fakultas FMIPA Universitas
Keterangan : Andalas (UNAND) padang, guna untuk
SBr : Simpangan Baku Residual mengetahui spesies dari sampel yang digunakan
BD : Batas Deteksi (µg/mL) dengan no surat 096/KID/ANDA/II/2021.
BK : Batas Kuantitasi (µg/mL) Penetapan kadar beta karoten masing-
Y : Nilai absorban terbaca masing sampel diawali dengan cara
Yi : Nilai absorban perhitungan mengekstraksi sampel daun pepaya secara
(y-yi) : Selisih nilai absorban maserasi selama 24 jam didalam botol gelap
perhitungan dengan absorban menggunakan pelarut aseton, dikarenakan sampel
terbaca yang digunakan dalam keadaan segar. Beta
n : Jumlah data karoten ialah senyawa yang tidak stabil terhadap
cahaya dan panas, maka dari itu sampel tidak
c. Perhitungan Kadar Beta Karoten boleh diekstraksi dalam keadaan kering. Sampel
Cu x Fp x Vu yang di ekstraksi dalam keadaan basah akan lebih
Kadar =
Bs mudah untuk didapatkan kandungan beta

√X−X
2 karotennya. Kemudian hasil ekstraksi aseton
SD = selanjutnya diuapkan di rotary evaporator.
n−1
Keterangan : Masing-masing hasil ekstrak aseton yang
Cu = Konsentrasi Sampel (µg/mL) telah diuapkan diberikan perlakuan
Fp = Faktor Pengenceran Baku (mL/mL) saponifikasi/penyabunan dengan menambahkan
Vu = Volume Sampel (mL) KOH 15% dalam metanol. Saponifikasi bertujuan
Bs = Berat Sampel (g) untuk menarik klorofil yang terdapat dalam
X = Absorban yang terbaca sampel dan juga mengekstraksi lemak yang
X = Absorban rata-rata mungkin terdapat dalam sampel. (Widayanto,
2007).
SD = Standar Deviasi
Selanjutnya pada sampel daun pepaya yang
d. Uji Anova Satu Arah
sudah disaponifikasi dilakukan fraksinasi di
Data kadar Beta Karoten daun muda,
dalam corong pisah dengan menambahkan
daun setengah tua dan daun tua dari pepaya
petroleum eter 3x25 mL sehingga nantinya akan
penang diolah dengan menggunakan analisa
terbentuk 2 fase. Fase lapisan atas merupakan
ANOVA satu arah, uji dilanjutkan dengan
petroleum eter dan beta karoten sedangkan fase
uji Duncan yang terdapat perbedaan.
lapisan bawah merupakan aseton dan air.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Kemudian dicuci dengan aquadest. Tujuan
Pada penelitian ini dilakukan penetapan
ekstraksi kembali dengan petroleum eter agar
kadar beta karoten dari esktrak daun pepaya
beta karoten yang terkandung di dalam sampel di
Penang (Carica papaya L.) yaitu daun pepaya
tarik oleh petroleum eter sedangkan penambahan
penang muda, daun pepaya penang tua dan daun
aquadest dilakukan untuk membuang zat-zat
pepaya penang sangat tua dengan menggunakan
polar (Idris, 2011).
Spketrofotometri UV-Vis. Sampel daun pepaya
Tabel 1. Hasil Pemeriksaan Organoleptis Daun
penang (Carica papaya L.) diperoleh di salah
Pepaya Penang
satu perkebunan pepaya warga di kabupaten
No Jenis Bau Warna Bentuk
Padang Pariaman. Sebelumnya sampel daun
. Daun
Page 6
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
1. Daun Khas Hijau Kental Dimana ekstrak daun pepaya penang muda
Muda Kecoklatan diperoleh susut pengeringan dan kadar abu: 10,19
2. Daun Khas Hijau Kental %, dan 3,07 %; daun pepaya tua: 6,22 % dan3,08
Tua Kecoklatan %; daun pepaya sangat tua: 9,08% dan 3,09%.
3. Daun Khas Hijau Kental
Persyaratan kadar abu pada ekstrak daun pepaya
Sangat Kecoklatan
Tua berdasarkan Materia Medika Indonesia Edisi V
Dari hasil pemeriksaan Organoleptis adalah tidak lebih dari 12 % (Depkes RI, 1989)
ekstrak daun pepaya penang (Carica papaya L.) maka masing-masing kadar abu ekstrak daun
yang telah dilakukan memiliki bau khas daun pepaya memenuhi persyaratan. Sedangkan untuk
pepaya dengan bentuk cairan kental yang susut pengeringan kurang dari 30,00% hal ini
bewarna hijau kecoklatan. menunjukan ekstrak yang digunakan adalah
ekstrak kental (Pankhurst,et al.,2003).

Tabel 2. Hasil Rendemen Dari Ekstrak Daun Tabel 4. Hasil Uji Analisa Kualitatif
Pepaya Penang No. Jenis Nilai Rf Nilai Rf
No. Jenis Rendemen (%) sampel pembanding
1. Daun muda 4,52 1. Daun muda 0,6 0,6
2. Daun tua 6,15 2. Daun tua 0,6 0,6
3. Daun sangat tua 6,84 3. Daun sangat 0,6 0,6
tua
Masing-masing ekstrak dari daun pepaya Analisa kualitatif dilakukan dengan
dilakukan perhitungan rendemen. Ekstrak daun menggunakan metode Kromatografi Lapis Tipis
pepaya penang muda diperoleh rendemen: 4,52 (KLT). Hal ini berguna untuk mengidentifikasi
%; daun pepaya tua: 6,15 %;daun pepaya sangat dan membuktikan apakah masing-masing sampel
tua: 6,84%. Rendemen ialah perbandingan jumlah daun pepaya mengandung beta karoten atau tidak
ekstrak yang diperoleh dengan berat sampel dengan melihat nilai Rf nya. Nilai Rf adalah
segar. Nilai rendemen berkaitan dengan perbandingan jarak yang ditempuh oleh senyawa
banyaknya kandungan bioaktif yang terkandung. dari titik asal dengan jarak yang ditempuh oleh
Semakin tinggi nilai rendemen maka semakin pelarut dari titik asal (Alegantina, 2010). Eluen
tinggi kandungan zat yang tertarik pada suatu yang digunakan pada penelitian ini adalah N-
sampel (Budiyanto, 2015). heksan : Aseton (7:3). Masing-masing sampel
Tabel 2. Hasil Susut Pengeringan dan Kadar Abu daun pepaya penang (Carica papaya L.) dan
ekstrak Daun Pepaya penang pembanding beta karoten murni, diperoleh noda
No. Jenis Susut Kadar pada plat KLT dibawah lampu UV 366 nm
Pengeringan Abu (%)
dengan nilai Rf 0,6. Jika zat uji yang
(%)
diidentifikasi dan baku pembanding sama, maka
1. Daun muda 10,19 3,07
2. Daun tua 6,22 3,08 terdapat kesesuaian dalam warna dan harga Rf
3. Daun sangat 9,08 3,09 (Depkes RI, 2008). Hasil analisa yang diperoleh
tua menunjukan bahwa masingmasing sampel daun
Selanjutnya masing-masing ekstrak kental pepaya penang (Carica papaya L.) dan
dari daun pepaya (Carica papaya L.) penang pembanding memiliki nilai Rf yang sama, hal ini
yang sudah di uapkan kemudian dilakukan menyimpulkan masing-masing sampel daun
karakterisasi susut pengeringan dan kadar abu. pepaya penang (Carica papaya L.) mengandung

Page 7
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
senyawa beta karoten.
5 cm
3 cm
Gambar 1. Analisa Kualitatif Lampu UV 366nm
Analisa Kuantitatif beta karoten dengan
menggunakan Spektrofotometer UV-Vis. Dimana
digunakan beta karoten murni sebagai
pembanding dan dibuat 5 deret konsentrasi yaitu
40 ppm, 80 ppm, 120 ppm, 160 ppm dan 200
ppm. Diukur masing-masing serapan konsentrasi
dengan spektrofotometri UV-Vis pada panjang
gelombang serapan maksimum beta karoten
477,0 nm, dan diperoleh persamaan regresi linear
y = 0,173 + 0,0026275 x dengan nilai koefisien
korelasi 0,9997. Nilai koefisien korelasi yang
baik hampir mendekati 1 (Harmita, 2014). Hal ini
berarti parameter yang diukur sesuai dengan deret
konsentrasi yang dibuat karena memiliki
linearitas yang baik.
Page 8
Gambar 2. Spektrum Panjang Gelombang
Serapan Maksimum Beta
Karoten
Selanjutnya dilakukan penentuan batas
deteksi (BD) dan batas kuantitasi (BK). Batas
deteksi merupakan konsentrasi terkecil analit
dalam sampel yang dapat di deteksi yang masih
memberikan respon signifikan dibandingkan
blangko. Sedangkan Batas kuantitasi merupakan
kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih
dapat memenuhi kriteria cermat dan seksama
(Harmita, 2006). Hasil perhitungan diperoleh
nilai batas deteksi sebesar 0,554466 µg/mL,
sedangkan nilai batas kuantitasi sebesar 1,848220
µg/mL.
Tabel 4. Hasil Kadar Beta Karoten Pada Masing-
masing Perkembangan Daun
No. Jenis Kadar beta
karoten(mg/100 g)
1. Daun muda 21,5413
2. Daun tua 32,1979
3. Daun sangat tua 13,3206
Selanjutnya perhitungan kadar beta karoten
pada berbagai tingkat perkembangan daun pepaya
penang (Carica papaya L.) yaitu daun pepaya
penang muda daun pepaya penang tua dan daun
pepaya penang sangat tua dengan menggunakan
spektrofotometer UV-Vis pada panjang
gelombang serapan maksimum 477,0 nm dengan
3 kali replikasi. Diperoleh kadar rata-rata beta
karoten masing-masing tingkat perkembangan
daun pepaya penang diantaranya daun pepaya
muda 21,5413 mg/100g; daun pepaya tua
32,1979 mg/100g; daun pepaya sangat tua
13,3206 mg/100g. Kadar tertinggi beta karoten
terdapat pada sampel daun pepaya tua, kemudian
diikuti oleh daun pepaya muda. Sedangkan daun
pepaya sangat tua menempati posisi terendah
untuk kadar beta karotennya. Perbedaan
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
kandungan komponen kimia ini terjadi karena
adanya perbedaan gejala
metabolisme daun pada masing-masing
perkembangan daun yang berhubungan dengan
proses fotosintesis (Kurniawan, et al.,2010).
Karotenoid merupakan pigmen aksesoris
yang membantu dalam proses fotosintesis.
Menurut (Hopkins, 2008) peran karotenoid dalam
fotosintesis adalah membantu mengabsorbsi
cahaya sehingga cahaya yang dipakai untuk
proses fotosintesis menjadi lebih besar. Energi
yang diserap oleh karotenoid diteruskan pada
klorofil yang kemudian digunakan dalam
fotosintesis.
Semakin banyak kandungan klorofil akan
meningkatkan kemampuan daun untuk
melakukan fotosintesis yang tentunya akan
mempengaruhi metabolisme daun. Kandungan
klorofil tertinggi terdapat pada daun pepaya tua,
hal ini bisa dilihat secara fisik daun tua memiliki
warna yang lebih hijau di bandingkan dengan
daun pepaya muda maupun daun pepaya sangat
tua. Menurut (Richardson,et al.,2002) kandungan
klorofil dipengaruhi oleh umur daun, kadar
klorofil akan meningkat seiring bertambahnya
umur daun sampai daun berkembang penuh dan
kemudian menurun ketika daun semakin tua yang
mengakibatkan melemahnya kemampuan daun
dalam berfotosintesis pun mulai menurun secara
perlahan.
Dalam proses fotosintesis dan biosintesis
karotenoid memerlukan cahaya matahari untuk
keberlangsungannya. Menurut (Johnson dan An,
1991) Cahaya merupakan salah satu faktor
penting dalam biosintesis karotenoid. Menurut
(Bramley, 2002) peran cahaya tersebut adalah
untuk meningkatkan aktivitas enzim yang
berperan dalam biosintesis karotenoid. Daun
pepaya tua memiliki kandungan karotenoid tinggi
karena mampu mengoptimalkan cahaya dalam
berlangsungnya biosintesis karotenoid.
Kadar beta karoten daun pepaya muda
berada di posisi nomor dua tertinggi setelah daun
Page 9
pepaya tua. Kemampuan menyerap cahaya untuk
keberlangsungan biosintesis karotenoid tidak
sebesar daun pepaya tua, hal ini terjadi karena
ukuran luas daun pepaya muda tidak seluas daun
pepaya tua. Menurut penelitian yang telah di
lakukan oleh (Kurniawan,et al.,2010) Serapan
energi cahaya dapat dipengaruhi oleh morfologi
daunnya. Daun pepaya muda memiliki morfologi
daun yang lebih kecil dari daun pepaya tua,
sehingga energi cahaya yang diserap kurang
optimal. Sehingga kadar beta karoten daun
pepaya muda lebih kecil dari kadar beta karoten
daun pepaya tua.
Kadar beta karoten terendah terjadi pada
daun sangat tua, hal ini disebabkan terganggunya
proses fotosintesis sehingga berkurangnya
penyerapan sinar matahari dan biosintesis
pembentukan karotenoid juga terganggu.
Menurut (Ajiningrum, 2018) Kemampuan daun
untuk melakukan fotosintesis semakin lama
semakin meningkat sampai daun berkembang
penuh dan kemudian mulai menurun secara
perlahan. Daun tua yang hampir mati kemudian
berubah warnanya menjadi kuning dan tidak
mampu berfotosintesis karena klorofil rusak dan
fungsi kloroplas hilang.
Tabel 6. Hasil Uji Analisa Statistik Anova Satu
Arah
Sum of Mean
Squares Df Square F Sig.
Between 602,711 2 301,356 536,250 0,000
Groups
Within 3,372 6 0,562
Groups
Total 606,083 8
Dari data analisa statistik untuk penetapan
kadar beta karoten pada berbagai tingkat
perkembangan daun pepaya penang dilakukan
dengan uji Anova satu arah didapatkan nilai
signifikan 0,000 (P<0,05), maka untuk itu H0
ditolak dan H1 diterima, yaitu adanya perbedaan
yang signifikan dari hasil pemeriksaan kadar
pada berbagai tingkat perkembangan daun pepaya
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
penang yaitu daun muda daun tua dan daun perbedaan kadar yang disebab kan karena
sangat tua. perbedaan varietas.
Tabel 7. Hasil Uji Analisa Statistik Duncan
DAFTAR PUSTAKA
Duncan
Ajiningrum, P. . (2018). Kadar Total Pikmen
Subset for alpha = 0.05
Klorofil Tanaman Avicennia Marina Pada
Pengulangan N 1 2 3 Tingakat Perkembangan Daun Yang
daun pepaya 3 13,320600 Berbeda. Staf Pengajar Prodi Biologi
sangat tua F.MIPA Universitas PGRI Adi Buana
daun pepaya 3 21,541333 Surabaya, 11(2), 52–59.
muda
Alegantina, S. dan A. I. (2010). Identifikasi dan
daun pepaya 3 33,263533 Penetapan Kadar Senyawa Kumarin Dalam
tua Ekstrak Metanol (Artemisia anna L.) Secara
Sig. 1,000 1,000 1,000 Kromatografi Lapis Tipis-Densitometri.
Hasil dari uji lanjutan Duncan terlihat Pusat Penelitian Dan Pengembangan
bahwa berbeda secara nyata padasetiap tingkat Biomedis Dan Farmasi, 38, 17–28.
perkembangan daun pepaya penang. Kadar beta
Baga Kalie, M. (1996). Bertanam Pepaya.
karoten tertinggi terdapat pada daun pepaya Penebar Swadaya.
penang tua, kemudian daun pepaya muda dan
kadar beta karoten terendah terdapat pada daun Bramley, P. . (2002). Regulation of Carotenoid
pepaya sangat tua. Formation During Tomato Fruit Ripening
and Development. Journal of Experimental
KESIMPULAN Botany, 377 (53), 2107–2113.
Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh
Budiyanto,A.(2015). Potensi
maka dapat disimpulkan bahwa: Antioksidan,inhibitor Tirosinase dan Nilai
1. Uji kuantitatif beta karoten pada masing- Toksisitas dari Beberapa Spesies Tanaman
masing sampel daun pepaya penang (Carica Mangrove di Indonesia. Institute Pertanian
papaya L.)dengan spektrofotometri UV-Vis Bogor.
didapatkan kandungan beta karoten yaitu:
Daun pepaya muda 21,5413 mg/100g, Daun Depkes RI. (1989). Materia Medika (5th ed.).
Direktorat Pengawasan Obat dan Makanan.
pepaya tua 32,1979 mg/100g, dan daun pepaya
sangat tua 13,3206 mg/100g.
2. Berdasarkan Uji Analisis Anova satu arah Depkes RI. (2002). Parameter Standar Umum
didapatkan nilai signifikan 0,000 (p<0,05), Ekstrak Tumbuhan Obat. Depkes RI.
adanya perbedaan yang signifikan dari hasil
pemeriksaan kadar beta karoten pada tingkat Depkes RI. (2008). Farmakope Herbal Indonesia
perkembangan daun pepaya penang (1st ed.). Depkes RI.

Harmita. (2006). Analisa Fisikokimia. UI Press.

SARAN
Disarankan kepada peneliti selanjutnya Harmita. (2014). Analisa Fisikokimia
untuk melakukan penelitian kandungan beta (Kromatografi). EGC.
karoten terhadap daun pepaya dengan varietas
yang berbeda, guna melihat apakah terdapat Hasidah, M. D. W. (2017). Kandungan Pigmen
Klorofil,Karotenoid dan Antosianin Daun
Page
10
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
Caldium. Protobiont, 6(2), 29–37.
Hopkins, W. dan H. N. (2008). Introduction to
Plant Physiology (4th ed.). John Wiley dan
Son.
Idris, N. (2011). Analisis Kandungan Beta
Karoten dan Penentuan Aktivitas Pankhurst QA,Connoly J,Jones SK, D. J. (2003).
Antioksidan dari Buah Melon (Cucumis
melo L.) Secara Spektrofotometri UV-Vis.
Skripsi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas
Islam Negeri Alauddin.
Johnson,E.A dan An, G. . (1991). Astaxantin
from Microbial Source. Critical Rev
Biotechnol, 11(4), 297--326.
Kementan. (2015). Data Produksi dan Luas
PanenTahun2014.http://aplikasi.pertanian.g
o.id/bdsp/newkom.asp
Otsuki dang, Kumagai kondo, I. M. (2010).
Aqueous extract of Carica papaya leaves
exhibits anti tumor activity and
immunomodulatoryeffects.J.Ethnopharmacol
, 127(3), 760–767.
Applications of magnetic nanoparticles in
biomedicine. 36, 167–181.
Paramastri dan Anindha. (2011). Pepaya Yang
Tak Busuk Saat Distribusi.
http://repository.ipb.ac.id/handle/123456789
/52408
Richardson,A.D,Dugan,S.P,Berlyn, G. . (2002).
An Evaluation of Noninvasive Mehtods to
Estimate Foliar Chlorophyll Content. USA
Jurnal Phytologist, 153(1), 20–24.

Kurniawan,Madha, M. I. dan Y. N. (2010). Rustam,Atmasari, Y. (2007). Efek Antiinflamasi

Kandungan Klorofil,Karotenoid dan Ekstrak Etanol Kunyit (Curcuma domestica
Vitamin C pada Berbagai Spesies Tumbuhan Val). Sains Dan Teknologi Farmasi, 12(2)
Akuatik. Buletin Anatomi Dan Fisiologi, 28. 112–115.

Laily AN,Suranto, S. (2012). Characteristices of Setiawati,T,Saragih, N. dan M. (2016). Analisis

Carica pubescens of Dieng Plateau Central Kadar Klorofil dan Luas Daun Lampeni
Java according to its (Ardisia humilis Thunbergh) Pada tingkat
morphology,antioxidant and protein pattern. perkembangan yang berbeda di Cagar Alam
In Nusantara Bioscience. Pengandaran. Prosiding Seminar MIPA
Mahmud, M. dan H. (2009). Tabel Komposisi Peran Penelitian Ilmu Dasar dalam
Pangan Indonesia. Persagi. Menunjang Pembangunan
Berkelanjutan,Universitas Padjajaran.
Maisarah, Nurul, Asma, F. (2013). Antioxidant
Analysis of Different Parts of Carica Sutarpa dan Sutama. (2008). Daun Pepaya
papaya. IFRJ, 20(3), 1043–1048. Dalam Ransum Menurunkan Kolesterol
pada Serum dan Telur Ayam. Jurnal
Marelli de souza,L,ferrira,K.S,Chaves,J.B.P dan Veteriner, 9(3), 152–156.
Teixeira, S. . (2008). Lascorbic Acid,Beta Syarif,S.Flaning, M. (n.d.). Analisis Kandungan
Carotene and Lycopen Content in Papaya Beta Karoten Pada Jenis Sawi Putih
Fruit (Carica papaya L.). Journal Sci.Agri. (Brassica pekinensia L.) dan jenis Sawi
(Peracicaba,Braz), 65(3). Hijau (Brassica juncea L.) Secara
Spektrofotometri UV-Vis. As-Syifaa, 05(01),
Murhalien dan Ani Nurgiartiningsih. (2015). 55–61.
Pemanfaatan Limbah Daun Pepaya dalam
bentuk tepung dan jus utuk meningkatkan USDA. (2001). Treating Livestock Medical Plant
performans produk ayam arab. Research or Toxis Carica papaya. Available on
Journal of Life Science, 02(2). Lineat.
Page
11
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
http://www.probe.nalusda.gov:8300/ogibin/b
rowse/phytochemdb

Widayanto, E. (2007). Optimasi Pemekatan

Karotenoid pada metil ester kasar (crude
methyl ester) Minyak Sawit dengan metode
Kromatografi Kolom Adsorpsi. Skripsi IPB.

Page
12