Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021

PENETAPAN KADAR BETA KAROTEN PADA BERBAGAI

TINGKAT PERKEMBANGAN DAUN PEPAYA PENANG (Carica
papaya L.) DENGAN SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS

ARTIKEL ILMIAH

Oleh :

MIKELWAGUCI
1704039

PROGRAM STUDI SI FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS PERINTIS INDONESIA
2021
Page 1
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
PENETAPAN KADAR BETA KAROTEN PADA BERBAGAI TINGKAT
PERKEMBANGAN DAUN PEPAYA PENANG (Carica papaya L.) DENGAN
SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS
Mikel Waguci, Hazli Nurdin dan Dedi Nofiandi
Program Studi S1 Farmasi, Fakultas Farmasi
Universitas Perintis Indonesia
Email: wagucimikel@gmail.com

ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian tentang penetapan kadar beta karoten pada berbagai tingkat
perkembangan daun pepaya penang (Carica papaya L.) yaitu daun muda, daun tua dan daun sangat
tua dengan spektrofotometer UV-Vis. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui perbedaan kadar
beta karoten pada ketiga tingkat perkembangan daun pepaya penang (Carica papaya L.)
Masingmasing daun pepaya penang diekstrak dengan menggunakan metode maserasi dengan pelarut
aseton. Selanjutnya, ekstrak aseton diberikan perlakuan saponifikasi dengan KOH 15 % dan
diekstrak kembali dengan pelarut petroleum eter. Ekstrak yang diperoleh kemudian dilakukan uji
kualitatif dengan menggunakan metoda kromatografi lapis tipis, selanjutnya dilakukan uji kuantitatif
dengan menggunakan metoda spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang serapan maksimum
477,0 nm. Hasil uji kualitatif menunjukkan bahwa daun pepaya penang muda, daun tua dan daun
sangat tua teridentifikasi mengandung senyawa beta karoten dengan nilai Rf 0,6. Hasil uji kuantitatif
menunjukkan bahwa kadar rata-rata beta karoten pada daun pepaya penang muda daun tua dan daun
sangat tua masing-masing 21,5413 mg;32,1979 mg;13,3206 mg/100g. Kadar beta karoten tertinggi
terdapat pada daun pepaya tua, diikuti oleh daun pepaya muda dan daun pepaya sangat tua. Hasil
analisa data menggunakan Anova satu arah dilanjutkan dengan uji duncan (SPSS 24.0) menunjukkan
adanya perbedaan yang signifikan pada masing-masing tingkat perkembangan daun pepaya penang
(p<0,05).
Kata Kunci: Daun pepaya penang muda (Carica papaya L.), daun pepaya penang tua (Carica
papaya L.), daun pepaya penang sangat tua (Carica papaya L.), beta karoten dan
spektrofotometri UV-Vis.
ABSTRACT

The Research on beta carotene of penang papaya has been carried out. The purpose of the
research was to determine the content of beta carotene in a few levels of penang papaya leaves
(Carica papaya L.) green, dark green and yellowish green leaves, the method used was UV-Vis
Spectrophotometry. The research was also aimed to see difference of beta carotene contents on the
three levels of the leaves. The papaya leaves were extracted by using maceration method using
aceton as a solvent. Aceton extract was saponified by 15 % KOH in methanol. The saponified matter
was re-extracted by petroleum eter. The extract obtaind was tested qualitatively by using thin layer
chromatography (TLC) the results was tested quantitatively by UV-Vis spectrophotometry method
using maximum wavelength of 477.0 nm. The qualitative test showed that green, dark green and
yellowish green leaves contained beta carotene wish Rf 0.6. Thequantitative test showed that beta
carotene in green, dark green and yellowish green leaves were 21.5413, 32.1979 and 13.3206 mg/100
g respectively. The highist beta carotene content was in dark green leaves followed by green and
yellowish green leaves respectively. Analysis method using one way ANOVA followed by Duncan
test (SPSS 24.0) showed the significant difference among the levels of papaya leaves (p<0.05).
Keywords : Penang papaya leaves green (Carica papaya L.), penang papaya leaves dark green
(Carica papaya L.) penang papaya leaves yellowish green (Carica papaya L.), beta
carotene and UV-Vis Spectrophotometry.
Page 2
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
PENDAHULUAN
Indonesia mempunyai berbagai kekayaan
keanekaragaman hayati yang luar biasa, terdapat
sekitar 40.000 jenis tumbuhan dan sekitar 1300
diantaranya digunakan sebagai obat tradisional
yang berkhasiat dan dapat dikembangkan secara
luas (Rustam dan Yanwirasti 2007). Salah satu
nya ialah tanaman pepaya. Pepaya merupakan
salah satu buah lokal unggulan Indonesia baik
konsumsi dalam negeri maupun ekspor keluar
negeri (Paramastri dan Anindha, 2011). Produksi
buah pepaya di Indonesia tahun 2014 mencapai
830.491 ton dengan sentra produksi di Jawa
Timur, Jawa Barat Jawa Tengah dan Lampung
(Kementan, 2015).
Tanaman pepaya memiliki berbagai macam
varietas yang terdiri dari pepaya semangka,
pepaya jinggo, pepaya mas, pepaya item, pepaya
ijo, pepaya cibinong, dan pepaya Bangkok (Baga
Kalie, 1996). Berdasarkan hasil survei dilapangan
yang dilakukan di beberapa kebun pepaya di kota
Padang, ditemukan berbagai macam varietas
pepaya lainnya yaitu pepaya california, pepaya
merah delima dan pepaya penang. Dari ketiga
pepaya tersebut yang paling banyak ditanam dan
mendominasi perkebunan pepaya ialah pepaya
penang. Pepaya penang memiliki panjang buah
sekitar 20 cm bagian tengah buah agak berlekuk
tangkai daun bewarna hijau kemerahan dan
pertulangan daunnya terlihat jelas.
Daun pepaya megandung berbagai macam
senyawa antara lain alfa tokoferol, asam askorbat
flavonoid dan beta karoten (Maisarah,et
al.,2013). Daun pepaya dengan berat 100 g
mengandug vitamin E:136 mg, vitamin C:140
mg, vitamin B1:0,15 g kalsium 35 g, fosfor 63
mg dan zat besi 0,80 mg, niasin 2,1 mg dan Beta
karoten sebesar 11.565 μg (USDA, 2001).
Semua vitamin dan mineral yang terdapat
pada daun pepaya tentunya berguna bagi
kesehatan tubuh manusia. Daun pepaya
mempunyai banyak manfaat seperti
meningkatkan nafsu makan, memperbaiki saluran
Page 3
pencernaan dan meningkatkan kesehatan tubuh
(Murhalien dan Ani, 2015). Selain itu Enzim
papain pada daun pepaya sebagai antimikroba
dan beta karoten pada daun pepaya dapat
berfungsi sebagai antioksidan (Sutarpa dan
Sutama, 2008). Daun pepaya juga memiliki
aktivitas anti kanker dengan cara apoptosis di
induksikan pada sel kanker (Otsuki,et al.,2010).
Daun pepaya penang mempunyai tingkat
perkembangan daun, diantaranya daun pepaya
muda, daun pepaya tua dan daun pepaya sangat
tua yang ditunjukkan dengan perubahan warna
daun yang mulai menguning. Adanya perbedaan
warna pada daun menunjukkan terdapatnya
perbedaan kandungan pigmen daun termasuk
karotenoid (Hasidah, 2017).
Perbedaan kandungan komponen kimia
dipengaruhi oleh gejala metabolisme daun pada
masing-masing tingkat perkembangan daun yang
berhubungan dengan proses fotosintesis. Salah
satu faktor yang mempengaruhi kemampuan daun
dalam berfotosintesis ialah klorofil. Klorofil
merupakan pigmen daun yang berperan penting
dalam proses fotosintesis yang dapat menyerap
cahaya matahari. Meningkatnya kadar klorofil
seiring dengan bertambahnya umur daun hingga
daun berkembang penuh dan kemudian menurun
ketika daun semakin tua (Setiawati,et al., 2016).
Kandungan klorofil yang banyak akan
meningkatkan kemampuan daun dalam
melakukan fotosintesis sehingga meningkatkan
metabolisme daun yang tentunya mempengaruhi
komponen kimia pada masing-masing tingkat
perkembangan daun, seperti karotenoid
(Richardson,et al.,2002). Karotenoid ialah salah
satu kandungan fitokimia yang terdapat pada
tanaman. Kandungan fitokimia dipengaruhi oleh
faktor internal seperti gen dan faktor eksternal
seperti cahaya (Laily,2012).
Menurut penelitian yang telah dilakukan
sebelumnya oleh Marelli,et al.,(2008) buah
pepaya mengandung beta karoten sebesar 20,722
µg/100 g berat pepaya. Sedangkan menurut
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
penelitian yang dilakukan oleh Sutarpa dan
Sutama (2008). daun pepaya mengandung beta C. Prosedur Kerja
karoten sebesar 11,565 µg/100 g. Dan menurut 1. Penyiapan Sampel
penelitian yang dilakukan oleh Mahmud (2009)
kadar beta karoten pada daun pepaya sebesar
18,250 µg/100 g.
Penelitian mengenai penentuan kadar beta
karoten pada berbagai tingkat perkembangan
daun pepaya belum pernah dilakukan, oleh
karena itu peneliti tertarik melakukan penelitian
penentuan kadar beta karoten pada berbagai
tingkat perkembangan daun pepaya Penang
(Carica papaya L.) yaitu daun muda, daun tua
dan daun sangat tua. Hal ini berguna untuk
mengetahui apakah terdapat perbedaan
kandungan beta karoten pada berbagai tingkat
perkembangan daun pepaya penang (Carica
papaya L.). Kadar beta karoten ditentukan
menggunakan instrumen spektrofotometer UV-
Vis. Kadar beta karoten yang diperoleh kemudian
diolah dengan analisa statistik ANOVA satu arah.
METODOLOGI PENELITIAN
A. Waktu Dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan ± 6 bulan di
Laboratorium Kimia Farmasi dan Laboratorium
Kimia Bahan Alam Fakultas Farmasi, Universitas
Perintis Indonesia.
B. Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan : mencampurkan 7 mL n-heksan dengan 3
Spektrofotometer UV-Vis (T92+), corong pisah
(Pyrex), corong (Pyrex) gelas ukur (Pyrex), labu
Erlenmeyer (pyrex), labu ukur (Pyrex),
Kromatografi lapis tipis Rotary evaporator, oven,
timbangan analitik, pipet tetes, spatel, batang
pengaduk kertas saring, aluminium foil, dan alat-
alat gelas yang menunjang penelitian.
Bahan-bahan yang digunakan : Daun Pepaya
Penang, Aseton, Petroleum eter, Beta Karoten
murni, N-heksan, Metanol, Natrium Kalium
hidroksida (KOH), sulfat anhidrat (Na2SO4
anhidrat), Plat KLT Silika gel 60 F254, dan
Aquadest.
Page 4
a. Pengambilan Sampel
Sampel yang digunakan pada
penelitian ini ialah daun pepaya penang
yang terdiri dari daun muda, daun tua dan
daun sangat tua. Sampel daun pepaya
diperoleh dari salah satu perkebunan
pepaya warga di kabupaten Padang
Pariaman.
b. Identifikasi Sampel
Identifikasi seluruh bagian tanaman
pepaya dilakukan di Herbarium Jurusan
Biologi Universitas Andalas (UNAND)
Padang.
c. Preparasi Sampel Daun Pepaya
Masing-masing sampel daun papaya
penang yang diperoleh dibersihkan dan
pisahkan daun dari tangkainnya. Kemudian
masing-masing sampel daun pepaya
penang dipotong kecil-kecil. Selanjutnya
sampel ditimbang sebanyak 250 g
(Syarif,2013).
2. Penyiapan Larutan Pereaksi
a. Pembuatan Larutan Fase Gerak
N-heksan : aseton (7:3) dibuat
sebanyak 10 mL, dengan cara
mL aseton dalam botol eluen lalu dikocok
hingga homogen.
b. Pembuatan Larutan KOH 15% b/v
dalam methanol
Ditimbang 7,5 g KOH, dilarutkan
dalam 25 mL metanol hingga larut.
Kemudian cukupkan volumenya hingga 50
mL dengan metanol (Syarif,2013).
3. Ekstraksi Sampel
a. Daun pepaya yang sudah diberi perlakuan
ditimbang sebanyak 250 g masukkan ke
dalam wadah maserasi dan ditambahkan
800 mL aseton 6 jam pertama diaduk
sesekali kemudian dimaserasi selama 24
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
jam, lalu disaring untuk memisahkan ampas
dan ekstrak. Ampasnya kemudian di
maserasi kembali dengan aseton. Proses
ekstraksi ini diulangi sebanyak 3 kali
hingga filtrat terakhir tidak berwarna lagi.
b. Hasil dari ekstrak aseton yang diperoleh di
uapkan dengan Rotary evaporator sampai
kental dan hitung persentase (%) rendemen
ekstrak.
c. 5 g esktrak aseton yang telah di uapkan
kemudian dilakukan saponifikasi dengan
menambahkan KOH 15% dalam metanol
1:1 yaitu sebanyak 5 mL masukan ke dalam
labu gelap, dikocok dan diamkan selama 1
malam.
d. Hasil dari saponifikasi tersebut diekstrak
kembali dengan petroleum eter sebanyak 3
x 25 mL, lalu dicuci dengan air suling
sampai bebas basa dilakukan dalam corong 100%
pemisah, dikocok searah selama ± 20 menit
dengan sesekali tutup corong pemisah
dibuka, kemudian diamkan sampai
terbentuk dua lapisan, lapisan bawah (g)
(larutan aseton) dibuang dan lapisan atas
(larutan petroelum eter) disimpan untuk
perlakuan lebih lanjut.
e. Larutan petroleum eter yang sudah
diperoleh kemudian disaring dengan
penaburan Na2SO4 anhidrat diatas kertas
saring untuk menyerap sisa air. Hasil
ekstraksi dimasukan ke dalam labu ukur
100 mL dan dicukupkan dengan petroleum
eter hingga tanda batas.
4. Karakteristik Ekstrak Sampel
a. Organoleptis
Pemeriksaan organoleptis meliputi
bentuk, warna, bau dan rasa (Depkes RI,
2008).
b. Rendemen
Hitung rendemen dengan rumus :
Rendemen (%)
Berat ekstrak yang diperoleh
x 100 %
Berat Sampel
Page 5
(Depkes RI, 2008).
c. Pemeriksaan Susut Pengeringan
Timbang krus porselen yang
sebelumnya telah dikeringkan selama 30
menit di dalam oven pada suhu 105oC dan
didinginkan dalam desikator (A). Timbang
ekstrak sebanyak 1 g, masukkan ke dalam
krus dan timbang (B). Kemudian perlahan-
lahan krus digoyang agar ekstrak merata.
Masukkan ke dalam oven, buka tutupnya
dan biarkan tutup ini berada dalam oven.
Panaskan selama 1 jam pada suhu 105oC,
dinginkan dan masukkan ke dalam
desikator, timbang kembali. Ulangi
perlakuan seperti di atas hingga bobot tetap.
Hitung susut pengeringan dengan rumus:
( B−A )−(C− A)
% Susut Pengeringan = x
( B−A )
Keterangan :
A = berat krus kosong (g)
B = berat krus + sampel sebelum di oven
C = berat krus + sampel setelah di oven (g)
d. Penetapan Kadar Abu
Ekstrak daun pepaya penang (Carica
papaya L.) ditimbang 2g dimasukkan
kedalam krus porselen yang telah ditara
dipijarkan dalam furnes. Kemudian
dinaikkan secara bertahap hingga 600 ±
25oC sampai bebas karbon dan dinginkan di
dalam desikator dan ditimbang berat abu.
Kadar abu ditentukan dalam persen
terhadap berat sampel yang digunakan
(Depkes RI, 2002).
C−A
% Kadar Abu = x 100%
B− A
Keterangan :
A = Berat Krus Kosong (g)
B = Berat Krus + Sampel Sebelum
= Pemijaran (g)
C = Berat Krus + Sampel Setelah
Pemijaran (g)
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
5. Analisa Kualitatif
Pembanding Beta Karoten murni dan
sampel ditotolkan bersama-sama pada
lempeng KLT. Setelah kering lempeng
KLT dimasukan ke dalam Chamber
kemudian dielusi dengan menggunakan
cairan pengelusi n-heksan : aseton (7:3)
selanjutnya lempeng KLT dikeluarkan dari
Chamber kemudian amati noda dengan
lampu UV 366 nm.
6. Analisa Kuantitatif
a. Pembuatan Larutan Induk Beta Karoten
1000 ppm
Ditimbang teliti 50 mg beta karoten
murni, dilarutkan dengan petroleumeter
hingga volume 50 mL pada labu ukur.
Diperoleh larutan dengan konsentrasi 1000
ppm. Larutan induk diencerkan menjadi
500 ppm dengan mengambil 25 mL dari
larutan induk beta karoten lalu masukan ke
labu 50 mL cukupkan volumenya dengan
petroleum eter hingga tanda batas. Labu
ditutup dengan aluminum foil karena beta
karoten mudah teroksidasi dan tidak stabil
apabila terkena cahaya (Syarif,2013).
b. Penentuan Panjang Gelombang Serapan
Maksimum Beta Karoten
Untuk penentuan panjang gelombang
serapan maksimum beta karoten dilakukan
pada konsentrasi 120 ppm dengan cara
dipipet 2,4 mL larutan beta karoten 500
ppm, masukkan ke dalam labu ukur 10 mL.
Tambahkan petroleum eter hingga tanda
batas, homogenkan. Lapisi labu ukur
dengan aluminium foil. Kemudian diukur
panjang gelombang serapan maksimum
beta karoten dengan Spektrofotometer UV
Visibel pada rentang 400-800 nm
(Syarif,2013).
c. Pembuatan Kurva Kalibrasi Beta
Karoten
Dari konsentrasi 500 ppm dipipet 0,8
mL, 1,6 mL, 2,4 mL, 3,2 mL dan 4 mL.
Page 6
Dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL dan
dicukupkan volumenya dengan petroleum
eter hingga hingga tanda batas Diperoleh
larutan baku dengan konsentrasi 40 ppm,
80 ppm, 120 ppm, 160 ppm, dan 200 ppm.
Setelah itu diukur absorbansinya dengan
Spektrofotometer UV-Vis pada panjang
gelombang 477,0 nm. Kemudian buat kurva
kalibrasi beta karoten dan tentukan
persamaan regresi linearnya (Syarif,2013).
d. Pengukuran Kadar Beta Karoten pada
Sampel
Untuk penetapan kadar beta karoten
dipipet dengan teliti 2 ml dari 100 mL
larutan sampel masing-masing daun
pepaya, masukkan ke dalam labu ukur 10
ml dan ditambahkan larutan petrolum eter
hingga tanda batas, ukur serapannya pada
panjang gelombang maksimum beta
karoten 477,0 nm. Untuk blanko digunakan
petroleum eter kemudian diukur
absorbannya dengan Spektrofotometer UV-
Vis pada panjang gelombang maksimum
477,0 nm (Syarif,2013). Kadar beta karoten
dihitung berdasarkan persamaan regresi
linear dar kurva kalibrasi y= a + bX.
7. Analisis Data
a. Uji Linearitas
Uji linearitas dan kurva kalibrasi
dibuat dengan menggunakan persamaan
garis regresi linear (y = a + bx) antara
konsentrasi beta karoten dengan serapan.
Persamaan linier ini dapat digunakan jika
faktor korelasinya 0,98 < r < 1 (Harmita,
2006).
b. Simpangan Baku Residual, Batas deteksi
(BD) dan Batas Kuantitasi (BK)
( y− yi)2
SBr = √ ∑
n−2
3 x SBr
BD =
Slope(b)
10 X SBr
BK =
slope(b)
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
Keterangan : Andalas (UNAND) padang, guna untuk
SBr : Simpangan Baku Residual mengetahui spesies dari sampel yang digunakan
BD : Batas Deteksi (µg/mL) dengan no surat 096/KID/ANDA/II/2021.
BK : Batas Kuantitasi (µg/mL) Penetapan kadar beta karoten masing-
Y : Nilai absorban terbaca masing sampel diawali dengan cara
Yi : Nilai absorban perhitungan mengekstraksi sampel daun pepaya secara
(y-yi) : Selisih nilai absorban maserasi selama 24 jam didalam botol gelap
perhitungan dengan absorban menggunakan pelarut aseton, dikarenakan sampel
terbaca yang digunakan dalam keadaan segar. Beta
n : Jumlah data karoten ialah senyawa yang tidak stabil terhadap
cahaya dan panas, maka dari itu sampel tidak
c. Perhitungan Kadar Beta Karoten boleh diekstraksi dalam keadaan kering. Sampel
Cu x Fp x Vu yang di ekstraksi dalam keadaan basah akan lebih
Kadar = mudah untuk didapatkan kandungan beta
Bs

√
X−X 2 karotennya. Kemudian hasil ekstraksi aseton
SD = selanjutnya diuapkan di rotary evaporator.
n−1
Keterangan : Masing-masing hasil ekstrak aseton yang
Cu = Konsentrasi Sampel (µg/mL) telah diuapkan diberikan perlakuan
Fp = Faktor Pengenceran Baku (mL/mL) saponifikasi/penyabunan dengan menambahkan
Vu = Volume Sampel (mL) KOH 15% dalam metanol. Saponifikasi bertujuan
Bs = Berat Sampel (g) untuk membuang klorofil yang terdapat dalam
X = Absorban yang terbaca sampel dan juga membuang lemak yang mungkin
X = Absorban rata-rata terdapat dalam sampel. (Widayanto, 2007).
Selanjutnya pada sampel daun pepaya yang
SD = Standar Deviasi
sudah disaponifikasi dilakukan fraksinasi di
d. Uji Anova Satu Arah
dalam corong pisah dengan menambahkan
Data kadar Beta Karoten daun muda,
petroleum eter 3x25 mL sehingga nantinya akan
daun setengah tua dan daun tua dari pepaya
terbentuk 2 fase. Fase lapisan atas merupakan
penang diolah dengan menggunakan analisa
petroleum eter dan beta karoten sedangkan fase
ANOVA satu arah, uji dilanjutkan dengan
lapisan bawah merupakan klorofil. Kemudian
uji Duncan yang terdapat perbedaan.
dicuci dengan aquadest. Tujuan ekstraksi kembali
HASIL DAN PEMBAHASAN
dengan petroleum eter agar beta karoten yang
Pada penelitian ini dilakukan penetapan
terkandung di dalam sampel di tarik oleh
kadar beta karoten dari esktrak daun pepaya
petroleum eter sedangkan penambahan aquadest
Penang (Carica papaya L.) yaitu daun pepaya
dilakukan untuk membuang zat-zat polar (Idris,
penang muda, daun pepaya penang tua dan daun
2011).
pepaya penang sangat tua dengan menggunakan
Tabel 1. Hasil Pemeriksaan Organoleptis Daun
Spketrofotometri UV-Vis. Sampel daun pepaya
Pepaya Penang
penang (Carica papaya L.) diperoleh di salah
No Jenis Bau Warna Bentuk
satu perkebunan pepaya warga di kabupaten
. Daun
Padang Pariaman. Sebelumnya sampel daun 1. Daun Khas Hijau Kental
pepeya telah diidentifikasi di Herbarium ANDA Muda Kecoklatan
jurusan Biologi Fakultas FMIPA Universitas 2. Daun Khas Hijau Kental

Page 7
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
Tua Kecoklatan diperoleh susut pengeringan dan kadar abu: 10,19
3. Daun Khas Hijau Kental %, dan 3,07 %; daun pepaya tua: 6,22 % dan3,08
Sangat Kecoklatan %; daun pepaya sangat tua: 9,08% dan 3,09%.
Tua Persyaratan kadar abu pada ekstrak daun pepaya
Dari hasil pemeriksaan Organoleptis
berdasarkan Materia Medika Indonesia Edisi V
ekstrak daun pepaya penang (Carica papaya L.)
adalah tidak lebih dari 12 % (Depkes RI, 1989)
yang telah dilakukan memiliki bau khas daun
maka masing-masing kadar abu ekstrak daun
pepaya dengan bentuk cairan kental yang
pepaya memenuhi persyaratan. Sedangkan untuk
bewarna hijau kecoklatan.
susut pengeringan kurang dari 30,00% hal ini
menunjukan ekstrak yang digunakan adalah
ekstrak kental (Pankhurst,et al.,2003).

Tabel 4. Hasil Uji Analisa Kualitatif

Tabel 2. Hasil Rendemen Dari Ekstrak Daun
Pepaya Penang No. Jenis Nilai Rf Nilai Rf
sampel pembanding
No. Jenis Rendemen (%)
1. Daun muda 0,6 0,6
1. Daun muda 4,52 2. Daun tua 0,6 0,6
2. Daun tua 6,15 3. Daun sangat 0,6 0,6
3. Daun sangat tua 6,84 tua
Masing-masing ekstrak dari daun pepaya Analisa kualitatif dilakukan dengan
dilakukan perhitungan rendemen. Ekstrak daun menggunakan metode Kromatografi Lapis Tipis
pepaya penang muda diperoleh rendemen: 4,52 (KLT). Hal ini berguna untuk mengidentifikasi
%; daun pepaya tua: 6,15 %;daun pepaya sangat dan membuktikan apakah masing-masing sampel
tua: 6,84%. Rendemen ialah perbandingan jumlah daun pepaya mengandung beta karoten atau tidak
ekstrak yang diperoleh dengan berat sampel dengan melihat nilai Rf nya. Nilai Rf adalah
segar. Nilai rendemen berkaitan dengan perbandingan jarak yang ditempuh oleh senyawa
banyaknya kandungan bioaktif yang terkandung. dari titik asal dengan jarak yang ditempuh oleh
Semakin tinggi nilai rendemen maka semakin pelarut dari titik asal (Alegantina, 2010). Eluen
tinggi kandungan zat yang tertarik pada suatu yang digunakan pada penelitian ini adalah N-
sampel (Budiyanto, 2015). heksan : Aseton (7:3). Masing-masing sampel
Tabel 3. Hasil Susut Pengeringan dan Kadar Abu daun pepaya penang (Carica papaya L.) dan
ekstrak Daun Pepaya penang pembanding beta karoten murni, diperoleh noda
No. Jenis Susut Kadar pada plat KLT dibawah lampu UV 366 nm
Pengeringan Abu (%) dengan nilai Rf 0,6. Jika zat uji yang
(%) diidentifikasi dan baku pembanding sama, maka
1. Daun muda 10,19 3,07 terdapat kesesuaian dalam warna dan harga Rf
2. Daun tua 6,22 3,08 (Depkes RI, 2008). Hasil analisa yang diperoleh
3. Daun sangat 9,08 3,09
menunjukan bahwa masingmasing sampel daun
tua
Selanjutnya masing-masing ekstrak kental pepaya penang (Carica papaya L.) dan
dari daun pepaya (Carica papaya L.) penang pembanding memiliki nilai Rf yang sama, hal ini
yang sudah di uapkan kemudian dilakukan menyimpulkan masing-masing sampel daun
karakterisasi susut pengeringan dan kadar abu. pepaya penang (Carica papaya L.) mengandung
Dimana ekstrak daun pepaya penang muda senyawa beta karoten.
Page 8
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
Selanjutnya dilakukan penentuan batas
deteksi (BD) dan batas kuantitasi (BK). Batas
5 cm deteksi merupakan konsentrasi terkecil analit
dalam sampel yang dapat di deteksi yang masih
memberikan respon signifikan dibandingkan
blangko. Sedangkan Batas kuantitasi merupakan
3 cm kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih
dapat memenuhi kriteria cermat dan seksama
(Harmita, 2006). Hasil perhitungan diperoleh
nilai batas deteksi sebesar 0,554466 µg/mL,
sedangkan nilai batas kuantitasi sebesar 1,848220
Gambar 1. Analisa Kualitatif Lampu UV 366nm
µg/mL.

Analisa Kuantitatif beta karoten dengan

menggunakan Spektrofotometer UV-Vis. Dimana
digunakan beta karoten murni sebagai Tabel 5. Hasil Kadar Beta Karoten Pada Masing-
pembanding dan dibuat 5 deret konsentrasi yaitu masing Perkembangan Daun
40 ppm, 80 ppm, 120 ppm, 160 ppm dan 200
No. Jenis Kadar beta
ppm. Diukur masing-masing serapan konsentrasi karoten(mg/100 g)
dengan spektrofotometri UV-Vis pada panjang
1. Daun muda 21,5413
gelombang serapan maksimum beta karoten
2. Daun tua 32,1979
3. Daun sangat tua
477,0 nm, dan diperoleh persamaan regresi linear 13,3206
Selanjutnya perhitungan kadar beta karoten
y = 0,173 + 0,0026275 x dengan nilai koefisien
pada berbagai tingkat perkembangan daun pepaya
korelasi 0,9997. Nilai koefisien korelasi yang
penang (Carica papaya L.) yaitu daun pepaya
baik hampir mendekati 1 (Harmita, 2014). Hal ini
penang muda daun pepaya penang tua dan daun
berarti parameter yang diukur sesuai dengan deret
pepaya penang sangat tua dengan menggunakan
konsentrasi yang dibuat karena memiliki
linearitas yang baik. spektrofotometer UV-Vis pada panjang
gelombang serapan maksimum 477,0 nm dengan
3 kali replikasi. Diperoleh kadar rata-rata beta
karoten masing-masing tingkat perkembangan
daun pepaya penang diantaranya daun pepaya
muda 21,5413 mg/100g; daun pepaya tua
32,1979 mg/100g; daun pepaya sangat tua
13,3206 mg/100g. Kadar tertinggi beta karoten
terdapat pada sampel daun pepaya tua, kemudian
diikuti oleh daun pepaya muda. Sedangkan daun
pepaya sangat tua menempati posisi terendah
untuk kadar beta karotennya. Perbedaan
Gambar 2. Spektrum Panjang Gelombang kandungan komponen kimia ini terjadi karena
Serapan Maksimum Beta adanya perbedaan gejala
Karoten metabolisme daun pada masing-masing

Page 9
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
perkembangan daun yang berhubungan dengan
proses fotosintesis (Kurniawan, et al.,2010).
Karotenoid merupakan pigmen aksesoris
yang membantu dalam proses fotosintesis.
Menurut (Hopkins, 2008) peran karotenoid dalam
fotosintesis adalah membantu mengabsorbsi
cahaya sehingga cahaya yang dipakai untuk
proses fotosintesis menjadi lebih besar. Energi
yang diserap oleh karotenoid diteruskan pada
klorofil yang kemudian digunakan dalam
fotosintesis.
Semakin banyak kandungan klorofil akan
meningkatkan kemampuan daun untuk
melakukan fotosintesis yang tentunya akan
mempengaruhi metabolisme daun. Kandungan
klorofil tertinggi terdapat pada daun pepaya tua,
hal ini bisa dilihat secara fisik daun tua memiliki
warna yang lebih hijau di bandingkan dengan
daun pepaya muda maupun dengan daun pepaya
sangat tua. Menurut (Richardson,et al.,2002)
kandungan klorofil pada daun dipengaruhi oleh
umur daun, kadar klorofil akan meningkat seiring
bertambahnya umur daun sampai daun
berkembang penuh dan kemudian menurun ketika
daun semakin tua yang mengakibatkan
melemahnya kemampuan daun dalam
berfotosintesis pun mulai menurun secara
perlahan.
Dalam proses fotosintesis dan biosintesis
karotenoid memerlukan cahaya matahari untuk
keberlangsungannya. Menurut (Johnson dan An,
1991) Cahaya merupakan salah satu faktor
penting dalam biosintesis karotenoid. Menurut
(Bramley, 2002) peran cahaya tersebut adalah
untuk meningkatkan aktivitas enzim yang
berperan dalam biosintesis karotenoid. Daun
pepaya tua memiliki kandungan karotenoid tinggi
karena mampu mengoptimalkan cahaya dalam
berlangsungnya biosintesis karotenoid.
Kadar beta karoten daun pepaya muda
berada di posisi nomor dua tertinggi setelah daun
pepaya tua. Kemampuan menyerap cahaya untuk
keberlangsungan biosintesis karotenoid tidak
Page
10
sebesar daun pepaya tua, hal ini terjadi karena
ukuran luas daun pepaya muda tidak seluas daun
pepaya tua. Menurut penelitian yang telah di
lakukan oleh (Kurniawan,et al.,2010) Serapan
energi cahaya dapat dipengaruhi oleh morfologi
daunnya. Daun pepaya muda memiliki morfologi
daun yang lebih kecil dari daun pepaya tua,
sehingga energi cahaya yang diserap kurang
optimal. Sehingga kadar beta karoten daun
pepaya muda lebih kecil dari kadar beta karoten
daun pepaya tua.
Kadar beta karoten terendah terjadi pada
daun sangat tua, hal ini disebabkan terganggunya
proses fotosintesis sehingga berkurangnya
penyerapan sinar matahari dan biosintesis
pembentukan karotenoid juga terganggu.
Menurut (Ajiningrum, 2018) Kemampuan daun
untuk melakukan fotosintesis semakin lama
semakin meningkat sampai daun berkembang
penuh dan kemudian mulai menurun secara
perlahan. Daun tua yang hampir mati kemudian
berubah warnanya menjadi kuning dan tidak
mampu berfotosintesis karena klorofil rusak dan
fungsi kloroplas hilang.
Tabel 6. Hasil Uji Analisa Statistik Anova Satu
Arah
Sum of Mean
Squares Df Square F Sig.
Between 602,711 2 301,356 536,250 0,000
Groups
Within 3,372 6 0,562
Groups
Total 606,083 8
Dari data analisa statistik untuk penetapan
kadar beta karoten pada berbagai tingkat
perkembangan daun pepaya penang dilakukan
dengan uji Anova satu arah didapatkan nilai
signifikan 0,000 (P<0,05), maka untuk itu H0
ditolak dan H1 diterima, yaitu adanya perbedaan
yang signifikan dari hasil pemeriksaan kadar
pada berbagai tingkat perkembangan daun pepaya
penang yaitu daun muda daun tua dan daun
sangat tua.
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
Tabel 7. Hasil Uji Analisa Statistik Duncan
Duncan
Subset for alpha = 0.05
Pengulangan N 1 2 3
daun pepaya 3 13,320600
sangat tua
Alegantina, S. dan A. I. (2010). Identifikasi dan
daun pepaya 3 21,541333
muda
daun pepaya 3 33,263533
tua
Sig. 1,000 1,000 1,000
Hasil dari uji lanjutan Duncan terlihat
Baga Kalie, M. (1996). Bertanam Pepaya.
bahwa berbeda secara nyata padasetiap tingkat
perkembangan daun pepaya penang. Kadar beta
karoten tertinggi terdapat pada daun pepaya Bramley, P. . (2002). Regulation of Carotenoid
penang tua, kemudian daun pepaya muda dan
kadar beta karoten terendah terdapat pada daun
pepaya sangat tua.
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh
maka dapat disimpulkan bahwa:
1. Uji kuantitatif beta karoten pada masing-
masing sampel daun pepaya penang (Carica
papaya L.)dengan spektrofotometri UV-Vis
didapatkan kandungan beta karoten yaitu:
Daun pepaya muda 21,5413 mg/100g, Daun
pepaya tua 32,1979 mg/100g, dan daun pepaya
sangat tua 13,3206 mg/100g.
2. Berdasarkan Uji Analisis Anova satu arah
didapatkan nilai signifikan 0,000 (p<0,05)
adanya perbedaan yang signifikan dari hasil
pemeriksaan kadar beta karoten pada tingkat
perkembangan daun pepaya penang
SARAN
Disarankan kepada peneliti selanjutnya
untuk melakukan penelitian kandungan beta
karoten terhadap daun pepaya dengan varietas
yang berbeda, guna melihat apakah terdapat
perbedaan kadar yang disebab kan karena
perbedaan varietas.
DAFTAR PUSTAKA
Page
11
Ajiningrum, P. . (2018). Kadar Total Pikmen
Klorofil Tanaman Avicennia Marina Pada
Tingakat Perkembangan Daun Yang
Berbeda. Staf Pengajar Prodi Biologi
F.MIPA Universitas PGRI Adi Buana
Surabaya, 11(2), 52–59.
Penetapan Kadar Senyawa Kumarin Dalam
Ekstrak Metanol (Artemisia anna L.) Secara
Kromatografi Lapis Tipis-Densitometri.
Pusat Penelitian Dan Pengembangan
Biomedis Dan Farmasi, 38, 17–28.
Penebar Swadaya.
Formation During Tomato Fruit Ripening
and Development. Journal of Experimental
Botany, 377 (53), 2107–2113.
Budiyanto,A.(2015). Potensi
Antioksidan,inhibitor Tirosinase dan Nilai
Toksisitas dari Beberapa Spesies Tanaman
Mangrove di Indonesia. Institute Pertanian
Bogor.
Depkes RI. (1989). Materia Medika (5th ed.).
Direktorat Pengawasan Obat dan Makanan.
Depkes RI. (2002). Parameter Standar Umum
Ekstrak Tumbuhan Obat. Depkes RI.
Depkes RI. (2008). Farmakope Herbal Indonesia
(1st ed.). Depkes RI.
Harmita. (2006). Analisa Fisikokimia. UI Press.
Harmita. (2014). Analisa Fisikokimia
(Kromatografi). EGC.
Hasidah, M. D. W. (2017). Kandungan Pigmen
Klorofil,Karotenoid dan Antosianin Daun
Caldium. Protobiont, 6(2), 29–37.
Hopkins, W. dan H. N. (2008). Introduction to
Plant Physiology (4th ed.). John Wiley dan
Son.
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
, 127(3), 760–767.
Idris, N. (2011). Analisis Kandungan Beta
Karoten dan Penentuan Aktivitas Pankhurst QA,Connoly J,Jones SK, D. J. (2003).
Antioksidan dari Buah Melon (Cucumis Applications of magnetic nanoparticles in
melo L.) Secara Spektrofotometri UV-Vis. biomedicine. 36, 167–181.
Skripsi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas
Islam Negeri Alauddin. Paramastri dan Anindha. (2011). Pepaya Yang
Tak Busuk Saat Distribusi.
Johnson,E.A dan An, G. . (1991). Astaxantin http://repository.ipb.ac.id/handle/123456789
from Microbial Source. Critical Rev /52408
Biotechnol, 11(4), 297--326.
Richardson,A.D,Dugan,S.P,Berlyn, G. . (2002).
Kementan. (2015). Data Produksi dan Luas An Evaluation of Noninvasive Mehtods to
PanenTahun2014.http://aplikasi.pertanian.g Estimate Foliar Chlorophyll Content. USA
o.id/bdsp/newkom.asp Jurnal Phytologist, 153(1), 20–24.

Kurniawan,Madha, M. I. dan Y. N. (2010). Rustam,Atmasari, Y. (2007). Efek Antiinflamasi

Kandungan Klorofil,Karotenoid dan Ekstrak Etanol Kunyit (Curcuma domestica
Vitamin C pada Berbagai Spesies Tumbuhan Val). Sains Dan Teknologi Farmasi, 12(2)
Akuatik. Buletin Anatomi Dan Fisiologi, 28. 112–115.

Laily AN,Suranto, S. (2012). Characteristices of Setiawati,T,Saragih, N. dan M. (2016). Analisis

Carica pubescens of Dieng Plateau Central Kadar Klorofil dan Luas Daun Lampeni
Java according to its (Ardisia humilis Thunbergh) Pada tingkat
morphology,antioxidant and protein pattern. perkembangan yang berbeda di Cagar Alam
In Nusantara Bioscience. Pengandaran. Prosiding Seminar MIPA
Mahmud, M. dan H. (2009). Tabel Komposisi Peran Penelitian Ilmu Dasar dalam
Pangan Indonesia. Persagi. Menunjang Pembangunan
Berkelanjutan,Universitas Padjajaran.
Maisarah, Nurul, Asma, F. (2013). Antioxidant
Analysis of Different Parts of Carica Sutarpa dan Sutama. (2008). Daun Pepaya
papaya. IFRJ, 20(3), 1043–1048. Dalam Ransum Menurunkan Kolesterol
pada Serum dan Telur Ayam. Jurnal
Marelli de souza,L,ferrira,K.S,Chaves,J.B.P dan Veteriner, 9(3), 152–156.
Teixeira, S. . (2008). Lascorbic Acid,Beta Syarif,S.Flaning, M. (n.d.). Analisis Kandungan
Carotene and Lycopen Content in Papaya Beta Karoten Pada Jenis Sawi Putih
Fruit (Carica papaya L.). Journal Sci.Agri. (Brassica pekinensia L.) dan jenis Sawi
(Peracicaba,Braz), 65(3). Hijau (Brassica juncea L.) Secara
Spektrofotometri UV-Vis. As-Syifaa, 05(01),
Murhalien dan Ani Nurgiartiningsih. (2015). 55–61.
Pemanfaatan Limbah Daun Pepaya dalam
bentuk tepung dan jus utuk meningkatkan USDA. (2001). Treating Livestock Medical Plant
performans produk ayam arab. Research or Toxis Carica papaya. Available on
Journal of Life Science, 02(2). Lineat.
http://www.probe.nalusda.gov:8300/ogibin/b
Otsuki dang, Kumagai kondo, I. M. (2010). rowse/phytochemdb
Aqueous extract of Carica papaya leaves
exhibits anti tumor activity and Widayanto, E. (2007). Optimasi Pemekatan
immunomodulatoryeffects.J.Ethnopharmacol Karotenoid pada metil ester kasar (crude
Page
12
 Universitas Perintis Indonesia (UPERTIS) 2020 / 2021
methyl ester) Minyak Sawit dengan metode
Kromatografi Kolom Adsorpsi. Skripsi IPB.

Page
13