Analisis genetika molekuler polimorfisme gen protein

susu sapi perah dan pejantan di Latvia

D. Smiltina* dan Z. Grislis

Latvia Universitas Ilmu dan Teknologi Hayati, Fakultas Pertanian, Institut Agrobioteknologi,
Jalan Liela 2, LV-3001 Jelgava, Latvia

*Korespondensi: dace.smiltina@llu.lv

Abstrak. Protein susu adalah komponen susu yang paling berharga dari sudut pandang makanan.
Lebih dari 95% protein susu ruminansia dikodekan oleh enam gen struktural: dua protein whey
(α – laktalbumin dan – laktoglobulin) dan empat kasein (α – dan αs2 – kasein, – kasein, –
kasein). Objek yang diteliti adalah polimorfisme genetik gen protein susu pada populasi sapi dan
banteng yang dikembangbiakkan dari breed penghasil susu di Latvia. Tujuannya adalah untuk
mempromosikan pembiakan sapi di Latvia dengan mengembangkan dan menguji analisis
genetika molekuler untuk analisis kuantitas dan kualitas masa depan populasi sapi perah di
Latvia, berdasarkan penelitian gen yang mengkode polimorfisme protein susu. Secara
metodologi dipilih penanda molekuler yang sesuai untuk karakterisasi polimorfisme lima gen
protein susu pada populasi sapi perah yang dipelihara di Latvia. Sebagai metode genetik dipilih
metode Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) dan alel protein susu yang paling
banyak dianalisis. Dengan menggunakan data 719 sampel DNA sapi perah, analisis populasi sapi
Latvia dilakukan melalui enam SNP dari lima gen protein susu: CSN1S1 c. 175A > G, CSN2
c.4451A > C, CSN3 c.11625C > T dan c.11661A > C, LAA c.15A > G dan LGB c.3106T > C.
Hasil analisis PCRRFLP menunjukkan seperti yang diharapkan, bahwa semua genotipe
ditemukan dalam populasi.

Kata kunci: protein susu, sapi perah, polimorfisme, populasi Latvia.

PENDAHULUAN

Pada akhir tahun 2014 di Latvia kepemilikan pertanian mengembangbiakkan 422,0 ribu sapi
(Biro Pusat Statistik Latvia, 2015). Namun pada akhir tahun 2016, kepemilikan pertanian hanya
mengembangbiakkan sebanyak 412,3 ribu sapi, penurunan tersebut disebabkan oleh
pengurangan jumlah sapi perah sebesar 5,2% (Biro Pusat Statistik Latvia, 2017).

Produksi sapi perah atau hasil susu dari total susu, yang diproduksi di Uni Eropa, pada tahun
2014 dan 2015 lebih dari 96% (Eurostat, 2015; 2016). Ini digunakan tidak hanya dalam bentuk
murni (sekitar 27% dari semua produk susu), tetapi juga dalam berbagai produk susu. Jumlah
susu yang diproduksi di Latvia (termasuk susu kambing) pada tahun 2014 mencapai 971,8 ribu
ton. Rata-rata produksi susu dari seekor sapi perah mencapai 5.812 kg, (BPS Latvia, 2015).
Hubungan genetik utama dengan kualitas dan kuantitas susu dicari kaitannya dengan protein
susu, yang sebagian besar, hingga 95% tergantung dari breed, (Artym, Zimecki, 2013; Tsabouri
et al., 2014) terdiri dari empat kasein dan dua protein whey utama .

Kasein adalah fraksi protein susu yang tidak larut dalam air (Tabel 1): alfas-casein (gen CSNISI),
alfas:-casein (CSNIS2), beta-casein (CSN2) dan kappa-casein (CSN3), (Artym, Zimecki, 2013 ;
Tsabouri et al., 2014). Lokus kasein sapi terletak pada kromosom 6, dan saling berhubungan erat
secara berkelompok (Caroli et al., 2009; Barlowska et al., 2012). Lokus kasein total bervariasi
dari 250 kb hingga 370 kb untuk manusia, tetapi urutan gen dan penyelarasan genetik bersifat
konservatif (Vilotte et al., 2013). Kelompok protein susu yang kedua adalah whey atau protein
serum-fraksi yang larut dalam air. Dua protein whey utama (Tabel 1) adalah a-laktalbumin
(a-LA), yang dikodekan dengan LAA (LALBA), dan B-laktoglobulin (B-LG;
progestagen-associated endometrial protein) atau gen LGB (PAEP) (Artym , Zimecki, 2013;
Tsabouri et al., 2014). gen a-LA terlokalisasi pada kromosom 5, tetapi gen LGB terletak pada
kromosom 11 (11q28; Barłowska et al., 2012).

Dalam studi yang berbeda dalam 80 tahun terakhir telah menemukan bahwa semua enam
protein susu sapi utama bervariasi tidak hanya di tingkat genom (polimorfisme) tetapi terutama
setelah urutan asam amino protein. Sejauh ini, berbagai ringkasan sintesis protein (Hristov et al.,
2014; Martin et al., 2013) telah menunjukkan bahwa untuk enam protein, variasi total alel adalah
53: dari 3 hingga 16 tergantung pada gen/protein (Tabel 1), meskipun fakta bahwa ada lebih
banyak polimorfisme di setiap gen. Dalam lima tahun terakhir, penelitian tentang populasi sapi
perah pada beberapa gen tersebut juga telah diluncurkan di Latvia (Petrovska et al., 2017a;
2017b; 2017c).
Pada tahun 2008, lebih dari 1200 breed sapi perah telah terdaftar di dunia (Utsunomiya et
al., 2015), tetapi di Latvia terdaftar 16 breed di Pusat Data Pertanian Republik Latvia. Jumlah
sapi perah pada tahun 2014 lebih dari 125 ribu. Breed yang lebih sering diternakkan di Latvia
adalah Holstein Black and White (HB; frekuensi sekitar 33% pada tahun 2014, tetapi pada tahun
2017 sekitar 47%), yang dikenal di lebih dari 128 negara (Utsunomiya et al., 2015). Hasil susu
sapi harian per satu sapi oh breed HB lebih besar dari breed lokal atau historis Latvia: Latvian
Brown dan Latvian Blue ( breed adalah kebutuhan yang lebih mendesak untuk melakukan
pembangunan kembali sebagian besar atau biaya tambahan untuk membeli atau menumbuhkan
sapi baru.
Tujuan dari semua penelitian adalah untuk mempromosikan pembiakan sapi di Latvia
dengan mengembangkan dan menguji analisis genetika molekuler untuk analisis kuantitas dan
kualitas masa depan populasi sapi perah di Latvia, berdasarkan penelitian gen yang mengkode
protein susu polimorfisme. Namun tugas penelitian ini adalah membuat karakterisasi primer
polimorfisme terpilih gen protein susu sapi pada populasi sapi perah yang dipelihara di Latvia.

BAHAN DAN METODE

Penelitian ini dielaborasi pada periode April 2009 hingga Juni 2014.

Deskripsi objek
penelitian Kelompok penelitian breed sapi perah yang dipelihara di Latvia dibentuk dari
719 bahan biologis sapi, termasuk darah dari 625 sapi dan sampel sperma dari 94 sapi perah
dari Breeding and artificial insemination station (BAIS) dari tujuh breed (Latvian Brown (LB)
dan Latvian Blue (LZ), Holstein Black and White (HB), Holstein Red and White (HR),
Sweden Red andWhite (SR), Danish Red (DR) dan Angeln (AN)) dari sapi perah yang
dipelihara di Latvia (Meja 2).

Tabel 2. Deskripsi kelompok sapi dan jumlah hewan dengan genotipe positif di setiap lokus

Secara keseluruhan, bahan biologis diperoleh dari 81 kawanan sapi perah di berbagai
wilayah Latvia. Dalam penelitian digunakan juga sampel sapi ras Latvia Brown dan Latvian
Blue dari Depository of Latvian SDGT.
DNA Ekstraksi
Pekerjaan DNA menggunakan dua kit ekstraksi DNA genom: Kit Pemurnian DNA Genomik
#K512 (Fermentas, Vilnius, Lithuania) dan Kit Isolasi DNA PUREGENE (QIAgene, USA).
Metode kedua kit disesuaikan untuk bekerja dengan jumlah darah dan sperma yang berbeda
dari pada protokol.

Analisis polimorfisme protein susu sapi

3) dianalisis dengan salah satu metode sidik jari DNA tertua (RestrictionFragment Length
Polymorphism (RFLP)), di mana setiap endonuklease restriksi menargetkan urutan nukleotida
yang berbeda dalam untai DNA dan memotong di lokasi yang berbeda. Masing-masing, dalam
gen protein kasein: CSN1S1
c. 175A > G, yang menyebabkan perubahan variasi protein B menjadi C; CSN2 c.4451A > C
(Pro67(82)Variasinya; A1 dan A2); untuk CSN3 dipilih dua SNP: c.11625C > T dan c.11661A > C,
yang mengarah ke Thr136(157)Ile dan Asp148(169)variasi Ala atau A berubah menjadi variasi B.
Untuk protein whey, masing-masing, untuk LAA dipilih SNP yang terletak di wilayah yang tidak
diterjemahkan atau c.15A > G, dalam hal ini dianggap bahwa perubahan A variasi dari B, tetapi
untuk LGB c.3106T > C, yang mengarah ke perubahan asam amino Val118(134)Ala atau
perubahan variasi protein A menjadi B.

Tabel 3. Deskripsi PCR RFLP untuk studi polimorfisme gen protein susu pada populasi sapi
yang dipelihara di Latvia.
Analisis data
Jumlah dan frekuensi alel dan genotipe untuk seluruh populasi diperkirakan dengan
penghitungan langsung, tetapi untuk kelompok setiap breed dihitung dengan membagi sampel.

Indeks heterozigot yang diharapkan diperkirakan untuk kedua alel di lokus atau polimorfisme.
Heterozigot populasi dihitung sebagai rasio jumlah individu heterozigot vs. jumlah total subjek.
Penyimpangan dari kesetimbangan Hardy Weinberg diuji dengan uji 2). Juga untuk seluruh
populasi dianalisis hubungan antara indikator non-parametrik (jumlah alel dan genotipe untuk
jenis kelamin atau ras sapi yang berbeda). Untuk perhitungan tersebut digunakan metode
tabulasi silang dengan 2 uji atau 2 uji pada tingkat kepercayaan p < 0,05. Untuk semua analisis
digunakan program statistik: IBM SPSS Statistics versi 22.0 dan MASA LALU (Statistik
PAlaentologi, ver.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Sampel DNA dari 719 sapi perah yang dibesarkan di Latvia, termasuk 94 pejantan, dianalisis
pada polimorfisme lima protein susu, dengan pejantan) alel dan genotipe (Tabel 4)

Tabel 4. Distribusi polimorfisme alel dan genotipe gen protein susu i

* sampel hanya dari pejantan.

 Analisis polimorfisme gen protein susu

Untuk gen CSN1S1 alel yang paling sering terjadi adalah B (pada semua populasi 0,96)
dan genotipe - BB (0,93) di Latvia (Tabel 4). Tidak ada perbedaan distribusi alel atau genotipe
antar ras sapi perah.
Menganalisis frekuensi alel tergantung dari jenis kelamin, Kami telah mengakui, bahwa
frekuensi alel b sapi jantan berkembang biak adalah 0,07 lebih rendah dari pada sapi (0,90 vs
0,97; p = 2.,07 x10‐⁷). Melihat frekuensi genotipe, kita dapat membuat kesimpulan, bahwa
sampel dengan heterozigot lebih umum antara sapi jantan berkembang biak daripada sapi
(20,93% untuk sapi jantan dan 5,43% untuk sapi; p = 4,99 x10‐⁷ untuk semua genotipe). Jadi,
itu mungkin menyiratkan, bahwa breeding bulls bertanggung jawab tentang alel C dalam
memicu berbeda, karena kami tidak ditemukan di antara 675 sampel apapun dengan homozigot
genotipe CC.
Menyelidiki Hasil Peneliti lain dari berbagai negara, kami menemukan bahwa hasil
penelitian Estonia (EE) mirip dengan kita. Untuk Estonia sapi berkembang biak asli (n = 118)
alel αs1 - CN alel B adalah dengan frekuensi 0,92, tetapi alel C - 0,08 (Lien et al., 1999). Juga
Lithuania (LT) peneliti memiliki hasil yang sama: untuk populasi sapi perah' dari LT (n = 427) alel
B adalah dengan frekuensi 0,95 (PE Molibiulaitiene, 2005). Di negara-negara lain dari Europa,
hasil penelitian serupa sedikit berbeda. Misalnya, untuk Bulgaria Berkembang biak abu-abu
(Neov et al., 2013) alel B adalah dengan frekuensi 0,43, tetapi alel C-0,57. As serta dalam
penelitian ini, bertentangan dengan kami, ditemukan ketiga genotipe dengan frekuensi: BB =
0,18, BC = 0,79, CC = 0,03. Hasil ini dapat dijelaskan dengan sejarah ini terjadinya breed (Bos
taurus brachiceros x Bos taurus primigenius; Neov et al., 2013). Sebaliknya, para ilmuwan
Ceko' hasil untuk 440 Ceko fleckvieh berkembang biak sapi ' oleh alel lebih dekat dengan hasil
kami (B = 0,89, C = 0,11), tetapi dengan genotipe - ke Bulgaria' hasil dengan ketiga genotipe,
masing-masing, BB = 0,80, BC = 0,18, CC = 0,16 (Ku multinova et al., 2006).
Dalam kasus CSN2 alel umum adalah Al dengan frekuensi0. 67 dan genotipe A1A1
(0,42), dan A1A2 (0,49), meskipun fakta bahwa dalam literatur sebagai lebih untuk sapi'
populasi dan sebagai alel umum lebih sering adalah alel A2 (Cardak, 2005; Cieslinska et al.,
2007; PE Molibiulaitiene et al., 2007). Melihat keseimbangan populasi atau defleksi dari
Hardy-Weinberg pada lokus tertentu, ada perbedaan yang signifikan secara statistik (p = 2,72
x10-³) antara frekuensi heterozigot yang diharapkan dan yang diperoleh. Hasil serupa apakah
untuk setengah dari keturunan (LB, LZ, HR dan AN). Untuk semua breed susu yang diselidiki
dari Latvia frekuensi genotipe A2A2 sangat rendah. Selain itu, tampak bahwa untuk
berkembang biak HB, yang memiliki produksi susu lebih tinggi daripada breed lain, juga
mengamati frekuensi a2a2 yang lebih tinggi dan ekuilibrium dengan persamaan
Hardy-Weinberg.
Frekuensi alel A2 yang lebih disukai dari CSN2 pada sapi ras asli Estonia (V al., 2009)
secara signifikan lebih tinggi (0,60) dibandingkan pada sapi breed LB (0,31) atau biru Latvia
(LZ) sapi berkembang biak (0,24). Kita dapat menyimpulkan bahwa dalam frekuensi breed asli
Estonia alel yang baik hati A2 dari CSN2 dua kali lebih tinggi daripada ras asli Latvia.
Dalam studi termasuk 94 peternakan sapi jantan dengan kecenderungan kecil untuk
dominasi CSN2 alel Al (0,54) di atas alel CSN2 A2 (0,46), tetapi 622 sapi perah memiliki
kecenderungan lebih besar untuk CSN2 alel Al Dominasi (0,69 vs 0,31; antara jenis kelamin p =
4,22 x10-⁵). Membiakkan sapi jantan memiliki tingkat frekuensi yang lebih tinggi dari heterozigot
dan homozigot dari CSN2 alel A2 genotipe (p = 3,75 x10-³). Jadi, ada latar belakang yang lebih
baik untuk genotipe CSN2 A2A2 formasi

Di ceko merupakan dalam situasi yang lebih baik untuk memilih alel CSN2 A2 daripada
yang di latvia.dalam penelitian mereka ditemukan bahwa alel CSN2 A1,A2,A3 dan B adalah
dengan frekuensi masing-masing 0.18,0.80.0.01 dan0.01 (kucerova et al.,2006 ).
Dalam studi gen protein kasein ketiga CSN3 kami menemukan, bahwa dalam populasi
produk susu kami sapi alel umum adalah A dengan frekuensi 0,92 dan genotipe homozigot
yang sama 0,86. Dari literatur diketahui bahwa sapi dengan genotipe BB dari CSN3 dibedakan
oleh fitur teknologi susu yang lebih baik, hasil keju yang lebih tinggi (Martin et al., 2002), tetapi
dalam populasi kami genotipe ini dan, masing-masing, alel CSN3 B sangat belakang (BB = 0,03
dan B = 0,08). Ada dominasi yang jelas dari alel CSN3 A, sebagai ditunjukkan dengan analisis
persamaan Hardy Weinberg (p = 1,19 x10-3). Harus mencatat bahwa hanya dalam sejarah
breed sapi perah Latvia (LB dan LZ) ditemukan ketiganya genotipe, tetapi pada breed lain
hanya genotipe AA. Hasilnya berbeda dari perguruan tinggi kami bekerja (Petrovska et al., 2017
a, b, c), tetapi alasannya mungkin karena dalam koleksi mereka hanya memiliki sumber daya
genetik hewan (berdarah > 50%) dan oleh karena itu kelompok ras lebih kecil.
Data kami tentang kemunculan alel A CSN3 yang sangat tinggi pada sapi perah
populasi Latvia sesuai dengan data penelitian di Lithuania dan Estonia (peciulaitiene at
al.,2007;varv et al.,2009) peneliti estosi menemukan frekuensi yang lebih tinggi dari alel CSN3
B pada sapi ras asli Estonia (0,24) dan sapi ras Estonia Merah (0,37). Meskipun tingkat rendah
alel CSN3 B, ilmuwan Estonia menemukan bahwa semua parameter susu koagulasi lebih baik
pada sapi dengan genotipe BB dari CSN3. Populasi sapi perah Inlithuania frekuensi alel CSN3
A adalah 0,74 dan CSN3 alel B- 0,22 (Peciulaitiene., 2007).
Kelompok kedua adalah protein whey(air dadih), di mana untuk LAA dan LGB alel
umum adalah BB (0,94 dan 0,78, masing-masing) dan genotipe umum adalah BB (0,88 dan
0,60).
Dalam kasus LAA lokus yang dianalisis berada dalam keseimbangan setelah
persamaan Hardi Weinberg melintasi populasi. Dalam keenam breed kami diamati dominasi alel
LAA B (dari 0.82 sampai 1.00). Dengan hasil tersebut dapat diketahui, bahwa akibat dari
pergeseran genetik LAA alel A dipaksa keluar dari populasi dan frekuensi alel B meningkat.
Lebih-lebih lagi, Alel A LAA hanya terdapat pada genotipe heterozigot, kecuali pada breed HB
dimana terdapat satu perkembangbiakan pejantan dengan genotipe homozigot setelah alel A.
Pada breed ini juga frekuensi Alel LAA A adalah yang tertinggi, yang, dibandingkan dengan
breed Latvia Brown, memiliki enam kali lebih tinggi (0,18 vs 0,03). Mencari pembagian alel LAA
belakang A pada sapi dan pembiakan sapi jantan, dapat dilihat bahwa untuk sapi jantan
berkembang biak alel ini dua kali lebih umum daripada sapi (0,12 vs 0,05; p= 5,38 x10-4).
Prevalensi alel LAA A menghasilkan prevalensi ganda frekuensi genotipe heterozigot (0,21 vs
0,10; p = 6,00 x10-4).
 Dari data penelitian yang berbeda (Bell et al., 1981; Formaggioni et al., 1999) kami
dapat disimpulkan bahwa LAA variasi B adalah tipikal atau nenek moyang untuk Bos taurus,
Bos indicus, Bos (Poephagus) grunniens, oleh karena itu L Bos taurus. Secara hipotetis, kami
dapat menyimpulkan bahwa data kami mengkonfirmasi para peneliti menunjukkan hasil tentang
frekuensi rendah variasi A pada breed dan asal yang berbeda.
Dalam data kami, frekuensi tertinggi alel LAA A adalah untuk sapi perah ras HB (0,18) di
Latvia. Membandingkan hasil kami dengan data penelitian lain, kami menyimpulkan, bahwa di
negara lain (Voelker et al., 1998; Bojarojc-Nosowicz et al., 2005) frekuensi Alel LAA A lebih
tinggi (hingga 0,77 atau 76,60%) daripada keturunan bertabur kami di Latvia

Dalam hal protein whey terbesar ke dua atau LGB dalam sejarah jenis sapi perah Latvia
frekuensi dari alel B LGB relatif lebih tinggi: pada Latvian brown 0.83, Latvian blue 0.80,
sedangkan pada Holstein Black and White (HB) hanya 0.58. Menganalisis variasi dari genotip
LGB dari populasi sapi perah Latvia, kami menemukan bahwa Pada jenis HR, SR dan AN yang
diuji, bentuk homozigot dari alel belakang LGB A secara nyata lebih tinggi daripada jenis lain
dari populasi Latvia dan frekuensi rata-rata semua populasi (0,03). Perbedaan dari distribusi alel
LGB dan dari genotip diantara breeds terlihat signifikan secara statistik (p = 7,16 x10-11 dan p =
3,25 x10-5, masing-masing) di Latvia.

Membandingkan hasil kami dengan data publik peneliti lain (peciulaitiene, 2005;
Zaton-Dobrowolska et al., 2006), kami menyimpulkan bahwa mereka menunjukan frekuensi dari
alel b yang sedikit lebih rendah, meneliti polimorfisme dari susu whey LGB pada breed sapi
yang berbeda di ternak nasional dan/atau khusus. Hanya satu breed dengan frekuensi alel b yang
lebih tinggi dibandingkan dengan populasi Latvia yaitu Lithuanian red dengan frekuensi 0.92
(peciulaitiene, 2005).

KESIMPULAN

Hasil dari menganalisis populasi memberikan peluang untuk menganalisis variasi B dan
C CSN1S1,variasi A1 dan A2 CNS2, dan variasi A dan B CSN3, LAA dan LGB dalam analisis
asosiasi dengan indikator produktifitas susu dan perkiraan nilai pemuliaan dan indeks hasil
pemuliaan sapi jantan.

Lokus tersebut dapat digunakan di masa depan, setelah analisis asosiasi, sebagai potensi
gen, lebih tepatnya untuk seleksi berbantuan penanda (MAS) dalam pemuliaan sapi perah Latvia.
Dibandingkan dengan pembiakan tradisional, MAS dapat jauh lebih efektif daripada pembiakan
sapi perah tradisional. Dilihat dari data literatur ilmiah dari berbagai negara, hal itu dapat
menjadi signifikan untuk meningkatkan produktivitas hewan, meningkatkan kualitas dan
keamanan produk susu, dengan mengurangi risiko penyakit terkait susu dan/atau produk susu
dan dengan mempromosikan biologis dan keamanan pangan.
Kami ucapkan terima kasih. Hasil tersebut merupakan bagian dari Tesis D. Smiltina, Dr. agr.,
PhD. Kami berterima kasih kepada Dewan Ilmu Pengetahuan Latvia atas dukungan keuangan
untuk penyelidikan kami melalui hibah Nr. 09.1461. Studi yang dibiayai oleh Proyek ESF
“Support for doctoral studies in LLU” No/2009/0180/1DP/1.1.2.1.2/09/IPIA/VIAA/0117
perjanjian No. 04.4-08/EF2.D1.13.

REFERENSI

Artym, J. & Zimecki, M. 2013. Milk-derived proteins and peptides in clinical trials. Postepy
Hig. Med. Dosw. 67, 800 816.
Barlowska, J., Wolanciuk, A., LItwinczuk, Z. & Krol, J. 2012. Milk proteins' polymorphism
in various species of animals associated with milk production utility. In: Milk Protein.
Edited by W. L. Hurley, pp.235 264.
Bell, K., Hopper, K.E. & McKenzie, H.A. 1981. Bovine α – lactalbumin C and αS1 -, β -, k –
caseins of Bali (Banteng) cattle, Bos (Bibos) javanicus. Aust. J. Biol. Sci., 34, 149-159.
Bojarojc-Nosowicz, B., Kaczmarczyk, E., Bongar,c E. & Malolepszy, J. 2005. Natural BLY
Infection and polymorphism within the 5’ flanking region of the a - lactalbumin gene
in the black and white breed cattle. Bull. Vet. Inst. Pulawy. 49, 439-442

Cardak, A.D. 2005. Effects of genetic variants in milk protein on yield and composition of milk
from Holstein-Friesian and Simmentaler cows. S. Afr. J. Anim. Sci. 35(1), 41 47.

Caroli, A.M., Chessa, S. & Erhardt, G.J. 2009. Milk protein genetic variation in cattle: impact on
animal breeding and human nutrition. J. Dairy Sci. 92, 5335 5352.

Central Statistical bureau of Latvia. 2015. Agriculture of Latvia, Collection of statistical data.
Collection of Statistical Data, Riga, pp.11 12.

Central Statistical bureau of Latvia. 2017. Agriculture of Latvia, Collection of statistical data.
Collection of Statistical Data, Riga, pp.12 13.

Cielava, L., Petrovska, S., Jonkus, D. & Paura, L. 2015. The effect of different bloodiness level
on Latvian brown cow productivity. Proceedings of the 7 the international scientific conference
rural development 2015.

Cielava, L., Jonkus, D. & Paura, L. 2017. Lifetime milk productivity in farms with different
housing and feeding system. Agronomy Research 15(2), 369 375. Cieslinska, A., Kaminski, S.,
Kostyra, E. & Sienkiewicz-Szlapka, E. 2007. Beta - casomorphin 7 in raw and hydrolysed milk
derived from cows of alternative-casein genotypes. Milchwissenschaft 62, 125 127. Eurostat.
2015. Milk and milk product statistics. In: Agriculture, forestry and fishery statistics - 2015.
Publications Office of the European Union, Luxembourg, pp.22 29. Eurostat. 2016. Milk. In:
Agriculture, forestry and fishery statistics - 2016. Publications Office of the European Union,
Luxembourg, pp.113 122. Formaggioni, P., Summer, A., Malacarne, M. & Mariani, P. 1999. Milk
protein polymorphism: detection and diffusion of the genetic variants in Bos genus. AFMV Univ.
Parma 19, 127 165. Hristov, P.I., Teofanova, D.R., Neov, B.S., Zagorchev, L.I. & Radoslavov,
G.A. 2014. Population Structure of Two Native Bulgarian Cattle Breeds with Regard to CSN3
and CSN1S1 Gene Polymorphism. BJVM 17(1), 18 24. I., Henno, M., Viinalass, H. & Sabre, D.
2005. Effect of k Casein and Lactoglobulin Genotypes on the Milk Rennet Coagulation
Properties. Agronomy Research 3, 55 64. A., Jandurova, O.M., Sorensen, P. E., Nemcova, M.,
Kott, J. & Frelich, J. 2006. Milk protein genes CSN1S1, CSN2, CSN3, LGB and their relation to
genetic values of milk production parameters in Czech Fleckvieh. Czech J. Anim. Sci. 51(6), 241
247. Lien, S., Kantanen, J., Olsaker, I., Holm, L.E., Eythorsdottir, E., Sandberg, K., Dalsgard, B.
& Addalsteisson, S. 1999. Comparison of milk protein allele frequencies in Nordic cattle breeds.
Animal Genetics 30, 85 91. Martin, P., Szymanowska, M., Zwierzchowski, L. & Leroux, Ch.
2002. The impact of genetic polymorphisms on the protein composition of ruminant milks.
Reprod. Nutr. Dev. 42, 433 459. Martin, P., Bianchi, L., Cebo, C. & Miranda, G. 2013. Genetic
polymorphism of milk proteins. In: Advanced Dairy Chemistry. 1A: Proteins: Basic Aspects. 4th
edition. New York: Fox, P.L. McSweeney ed., pp. 463 514. Neov, B., Teofanova, D., Zagorchev,
L., Radoslavov, G. & Hristov, P. 2013. Milk protein polymorphism in Bulgarian grey cattle
population. Bulg. J. Agric. Sci. 19(2), 194 196. N., Miceikiene, R., Krasnopiorova, N. &
Kriauziene, J. 2007. Genetic factors influencing milk production traits in Lithuanian dairy cattle
breeds. 14(1), 32 38. tiene, N. 2005. Genetic Types of Milk Proteins Prevalence and their
Relation with Production Traits in Lithuanian Dairy Cattle Breeds. Summary of doctoral thesis.
Biomedical sciences, zootechny 13B. Kaunas. 909 Petrovska, S., Jonkus, D. 2017a. I -casein
genotype on milk productivity of Latvia local dairy breeds. International Scholarly and Scientific
Research & Innovation 11(3), 243 247. Petrovska, S., Jonkus, D., Zagorska, J. & Ciprovica, I.
2017b. The influence of kappa-casein and beta-lactoglobulin genotypes on milk coagulation
properties in Latvia dairy breed. Agricultural sciences (Crop sciences, animal sciences), 2, 74 80.
Petrovska, S., Jonkus, D., Zagorska, J. & Ciprovica, -Casein Genotype on coagulation
propertiesof milk collected from the local :atvian cow breeds. Agronomy Research 15(S2), 1411
1419. Tsabouri, S., Douros, K. & Priftis, K.N. 2014. Endocr Metab Immune Disord Drug
Targets. 14(1),16 26. Utsunomiya, A.M.P., Sonstegard, J. & Garcia, J.F. 2015. past selection in
the bovine genome. Front. Genet. 5, 1 13. S., Belousova, A., Sild, E. & Viinalass, H. 2009.
Genetic diversity in milk proteins among Estonian dairy cattle. Veterinarija I Zootechnika
48(70), 93 98. Vilotte, J. L., Chanat, E., Le Provost, F., Whitelaw, C.B.A., Kolb, A. & Shennan,
D.B. 2013. Genetics and biosynthesis of milk proteins. In: Advanced Dairy Chemistry 1A:
Proteins: Basic Aspects. 4th edition. New York: Fox, P.L. McSweeney ed., pp. 431 461. Voelker,
Jr.G.R., Bleck, G.T. & Wheeler, M.B. 1999. Identification of variations in the lactalbumin gene
in cattle and potential correlations to milk production traits. In: Illini DairyNet Papers. University
of Illinois Extension (ASV). Zaton-Dobrowolska, J., Filistovicz, A., Rehout, V. & Szulc, T. 2006.
An estimation of the genetic distance between Polish Red and other red cattle breeds on the basis
of selected milk protein loci. EJPAU 9(2, 10), 1 9.