Machine Translated by Google

www.nature.com/scientificreports

MEMBUKA
Nanopartikel silika fluoresen sebagai
penanda internal pada fies buah dan
pengaruhnya terhadap kelangsungan
hidup dan kesuburan
Nut Songvorawit*, Photchara Phengphuang & Thitinat Khongkhieo
Melacak dan membedakan serangga kecil pada tingkat individu membutuhkan bahan penandaan yang
tepat karena ukurannya yang kecil. Studi ini mengusulkan dan menyelidiki penggunaan nanopartikel silika
fluoresen (FSNPs) sebagai penanda internal karena sifat optik dan biokompatibilitasnya yang baik.
FSNP disiapkan menggunakan teknik mikroemulsi balik air-dalam-minyak dengan pewarna Rubpy sebagai
fuorofor. Partikel yang diperoleh berbentuk bulat, terdispersi tunggal dalam ukuran nano dan menunjukkan
pendaran oranye terang di bawah sinar ultraviolet (UV). Penandaan internal dilakukan pada ikan buah (Drosophila
melanogaster) melalui pemberian makan. Hasilnya menunjukkan bahwa daging buah menunjukkan pendaran
terang di perutnya saat terkena sinar UV. Durasi penandaan persistensi FSNP dalam tubuh buah fy lebih lama
dibandingkan dengan pewarna fluoresen lainnya. Ikan buah yang diberi makan dengan FSNP memiliki umur yang
lebih panjang daripada yang diberi pewarna Rubpy. Tidak ada perbedaan fertilitas dan respon geotaksis negatif
antara kelompok perlakuan dan kontrol. Temuan ini menunjukkan bahwa FSNPs dapat digunakan sebagai penanda
internal pada fies buah, dan mungkin diterapkan dengan serangga kecil lainnya dengan perut transparan.

Menandai adalah langkah penting dalam memahami perilaku, aktivitas, dan penyebaran hewan yang bergerak aktif karena
memungkinkan peneliti membedakan dan mengidentifikasi mereka pada tingkat individu1 . Berbagai teknik telah digunakan
untuk penandaan, tergantung pada anggaran dan organisme target2 . Lukisan, penandaan dengan pita atau kerah, mutilasi,
dan tato tidak mahal dan mudah diterapkan3–8 . Menggunakan teknologi yang lebih maju, seperti telemetri radio dan satelit,
menawarkan data yang lebih akurat tentang pergerakan hewan dan penggunaan habitat9,10. Beberapa dari teknik ini telah
diterapkan pada serangga, tetapi hanya pada spesies besar seperti kumbang, kupu-kupu, lebah, dan capung11–16. Namun,
penandaan serangga kecil jauh lebih menantang karena ukurannya9 Penandaan .
neon adalah teknik yang digunakan untuk serangga kecil, di mana bahan dengan sifat bercahaya digunakan untuk
menandai di luar atau di dalam target. Individu yang ditandai dapat diidentifikasi secara visual dengan luminositasnya
terhadap latar belakang gelap saat terkena sinar ultraviolet (UV) atau cahaya dengan panjang gelombang pendek. Debu
neon adalah teknik konvensional untuk menandai serangga kecil menggunakan partikel yang dapat berpendar di bawah
sinar UV. Prosedurnya sangat mudah: tempatkan serangga dan debu dalam wadah dan kocok sampai debu menempel pada permukaan s
Namun, studi jangka panjang mungkin tidak cocok karena masa pakainya terbatas, dan terlalu banyak debu dapat
menghalangi spirakel, memengaruhi kelangsungan hidup dan perilaku.
serangga1 Penandaan internal menggunakan pewarna fluoresen adalah teknik lain untuk mengatasi kelemahan debu
fluoresen, di mana serangga mudah didapat. pewarna melalui makan. Teknik ini cocok untuk serangga yang integumennya
tipis dan cukup tembus cahaya untuk memungkinkan cahaya eksitasi dan pancaran melewatinya19,20. Karena molekul
pewarna secara langsung menghubungi jaringan hewan dan kemungkinan diserap melalui saluran pencernaan, dampak
pada fisiologi hampir tidak dapat dihindari dan harus diperhatikan21. Pendinginan fluoresensi adalah masalah lain di mana
emisi fluoresensi secara bertahap menghilang selama periode eksitasi, terutama karena reaksi terhadap oksigen di
lingkungan sekitar22,23. Fenomena ini membatasi efisiensi pewarna fluoresen ketika diperlukan pengamatan jangka panjang.

Nanomaterial saat ini mendapatkan perhatian dalam ilmu biologi karena ukurannya yang kecil dan sifat uniknya. Quantum
dots (QDs) dan nanopartikel silika fluoresen (FSNPs) adalah dua jenis nanopartikel fuorescent (NPs) yang menonjol yang
berguna untuk penandaan dan pelabelan. QD adalah kristal nano semikonduktor yang memancarkan pendaran terang di
bawah sinar UV24. Banyak warna tersedia tergantung pada komposisi unsurnya

Laboratorium Ekologi Perilaku, Departemen Biologi, Fakultas Sains, Universitas Chulalongkorn,

Bangkok 10330, Thailand. *email: nut.so@chula.ac.th

Laporan Ilmiah | (2022) 12:19745 | https://doi.org/10.1038/s41598-022-24301-7 1

Vol.:(0123456789)
 Machine Translated by Google
www.nature.com/scientificreports/

Gambar 1. (a) Gambar mikroskop elektron transmisi (TEM) pada perbesaran 100.000 × menunjukkan bentuk bulat
FSNP dan (b) distribusi ukuran FSNP yang diukur dari gambar TEM menggunakan perangkat lunak ImageJ (versi 1.53o, NIH,
USA).

dan ukuran. Penandaan eksternal menggunakan QD telah berhasil digunakan di Trilobium castaneum25. Selain itu, dengan
menggunakan penandaan tidak langsung, penyerbukan lebah telah dilacak dengan memberi label serbuk sari dengan QDs26,27.
Namun, sebagian besar QD terdiri dari logam berat, terutama kadmium, yang tidak ramah lingkungan, dan toksisitasnya
terhadap sistem biologis masih diperdebatkan24,28.
FSNP adalah jenis NP lain di mana banyak fuorofor digabungkan di dalam matriks amorf partikel silika, menghasilkan sinyal
optik yang diperbesar secara signifikan dibandingkan dengan molekul pewarna tunggal29.
Selain itu, karena zat warna terkandung dalam matriks silika, yang bertindak sebagai penghalang yang efisien antara zat warna
dan lingkungan sekitarnya, zat warna tersebut memiliki kemampuan fotostabilitas yang baik22,23. Karena fotostabilitasnya
yang bagus, nanopartikel ini sangat cocok untuk aplikasi yang membutuhkan intensitas tinggi atau eksitasi berkelanjutan, seperti
mendeteksi bakteri, sel kanker, dan biomolekul30–34. Namun, belum ada laporan penggunaan FSNP sebagai penanda serangga.

Ada kemungkinan bahwa menggunakan FSNP sebagai bahan penanda berpendar pada serangga mungkin merupakan pendekatan yang efektif.
Oleh karena itu, penelitian ini mengevaluasi kemungkinan penggunaan FSNPs sebagai penanda pada serangga kecil. FSNP
disiapkan, dan sifat fisiknya dikarakterisasi. Kemanjuran penandaan dan pengaruhnya terhadap aspek biologis diselidiki
menggunakan ikan buah, Drosophila melanogaster, sebagai organisme model.

Hasil
Karakteristik FSNPs. Sekitar 70 mg FSNP kering diperoleh dari setiap waktu sintesis. Jumlah pewarna
fluoresen yang ditemukan pada supernatan afer sintesis sangat rendah (<1% dari total pewarna dalam
sistem reaksi) yang menunjukkan bahwa hampir semua molekul pewarna terperangkap di dalam NP.
FSNP sangat bulat dan monodispersi (Gbr. 1a), dan NP berukuran seragam, dengan diameter rata-rata 65, 78 ± 4, 38 nm
(Gbr. 1b). Kepadatan sebenarnya dari FSNP adalah 1,763 g/cm3 dan konsentrasinya adalah 3,804 × 1015 partikel/g NP kering.
Berdasarkan perhitungan, jumlah molekul dye yang terperangkap dalam satu NP sebanyak 43.407 molekul. Potensi zeta rata-
rata dari FSNP 1 mg/mL terdispersi dalam air deionisasi (pH=5,8) adalahÿ31,5±0,76 mV (n=6), menunjukkan stabilitas sedang.
Namun, ketika FSNPs didispersikan dalam makanan cair untuk membesarkan fies buah (pH=5.8), potensi zeta meningkat
menjadiÿ10.85±0.40 mV (n=6), menunjukkan ketidakstabilan yang baru jadi.

Suspensi FSNP memancarkan pendaran oranye terang di bawah sinar UV (Gbr. 2a). Spektrum serapan FSNPs dan larutan
pewarna Rubpy serupa dengan panjang gelombang serapan maksimal masing-masing pada 454 dan 452 nm (Gbr. 2b). Panjang
gelombang emisi maksimal FSNP adalah 618 nm yang sedikit bergeser kebiruan relatif terhadap larutan Rubpy (624 nm) di
bawah pita eksitasi 460 nm (Gbr. 2c). Namun, intensitas fluoresensi FSNP lebih tinggi pada konsentrasi molar pewarna yang
sama. FSNP menunjukkan fotostabilitas yang lebih besar daripada larutan pewarna Rubpy, dengan kecerahan fluoresensinya
berubah sangat sedikit selama 2 jam eksitasi di bawah lampu uap merkuri 150 W (Gbr. 2d).

Kuantitas FSNP yang sesuai untuk penandaan. Efisiensi penandaan bervariasi secara signifikan di seluruh konsentrasi NP,
meningkatkan efisiensi dengan peningkatan konsentrasi FSNP hingga 1,00 mg/mL (Gbr. 3). Efisiensi tidak berbeda antara
jenis kelamin, dan interaksi antara konsentrasi dan jenis kelamin tidak terdeteksi secara statistik (Tabel 1).

Penerimaan makan. Penerimaan makan diukur dari jumlah makanan yang dikonsumsi menunjukkan perbedaan yang signifikan
antara ikan jantan dan betina, tetapi tidak di antara jenis penanda (Tabel 1). Konsumsi rata-rata semua makanan yang diuji
berkisar antara 0,89 dan 0,91 µL/orang/hari untuk laki-laki dan antara 0,94 dan 1,03 µL/orang/hari untuk wanita.

Laporan Ilmiah | (2022) 12:19745 | https://doi.org/10.1038/s41598-022-24301-7 2

Vol:.(1234567890)
Machine Translated by Google
www.nature.com/scientificreports/

Gambar 2. (a) Pendaran jingga suspensi FSNP dan larutan pewarna rubpy di bawah sinar UV, (b) spektrum serapan
FSNPs 0,1 mg/mL dan larutan pewarna ruby 0,027 mM, (c) spektrum emisi FSNPs 1 mg/mL dan 0,27 mM Larutan
pewarna rubpy ketika dieksitasi dengan pita eksitasi 460 nm, dan (d) stabilitas fluoresensi suspensi FSNPs 1 mg/mL
dibandingkan dengan larutan pewarna Rubpy 0,27 mM setelah dipaparkan ke lampu uap merkuri 150 W selama 2 jam.
Panah menunjukkan penyerapan maksimal atau panjang gelombang emisi maksimal.

Gambar 3. Menandai efisiensi FSNP pada konsentrasi berbeda di Drosophila melanogaster (n dari setiap perlakuan
= 10, gabungan pria dan wanita). Garis horizontal dalam setiap kotak menunjukkan median, tepi kotak menunjukkan
persentil ke-75 dan ke-25, kumis menunjukkan maksimum dan minimum, dan lingkaran mewakili outlier. Perlakuan
dengan huruf yang sama tidak berbeda nyata satu sama lain yang diungkapkan dengan uji rank alignment pada taraf
signifikansi 5%.

Menandai ketekunan. Ikan yang diberi fluorescein dan FSNP menunjukkan pendaran yang lebih terang di perut
daripada ikan yang diberi makan Rubi di bawah sinar UV (Gbr. 4). Namun, api rubpy-fed menunjukkan pendaran pucat,
yang sulit dibedakan dari autofuoresensi pada api yang tidak ditandai. Durasi pendaran yang dapat dideteksi dari api
bervariasi antara jenis penanda dan jenis kelamin (Tabel 1). Pendaran dari fies yang diberi makan FSNP dapat dideteksi
lebih lama daripada yang diberi fuorescein dan pewarna Rubpy (Gbr. 5). Namun, pendaran di sebagian besar fies melakukannya

Laporan Ilmiah | (2022) 12:19745 | https://doi.org/10.1038/s41598-022-24301-7 3

Vol.:(0123456789)
 Machine Translated by Google
www.nature.com/scientificreports/

Karakteristik Faktor dfa Fb P

konsentrasi FSNP 4 9.89 <0,001

Menandai efisiensi Seks 1 0,01 0,922

Konsentrasi FSNP×jenis kelamin 4 0,85 0,500

Jenis penanda 3 1.35 0,259

Penerimaan makan Seks 1 53.18 <0,001

Jenis penanda×seks 3 1.25 0,294

Jenis penanda 2 27.39 <0,001

Menandai ketekunan Seks 1 11.73 <0,001

Jenis penanda×seks 2 8.00 <0,001

Jenis penanda 3 95.37 <0,001

Umur panjang Seks 1 8.19 0,004

Jenis penanda×seks 3 2.56 0,054

Jenis penanda 3 1.19 0,317

Pendakian Seks 1 7.19 0,008

Jenis penanda×seks 3 0,55 0,651

Tabel 1. Pengaruh marka, jenis kelamin, dan interaksinya terhadap parameter marka dan karakteristik Drosophila a df adalah derajat
uji rank selaras. jumlah rata-rata kuadrat dengan kebebasan. bF adalah F-statistik, yang merupakan rasio melanogaster, menggunakan
kesalahan kuadrat rata-rata.

Gambar 4. Drosophila melanogaster di bawah bola lampu UV 40 W (panjang gelombang 365–400 nm) pada jarak 30 cm setelah
memberi makan makanan cair yang mengandung penanda fluoresen berbeda selama 1 jam, (a) makanan cair tanpa penanda, (b)
makanan cair yang mengandung 0,27 mM pewarna ruby, (c) makanan cair yang mengandung 0,27 mM fuorescein, dan (d) makanan
cair yang mengandung 1 mg/mL FSNPs.

tidak bertahan lebih dari 10 jam setelah makan, kecuali untuk beberapa betina yang diberi makan FSNP. Selama percobaan, bintik-bintik
tinja yang cerah terlihat di dinding bagian dalam vial sejak jam pertama pemberian makan.

Umur panjang. Efek FSNPs terhadap umur panjang ikan dewasa diuji dan dibandingkan dengan pewarna lainnya. Ketahanan hidup
buah berbeda secara signifikan di antara kelompok perlakuan (ÿ2=362, df=3, P<0,001).
Probabilitas kelangsungan hidup ikan ruby-fed lebih rendah daripada kelompok lain pada usia yang sama (Gbr. 6a). Secara keseluruhan,
betina memiliki umur yang sedikit lebih panjang daripada jantan di semua perlakuan. Rata-rata waktu kelangsungan hidup ikan kontrol,
ikan fuorescein-, Rubpy- dan FSNP masing-masing adalah 41, 32, 5, 16, dan 34 hari untuk jantan dan 41, 40, 17, dan 39, 5 hari untuk
betina (Gbr. 6b).

Kesuburan. Jumlah mata air yang berkembang menjadi dewasa sangat bervariasi tetapi tidak berbeda nyata antara jantan yang diberi
perlakuan, betina yang diberi perlakuan, dan pasangan fy yang tidak diberi perlakuan (ÿ2=11.85, df=6, P=0.07) (Tabel 2). Rasio jenis
kelamin pegas dari pasangan yang diuji ini sedikit bias perempuan, dan tidak berbeda secara signifikan di antara kelompok perlakuan
(ÿ2=2.19, df=6, P=0.90) (Tabel 2).

Geotaksis negatif. Persentase fies dengan geotaxis negatif dan kemampuan untuk melintasi garis 7 cm pada
perawatan kontrol, fuorescein, Rubpy, dan FSNP masing-masing adalah 30% untuk pria dan 40%, 30%, 40%,
dan 50% untuk wanita. . Namun, ada perbedaan yang signifikan antara jenis kelamin, tetapi tidak di antara
perlakuan (Tabel 1).

Laporan Ilmiah | (2022) 12:19745 | https://doi.org/10.1038/s41598-022-24301-7 4

Vol:.(1234567890)
Machine Translated by Google
www.nature.com/scientificreports/

Gambar 5. Durasi pendaran Drosophila melanogaster yang terdeteksi setelah memberi makan makanan cair yang
mengandung penanda berbeda. Garis horizontal dalam setiap kotak menunjukkan median, tepi kotak menunjukkan
persentil ke-75 dan ke-25, kumis menunjukkan maksimum dan minimum, dan lingkaran mewakili outlier. Perlakuan
dengan huruf yang sama tidak berbeda nyata satu sama lain yang diungkapkan dengan uji rank alignment pada
taraf signifikansi 5%. Angka-angka di atas kotak adalah ukuran sampel dari masing-masing perlakuan.

Gambar 6. (a) Kurva kelangsungan hidup Drosophila melanogaster yang diberi pakan cair yang mengandung penanda
berbeda dan (b) rentang hidup buah fy pada masing-masing perlakuan. Garis horizontal dalam setiap kotak
menunjukkan median, tepi kotak menunjukkan persentil ke-75 dan ke-25, kumis menunjukkan maksimum dan
minimum, dan lingkaran mewakili outlier. Perlakuan dengan huruf yang sama tidak berbeda nyata satu sama lain yang
diungkapkan dengan uji rank alignment pada taraf signifikansi 5%.

Perlakuan Median jumlah pegas dewasa Median rasio jenis kelamin pegas
Laki-laki normal × perempuan normal 107 0,45

Jantan pemakan fluorescein×betina normal 75 0,43

Jantan pemakan rubi×betina normal 51.5 0,43

Jantan pemakan FSNP×betina normal 56 0,46

Laki-laki normal × betina yang diberi makan fuorescein 147 0,45

Laki-laki normal × Betina yang diberi makan rubpy 122 0,44

Jantan normal × betina yang diberi makan FSNP 76 0,44

Tabel 2. Fertilitas Drosophila melanogaster jantan dan betina selama 10 hari setelah pemberian pakan penanda yang
berbeda.

Laporan Ilmiah | (2022) 12:19745 | https://doi.org/10.1038/s41598-022-24301-7 5

Vol.:(0123456789)
 Machine Translated by Google
www.nature.com/scientificreports/

Pembahasan
Pendaran terang, fotostabilitas tinggi, dan toksisitas rendah merupakan fitur penting penanda fluoresen saat diterapkan pada organisme
hidup atau sistem biologis1,29. Dalam penelitian ini, sifat optik yang diamati dari FSNP dan pewarna bebas sedikit berbeda. Pergeseran
penyerapan dan puncak emisi FSNPs relatif terhadap pewarna bebas mungkin disebabkan oleh polaritas molekul pewarna di sekitar media
yang berbeda antara sisi dalam dan luar NPs35 . Sinyal fluoresensi dari FSNP lebih terang daripada larutan pewarna Rubpy pada
konsentrasi molar yang setara (Gambar 2c dan 4). Kecerahan FSNP yang luar biasa telah dilaporkan sebelumnya23,30,31. Banyak
fuorofor digabungkan di dalam matriks amorf partikel silika, menghasilkan sinyal optik yang diperbesar secara signifikan dibandingkan
dengan molekul pewarna tunggal29. Struktur nano silika berfungsi sebagai penghalang yang melindungi molekul pewarna dari interaksi
dengan peredam fluoresensi (misalnya oksigen) di lingkungan sekitar, dan dengan demikian mempertahankan hasil kuantum fluoresensi
yang tinggi22,23,36.

FSNPs tampaknya tidak terakumulasi dalam bagian usus dari fies buah, dan mereka secara bertahap diekskresikan pada jam pertama
setelah dikonsumsi. Percobaan pada penelitian sebelumnya dengan menggunakan FD&C Blue No. 1 yang dicampurkan pada makanan
menunjukkan bahwa fies buah dapat mengeluarkan makanan dan pewarna yang dikonsumsi dalam waktu 30 menit37,38. Hal ini
menunjukkan bahwa waktu retensi makanan dalam usus buah sangat cepat. Namun, betina memiliki waktu persistensi penandaan yang
lebih lama dibandingkan jantan (Tabel 1 dan Gambar 5). Hal ini dapat dijelaskan dengan variasi ukuran usus antara jenis kelamin di mana
betina biasanya memiliki usus yang lebih besar daripada jantan, sehingga waktu retensi makanan dan pewarna (atau NP) lebih lama di dalam usus39 .
Namun demikian, penyerapan NP dapat terjadi karena interaksi elektrostatik antara muatan permukaan NP dan membran di dalam usus.
Sebagai contoh, dalam kondisi asam di midgut tengah fies buah, NP bermuatan positif dapat lewat dengan cepat saat diserap dan tinggal
lebih lama di segmen posterior alkali dari midgut40,41 . Pengamatan interaksi ini telah dicapai dengan menggunakan polimer fluoresen
NPs41. Menurut analisis zetapotensial dalam penelitian ini, permukaan FSNPs bermuatan negatif yang mungkin memiliki elektrostatik
antara NPs dan membran sel bermuatan negatif di usus, dan mungkin juga dipengaruhi oleh gaya van der Waals dan ikatan hidrogen42.

Molekul pewarna tidak hanya dilindungi dari lingkungan sekitarnya, tetapi struktur nano silika juga mencegah kontak langsung antara
pewarna dan sel hidup, yang dapat berdampak negatif pada organisme target29.
Hal ini dapat menjelaskan penurunan kelangsungan hidup ikan yang cepat pada kelompok yang diberi makan Rubi, sedangkan ikan yang
diobati dengan FSNP hidup lebih lama dan memiliki umur yang sebanding dengan kelompok kontrol (Gbr. 6a). Meskipun belum ada
penelitian tentang toksisitas pewarna ruby pada organisme hidup yang telah dilakukan, dihipotesiskan bahwa pewarna fluoresen ini
memiliki efek negatif pada kelangsungan hidup ikan dan struktur nano silika dapat mencegah efek ini.
Masih ada perbedaan mengenai toksisitas NP silika. Misalnya, NP silika amorf saat ini sedang dikembangkan sebagai bahan
tambahan makanan dan agen pengiriman obat karena keamanannya bagi kesehatan manusia, toksisitas rendah, dan kompatibilitas
dengan sistem biologis23,43–46. Namun, telah dilaporkan bahwa FSNP meningkatkan apoptosis sel epitel paru-paru manusia dan
menunjukkan sitotoksisitas pada sel MRC-547,48 . Bahkan ketika hanya FSNP yang disiapkan menggunakan proses dan pewarna
fluoresen (pewarna Rubpy) yang sama seperti dalam penelitian ini, laporan toksisitas bervariasi di antara organisme yang diuji. Sebagai
contoh, mereka tidak memiliki efek negatif pada embrio zebrafsh tetapi mempromosikan apoptosis pada sel epitel paru-paru manusia45,47.
NP silika tampaknya memiliki efek entomocidal yang khas dan dikembangkan menjadi pestisida. Selanjutnya, ketika digunakan sebagai
debu, mereka menyerap air dari kutikula serangga dan menyebabkan abrasi pada lapisan lilin, yang pada akhirnya menyebabkan kematian
akibat pengeringan48–50. Larva D. melanogaster yang terpapar NP silika mengalami efek merugikan dari destabilisasi membran usus,
deformasi bagian mulut, dan stres oksidatif51,52. Namun, perhatikan bahwa toksisitas NP silika bergantung pada banyak faktor, termasuk
teknik preparasi, gugus fungsi pada permukaan partikel, ukuran partikel, dosis, dan sel target atau organisme53,54.

FSNP dalam penelitian ini agregat lebih cepat dalam makanan cair daripada air deionisasi. Fenomena ini dikonfirmasi oleh potensi
zeta, yang menunjukkan bahwa ketika partikel terdispersi dalam makanan cair yang mengandung gula dan pepton, nilainya mendekati nol.
Agregasi adalah masalah yang memprihatinkan ketika NP diterapkan dalam fase air. Masalah ini dapat dicegah dengan memodifikasi
gugus fungsi pada permukaan partikel, menjadikannya cocok untuk aplikasi dalam sistem biologis55. Oleh karena itu, menyelidiki efek
modifikasi permukaan in vivo direkomendasikan untuk penelitian selanjutnya.

Kesimpulan
Studi ini menunjukkan pencapaian penggunaan FSNP yang disintesis menggunakan teknik water-in-oil reverse
microemulsion (WORM) sebagai penanda pijar internal pada buah-buahan. FSNP sangat bulat dan monodis, dengan
diameter rata-rata 65,78 ± 4,38 nm. Api buah dapat dengan mudah memasukkan NP melalui makanan cair,
menghasilkan pendaran oranye terang di perut di bawah sinar UV. Selain itu, tidak ada efek buruk pada kelangsungan
hidup dan kesuburan yang terdeteksi dibandingkan dengan kelompok kontrol. Modifikasi permukaan partikel dapat
digunakan untuk meningkatkan persistensi NP dalam tubuh serangga atau untuk merancang NP dengan pengikatan
spesifik pada jaringan/organ target. Studi lebih lanjut tentang interaksi antara NP dan organisme hidup diperlukan untuk penelitian di

Metode
Sintesis FSNPs. FSNP dibuat menggunakan teknik WORM dengan sedikit modifikasi dari penelitian sebelumnya dengan menggunakan
pewarna Rubpy (tris (2,2ÿ-bipyridyl)ruthenium(II) chloride) sebagai fuorophore karena tertanam dengan baik dalam jaringan silika, dan
terdapat tidak perlu pra-modifikasi molekul pewarna sebelum sintesis NP31,32,34,56. Selanjutnya, 15 mL sikloheksana, 3,6 mL 1-heksanol,
3,54 mL Triton™ X-100, dan 0,96 mL larutan pewarna Rubpy 20 mM dicampur dan diaduk selama 20 menit. Sepuluh, 0,2 mL tetraetil
ortosilikat (TEOS) ditambahkan dan diaduk selama 10 menit. Setelah pembentukan WORM dalam sistem, 0,2 mL larutan amonium 28-30%
ditambahkan untuk mengkatalisis reaksi dan diaduk lebih lanjut selama 24 jam pada suhu kamar dalam kondisi gelap.

Untuk mengurangi kebocoran pewarna dari NP, produk selanjutnya dilapisi dengan cangkang silika dengan mengulangi reaksi untuk
satu siklus lagi57. Sepuluh, 0,96 mL air deionisasi, 0,2 mL TEOS, dan 0,2 mL amonium 28–30%

Laporan Ilmiah | (2022) 12:19745 | https://doi.org/10.1038/s41598-022-24301-7 6

Vol:.(1234567890)
Machine Translated by Google
www.nature.com/scientificreports/

larutan ditambahkan ke bubur dan diaduk selama 24 jam. Setelah reaksi selesai, FSNPs dipisahkan dari larutan dengan pengendapan
aseton dan kemudian dicuci dengan etanol 95% dan air suling untuk menghilangkan pelarut dan surfaktan. Kebocoran pewarna diukur dari
absorbansi supernatan setelah mengendapkan produk NP pada 460 nm menggunakan spektrofotometer (Dlab, SP-V1000), dan
dibandingkan dengan kurva standar larutan pewarna Rubpy. FSNP yang telah dicuci disimpan dalam suspensi dalam gelap pada suhu 4
°C.

Karakterisasi FSNP. FSNP diperiksa di bawah mikroskop elektron transmisi (TEM; JEOL JEM-1400). Diameter diukur dari gambar TEM
(tiga sampel independen, 90 partikel per sampel) menggunakan perangkat lunak ImageJ (versi 1.53o, NIH, USA; https://imagej.nih.gov/ij).
Kepadatan NP yang sebenarnya diukur dengan piknometri helium menggunakan Ultrapycnomter 1000 (Instrumen Quantachrome). Agregasi
NP dalam larutan berair diukur dalam hal potensi zeta menggunakan zeta-sizer (Malvern Panalytical, Nano ZSP). Semakin tinggi nilainya
(positif atau negatif), semakin stabil dispersi partikel, dengan 0 hingga ± 10 mV menunjukkan bahwa NP tidak stabil dan cenderung
beragregasi, ± 10 hingga ± 30 mV mulai tidak stabil, ± 30 hingga ± 40 mV sedang stabil, ±40 hingga ±60 mV stabil dengan baik, dan nilai
di atas ±60 mV sangat stabil58. Spektra serapan dianalisis menggunakan spektrofotometer (Dlab, SP-V1000), dan spektra emisi dianalisis
menggunakan spektrofuorometer (Shimadzu, RF-6000) pada panjang gelombang eksitasi maksimal 460 nm32. Untuk menguji stabilitas
fluoresensi, 1 mg/mL suspensi FSNP dipaparkan ke lampu uap merkuri 150 W, dan intensitas fluoresensinya diukur setiap 10 menit selama
2 jam.

Konsentrasi FSNP dan jumlah molekul pewarna yang tertanam dalam partikel. Konsentrasi FSNP
dinyatakan sebagai jumlah NP dalam 1 g NP kering, yang dihitung dari rumus volume bola, seperti yang
ditunjukkan pada Persamaan. (1):

4ÿr3
VNP = (1)
3

di mana VNP adalah volume NP dan r adalah radius rata-rata FSNP dalam satuan cm.
Jumlah FSNPs (NNP) dalam 1 g dihitung menurut Persamaan. (2):

1
NNP = (2)
(D × VNP)

di mana D adalah densitas sebenarnya dari FSNP dalam satuan g/cm3 .

Untuk memperkirakan jumlah molekul pewarna yang terperangkap dalam satu NP, perhitungan dilakukan berdasarkan asumsi bahwa
semua molekul pewarna terperangkap di dalam FSNP dan setiap sintesis menghasilkan 70 mg NP kering.

Terbang budaya dan peternakan. Ikan buah tipe liar, Drosophila melanogaster, dikumpulkan dari populasi
alami di Bangkok, Tailand, dibiakkan dan dipelihara pada media agar tepung jagung-sukrosa-ragi standar (100
g/L tepung jagung, 50 g/L sukrosa, 50 g/L bubuk ragi, agar 20 g/L, natrium propionat 0,65 g/L, dan metilparaben
0,1 g/L) pada suhu 25 °C±1 °C, kelembapan relatif 60%±10% dalam siklus terang/gelap 12/12 jam. Kondisi ini
digunakan selama penelitian.

Konsentrasi FSNP yang tepat untuk penandaan. Konsentrasi FSNP yang tepat untuk menandai fies buah diukur dalam hal efisiensi
penandaan. FSNP dicampur dalam makanan cair (100 g/L sukrosa dan 10 g/L ekstrak ragi) dan disesuaikan dengan lima konsentrasi: 0,25,
0,5, 1,0, 1,5, dan 2,0 mg/mL. Kelompok 20-40 ekor dengan usia dewasa 3 sampai 5 hari kelaparan selama 18-20 jam dalam botol kaca
240 mL yang berisi agar air 1,5% sebelum percobaan. Eksperimen dilakukan dalam botol kaca 240 mL dengan delapan pengumpan yang
terbuat dari ujung pipet 200 µL yang digantung di tutup botol (8 ujung per botol, memuat 20 µL makanan cair per ujung). Ikan diizinkan untuk
memakan makanan selama 2 jam sebelum dibekukan. Pendaran api karena asupan FSNP, yang terlihat melalui kutikula perut, diperiksa
secara visual pada jarak 30 cm dari api di bawah bola lampu UV 40 W (panjang gelombang 365-400 nm). Kecerahan fluoresen diberi skor
mulai dari 0 hingga 2: 0=tidak ada fluoresensi, 1=pendaran sedikit, dan 2=pendaran terang. Efisiensi penandaan dihitung mengikuti rumus
yang dijelaskan dalam penelitian sebelumnya17, seperti yang ditunjukkan pada Persamaan. (3):

(nF × b)
Efisiensi penandaan (% ) = 100 × . (3)
(B × NF )

di mana nF adalah jumlah fies dengan setiap nilai skor, b adalah skor kecerahan, B adalah skor tertinggi yang mungkin (di sini: 2), dan NF
adalah jumlah total fies yang dicetak. Percobaan dilakukan dengan lima ulangan.

Penerimaan makan. Penerimaan makan diukur sebagai jumlah asupan makanan melalui pengumpan kapiler selama periode 3 hari59.
Kelompok lima ekor ayam dengan umur dewasa 3-5 hari disimpan dalam botol kaca 45 mL yang berisi agar air 1,5%. Makanan cair yang
mengandung 1 mg/mL FSNPs diberikan ke fies melalui dua 5 µL capillary feeder yang tergantung dari colokan kapas. Setelah 24 jam,
jumlah asupan makanan diukur, dan kapiler lama diganti dengan yang baru. Pengurangan makanan cair dari penguapan ditentukan dari
pengumpan dalam vial tanpa api. Penerimaan pakan FSNPs dibandingkan dengan pemberian pakan penanda lainnya, yaitu pakan cair
yang mengandung fuorescein 0,27 mM, pakan cair yang mengandung pewarna Rubpy 0,27 mM, dan pakan cair tanpa marker (kontrol).
Konsentrasi larutan pewarna pada 0,27 mM dipilih karena konsentrasi ini setara dengan jumlah pewarna yang disajikan dalam 1 mg/mL
FSNP berdasarkan perhitungan.

Laporan Ilmiah | (2022) 12:19745 | https://doi.org/10.1038/s41598-022-24301-7 7

Vol.:(0123456789)
 Machine Translated by Google
www.nature.com/scientificreports/

Menandai ketekunan. Fies buah dengan usia dewasa 3-5 hari dipuasakan selama 18-20 jam dalam botol kaca 45 mL yang berisi agar air
1,5%. Pengujian dimulai pada pukul 08:00 dengan membiarkan ikan memakan makanan cair yang mengandung penanda berbeda seperti
yang dijelaskan sebelumnya melalui pengumpan selama 1 jam. Sepuluh, spidol diganti dengan makanan cair biasa.
Pendaran dari api diamati di bawah sinar UV setiap jam sampai pendaran tidak terdeteksi.
Lalat tanpa pendaran pada awalnya (menunjukkan tidak makan) dikeluarkan dari analisis.

Eksperimen umur panjang. Kelompok 10 ekor terdiri dari 5 ekor jantan dan betina dengan umur dewasa kurang dari 12 jam disimpan dalam
botol kaca 45 mL yang berisi agar air 1,5%. Makanan cair yang mengandung penanda berbeda yang dijelaskan sebelumnya diberikan kepada
ikan secara ad libitum melalui ujung pipet 200 µL dan diperbarui setiap hari.
Jumlah ikan mati dan hidup diperiksa setiap hari, dan ikan hidup dipindahkan ke vial baru setiap minggu untuk
mencegah infeksi jamur sampai semua individu mati.

Efek pada kesuburan. Ikan perawan yang baru muncul (umur dewasa kurang dari 6 jam) dari jenis kelamin yang sama diperlakukan dengan
pemeliharaan dengan pakan uji yang mengandung penanda berbeda dengan cara yang sama seperti percobaan umur panjang selama 7 hari.
Untuk mengidentifikasi efek pewarna atau FSNP pada reproduksi dalam kaitannya dengan jenis kelamin, ikan yang diberi perlakuan (diberi makan
dengan makanan yang mengandung penanda) dan ikan yang tidak diberi perlakuan (diberi makan dengan makanan biasa) dipasangkan, yaitu jantan
yang diberi perlakuan×betina yang tidak diberi perlakuan dan jantan yang tidak diberi perlakuan×betina yang diberi perlakuan. . Ikan dipelihara dengan
CYS agar satu pasang per vial dan dipindahkan ke vial baru setiap lima hari selama 10 hari. Botol-botol itu disimpan dalam kondisi pemeliharaan
standar sampai semua musim berkembang menjadi dewasa. Jumlah pegas dihitung, dan jenis kelamin diidentifikasi.

Geotaksis negatif. Efek penanda pada gerak dan respons perilaku diselidiki dari geotaksis negatif menggunakan uji panjat. Peralatan
pemeliharaan, pakan, dan pakan dilakukan serupa dengan percobaan umur panjang. Setelah 2 minggu pemberian makanan yang diuji,
kelompok 10 ekor dengan jenis kelamin yang sama dipindahkan ke botol kaca baru, dan botol diberi tanda 7 cm di atas dasar. Lalat dibiarkan
tanpa gangguan selama 1 jam sebelum dilakukan uji perilaku. Sepuluh, api ditepuk ke bawah sebanyak tiga kali dan diberi waktu 10 detik
untuk naik ke atas ke atas. Jumlah kobaran api di atas dan di bawah tanda 7 cm dicatat. Eksperimen diulang selama tiga percobaan dengan
interval 1 menit. Sepuluh ulangan dilakukan per perlakuan.

Analisis statistik. Pengaruh marka, jenis kelamin, dan interaksinya terhadap parameter marka dan karakteristik
daging buah dianalisis menggunakan uji rank rata60. Efek penanda pada umur panjang divisualisasikan dengan
memplot kurva kelangsungan hidup menggunakan analisis Kaplan-Meier, dan perbedaan dalam tingkat
kelangsungan hidup diuji menggunakan uji log-rank. Rasio jumlah pucuk dan kelamin pucuk dibandingkan antar
perlakuan menggunakan uji Kruskal-Wallis. Nilai AP <0,05 dianggap signifikan secara statistik. Analisis statistik
dilakukan dengan menggunakan paket base, ARTool, survival, dan survminer di R, versi 4.1.361.

Ketersediaan data
Semua data yang dihasilkan dan dianalisis dalam penelitian ini tersedia dari penulis terkait atas permintaan yang
masuk akal.

Diterima: 20 Juni 2022; Diterima: 14 November 2022

Referensi
1. Hagler, JR & Jackson, CG Metode penandaan serangga: teknik saat ini dan prospek masa depan. Tahun. Pendeta Entomol. 46, 511–543. https://doi.org/
10.1146/annurev.ento.46.1.511 (2001).
2. Tomas, B., Holland, JD & Minot, EO Opsi teknologi pelacakan satwa liar dan pertimbangan biaya. Wildl. Res. 38, 653–663. https://doi.org/10.1071/
WR10211 (2011).
3. De Souza, AR, Ribeiro, B., José, N. & Prezoto, F. Cat menandai tawon sosial: Evaluasi efek perilaku dan toksisitas.
Entomol. Exp. Aplikasi 144, 244–247 (2012).
4. Fisher, P. Review penggunaan Rhodamine B sebagai penanda untuk studi satwa liar. Wildl. Soc. Banteng. 27, 318–329 (1999).
5. Schmera, D., Szentesi, Á. & Jermy, T. Dalam pergerakan feld kumbang kentang Colorado yang melewati musim dingin: Pendekatan berbasis tambalan. J.
Aplikasi Entomol. 131, 34–39 (2007).
6. Unruh, T. & Chauvin, R. Elytral tusukan: Metode yang cepat dan andal untuk menandai kumbang kentang Colorado. Bisa. Entomol. 125, 55–63
(1993).
7. Paterson, W. et al. Penilaian penyembuhan situs tag fipper pada anak anjing laut abu-abu menggunakan termografi. Mar.Mamm. Sains. 27, 295–305.
https://doi.org/10.1111/j.1748-7692.2010.00400.x (2011).
8. McGregor, M. & Jones, D. Pena tato sebagai pendekatan berbiaya rendah untuk identifikasi permanen mamalia berukuran sedang.
Wildl. Soc. Banteng. 40, 169–173. https://doi.org/10.1002/wsb.631 (2016).
9. Daniel Kissling, W., Pattemore, DE & Hagen, M. Tantangan dan prospek dalam telemetri serangga. Biol. Wahyu 89, 511–530. https://doi.org/10.1111/
brv.12065 (2014).
10. Whitford, M. & Klimley, AP Tinjauan sensor perilaku, fisiologis, dan lingkungan yang digunakan dalam biotelemetri hewan
dan studi biolog. Animasi. Bioteleme. 7, 26. https://doi.org/10.1186/s40317-019-0189-z (2019).
11. Fisher, KE, Adelman, JS & Bradbury, SP Menggunakan telemetri radio frekuensi sangat tinggi (VHF) untuk membuat ulang kupu-kupu raja
jalur pertarungan. Mengepung. Entomol. 49, 312–323. https://doi.org/10.1093/ee/nvaa019 (2020).
12. Moskowitz, D. & May, M. Pemanfaatan habitat dan wilayah jelajah harimau dewasa (Cordulegaster erronea Hagen) diamati melalui telemetri radio dengan
rekomendasi konservasi. J. Konservasi Serangga. 21, 885–895. https://doi.org/10.1007/s10841-017-0027-7 (2017).
13. Rink, M. & Sinsch, U. Pemantauan radio-telemetrik penyebaran kumbang rusa: Implikasi untuk konservasi. J. Zool. 272, 235–243. https://doi.org/10.1111/
j.1469-7998.2006.00282.x (2007).
14. Tini, M. dkk. Deteksi situs oviposisi kumbang rusa dengan menggabungkan telemetri dan perangkap munculnya. Nat. Konservasi. 19, 81 (2017).
15. Tini, M. dkk. Penggunaan ruang dan kemampuan penyebaran serangga saproxylic fagship: Studi telemetri kumbang rusa (Lucanus cervus)
di hutan dataran rendah peninggalan. Konservasi Serangga. Penyelam. 11, 116–129 (2018).

Laporan Ilmiah | (2022) 12:19745 | https://doi.org/10.1038/s41598-022-24301-7 8

Vol:.(1234567890)
Machine Translated by Google
www.nature.com/scientificreports/

16. Wikelski, M. dkk. Pergerakan jarak jauh lebah anggrek neotropis diamati melalui telemetri radio. PLoS SATU 5, e10738. https://
doi.org/10.1371/journal.pone.0010738 (2010).
17. Clymans, R., Van Kerckvoorde, V., Beliën, T., Bylemans, D. & De Clercq, P. Menandai Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae)
dengan debu neon. Serangga 11, 152. https://doi.org/10.3390/insects11030152 (2020).
18. Russell, TL dkk. Anopheles farauti adalah populasi homogen yang menghisap darah lebih awal dan luar ruangan di Kepulauan Solomon.
Malar. J.15 , 1–7. https://doi.org/10.1186/s12936-016-1194-9 (2016).
19. Sarkar, D., Muthukrishnan, S. & Sarkar, M. Nyamuk bertanda neon menawarkan metode untuk melacak dan mempelajari perilaku nyamuk
iour. Int. J.Mosk. Res. 4, 5–9 (2017).
20. Gayahan, GG & Tschinkel, WR Semut api, Solenopsis invicta, mengeringkan dan menyimpan potongan serangga untuk digunakan nanti. J. Ilmu Serangga. 8,
1. https://doi.org/10.1673/031.008.3901 ( 2008).
21. Alford, R. dkk. Toksisitas fuorofor organik yang digunakan dalam pencitraan molekuler: Tinjauan pustaka. Mol. Gambar. 8, 341–354 (2009).
22. Yang, H.-H. et al. Partikel silika hibrida berpendar nanometer sebagai label biologis ultrasensitif dan dapat difoto. Analis 128,
462–466. https://doi.org/10.1039/B210192K (2003).
23. Cho, EB, Volkov, DO & Sokolov, I. Nanopartikel silika mesopori berpendar ultrabright. Kecil 6, 2314–2319. https://doi. org/10.1002/smll.201001337 (2010).

24. Gidwani, B. dkk. Titik-titik kuantum: Prospek, toksisitas, kemajuan, dan aplikasi. J. Pengiriman Obat. Sains. Technol. 61, 102308. https://
doi.org/10.1016/j.jddst.2020.102308 (2021).
25. Gurdasani, K., Li, L., Rafer, MA, Daglish, GJ & Walter, GH Nanopartikel sebagai penanda eksternal potensial untuk studi mark-release-recapture pada Tribolium
castaneum. Entomol. Exp. Aplikasi 169, 575–581. https://doi.org/10.1111/eea.13040 (2021).
26. Konzmann, S., Kluth, M., Karadana, D. & Lunau, K. Efektivitas penyerbuk dari lebah spesialis yang mengeksploitasi tanaman generalis — melacak transfer
serbuk sari oleh Heriades truncorum dengan titik-titik kuantum. Apidologie 51, 201–211. https://doi.org/10.1007/s13592-019-00700-0 (2020).

27. Minnaar, C. & Anderson, B. Menggunakan titik-titik kuantum sebagai label serbuk sari untuk melacak nasib butiran serbuk sari individu. Metode Ekol. Evol. 10,
604–614. https://doi.org/10.1111/2041-210X.13155 (2019).
28. Wang, Z. & Tang, M. Te sitotoksisitas titik-titik kuantum struktur inti-cangkang atau non-cangkang dan refleksi ramah lingkungan:
Ulasan. Mengepung. Res. 194, 110593. https://doi.org/10.1016/j.envres.2020.110593 (2021).
29. Nanopartikel Wei, W., Wei, M. & Liu, S. Silika sebagai pembawa untuk amplifikasi sinyal. Pendeta Anal. Kimia 31, 163–176. https://doi.org/
10.1515/revac-2012-0021 (2012).
30. Palantavida, S., Guz, NV, Woodworth, CD & Sokolov, I. Nanopartikel silika mesopori fluoresen ultrabright untuk prescreening kanker serviks. nanomed.
Nanoteknologi. Biol. Kedokteran 9, 1255–1262. https://doi.org/10.1016/j.nano.2013.04.011 (2013).
31. Lian, W. dkk. Deteksi ultrasensitif biomolekul dengan nanopartikel yang didoping pewarna fluoresen. Anal. Biokimia. 334, 135–144.
https://doi.org/10.1016/j.ab.2004.08.005 (2004).
32. Santra, S., Zhang, P., Wang, K., Tapec, R. & Tan, W. Konjugasi biomolekul dengan nanopartikel silika yang didoping luminofora untuk biomarker photostable.
Anal. kimia 73, 4988–4993. https://doi.org/10.1021/ac010406+ (2001).
33. Chen, Z.-Z. et al. Deteksi imunofuoresensi tidak langsung dari E. coli O157: H7 dengan nanopartikel silika fluoresen. Biosen. Bioel
elektron. 66, 95–102. https://doi.org/10.1016/j.bios.2014.11.007 (2015).
34. Songvorawit, N., Tuitemwong, P., Tuchinda, K. & Tuitemwong, K. Nanopartikel silika yang didoping pewarna fluoresen dengan poliklonal
antibodi untuk deteksi cepat Salmonella spp. Universitas Chiang Mai. J.Nat. Sains. 12, 25–33 (2013).
35. Ma, D., Kell, AJ, Tan, S., Jakubek, ZJ & Simard, B. Sifat fotofisika nanopartikel silika yang didoping zat warna berbeda
jenis interaksi pewarna-silika. J.Fis. kimia C 113, 15974–15981 (2009).
36. Kalaparthi, V., Palantavida, S. & Sokolov, I. Sifat ultrabrightness dari partikel berpendar nanopori dengan fisik
pewarna fluoresen enkapsulasi. J.Mater. kimia C 4, 2197–2210 (2016).
37. Deshpande, SA dkk. Mengukur asupan makanan Drosophila: analisis komparatif metodologi saat ini. Nat. Metode 11,
535–540. https://doi.org/10.1038/nmeth.2899 (2014).
38. Shell, BC et al. Pengukuran asupan makanan padat di Drosophila melalui konsumsi-ekskresi pelacak pewarna. Sains. Rep. 8, 11536.
https://doi.org/10.1038/s41598-018-29813-9 (2018).
39. Millington, JW & Rideout, EJ Dimorfisme seksual: Ecdysone memodulasi perbedaan jenis kelamin di usus. Kur. Biol. 30, R1327–R1330.
https://doi.org/10.1016/j.cub.2020.08.088 (2020).
40. Pappus, SA & Mishra, M. dalam toksikologi seluler dan molekuler nanopartikel Vol. 1048 (eds Q Saquib, M Faisal, A Al-Khedhairy,
& A Alatar) 311–322 (Springer, Cham, 2018).
41. Jiang, S. dkk. Pemberian oral dan pengambilan selektif nanopartikel polimerik pada larva Drosophila sebagai model in vivo. ACS
Biomater. Sains. Eng. 1, 1077–1084. https://doi.org/10.1021/acsbiomaterials.5b00163 (2015).
42. Kettiger, H., Québatte, G., Perrone, B. & Huwyler, J. Interaksi antara nanopartikel silika dan membran fosfolipid.
Biochim. Biofisika. Acta Biomembran. 1858, 2163–2170. https://doi.org/10.1016/j.bbamem.2016.06.023 (2016).
43. Go, M.-R., Bae, S.-H., Kim, H.-J., Yu, J. & Choi, S.-J. Interaksi antara nanopartikel silika aditif makanan dan matriks makanan.
Depan. Mikrobiol. 8, 1013. https://doi.org/10.3389/fmicb.2017.01013 (2017).
44. Wang, Y. et al. Nanopartikel silika mesopori dalam pengiriman obat dan aplikasi biomedis. nanomed. Nanoteknologi. Biol. Kedokteran
11, 313–327. https://doi.org/10.1016/j.nano.2014.09.014 (2015).
45. Fent, K., Weisbrod, CJ, Wirth-Heller, A. & Pieles, U. Penilaian serapan dan toksisitas nanopartikel silika fuorescent pada tahap awal kehidupan zebrafsh (Danio
rerio). Aquat. Toksikol. 100, 218–228. https://doi.org/10.1016/j.aquatox.2010.02.019 (2010).
46. Chandra, S., Beaune, G., Shirahata, N. & Winnik, FM Sintesis satu pot dari nanopartikel silika berpendar tinggi yang larut dalam air.
J.Mater. kimia B 5, 1363–1370. https://doi.org/10.1039/C6TB02813F (2017).
47. Jin, Y., Kannan, S., Wu, M. & Zhao, JX Toksisitas nanopartikel silika bercahaya terhadap sel hidup. kimia Res. Toksikol. 20, 1126–1133. https://doi.org/10.1021/
tx7001959 (2007).
48. Debnath, N., Das, S., Patra, P., Mitra, S. & Goswami, A. Evaluasi Toksikologi nanopartikel silika entomotoksik. Toksikol. Mengepung.
kimia 94, 944–951. https://doi.org/10.1080/02772248.2012.682462 (2012).
49. Shoaib, A. dkk. Efek entomotoksik nanopartikel silikon dioksida pada Plutella xylostella (L.)(Lepidoptera: Plutellidae) dalam kondisi laboratorium. Toksikol.
Mengepung. kimia 100, 80–91. https://doi.org/10.1080/02772248.2017.1387786 (2018).
50. Debnath, N. et al. Efek entomotoksik nanopartikel silika terhadap Sitophilus oryzae (L.). J. Pest Sci. 84, 99–105. https://doi.org/
10.1007/s10340-010-0332-3 (2011).
51. Pandey, A., Chandra, S., Chauhan, LKS, Narayan, G. & Chowdhuri, DK Internalisasi seluler dan respons stres dari nanopartikel silika amorf yang tertelan di
usus tengah Drosophila melanogaster. Biochim. Biofisika. Acta - Jenderal Subj. 1830, 2256–2266. https://doi.org/10.1016/j.bbagen.2012.10.001 (2013).

52. Galal, O. & El-Samahy, M. Efek genetik penggunaan nanopartikel silika sebagai biopestisida pada Drosophila melanogaster. Mesir J. Genet.
Sitol. 41, 87–106. https://doi.org/10.21608/ejgc.2012.10561 (2012).
53. Croissant, JG, Butler, KS, Zink, JI & Brinker, CJ Nanopartikel silika amorf sintetik: Toksisitas, biomedis, dan lingkungan
implikasi ronmental. Nat. Pendeta Mater. 5, 886–909. https://doi.org/10.1038/s41578-020-0230-0 (2020).
54. Kim, I.-Y., Joachim, E., Choi, H. & Kim, K. Toksisitas nanopartikel silika tergantung pada ukuran, dosis, dan jenis sel. nanomed. Nano
technol. Biol. Kedokteran 11, 1407–1416. https://doi.org/10.1016/j.nano.2015.03.004 (2015).
55. Bagwe, RP, Hilliard, LR & Tan, W. Modifikasi permukaan nanopartikel silika untuk mengurangi agregasi dan pengikatan nonspesifik.
Langmuir 22, 4357–4362. https://doi.org/10.1021/la052797j (2006).

Laporan Ilmiah | (2022) 12:19745 | https://doi.org/10.1038/s41598-022-24301-7 9

Vol.:(0123456789)
 Machine Translated by Google
www.nature.com/scientificreports/

56. Gubala, V., Giovannini, G., Kunc, F., Monopoli, MP & Moore, CJ Nanopartikel silika yang didoping pewarna: Sintesis, kimia permukaan
dan bioaplikasi. Nanoteknologi Kanker. 11, 1–43. https://doi.org/10.1186/s12645-019-0056-x (2020).
57. Yoo, H. & Pak, J. Sintesis nanopartikel silika berpendar tinggi dalam mikroemulsi terbalik melalui doping berlapis ganda
dari fuorofor organik. J. Nanopart. Res. 15. 1609. https://doi.org/10.1007/s11051-013-1609-2 (2013).
58. Kumar, A. & Dixit, CK dalam Kemajuan dalam Pengobatan Nano untuk Pengiriman Asam Mukleat Terapeutik (eds Surendra Nimesh,
Ramesh Chandra, & Nidhi Gupta) 43–58 (Woodhead Publishing, 2017).
59. Diegelmann, S. et al. Uji CApillary FEeder mengukur asupan makanan pada Drosophila melanogaster. J.Vis. Exp. 121, 55024. https://
doi.org/10.3791/55024 ( 2017).
60. Seaman, JW Jr., Walls, SC, Wise, SE & Jaeger, RG Caveat emptor: Metode dan interaksi transformasi peringkat. Tren Ekol.
Evol. 9, 261–263. https://doi.org/10.1016/0169-5347(94)90292-5 (1994).
61. Tim Inti R. (Yayasan R untuk Komputasi Statistik, Wina, Austria, 2022).

Ucapan Terima Kasih Kami

berterima kasih kepada Petroleum and Petrochemical College, Chulalogkorn University, dan Oral Biology Research Center, Chulalogkorn
University yang telah menyediakan peralatan untuk analisis. Penelitian ini didanai oleh Ratchadapiseksom potch Fund Chulalongkorn University
(CU_GR_62_61_23_24).

Kontribusi penulis NS
memprakarsai ide penelitian, memperoleh dana, merancang dan melakukan sebagian besar eksperimen, menganalisis data, dan menulis
manuskrip. PP dan TK memelihara ikan buah dan melakukan pendataan.

Kepentingan yang bersaing Para

penulis menyatakan tidak ada kepentingan yang bersaing.

Informasi tambahan
Korespondensi dan permintaan materi harus dialamatkan ke NS
Informasi cetak ulang dan izin tersedia di www.nature.com/reprints.
Catatan penerbit Springer Nature tetap netral sehubungan dengan klaim yurisdiksi dalam peta yang diterbitkan dan
afiliasi kelembagaan.

Akses Terbuka Artikel ini dilisensikan di bawah Lisensi Internasional Creative Commons Attribution
4.0, yang mengizinkan penggunaan, berbagi, adaptasi, distribusi, dan reproduksi dalam media atau
format apa pun, selama Anda memberikan kredit yang sesuai kepada penulis(-penulis) asli dan sumbernya, berikan
tautan ke lisensi Creative Commons, dan tunjukkan jika ada perubahan. Gambar atau materi pihak ketiga lainnya
dalam artikel ini termasuk dalam lisensi Creative Commons artikel tersebut, kecuali dinyatakan sebaliknya dalam
kredit materi. Jika materi tidak termasuk dalam lisensi Creative Commons artikel dan tujuan penggunaan Anda tidak
diizinkan oleh peraturan undang-undang atau melebihi penggunaan yang diizinkan, Anda harus mendapatkan izin
langsung dari pemegang hak cipta. Untuk melihat salinan lisensi ini, kunjungi http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.

© Te Author(s) 2022

Laporan Ilmiah | (2022) 12:19745 | https://doi.org/10.1038/s41598-022-24301-7 10

Vol:.(1234567890)