INDECZIEHLNEELSEN PERINGATAN
- Kit berisi bahan yang bersifat korosif, mudah menguap dan mudah
REAGEN ZIEHL NEELSEN(Basil Tahan Asam)
45-25°C
MF-ZN01 (3xl00ml)
MF-ZN02 (5x100m1)
REG. NO. KEMEN KES RI : AKD
10201610162
KEGUNAAN
Kit reagen Ziehl Neelsen digunakan untuk melakukan pemeriksaan
inikroskopis Basil Tahan Asam (BTA) antara lain Mycohacteriiuit
tuberculosis, M ycobacteriwn iton tubei‘culosis dan Mycobacterium
leJ›rae.
LATARBELAKANG
Basil Tahan Asam merupakan bakteri berbentuk batang yang kandun-
gan lemaknya sangat tebal sehingga tidak bisa diwarnai dengan reaksi
pewarnaan biasa, tetapi harus dengan pewarnaan tahan asam. Kelom-
pok bakteri ini disebut Basil Tahan Asam (BTA) kareua dapat
merrlpertahankan zat warna pertama sewaktu dicuci dengan larutan
penghilang warna. Golongan bakteri ini biasanya bersifat patogen
pada manusia contohnya adalah Mvcobn‹ terium tiifiercB/o.sis. Bakteri
M5 c’obacteritim tuberculosis dapat diisolasi dari sputum penderita
tuberculosis (TBC). Reaksi hasil pewarnaannya jika positif terdapat
bakteri Mr'c’obacterium fttfiei ‹ ufos is berwarna merah. Selain me-
nyo•rang manusia juga menyerang hewan seperti marmut dan kera.
Penularannya dapat melalui udara yang masuk ke saluran pernapasan.
Basil Tahan Asam dapat diamati dengan teknik pewarnaan Ziehl
Neelsen. Pengambilan sputum (sekret paru-paru atau dahak) untuk
analisis TBC dapat dilakukan setiap saat dikenal ada 3 jenis sputum
Sputum sewaktu (1), penderita datang berobat dengan keluhan apa
saja ke poliklinik
Sputum pagi, yang diambil besok paginya begitu bangun tidur.
Sputum sewaktu (2), yang diambil sewaktu penderita mengantar
dahak pagi tersebut.
PRINSIP PEWARNAAN
Basil Tahan Asam bila diwarnai dengan Carbol Fuchsin sulit dihilang-
kan. warna merah tetap bertahan walaupun dicnci dengan Asam Alkohol.
Methylene Blue merupakan could ter stain (warna dasar).
Dinding Basil Tahan Asam mempunyai lapisan lilin dan lemak yang
sukar ditembus pewarna. Oleh karena pengaruh fenol dan pemanasan,
maka lapisan lilin dan lemak itu dapat ditembus pewarna basic fuchsin
yang terdapat pada Carbol Fuchsin. Pada waktu pencucian lapisan lilin
dan lemak yang terbuka akan merapat kembali. Pada pencucian dengan
Asam Alkohol warna fuchsin tidak dilepas. Sedangkan pada bakteri tidak
tahan asam akan luntur dan mengambil warna biru dari Methylene Blue.
KOMPOSISI
Item MF-ZN0 1 MF—ZN02
Kit reagen Ziehl Neelsen berisi : Botol Botol
- Larutan Carbol Fuchsin 1% 1 x1 00 ITIL 1x100 mL
Larutan Asam Alkohol 3% 1 x 100 mL 3x100 mL
Larutan Methylene Blue 0,1% I x100 mL lx100 mL
PENYIMPANAN
Kit reagen Ziehl Neelsen harus disiinpan pada suhu 15-250 tidak
lembap, posisi botol tegak, tidak terbalik dan tidak terkena sinar matahari
langsung. Bila penyimpanan baik, kit bisa dipakai sampai tanggal
kedaluwarsa yang tercantum pada label kit. Penyimpanan yang tidak
baik akan memperpendek uinur reagen.
Lilaat tanggal peinbuatan reagen yang tercantum pada label botol dan
label kit. Reagen harus dibuang bila terkontaminasi atau hasil kontrol
sediaan positif tidak memenuhi kriteria.
terbakar.
Carbol Fuchsin : Bersifat toksik dan berbahaya, bila terkena mata
menyebabkan rasa terbakar.
Asam Alkohol : Berbahaya bila terhirup dan tertelan. Jauhkan
dari sumber apr.
Methylene Blue : Berbahaya bila terhirup dan tertelan, iritasi
terhadap mata, pernafasan dan kulit.
Tutup rapat-rapat botol reagen Ziehl Neelsen setelah digunakan.
- Gunakan jas laboratorium dan sarung tangan selama bekerja.
Kemasan harus tertutup rapat.
PROSEDUR PEWARNAAN
- Letakan sediaan dengan bagian apusan menghadap ke atas pada rak
pewarnaan, beri jarak kurang lebih satu jari antara sam sediaan dengan
sediaan yang lain.
- Tuangkan Larutan Carbol Fuchsin 1% melalui kertas saring hingga
inenggenangi seluruh permukaan sediaan.
- Panasi dari bawah dengan menggunakan sulut apr setiap sediaan
sampai keluar uap (jangan sampai mendidih).
- Diamkan selama 5 menit.
- Bilas sediaan dengan hati-hati menggunakan air mengalir.
- Genangi dengan Larutan Asam Alkohol 3%.
- Bilas sediaan dengan hati-hati menggunakan air mengalir.
- Ulangi pemberian Larutan Asam Alkohol 3%fi sampai tidak
tampak warna merah fuchsin.
- Genangi sediaan dengan Larutan Methylene Blue 0,1% selama 10-20
detik.
- Bilas sediaan dengan hati-hati menggunakan air mengalir.
- Keringkan sediaan pada rak pengering.
- Baca sediaan menggunakan mikroskop binokuler peinbesaran l OOOX.
INTERPRETASI HASIL
Positif: BTA akan terlihat berwarna merah terang dengan latar
belakang biru tanpa ada kotoran dari pewarnaan.
Hasil Pengujian Interpretasi
0 BTA/100 LP Negatif
1-9 BTA 100 LP Scanu’ (Tulis jumlah BTA)
10-99 BTA/100 LP I
1—10 BTA/1 LP 2^
>10 BTA/I LP 3+
Skala I UATLD/WHO. LP = Lapang Pandang
UJI KUALITAS
Lakukan uji kualitas reagen Ziehl Neelsen dengan menggunakan sediaan
kontrol positif dan negatif setiap menggunakan kit baru dan setiap 2
minggu sekali selama kit masih ada.
REFERENSI
1. Keputusan rnenteri kesehatan republik Indonesia No.
831/menkes/SK/IX/2009 tentang Standar Reagen Ziehl Neelsen
2. Lay, B. W. (1994). Analisis Mikroba di Laboratorium. Jakarta: PT.
Raga Grafindo Persada. [25 Oktober 2012]
3. Lumb R, et al. The Handbook Global Edition: Laboratory Diagnosis of
Tubercu losis by Sputum Microscopy. Global Laboratory Initiative. 2013. SA
Pathology: Australia.
4. Standar Proscdur Operasional Pemeriksaan Mikroskopis TB,
Kementerian Kesehatan RI. 2012
5. Pemeriksaan Mikroskopis Tuberkulosis, Panduan bagi Petugas
Laboratorium, Departeinen Kesehatan RI, 2006
6. Kementerian Kesehatan RI, Direktorat Jenderal Bina Upaya Kesehatan, Surat
edaran No. HK.03.03/1/4002/2014 tentang Perubahan Konsentrasi Reagen
Ziehl Neelsen untuk Pemeriksaan Mikroskopis TB
DAFTAR SIMBOL
No. Katalog
" Suhu Pen1'impanan
Tanggal Kedaluwarsa (Exp./ E pin Dat‹•)
Lihat petunju k penggunaan M-004-19
PT INDEC DIAGNOSTICS
Kompleks Perkantoran Taman Pulo Gebang A3 No.17-20,
JI. Raya Bekasi Km. 24, Jakarta 13910, Indonesia
Telp. +62-21-4608822, Fax +62-21-4609977
e-mail: support@in dec-diagnostics.co.id
website: www.indec-diagnostics.co.id