FERMENTOR/BIOREAKTOR

B Y: R A H M AY U N I , S P , M . S C
 PENGERTIAN BIOREAKTOR

• Sebuah fermentor prinsipnya adalah alat dimana

substrat dengan nilai (harga) yang rendah
digunakan oleh sel hidup atau enzim untuk
menghasilkan produk dengan nilai tinggi

• Merupakan sistem yang didisain untuk

memberikan lingkungan yang baik untuk
pertumbuhan dan aktivitas metabolisme dari
mikroorganisme yang optimal
 PENGERTIAN BIOREAKTOR

 Wadah / tempat berlangsungnya bioproses

 Tempat terjadinya reaksi enzimatis oleh katalis (m.o.
atau enzim m.o.)
 Tempat pertumbuhan m.o. dalam mengubah substrat
menjadi produk yang dikehendaki

= Suatu unit alat yg digunakan untukmelangsungkan

proses biokimia suatu bahan baku menjadi produk yg
diinginkan, prosesnya dikatalisis oleh enzim mikrobial
atau mikrobial murni

 Memenuhi SYARAT-SYARAT BIOREAKTOR

 SYARAT PROSES BIOREAKTOR

1. Terbuat dari bahan yang sesuai (gelas atau

stainless steel, permukaannya halus, tidak
menimbulkan efek toksik dan tahan karat.
2. Menjamin pertumbuhanm.o dan produk
3. Bebas Kontaminan
4. Volume kultur relatif konstan (tdk
bocor/menguap)
5. Kondisi lingkungan fisik yang sesuai bagi katalis
berinteraksi dengan substrat (suhu, pH, O2terlarut
dll)
6. Desain proses dapat dimonitor & dikontrol
 SYARAT FISIK BIOREAKTOR

1. Tidak boleh ada hubungan antara bagian sistem

yang steril dengan non-steril.
2. Hindari kelep-kelep / penghubung bentuk
gelangan, karena bentuk demikian dapat
mengendur akibat dari gerakan/fibrasi alat dan
kenaikan suhu, dan memungkinkan
kontaminasi.
3. Bila mungkin seluruh konstruksi alat dilas.
4. Hindari ruang-ruang perangkap serta bentuk
leher, karena ruangan seperti itu sulit untuk
dibersihkan.
 SYARAT FISIK BIOREAKTOR

5. Semua bagian sistem harus dapat disterilisasi

secara tersendiri.
6. Setiap hubungan/kelep ke bejana harus dapat
disterilkan dengan uap.
7. Gunakan katup-katup yang mudah dibersihkan
maupun disterilkan
8. Tekanan dalam fermentor harus tetap positif
sehingga kalau ada kebocoran akan mengarah
ke luar.
MODEREN BIOREACTOR (AGITATED
BIOREACTOR
 KOMPONEN DASAR

• Sistem agitator
• Sistem pengaliran oksigen
• Sistem kontrol foam
• Sistem kontrol suhu
• Sistem kontrol pH
• Tempat pengambilan sampel
• Sistem pembersihan dan sterilisasi.
• Pipa untuk mengosongkan reaktor
STRUKTUR BIOREAKTOR

KETERANGAN :
1 = pipa inokulasi
2 = seal stirrer sahft
3 = tinggi cairan kultur (=L)
4 = baffle (sekat)
5 = pipa sambung
6 = impeller
7 = pipa udara steril
8 = sparger udara
9 = pipa pengeluaran
H = tinggi fermentor
D = diameter fermentor
 ATURAN OPERASIONAL AGAR
KONDISI STERIL :
• Sterilisasi fermentor, dengan uap bertekanan. Medium
fermentasi dapat disterilkan bersama di dalam fermentor atau
secara terpisah.
• Sterilisasi penyediaan udara, dilakukan dengan menggunakan
penyaring berserat atau penyaring absolut.
• Aerasi dan agitasi, berkaitan dengan jenis bahan, struktur
geometrik dan posisi pemasangannya serta penggunaan “seal”.
• Penambahan inokulum, nutrien dan bahan-bahan lain, harus
dalam keadaan tekanan positif dan lubang pemasukan
dilengkapi sistem pemberian uap.
• Pengambilan contoh (sampling).
• Pengontrolan buih.
• Monitoring dan pengontrolan berbagai parameter
 PARAMETER YANG DIKONTROL

• Suhu
• oksigen terlarut
• bahan baku
• nutrisi
 KOMPONEN BIOREAKTOR

• KOMPONEN FISIK
1. Tangki  substrat
2. Sparger  pompa udara : dispersi oksigen
3. Impeller  agitasi campuran substrat + sel
4. Baffle  saringan halus mencegah efek pusaran akibat
agitasi
5. Sensor  kontrol suhu, tekanan, agitasi, foam, kecepatan
aliran pH, kadar O2 danperubahan komposisi medium

• KOMPONEN PROSES
1. Biokatalis sel, enzim
2. Kondisi lingkungan dalam bioreaktor
 KOMPONEN BIOREAKTOR

TANGKI
• Fermentor kapasitas 1-
30 L dari gelas
/stainless steel
permukaan halus, tidak
menimbulkan toksik &
tahan karat.
• Fermentor kapasitas
>30 L biasanya dari
stainless steel atau
mild-steel.
 KOMPONEN BIOREAKTOR

IMPELLER

1. Memperkecil ukuran gelembung udara sehingga

area interface untuk transfer oksigen menjadi
besar dan menurunkan jarak difusi

2. Mempertahankan keseragaman kultur di seluruh

bagian fermentor.
KOMPONEN-KOMPONEN AGITATOR
(IMPELLER)
 SISTEM AGITATOR/IMPELLER

• Jumlah impeler tergantung pada tinggi cairan di

dalam reaktor
• Setiap impeler memiliki 2-6 pisau
• Motor agitator fase tunggal (240 V) digunakan
untuk reaktor kecil
• Pada reaktor besar digunakan motor 3 fase (430
v)
• Pengendalian kecepatan dilakukan dengan
menggunakan alat pengurang kecepatan
 BIOREAKTOR TANKI BERSTIRER ; SISTEM AGITASI ‐ TOP
ENTRY DAN BOTTOM ENTRY IMPELLERS

• Impeller shaft dapat dimasukkan dari dasar

(Bottom entry) atau dari atas tanki (Top entry
Impeller = Overhung Shaft).
• Overhung Shaft lebih mahal dan lebih sulit untuk
dipasang
 BOTTOM ENTRY IMPELLER

• Memerlukan perawatan yang lebih mahal karena

kerusakan oleh partikel-partikel di dalam media
dan komponen media yang mengkristal ketika
reaktor tidak digunakan
 KOMPONEN BIOREAKTOR

• BAFFLE

• meningkatkan efisiensi aerasi dan mencegah

aliran atau sirkulasi cairan kultur yang terlalu
cepat.
 KOMPONEN BIOREAKTOR

SPARGER
• memasukkan udara ke dalam cairan kultur
dalam fermentor
TIPE :
• Sparger berpori : untuk fermentor skala lab.
laboratorium, tanpa agitator
• Sparger orifice : pipa berlobang-lobang, mudah
tertutup mikroba
• Sparger nozel : pipa terbuka atau tertutup di
bawah impeller
 SPARGER

• Fungsi : memcah udara yang masuk menjadi

gelembung berukuran kecil
• Dapat terbuat dari gelas atau logam, tetapi yang
paling banyak digunakan adalah filter berbentuk
ring
 SPARGER

• Selama pengosongan fermenter, maka katup

udara harus ditutup  mengurangi kontaminasi
dari udara
 OXYGEN DELIVERY SYSTEM

• Terdiri dari :
Kompresor
Sistem sterilisasi udara yang masuk
Sparger udara untuk sistem sterilisasi udara yang
keluar
 OXYGEN DELIVERY SYSTEM

• Kompressor
 OXYGEN DELIVERY SYSTEM ‐
KOMPRESSOR
• Mendorong udara ke dalam reaktor perlu tekanan
untuk mendorong udara melewati filter, lubang
sparger dan masuk ke dalam media fermentasi

• Untuk bioreaktor skala besar digunakan Kompresor

udara yang dapat menghasilkan udara 250 kPa.

• Udara yang masuk harus kering dan bebas minyak

sehinggatidak menutupi filter dan mengkontaminasi
media
 OXYGEN DELIVERY SYSTEM‐ SISTEM
STERILISASI UDARA

• Mencegah kontaminasi yang berasal dari udara

• Juga mencegah mikroba yang ada di dalam

reaktor mengkontaminasi udara

• Metode yang umum digunakan adalah filtrasi

PENGARUH KECEPATAN IMPELLER

• Jika kecepatan impeller terlalu rendah maka gelembung

udara tidak akan dapat dipecahkan-terjadi buoyancy
STERILISASI UDARA
 SKALA BIOREAKTOR

1. SKALA LABORATORIUM
• Dalam botol erlenmeyer ( 50-2000 ml dengan pengisian
maksimum20 %).
• Kelebihan : dpt mengukur komposisi larutan nutrisi, suhu dan
suplementasi substrat
• Kelemahan : tidak dapat mengukur pH dan konsentrasi oksigen

2. SKALA PILOT PROJECT

3. SKALA INDUSTRI
• Setiap fermentor harus mempunyai “head space” sekitar ¼
atau 1/5 dari volume total, yang berguna untuk menyediakan
ruangan pada waktu aerasi dan pembentukan buih.
HEADSPACE VOLUME
 JENIS BIOREAKTOR

1. Berdasarkan Tingkat Aseptis

2. Berdasarkan Sistem Aerasi

3. Berdsarkan Pemberian Substrat

 TIPE BIOREAKTOR – BERDASARKAN
TINGKAT ASEPTIS

1. TIPE SEPTIS (Non Aseptis)

• Mikroorganisme kultur campuran
• produk : pengembang roti, brewing/bir

2. TIPE ASEPTIS
• tidak ada Mikroorganisme kontaminan
• fine produk : antibiotik, SCP dll
 SISTEM AERASI BIOREAKTOR

• Stirred tank (menggunakan sistem agitasi)

• Bubble column (udara dialirkan melalui sparger)

• Loop bubble column bioreactor (udara dan media

disirkulasi bersamaan melalui suatu kolom)
PEMBERIAN SUBSTRAT BIOREAKTOR

BATCH FERMENTOR Proses fermentasi :

• Sistem tertutup
• Fermentor diisi oleh
nutrisi/medium, suhu & pH
di set sterilisasi
• Inokulum dimasukan
proses fermentasi hingga
waktu yang ditentukan
• Proses sampai fase akhir
log/stasioner
• Proses selanjutnya diulang
• Tidak ada nutrisi yang
ditambahkan
PEMBERIAN SUBSTRAT BIOREAKTOR

CONTINUOUS FERMENTOR

Pemberian nutrisi secara kontinyu/berkala dalam

jangka waktu tertentu

Volume nutrisi di dalam reaktor harus tepat antara

nutrisi yang dikeluarkan dan dimasukan harus ekivalen

Proses fermentasi bersifat sensitif terhadap

kontaminasi, biomasa berkurang karena ikut terbuang,
perubahan fase biotik
PEMBERIAN SUBSTRAT BIOREAKTOR

FED BATCH FERMENTOR

 Intermediary bioreactor

Nutrisi ditambahkan pada saat fase yang

dibutuhkan

Selama proses fermentasi kecepatan

pertumbuhan mo dan konsentrasi biomasa dapat
dikontrol dengan penambahan nutrisi saat fase
tertentu
 RETENSI MIKROORGANISME

BATCH FERMENTOR

• Mikroorganisme tidak hilang selama proses

fermentasi
• MO. Memiliki waktu untuk beradaptasi dan
kecepatan pembelahanmaksimum
• Biotransformasi MO. Berjalan dgn baik dengan
parameter lingkungan yang terkontrol
• MO dapat lebih cepat/lambat masuk ke fase
stasioner dan terakumulasi toksin saat nutrisi
terbatas
 RETENSI MIKROORGANISME

CONTINUOUS FERMENTOR

• MO, nutrisi dan cairan dapat ikut terbuang

• MO membutuhkan waktu untuk beradaptasi lagi

setiap penambahan nutrisi

• Rentan terhadap MO kontaminan

 RETENSI MIKROORGANISME

FED BATCH FERMENTOR

• Pemberian nutrisi secara berselang

• Mikroorganisme lebih sehat karena nutrisi dapat

terpenuhi
PRINSIP KERJA BIOREAKTOR
 HAL-HAL YANG PERLU DIPERHATIKAN DALAM
PENENTUAN MODEL BIOREAKTOR

• Pemilihan sistem fermentasi (batch, continuous,

fed batch).
• Tipe bioreaktor dan cara operasinya.
• Sifat-sifat mikroba yang digunakan
• Melakukan penelitian pendahuluan untuk
menentukan kondisi optimum suatu galur
mikroba pada skala laboratorium, lalu di-scale up
hingga layak untuk diproduksi skala industri.