BIOFARMASETIKA

OPTIMASI METODE ANALISA

OBAT
Kelompok :
1. Lina fatin fauziah(1041511099)
2. Liya Lilistiana (1041511101) 3.
Mita budi (1041511114)
4. Avianti burhan
 TUJUAN
• Memahami langkah-langkah analisa obat di dalam
darah
• Mampu melakukan validasi metode analisis obat di
dalam darah
 DASAR TEORI
Validasi metoda analisis adalah suatu tindakan penilaian
terhadap parameter tertentu, berdasarkan percobaan
laboratorium, untuk membuktikan bahwa parameter tersebut
memenuhi persyaratan untuk penggunaannya.
Beberapa parameter analisis yang harus dipertimbangkan
dalam validasi metode analisis :
1. Kecermatan
2. Keseksamaan
3. Selektivitas
 ALAT DAN BAHAN
Alat Bahan
• Labu takar • Paracetamol
• Mikropipet • Asam Trikloroasetat (TCA) 20%
• Tabung reaksi • Natrium Nitrit 10 %
• Pipet ukur • Natrium Hidroksida 10%
• Pipet volum • Asam Sulfamat 15%
• Tabung Sentrifuge • HCl 6N
• Rak tabung reaksi • Heparin
• Ependrop • Aquadest
• Vortex-mixer • Hewan uji (tikus)
• Sentrifuge
• Gunting bedah
• Holder
• Kuvet
• Spektrofotometer
 SKEMA KERJA
Pembuatan Larutan StokNa Salisilat
Data Pengamatan
Pengukuran Kurva Baku Paracetamol max435 nm

Konsentrasi (µg/ml) Absorbansi

99,98 0,013

300 0,112

499,98 0,206

599,97 0,226

699,99 0,343
 Kurva Baku Parcetamol vs Absorbansi
0.4

0.35

0.3
f(x) = 0 x − 0.04
0.25 R² = 0.96
Absorbansi

0.2 Absorbansi
Linear (Absorbansi)
0.15

0.1

0.05

0
0 100 200 300 400 500 600 700 800

Konsentrasi (µg/ml)

ABSORBAN

a = -0,0430 b = 5,0690 x 10-4 r = 0,9815

y = bx + a
y = 5,0690 x 10-4 α +(– 0,0430)
Perhitungan data absorban
Data Penetapan Kadar, Kesalahan Sistemik, dan
Kesalahan Acak

Konsentrasi Absorbansi
99,98 0,083
99,98 0,056
99,98 0,075
300 0,0108
300 0,079
300 0,049
499,98 0,149
499,98 0,120
499,98 0,096
 µ𝑔
a) 99,98 ൗ𝑚𝑙
0,083 = 5,0690x 10−4 x – 0,0430
µ𝑔
X = 248,57 ൗ 𝑚𝑙
0,056 = 5,0690x 10−4 x – 0,0430
µ𝑔
X = 195,30 ൗ 𝑚𝑙
0,075 = 5,0690x 10−4 x – 0,0430
µ𝑔
X = 232,79 ൗ𝑚𝑙

µ𝑔
a) 300 ൗ𝑚𝑙
0,018 = 5,0690x 10−4 x – 0,0430
µ𝑔
X = 297,89 ൗ𝑚𝑙
0,079 = 5,0690x 10−4 x – 0,0430
µ𝑔
X = 240,68 ൗ𝑚𝑙
0,049 = 5,0690x 10−4 x – 0,0430
µ𝑔
X = 181,49 ൗ𝑚𝑙
 µ𝑔
a) 499 ൗ𝑚𝑙
0,149 = 5,0690x 10−4 x – 0,0430
µ𝑔
X = 378,77 ൗ 𝑚𝑙
0,120 = 5,0690x 10−4 x – 0,0430
µ𝑔
X = 321, 56 ൗ 𝑚𝑙
0,096 = 5,0690x 10−4 x – 0,0430
µ𝑔
X = 274,21 ൗ 𝑚𝑙
PERHITUNGAN % RECOVERY %P=

Rata-rata
Konsentrasi Absorbansi Recovery
99,98 0,083 Rata2 = 248,57
225,60 %
%P= x100% = 248,62 %
0,056 Rata2= 195,30
%P=x100%= 195,34 %
0,075 Rata2= 232, 79
%P=x100%= 232,84%
300 0,108 Rata2 = 297,89 80,01 %
%P=x100%= 99,30%
0,079 Rata2 = 240,68
%P=x100%= 80,23%
0,049 Rata2 = 181,49
%P=x100%= 60,50 %
0,149 Rata2 = 378,77 64,97 %
%P=x100%= 75,76 %
0,120 Rata2= 321,56
%P=x100%= 64,31 %
0,096 Rata2= 274,21
%P=x100%= 54,84 %
PERHITUNGAN KESALAHAN SISTEMATIS = 100% -P%

Konsentrasi Absorbansi Kesalahan Sistemik Rata-rata

99,98 0,083 100% - P% 125,60 %

100% - 248,62% = -148,62 %
0,056 100% - P%
100% - 195,34% = -95,34 %
0,075 100% - P%
100% - 232,84% = -132,84 %
300 0,138 100% - P% 19,99 %
100% - 99,30% = 0,7 %
0,079 100% - P%
100% - 80,23% = 19,77 %
0,049 100% - P%
100% - 60,50% = 39,50 %
499,98 0,149 100% - P% 35,03 %
100% - 75,76% = 24,24 %
0,120 100% - P%
100% - 64,31% = 35,69 %
0,096 100% - P%
100% - 54,04% = 45,16 %
 Kesalahan Acak
Konsentrasi Absorbansi Kesalahan Acak
99,98 0,083 x100%
0,056 x100%=12,13 %
0,075
300 0,108 x100%
0,079 x100%=24,25 %
0,049
499,98 0,149 x100%
0,120 x100%=16,12 %
0,096
 KESIMPULAN
• Langkah-langkah dalam optimasi analisis obat meliputi penetapan OT, penetapan
panjang gelombang maksimal, pembuatan kurva baku, dan perhitungan nilai recovery,
kesalahan acak dan kesalahan sistemik.

•Panjang gelombang maksimal untuk dan Paracetamol 435 nm.

•Dapat disimpulkan bahwa nilai recovery Paracetamol pada konsentrasi 225,60(µg/ml);

80,01 (µg/ml); 64,97 (µg/ml) ada yang tidak memenuhi persyaratan, karena konsentrasi
64,97 (µg/ml)<75-90 (µg/ml)

•Nilai KA Paracetamol pada semua konsentrasi tidak memasuki persyaratan karena >10%.

•Nilai KS pada Paracetamoltidak memasuki persyaratan karena >10%.

 K a s ih
r i m a
Te