1.

Pembuatan larutan PBS pH 7,2 (stock

PBS).
Bahan
- NaCl : 8,0 gram
- KCl : 0,2 gram
- Na2 HPO4 : 1,15 gram
- KH2 PO4 : 0,2 gram
- Aquades : 1000 gram
Cara kerja
Setelah semua bahan ditimbang kemudian
tambah aquades dan larutan dengan
menggunakan magnetic stirer, selanjutnya
seterilkan dengan autoclave suhu 120C selama
20 menit dan ukur pH dengan pH meter, jika
terlalu asam tambahkan NaOH dan jika terlalu
basa tambahkan HCl. Setelah dingin simpan
dan tutup dengan alumunium foil pada suhu
4C.
2. Larutan Alsevier
Bahan
- Dextrose : 20,5 gram
- Sodium Sitrat : 8,0 gram
- Citric Acid : 0,55 gram
- NaCl : 4,2 gram
- Aquades :1000 ml
Cara kerja
- Setelah semua bahan ditimbang
- Tambahkan Aquades 1000 ml
- Larutkan dengan magnetic stirrer
- Sterilkan dengan autoclave pada suhu
120C selama 20 menit.
3. Pengambilan darah ayam dan pembuatan
RBC 1%
Pengambilan darah ayam
Cara kerja
- Ambil ayam hidup dewasa, bentangkan
sayap untuk mencari vena sayap.
- Bulu sekitar vena dicabut dan dibersihkan
dengan alkohol.
- Setelah jarum, handle dan venojack berisi
heparin disiapkan maka melalui urat daging
tusuk vena sayap untuk mendapat darah.
- Kemudian setelah darah ayam didapat
volum venojack selanjutnya dengan hati-hati
digoyang mengikuti angka 8 agar homogen.
Pembuatan RBC 1%
Cara kerja
- Darah ayam yang telah diisi antikoagulan
ditambah PBS ( 1-1/2 ml darah).
- Sentrifuse dengan kecepatan 1000-1500
rpm selama 10 menit.
- Selanjutnya plasma darah (bagian warna
bening) dibuang dengan spuit.
- Pencucian dilakukan 3 kali.
- Endapan RBC dapat ditambah PBS ml
dari yang didapat kemudian endapan dibuat
suspensi 1%.
- Dengan tabung mikrohematokrit yang berisi
antikoagulan suspensi RBC diambil duplo
atau sepasang.
- Ujunya ditutup dengan plastisin atau dibakar
kemudian di sentrifuse.
- Diukur PCV dengan mikrohematokrit reader.
- Untuk dapat persentase (%) PCV dengan
memakai rumus : C1.V1=C2.V2
- Misal : PCV duplo (sepasang) didapat 41%
maka untuk memperoleh RBC 1% dilakukan
pengambilan RBC 1 ml ditambah 40 ml PBS
- Kemudian dikocok perlahan sampai
homogen.
- Selanjutnya RBC dapat diletakkan dalam
botol elemeyer dan di tutup dengan
aluminium foil.
- Untuk pemakaian lama selajutnya ditambah
Streptomycin 1 ml dan disimpan di rak
dengan suhu 4C.