PENUNTUN PRAKTIKUM

KIMIA ANALITIK INSTRUMEN (KI-431)

Semester Ganjil Tahun Akademik 2012/2013

LKIUPI
Oleh :
Wiji, MSi
Dr. Iqbal Musthapa,S.Pd., M.Si
Dr. Hernani MSi
Dra. Soja Siti Fatimah, MSi
Dra. Zackiyah MSi

LABORATORIUM KIMIA INSTRUMEN

JURUSAN PENDIDIKAN KIMIA, FPMIPA, UPI

Page 1 of 21

KATA PENGANTAR
Dengan mengucapkan puji syukur ke hadirat Alloh SWT, buku penuntun praktikum
Kimia Analitik Instrumen ini dapat diselesaikan
Buku ini berisi tentang instruksi kerja, kewajiban mahasiswa, dan berbagai
ketentuan-ketentuan selama pelaksanaan praktikum. Instruksi kerja meliputi lima
instrumen yaitu Spektrofotometer Uv/Vis, Spektrofotometer IR, AAS, HPLC dan
GC.
Penyusun menyadari bahwa buku penuntun ini masih jauh dari sempurna, oleh
karena itu akan senantiasa diperbaiki dari tahun ke tahun berdasarkan masukan
ketika buku penuntun ini diaplikasikan. Semoga bermanfaat

Page 2 of 21

DAFTAR ISI
Kata pengantar
Alur layanan praktikum
Alur pelaksanaan praktikum
Kewajiban mahasiswa praktikan
Ketentuan pembuatan jurnal
Ketentuan pelaksanaan pretes dan tes akhir praktikum
Ketentuan pembuatan laporan praktikum
Standar Penilaian Praktikum
Instruksi kerja Spektrofotometer UV/Vis
Instruksi kerja Spektrofotometer IR
Instruksi kerja HPLC
Instruksi kerja GC
Instruksi kerja AAS

Page 3 of 21

2
4
6
8
8
9
9
11
13
15
17
21
24

ALUR LAYANAN PRAKTIKUM

Pelaksana

Proses

Dokumentasi

Mulai
Menyerahkan daftar MP dan
Fasilitator kepada KLPr

CM-LKI-PR.01-01
CM-LKI-PR.01-02

KLPr

Membagi kelompok

CM-LKI-PR.01-03

KLPr

Menetapkan jadwal praktikum

PDR-LKI-PR-02

Melakukan ujicoba materi

praktikum

PDR-LKI-PR-03

Menyusun penuntun praktikum

PDR-LKI-PR-03

KL

DP/PJI & OI

KLPr & DP

KLPr

Memberikan pengarahan pra

praktikum kepada MP

Page 4 of 21

IK-LKI-PR.01-01

Pelaksana

Proses

Dokumentasi

MP
MP

Membuat jurnal

SM-LKI-PR.01-04
CM-LKI-PR.01-04

Mengikuti pretes

SM-LKI-PR.01-04
SM-LKI-PR.01-01
CM-LKI-PR.01-05
T

DP

Lulus?
Y

MP

Melaksanakan praktikum

MP

Mengikuti ujian akhir praktikum

KLPr

KLPr, DP

KLPr, DP

Menetapkan nilai dan kelulusan

mahasiwa praktikan

PDR-LKI-PR-04
SM-LKI-PR.01-04
SM-LKI-PR.01-04
SM-LKI-PR.01-02
CM-LKI-PR.01-06
CM-LKI-PR.01-07
SM-LKI-PR.01-03
SM-LKI-PR.01-04
CM-LKI-PR.01-08
PDR-LKI-PR-05

Mengevaluasi proses
pelaksanaan layanan praktikum

PDR-LKI-PR-05

Mengevaluasi hasil layanan

praktikum

PDM-LKI-3.1
PDM-LKI-3.3
PDR-LKI-PR-05

Selesai

Page 5 of 21

ALUR PELAKSANAAN PRAKTIKUM

Pelaksana

Proses

Dokumentasi

Mulai

DP/PJI, OI, Lb, MP

MP, Lb

DP

CM-LKI-PR.04-05

Mengisi presensi kegiatan

praktikum
Meminjam peralatan penunjang
yang diperlukan

CM-LKI-PR.04-01

Memberikan pengarahan awal

praktikum

IK-LKI-PR.04-01
IK-LKI-ALL.HPLC-01
IK-LKI- ALL.UV-01
IK-LKI- ALL.GC-01
IK-LKI- ALL.FTIR-01
IK-LKI- ALL.AAS-01

OI

Menunjukkan cara
mengoperasikan instrumen

MP

Melakukan preparasi sebelum

pengukuran

CM-LKI-PR.01-04

DP

Melakukan pemantauan dan

penilaian terhadap kinerja MP

SM-LKI-PR.01-03
CM-LKI-PR.04-02

DP

Sesuai?

Y
MP & OI

Melakukan analisis/pengukuran

Page 6 of 21

IK-LKI-ALL.HPLC-01
IK-LKI- ALL.UV-01
IK-LKI- ALL.GC-01
IK-LKI- ALL.FTIR-01
IK-LKI- ALL.AAS-01

Pelaksana

Proses

Dokumentasi

MP

MP, DP

MP, Lb

Mencatat hasil pengukuran/

analisis

Mendiskusikan interpretasi
hasil analisis instrumen

Mengembalikan peralatan
penunjang yang telah
digunakan

CM-LKI-PR.01-04

CM-LKI-PR.01-04

CM-LKI-PR.04-01

MP

Membuat analisis data dan

kesimpulan

CM-LKI-PR.01-04

MP

Membuat dan menyerahkan

laporan akhir praktikum

CM-LKI-PR.04-03

DP

Menilai laporan akhir praktikum

SM-LKI-PR.01-03
CM-LKI-PR.04-04

Selesai

Page 7 of 21

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

1.
2.

3.

1.
2.
3.

4.
5.
6.

1.
2.
3.
4.

KEWAJIBAN MAHASISWA PRAKTIKAN

Menghadiri dan melaksanakan seluruh kegiatan praktikum (100%)
Menggunakan jas lab selama kegiatan praktikum di laboratorium
Membawa kertas milimeter block
Membawa kit praktikum yang terdiri dari lap, 5 pipet tetes, korek api, tissu gulung,
sabun cuci, sikat tabung, kertas label, gunting, dan vial
Membuat jurnal sebelum melaksanakan praktikum
Mengikuti dan lulus pretes sebelum melaksanakan praktikum
Membuat laporan setelah melaksanakan praktikum
Mengikuti tes akhir praktikum
KETENTUAN PEMBUATAN JURNAL
Jurnal ditulis dalam buku berukuran A4
Jurnal sekurang-kurangnya berisi :
a. Tanggal praktikum
b. Judul praktikum
c. Tujuan praktikum
d. Prinsip dasar (termasuk skema dan fungsi setiap komponen instrument)
e. Alat dan bahan praktikum
f. Bagan alir prosedur kerja
g. Cara pembuatan larutan (termasuk perhitungan konsentrasinya)
h. Data pengamatan
i. Analisis
j. Kesimpulan
Jurnal harus dibawa ketika pretes dan praktikum

KETENTUAN PELAKSANAAN PRETES DAN TES AKHIR PRAKTIKUM

Pretes dilakukan secara lisan oleh dosen praktikum sesuai judul praktikum
Pretes dilaksanakan sebelum praktikum sesuai jadwal/perjanjian secara berkelompok
dan hanya dilayani jika anggota kelompok lengkap
Komponen-komponen pertanyaan pretes meliputi : prinsip kerja instrumen, komponenkomponen instrumen dan fungsinya, serta ruang lingkup praktikum yang akan
dilakukan
Tes akhir praktikum dilakukan dalam bentuk tes tertulis atau tes ketrampilan
Tes akhir dilaksanakan setelah mahasiswa praktikan menyelesaikan praktikum dan telah
mengumpulkan laporan praktikum
Komponen-komponen pertanyaan tes akhir praktikum difokuskan kepada cara
pengoperasoian alat, penyiapan larutan standar dan sampel serta interpretasi hasil
pengukuran instrumen
KETENTUAN PEMBUATAN LAPORAN
Laporan dibuat oleh kelompok bukan perorangan
Laporan dikumpulkan satu pekan setelah praktikum berakhir
Laporan diketik menggunakan kertas A4 dengan kover
Laporan berisi :
a. Tanggal praktikum
Page 8 of 21

5.
6.

b. Judul praktikum
c. Tujuan praktikum
d. Tinjauan pustaka
e. Alat dan bahan praktikum
f. Prosedur kerja praktikum
g. Hasil dan analisis data
h. Kesimpulan
i. Daftar pustaka
j. Lampiran (cara pembuatan larutan, perhitungan, data pengamatan)
Laporan disusun dalam bentuk bundel seluruh kelompok, per judul praktikum dan
diurutkan berdasarkan tanggal praktikum
Apabila dalam satu judul praktikum, ditemukan 2 atau lebih laporan yang diduga copy
paste maka laporan-laporan tersebut tidak syah dan nilainya 0 (nol)

STANDAR PENILAIAN PRAKTIKUM

A. PRETES
Nilai Pretes maksimum 100 dengan kriteria sebagai berikut :
No

Indikator

Menjelaskan prinsip kerja instrumen

2
3

Mengetahui komponen-komponen instrumen dan fungsinya

Menjelaskan ruang lingkup praktikum yang akan dilakukan

Bobot
Penilaian
30 %
30 %
40 %

B. KINERJA
Nilai kinerja maksimum 100 dengan kriteria sebagai berikut :
No
1
2
3
4
5
6

Indikator
Menyiapkan alat dan bahan dengan benar
Melakukan preparasi larutan standar dengan benar
Mendapatkan hasil pengukuran yang baik
Melakukan pekerjaan secara berkelompok
Menginterpretasi hasil analisis dengan benar
Memperhatikan penanganan limbah dan lingkungan

Bobot
Penilaian
10 %
20 %
25 %
10 %
25 %
10 %

C. LAPORAN
Nilai laporan maksimum 100 dengan kriteria sebagai berikut :
No
1
2

3
4

Indikator
Mencantumkan tanggal dan judul praktikum
Menuliskan tinjauan pustaka yang meliputi prinsip dasar analis suatu
instrumen, gambar skema instrument dan fungsi setiap komponenkomponen dari instrumen
Menuliskan alat praktikum dengan ukuran dan jumlah yang benar
Menuliskan prosedur kerja praktikum secara lengkap, jelas tahapanPage 9 of 21

Bobot
Penilaian
5%
20 %

10 %
10 %

5
6
7

tahapannya dan sesuai dengan pekerjaan praktikum

Menuliskan hasil percobaan, analisis data dan kesimpulan sesuai
tujuan percobaan
Mengutip daftar pustaka yang relevan
Menuliskan lampiran yang terdiri dari cara pembuatan larutan, data
pengamatan, dan perhitungan yang diperlukan

30 %
10 %
15 %

D. UJIAN AKHIR
Nilai ujian akhir maksimum 100 dengan kriteria sebagai berikut :
No
1
2
3

Indikator
Menjelaskan cara preparasi sampel dan standar
Menjelaskan cara pengoperasian instrumen
Menafsirkan hasil pemisahan/pengukuran instrumen

Bobot
Penilaian
35 %
30 %
35 %

E. NILAI AKHIR PRAKTIKUM

1. Kehadiran mahasiswa 100 % menjadi syarat mutlak kelulusan
2. Komponen penilaian terdiri dari :
a. Nilai pretes dengan bobot 10%
b. Nilai kinerja dengan bobot 30%
c. Nilai laporan dengan bobot 20%
d. Nilai tes akhir praktikum (tes tertulis atau tes keterampilan) dengan bobot 40 %
3. Range nilai antara 0 sampai dengan 100
4. Mahasiswa dinyatakan lulus pretes apabila memiliki nilai diatas 50
5. Nilai mutu diberikan berdasarkan rentang nilai sebagai berikut :
a. Antara 0 sampai dengan 44,4 nilai mutu E
b. Antara 44,5 sampai dengan 54,4 nilai mutu D
c. Antara 54,5 sampai dengan 64,4 nilai mutu C
d. Antara 64,5 sampai dengan 74,5 nilai mutu B
e. Antara 74,5 sampai dengan 100 nilai mutu A
6. Mahasiswa dinyatakan lulus praktikum apabila tidak mendapatkan nilai mutu E

Page 10 of 21

INSTRUKSI KERJA SPEKTROFOTOMETER UV/VIS

1. Tujuan
Mahasiswa dapat menentukan kadar Fe(II) dalam sampel dengan menggunakan alat
spektrofotometer UV-Vis dan dapat mengoperasikan alat spektrofotometer UV-Vis.
2. Prinsip Dasar
Penentuan kadar besi berdasarkan pada pembentukan senyawa kompleks berwarna
antara besi (II) dengan orto-fenantrolin yang dapat menyerap sinar tampak secara
maksimal pada panjang gelombang tertentu. Banyak sinar yang diserap akan berkorelasi
dengan kuantitas analit yang terkandung di dalamnya sesuai dengan Hukum LambertBeer.
3. Alat dan Bahan
a. Alat
Spektrofotometer
Labu takar 100 mL dan 25 mL
Gelas kimia
Botol semprot
Spatula
Corong pendek
Pipet seukuran
Pipet tetes
Batang pengaduk
b. Bahan
Garam Fe(NH4OH)2SO4
Larutan Hidroksilamin HCl 5 %
Larutan 1,10 fenantrolin 0,1%
Larutan CH3COONa 5 %
Aquades
4. Langkah kerja
a.

Pembuatan larutan induk Fe(II) 100 ppm

Timbang 0,0700 gr garam Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O
Larutkan dalam labu takar 100 mL.
Tambahkan 5 mL asam sulfat 2 M untuk menghindari hidrolisis.

b.

Pembuatan larutan sandar Fe(II) 10 ppm

Pipet sebanyak 10 mL larutan Fe(II) 100 ppm ke dalam labu ukur 100 mL, encerkan
hingga tanda batas.

c.

Preparasi deret standar dan sampel

Buatlah larutan deret standar Fe (II) 1 ppm; 1,5 ppm, 2 ppm; 2,5 ppm dan 3 ppm;
dari larutan standar 10 ppm ke dalam labu takar 25 mL.
Sebelum diencerkan, tambahkan ke dalam masing-masing labu 1 mL larutan
hidroksilamin-HCl 5 %, 8 mL CH3COONa 5% dan 5 mL 1,10-fenantrolin 0,1%.
Page 11 of 21

 Untuk larutan sampel, pipet sejumlah sampel ke dalam labu takar 25 mL, tambahkan
pereaksi dengan jumlah yang sama dengan larutan deret standar sebelum diencerkan.
Diamkan larutan deret standar maupun sampel selama 10 menit sebelum dilakukan
pengukuran.
d.

Penentuan panjang gelombang maksimum

Dari larutan deret standar, gunakan larutan dengan konsentrasi 2 ppm untuk
menentukan panjang gelombang maksimum.
Pengukuran absorban larutan dilakukan pada rentang panjang gelombang 400-600
nm (jarak rentang 10 nm, setelah mendekati panjang gelombang maksimum perkecil
rentangnya).

e.

Pengukuran deret standar dan sampel

Lakukan pengukuran serapan larutan deret standar dan sampel pada panjang
gelombang maksimum.
Buatlah kurva kalibrasi antara konsentrasi dan serapan deret standar.
Encerkan sampel bila serapan berada diluar rentang deret standar.

f.

Perhitungan hasil analisis

Dari kurva kalibrasi diperoleh persamaan garis :

y = ax + b
dimana y adalah serapan dan x adalah konsentrasi.
Jadi konsentrasi sampel adalah

X=

yb
a

Page 12 of 21

INSTRUKSI KERJA SPEKTROFOTOMETER IR

1. TUJUAN
1. Menentukan keberadaan zat aditif pada plastik kemasan melalui perlakuan
pemanasan.
2. Memahami prinsip dasar spektrometri inframerah dan menggunakannya untuk
identifikasi zat.
3. Mengembangkan kemampuan komunikasi verbal dan non verbal berkaitan dengan
hasil analisis.
2. PRINSIP DASAR
Senyawa kimia tertentu (hasil sintesa atau alami) mempunyai kemampuan menyerap
radiasi elektromagnetik dalam daerah spektrum inframerah (IR). Absorpsi radiasi IR
pada material tertentu berkaitan dengan fenomena bergetarnya molekul atau atom.
Spektrum serapan inframerah suatu senyawa mempunyai pola yang khas, sehingga
berguna untuk identifikasi senyawa (identifikasi keberadaan gugus-gugus fungsi yang
ada)
Posisi pita dalam analisa inframerah dinyatakan dalam satuan frekuensi. Frekuensi
sering dinyatakan sebagai bilangan gelombang, yakni jumlah gelombang atau panjang
gelombang per centimeter (cm 1). Daerah yang sering dianalisa dengan spektroskopi
inframerah adalah dalam kisaran 4000-600 cm-1 (setara dengan 2,5 25 mm) atau lebih
rendah. Hasil analisa dicatat dalam modus pemancar (%T) atau serapan (Abs).
Plastik merupakan polimer sintetik yang terbentuk dari reaksi polimerisasi monomermonomernya, seperti diperlihatkan pada reaksi berikut:
R
R

R = -H (Polietilena)
= -CH3 (Polipropilena)
= -C6H5 (Polistirena)
= -CH2CONH2 (Poliamida)

Keberadaan gugus R akan mempengaruhi jenis, sifat kimia, sifat mekanik, dan
penggunaan polimer. Jenis-jenis polimer karena perbedaan gugus R dapat ditentukan
melalui metode spektrometri inframerah.
Zat aditif bermassa molekul rendah sering ditambahkan ke dalam polimer untuk
memperoleh sifat-sifat berkaitan dengan keterbakaran dan keluwesannya. Zat aditif ini
dapat berpindah ke dalam makanan-minuman jika mengalami kontak yang cukup lama
dengan makanan-minuman atau terkena perlakuan panas. Metode spektrometri
inframerah dapat digunakan untuk menentukan keberadaan zat aditif ini jika diberikan
perlakuan panas.
3. ALAT DAN BAHAN
a. Gunting
b. Interferometer FTIR Shimadzu 8400
c. Pengaduk Magnet dengan Pemanas
d. Labu Erlenmeyer 50 mL
Page 13 of 21

e.
f.

Etanol
Sampel Plastik Kemasan Makanan-Minuman

4. LANGKAH KERJA
a. Sediakan sampel film plastik kemasan dan gunting dengan ukuran (2 x 1) cm.
b. Buatlah dua buah guntingan film. Film pertama akan langsung diukur sedangkan
film kedua ditempatkan dalam labu erlenmeyer berisi 10 mL pelarut etanol.
c. Panaskan dan aduk dengan pengaduk magnet pelarut etanol dan film dalam labu
erlenmeyer selama 2 jam.
d. Dapatkan spektra inframerah film tanpa perlakuan dan film setelah perlakuan, dan
bandingkan spektra keduanya.
e. Dapatkan pula spektra inframerah pelarut diklorometana awal dan setelah perlakuan,
dan bandingkan spektra keduanya.

Page 14 of 21

INSTRUKSI KERJA HPLC

1.

Tujuan
b. Mahasiswa memahami cara kerja instrumen HPLC untuk analisis kuantitatif.
c. Mahasiswa dapat melakukan preparasi dengan tepat dan akurat , serta dapat
mengikuti manual pengoperasian HPLC.
d. Mahasiswa dapat menentukan/menghitung kadar zat aditif dalam sampel minuman.

2. Prinsip Dasar
Teknik HPLC merupakan suatu metode kromatografi cair-cair, yang dapat
digunakan baik untuk keperluan pemisahan maupun analisis kuantitatif. Analisis kuantitatif
dengan teknik HPLC didasarkan pada pengukuran luas area puncak analit dalam
kromatogram, dibandingkan dengan luas area standar. Pada prakteknya,
metode
pembandingan area standar dan sampel kurang menghasilkan data yang akurat bila hanya
melibatkan satu konsentrasi standar. Oleh karena itu, dilakukan dengan menggunakan
teknik kurva kalibrasi.
Terdapat berbagai zat aditif yang digunakan oleh produsen makanan dan minuman
diantaranya : natrium benzoat, vitamin C,dan kafein untuk masing-maing tujuan tertentu.
Ketiga zat aditif tersebut merupakan senyawa yang memiliki sifat kepolaran yang berbeda,
dan memiliki gugus kromofor yang menyebabkan senyawa tersebut dapat menyerap sinar
UV. Berdasarkan karaktersitik senyawa ini memungkinkan dilakukannya analisis dengan
teknik HPLC menggunakan kolom nonpolar seperti C-18 dan fasa gerak polar.
3. Alat dan Bahan
a. Alat
Perangkat HPLC
Spatula
Labu ukur 50 mL dan 10 mL (6 buah)
Neraca analitik terkalibrasi
Corong pendek
Pipet tetes
Gelas kimia 20 mL
Gelas ukur 500 mL
Ultrasonic vibrator
Pipet seukuran (1,2,3,4, dan 5 mL)
kertas saring whattman
membrane PTFE dan selulosa nitrat
b.

Bahan
Natrium benzoat p.a 20 mg
Vitamin C standar 20 mg
Kafein 20 mg
Metanol for HPLC
Sampel minuman yang mengandung vit. C
Kalium dihidhirogenfosfat
Page 15 of 21

 Aquabides
asetonitril
4. Langkah Kerja
a.
Pembuatan fasa gerak (Pelarut)
Hitunglah jumlah KH2PO4 yang diperlukan untuk membuat larutan KH2PO4
0.01 M sebanyak 500mL dalam akuades. Kemudian ajust pH pada nilai 2,65
dengan asam fosfat.
Lakukan penyaringan untuk larutan KH2PO4 menggunakan membran selulosa
nitrat
Lakukan penyaring pula untuk asetonitril dengan PTFE
Hilangkan gelembung pada larutan dengan ultrasonic vibrator selama 15 menit.
Buatlah campuran larutan fasa gerak KH2PO4 dan asetonitril (60:40) untuk
keperluan larutan standar dan larutan sampel, sesuai kebutuhan
b.

Pembuatan larutan induk natrium benzoat, Vit C, dan kafein

Timbanglah zat standar natrium benzoat 2.5 mg, vit C 2 mg dan kafein 5 mg
Campurkan ketiga zat standar dengan melarutkan dalam 50 mL fasa gerak secara
kuantitatif pada labu ukur.
Homogenkan selama 5 menit menggunakan ultra sonic vibrator.

5.3 Pembuatan deret larutan standar natrium benzoat, Vit C, dan kafein
Pipet larutan induk masing-maing 2 mL, 3 mL, 4 mL, dan 5 Ml, 6 mL encerkan
dengan fasa gerak dalam labu ukur 10 mL.
Homogenkan larutan, kemudian, saringlah semua larutan standar tersebut
dengan menggunakan membrane PTFE.
Tempatkan hasil saringan ke dalam vial bertutup yang telah diberi label.
Lakukan degassing selama 5 menit. Larutan standar siap diinjeksikan.
5.4. Pembuatan larutan sampel
Pipet 2 mL larutan sampel larutkan dengan fasa gerak hingga 10 mL secara
kuantitatif pada labu ukur.
Lakukan penyaringan dengan PTFE, tampung dalam botol vial bertutup.
Hilangkan gelembung pada larutan sampel dengan menggunakan ultrasonic
vibrator selama 5 menit.
5.5. Penyiapan Instrumen HPLC
Sementara melakukan preparasi sampel dan standar, hidupkan peralatan HPLC
sesuai dengan langkah berikut :
Kondisikan instrumen HPLC dengan:
Fasa gerak dengan sistem elusi gradien dengan kondisi:
Waktu(menit) % asetonitril
%KH2PO4
0
60
40
1
40
60
2
20
80
Page 16 of 21

3
4
5
Kolom
Panjang gelombang
Laju alir
Volume injeksi

30
40
60

70
60
40
: C-18 (12,5 cm)
: 254 nm
: 0,75 mL/menit
: 20 L

Pastikan kabel penghubung listrik telah tersambung dengan benar.

Tekan tombol ON pada sakelar listrik.
Isi botol fasa gerak dengan volume yang memadai dan kosongkan botol penampung.
Tekan tombol ON pada alat, berturut-turut untuk power, detector dan pompa.
Lakukan pemrograman alat dengan computer.Ikuti langkahnya sesuai isntruksi
dalam komputer .
Pilihlah mode yang akan digunakan sesuai dengan parameter kondisi instrumen
Apabila kromatogram telah menunjukkan base line yang mendatar, maka instrumen
siap digunakan,
Injeksikan berturut-turut larutan standar (mulai dari konsentrasi terendah), dan
terakhir larutan sampel
Cetak hasil pengukuran, catat kondisi percobaannya.
Setelah selesai digunakan, matikan pompa dengan menyoroti tanda pompa dalam
computer.
Tutup file sesuai petunjuk, lalu matikan computer.
Untuk mematikan, tekan tombol Off pada pompa, detector dan power secara
berurutan. Putuskan sambungan listrik.

5.6. Perhitungan hasil analisis

Dari hasil operasi instrumen akan diperoleh kurva kalibrasi. Bila kurva kalibrasi
diperoleh dengan koefisien regresi > 0,997, anda boleh melanjutkan perhitungan
kadar zat aditif dalam sampel. Hitunglah kadarnya dalam satuan % w/w
Bila tidak diperoleh kurva yang linier, maka lakukan diskusi untuk mencari
penyebabnya.

Page 17 of 21

INSTRUKSI KERJA GC
1. Tujuan
1.1. Mahasiswa dapat mengenal cara pengoperasian instrumen GC
1.2. Mahasiswa dapat memahami cara kerja instrumen GC untuk analisis kualitatif
1.3. Peserta dapat menentukan beberapa komponen dalam sampel premium, pertamak,
dan pertamak plus
2. Prinsip Dasar
Kromatografi gas merupakan teknik pemisahan komponen-komponen dalam suatu
campuran berdasarkan perbedaan distribusi komponen-komponen ke dalam 2 fasa, yaitu
fasa gerak berupa gas dan fasa diam bisa cairan atau padatan. Selain pemisahan,
kromatografi gas juga dapat melakukan pengukuran kadar komponen-komponen dalam
sampel.
Kromatografi gas merupakan salah satu teknik kromatografi yang bisa digunakan untuk
memisahkan senyawa-senyawa organik. Senyawa-senyawa tersebut harus mudah
menguap dan stabil pada temperatur pengujian. Senyawa yang sukar menguap atau tidak
stabil juga apat diukur tetapi harus melalui proses derivatisasi terlebih dahulu.
Komponen-komponen utama dalam instrumentasi kromatografi gas terdiri dari gas
pembawa, injektor, kolom, detektor dan recorder.
Kromatografi gas dapat digunakan untuk analisis kualitatif maupun kuantitatif. Analisis
kualitatif dilakukan dengan cara membandingkan waktu retensi, ko-kromatografi atau
spiking, dan spektrometri.
3. Alat dan Bahan
3.1. Alat
Perangkat GC
Botol vial
Gelas ukur 10 mL
3.2. Bahan
Standar Heksana p.a
Standar Toluena p.a
Standar Benzena p.a
Sampel premium
Sampel pertamak
Sampel pertamak plus
4. Langkah Kerja
4.1. Siapkan Larutan standard dengan cara mencampurkan 0,5 mL hexane; 0,5 mL
toluene dan 0,5 mL xilena.
4.2. Siapkan larutan sampel premium/pertamax/pertamax plus sebanyak 1 mL
4.3. Siapkan larutan campuran sampel dan standar masing-masing 0,5 mL
4.4. Simaklah operator dalam menyiapkan dan menjelaskan cara mengoperasikan
instrumen GC.
Seting gas pembawa dan gas pembakar
Menyalakan GC, diikuti computer.
Mengatur parameter operasional GC
Page 18 of 21

suhu injector 150C, suhu detector 250C, suhu awal kolom pada 40C kemudian
diprogram dengan kenaikan 8C permenit sampai 150C dipertahankan selama 2
menit , detector FID, kolom DB-5, gas pembawa H2 tekanan 4-5 Bar.
4.5. Ukurlah larutan standar, sampel dan campuran yang sudah disiapkan dengan
instrumen GC
Ambil sebanyak 0,5 L larutan yang akan diukur dengan syringe dan injeksikan
pada GC.
4.6. Simaklah operator mengukur dan mencetak hasil
4.7. Diskusikan hasil pengukuran dengan dosen praktikum

Page 19 of 21

INSTRUKSI KERJA AAS

1.

Tujuan
Melalui kegiatan ini diharapkan mahasiswa dapat:
a. mempreparasi sampel air limbah yang akan ditentukan kadar tembaganya dengan
alat spektrometer serapan atom.
b. menyiapkan larutan kerja dari larutan stock yang tersedia.
c. memahami prinsip penentuan kadar logam dalam suatu sampel dengan alat
spektrometer serapan atom.

2.

Prinsip Dasar
Metode AAS adalah metode spektrometri yang didasari oleh adanya serapan/absorpsi
cahaya ultra violet (uv) atau visible (vis) oleh atom-atom suatu unsur dalam keadaan
dasar yang berada di dalam nyala api. Cahaya UV atau vis yang diserap berasal dari
energi yang diemisikan oleh sumber energi tertentu.
Besarnya cahaya yang diserap oleh suatu atom dalam keadaan dasar sebanding dengan
konsentrasinya. Hal ini berdasarkan hukum Lambert-Beer yang secara sederhana
dirumuskan sebagai berikut:
A=abC
Keterangan:
A = absorbansi/ daya serap
a = absorftivitas
b = lebar kuvet (cm)
C = konsentrasi

Dengan cara kurva kalibrasi, yaitu hubungan linier antara absorbansi (sumbu Y) dan
konsentrasi (sumbu X), kita dapat menentukan konsentrasi suatu sampel.
Ada tiga komponen alat yang utama dalam SSA, yaitu (1) unit atomisasi, berupa nyala
api dari pembakaran bahan bakar tertentu dengan oksidan; (2) sumber energi, berupa
hollow cathode; dan (3) unit pengukur fotometrik, terutama berupa detektor yang
dapat mendeteksi intensitas cahaya yang melaluinya.
3.

Alat dan Bahan

a. Alat
Labu takar 50 mL
2 buah
Labu takar 25 mL
4 buah
Pipet tetes
1 buah
Gelas kimia 100 mL
1 buah
Gelas kimia 600 mL
1 buah
Corong kecil
1 buah
Pipet ukur 1 mL
1 buah
Hot plate
1 buah
Kaca arloji
1 buah
b. Bahan
Larutan HNO3 0,2M
Larutan stock Cu(II) 1000 ppm
Page 20 of 21

4.

Langkah Kerja
a. Preparasi sampel
Ambil 50 mL sampel dan masukkan ke dalam gelas kimia 100 mL.
Tambahkan 2,5 mL HNO3 pekat, aduk, kemudian uapkan di atas hot plate sampai
volumenya menjadi + 15 mL.
Tambahkan lagi 2,5 mL HNO3 pekat, tutup dengan kaca arloji dan panaskan
kembali sampai warna larutan jernih.
Dinginkan larutan sampel, tambahkan sedikit aquades dan tuangkan ke dalam
labu takar 50 mL
Tepatkan volume sampel sampai dengan 50 mL dengan cara menambahkan
aquades.
Jika masih ada yang tidak larut saring dengan kertas saring Whatmann.
b. Pembuatan Larutan blanko
Buatlah larutan blanko berupa larutan HNO3 yang memiliki pH 2,0.
c. Pembuatan larutan kerja Cu (II)
Buatlah larutan kerja Cu(II) dengan konsentrasi 5, 10, 15, 20, dan 25 ppm; dengan
cara mengencerkan larutan stock dengan larutan blanko.
Catatan:
Untuk larutan kerja konsentrasi terkecil dibuat dalam labu takar 50 mL, sedangkan
untuk larutan standar lainnya dibuat dalam labu takar 25 mL.
d. Pembuatan kurva kalibrasi dan pengukuran konsentrasi sampel
Ukur absorbansi masing-masing larutan kerja yang telah anda siapkan dimulai
dari konsentrasi terendah.
Ukur absorbansi larutan sampel.
Buat grafik hubungan absorbansi vs. konsentrasi dengan program Excell,
Tentukan persamaan matematik hubungan linier antara absorbansi dengan
konsentrasi.
Tentukan konsentrasi (ppm) tembaga(II) dalam larutan contoh uji.

Page 21 of 21