METODA PENGUJIAN

MIKROBIOLOGI AIR DENGAN

MENGGUNAKAN MEMBRAN
FILTER

Disampaikan pada:
Pelatihan Pengujian Kualitas Air Metode Filtrasi Membran
(Jakarta, 17 21 Juni 2013)

Pendahuluan

Air digunakan dalam proses pengolahan ikan

Monitoring kualitas mikrobiologi air masih
menggunakan metode cawan agar/SNI Produk
Perikanan
Tindak lanjut temuan ketidaksesuaian dari Tim
UE

Persyaratan kualitas air:

CD 98/83/EC
Persyaratan air untuk konsumsi manusia
Parameter
Clostridium
Total bacteria 22oC
37oC
E.coli
Enterococci
Pseudomonas aeroginosa

Standar Maksimal
0/100ml
100/ml
20/ml
0/250 ml
0/250 ml
0/250 ml

Persyaratan Air Minum :

(KepMenKes No.907/MenKes/SKVII/2002)
Parameter

Satuan

Persyaratan

E. coli

/100ml

Faecal Coliform

/100ml

Persyaratan Air Pada Sistem Distribusi:

(KepMenKes No.907/MenKes/SKVII/2002)

Parameter
E. coli
Faecal Coliform
Total Bakteri
Coliform

Satuan
/100ml

Persyaratan
0

/100ml
/100ml

0
0

CD 80/778/EEC: Check of Water Fishery Establisments

Peryaratan mikrobiologi air untuk pengolahan ikan

Parameter

Volume contoh Persyaratan max

(ml)
( membran filter)

Total Coliform

100

Fecal coliform

100

Fecal streptococci

100

Sulfate reducing
Clostridia

20

Pengujian Mikrobiologi Air :

Bahan :
air/es yang digunakan untuk pengolahan ikan

Peralatan :
- Filter Apparatus
- Vacum Pump
- Peralatan Glass.

Manifold Stainless Stell

Filter apparatus

Single membran steril

Vacuum Pump

LANGKAH LANGKAH METODE PENGUJIAN AIR DGN

MEMBRAN FILTER (MF)

LANGKAH-LANGKAH METODE PENGUJIAN AIR DGN

MEMBRAN FILTER (MF)

Pemilihan jenis membran filter sangat mempengaruhi hasil

pertumbuhan

Chromocult Coliform Agar

Comparison of different Membrane Filters
Filter

Colony colour

Growth

Inhibition Handling

Assessment

Gelman #66278 - Zellulosemischester - GN 6

Schleicher & Schuell # 406870 Zellulosemischester - ME25/21 ST
Schleicher & Schuell # 405370 Cellulosenitrate - NC45/20 ST
Whatman # 7060 4704 - Polycarbonat Cyclopore
Whatman # 7141 114 - Cellulosenitrate
Whatman # 7404 004 - Nylon
Schleicher & Schuell # 414112 - Polyamid NL17
Gelman # 61845 - Polyethersulfon - Supor
450
Gelman #66408 - Acrylcopolymer mit
Nylonsubstrat - Versapor 450
Gelman #66223 - Polysolfon - HT450
MILLIPORE # HTTP04700 - Polykarbonat
Sartorius # 13906-047ACN - Cellulosenitrat Typ : 139
Sartorius # 11106-047N - Celluloseacetat Typ : 111
Whatman # 6809 5022 - Anodisc 47
Whatman # 7153 104 - Mixed Esters
Whatman # 7000 0004 - Cellulose Acetate
MILLIPORE # HAWG04700 Zellulosemischester
MILLIPORE # HATF04700 Zellulosemischester - tritonfrei
Schleicher & Schuell # 404012 - Cellulose
Acetate - OE67
Asypor # ZDMA047-045AZ

++
++

++
++

++
++

++
++

++
++

++

++

++

++

o
o
o

+
+
+

++
++
++

+
o
+

o
o
o

++

++

+
o
-

o
+
+

++
++
++

+
-

o
o
-

++

+
+
+
+

++
++
++
++

o
+
o
+

++

++

++

Perbandingan pertumbuhan Coliform dan E coli

di berbagai jenis membran filter

Bakteri Coliform dan E. coli

Bakteri Coliform di membran filter

Metoda:

ISO 6222-1999
ISO 9308-2-2000
ISO 6461-2-1986
ISO 7899-2-2002

: ALT
: Coliform dan E. coli
: Sulfate reducing Clostridia
: Enterococci

Perhitungan intestinal Enterococci (ISO 7899- 2 2000)

100 ml contoh
koloni yang dihitung 20-80 koloni /filter

Membran filter

Pindah membran filter ke

Slanetz And Bartley Agar
Ink 36 2 0 C, 44 4 jam
Hentikan pengujian jika tipikal
koloni bukan berwarna merahpink

Pendugaan enterococci
Hit koloni tersangka :
berwarna merah,maroon
atau pink

Pindahkan membran filter ke Bile

Aesculine Azide Agar, yg telah di
panaskan 44 0 C
Ink 44 0,5 0 C, 2 jam

Penegasan intestinal enterococci

Hit koloni yang berwarna kuning
kecoklatan sampai hitam

Perhitungan Clostridium perfringens (ISO/WD-2 2002)

Air minum 100 ml contoh
koloni yang dihitung 20-80 koloni /filter

Membran filter

Pindah membran filter ke Tryptose

Sulphite Cycloserine Agar Without egg
Yolk (TSC Agar)
Ink 44 1 0 C, 21 3 jam (Anerobic )

Pendugaan Clostidium
perfringens :
Hit koloni tersangka :
berwarna hitam

Sub kultur ( >10 atau semua) koloni tersangka kedalam 2 plates Coulombia Blood Agar
Ink 36 2 0 C, 21 3 jam 1 plate aerobic dan 1 plate anaerobic

Nitrate-Motility test:
Ink Buffered Nitrate-Motility
Medium 36 2 0 C, 21 3 jam

Acid-Gelatin Liquification:
Ink Latose Gelatin Medium 36
2 0 C, 21 3 jam

Penegasan Clostridium perfringens: Hitung koloni hitam

Non-Motile

Mereduksi Nitrat
menjadi Nitrit

Memproduksi asam
dari Laktose

Gelatin mencair

UV

Clostridium perfringens
ATCC 10543

Clostridium perfringens
ATCC 13124

Perhitungan Sulphite reducing clostridia

(ISO 6461-2 1986 DIN EN 26461 : 1993-2)
Panaskan contoh 75 50 C, 15 min
(koloni yang dihitung 20-80 koloni /filter)

Membran filter

Pindahkan membran filter :

ke dalam Nutrient Agar dg sulphite dan besi (II)
sulphate atau
ke Tryptose Sulphite Agar
Ink 37 20 C, 20 4 dan 44 4 jam
(Anaerob)

Penegasan Sulphite reducing clostridia

Hit koloni yang berwarna putih dengan halo berwarna hitam