M ETO

TODA
DA PE
PEN GUJ
UJIIAN
M IK
IKR
RO BIO
IOLLO GI AIR DE
DEN
N GAN
MENGGUNAKAN MEMBRAN
FILTER

Disampaikan pad
Disampaikan pada:
a:
Pelati
Pelatihan
han Peng
Pengujia
ujiann Kua
Kualita
litass Air Meto
etode
de Filt
Filtrrasi Membr
embran
an
(Jakar
(Ja karta,
ta, 17 – 21 Juni 201
2013)
3)
Pendahuluan

 Air digunakan dalam proses pengolahan ikan

 Monitoring kualitas mikrobiologi air masih
menggunakan metode cawan agar/SNI Produk
Perikanan
 Tindak
Tindak lanjut temuan ketidaksesuaian dari Tim
UE
 Persyaratan kualitas air:
 CD 98/83/EC
Persyaratan air untuk konsumsi manusia

Parameter StandarMaksimal

Clostridium 0/ 100ml
Total bacteria 22 oC 100/ ml
37oC 20/ ml
E.coli 0/ 250 ml
Enterococci 0/ 250 ml
Pseudomonas aeroginosa 0/ 250 ml
Persyaratan Air Minum :
(KepMenKes No.907/MenKes/SKVII/2002)

Parameter Satuan Persyaratan

E. coli /100ml 0

Faecal Coliform /100ml 0

Persyaratan Air Pada Sistem Distribusi:
(KepMenKes No.907/MenKes/SKVII/2002)

Parameter Satuan Persyaratan

E. coli /100ml 0
Faecal Coliform /100ml 0
Total Bakteri /100ml 0
Coliform
CD 80/778/EEC: “Check of Water Fishery Establisments”
Peryaratan mikrobiologi air untuk pengolahan ikan

Parameter Volume contoh Persyaratan max

(ml) ( membran filter)

Total Coliform 100 0

Fecal coliform 100 0
Fecal streptococci 100 0
Sulfate reducing 20 -
Clostridia
 Pengujian Mikrobiologi Air :
 Bahan :
air/es yang digunakan untuk pengolahan ikan
 Peralatan :
- Filter Apparatus
- Vacum Pump
- Peralatan Glass.
Manifold Stainless Stell
Filter apparatus

Single membran steril

Vacuum Pump
LANGKAH –LANGKAH METODE PENGUJIAN AIR DGN
MEMBRAN FILTER (MF)

1 2 3

4 4
LANGKAH-LANGKAH METODE PENGUJIAN AIR DGN
MEMBRAN FILTER (MF)

Pemilihanjenis membranfilter sangatmempengaruhi hasil

pertumbuhan
 ®
Chromocult Colifor m Agar
Comp arison of diff erent Membrane Filters

Filter Colony colour G rowth Inhibition Handling Assessment

Gelman #66278 - Zellul osemisch ester - GN 6 ++ ++ ++ ++ ++
Schleicher & Schuell # 406870 - ++ ++ ++ ++ ++
Zellulo semischest er - ME25/21 ST
Schleicher & Schuell # 405370 - + ++ ++ ++ +
Cellulosenitrate - NC45/20 ST
Whatman # 7060 4704 - Polycarbonat - o + ++ + o
Cyclopore
Whatman # 7141 114 - Cellulosenit rate o + ++ + o
Whatman # 7404 004 - Nylon o + ++ o o
Schleicher & Schuell # 414112 - Polyamid - o + ++ + o
NL17
Gelman # 61845 - Polyet hersulfo n - Supor o + ++ o o
450
Gelman #66408 - Acrylco poly mer mit o o ++ + o
Nylonsubstrat - Versapor 450
Gelman #66223 - Polysolfon - HT450 + o ++ + o
MILLIPORE # HTTP04700 - Polykarbonat o + ++ - o
Sartorius # 13906-047ACN - Celluloseni trat - - + ++ - -
Typ : 139
Sartorius # 11106-047N - Celluloseacetat - - o ++ o -
Typ : 111
Whatman # 6809 5022 - Anodisc 47 - + ++ o -
Whatman # 7153 104 - Mixed Esters - + ++ + -
Whatman # 7000 0004 - Cellulose Acetate - + ++ o -
MILLIPORE # HAWG04700 - - + ++ + -
Zellulosemischester
MILLIPORE # HAT F04700 - - + ++ + -
Zellulosemischester - t ritonfrei
Schleicher & Sch uell # 404012 - Cellulose - + ++ o -
Ac eta te - OE67
As ypo r # ZDMA047-045AZ - - ++ + -
Perbandinganpertumbuhan Coliform dan Ecoli
di berbagai jenismembran filter
Bakteri Coliform dan E. coli
Bakteri Coliform di membran filter
 Metoda:
 ISO 6222-1999 : ALT
 ISO 9308-2-2000 : Coliformdan E. coli
 ISO 6461-2-1986 : Sulfate reducing Clostridia
 ISO 7899-2-2002 : Enterococci
 Perhitunganintestinal Enterococci (ISO 7899- 2 2000)

100 ml contoh
koloni yang dihitung 20-80 koloni / filter

Membranfilter

 Pindah membran filter ke Pendugaan enterococci

Slanetz And Bartley Agar Hit koloni tersangka :
 Ink 36 ± 2 0 C, 44 ± 4 jam berwarna merah,maroon
 Hentikan pengujian jika tipikal atau pink
koloni bukan berwarna merah-
pink

 Pindahkan membran filter ke Bile

Aesculine Azide Agar, yg telah di
panaskan44 0 C
 Ink 44 ± 0,5 0 C, 2 jam

Penegasan intestinal enterococci

Hit koloni yang berwarna kuning
kecoklatan sampai hitam
 PerhitunganClostridiumperfringens (ISO/WD-2 2002)

Air minum 100 ml contoh

koloni yang dihitung 20-80 koloni / filter

Membran filter

Pindah membran filter ke Tryptose Pendugaan Clostidium

UV
Sulphite Cycloserine Agar Without egg perfringens :
Yolk (TSC Agar) Hit koloni tersangka :
Ink 44 ± 1 0 C, 21 ± 3 jam (Anerobic ) berwarna hitam

 Sub kultur ( > 10 atau semua) koloni tersangka kedalam2 platesCoulombia Blood Agar
 Ink 36 ± 2 0 C, 21 ±3 jam 1 plate aerobic dan 1 plate anaerobic

Nitrate-Motility test: Acid-Gelatin Liquification:

 Ink Buffered Nitrate-Motility  Ink Latose Gelatin Medium 36
Medium 36 ± 2 0 C, 21 ±3 jam ± 2 0 C, 21 ± 3 jam

Penegasan Clostridium perf ringens: Hitung koloni hitam

Non-Motile Mereduksi Nitrat Memproduksi asam Gelatin mencair

menjadi Nitrit dari Laktose
Clostridium perfr ingens Clostridium perfr ingens
ATCC 10543 ATCC 13124
 PerhitunganSulphitereducingclostridia
(ISO 6461-2 1986 DIN EN 26461 : 1993-2)

Panaskan contoh 75 ± 50 C, 15 min

(koloni yang dihitung 20-80 koloni / filter)

Membran f ilter

Pindahkan membran filter :

 ke dalamNutrient Agar dg sulphite dan besi (II)
sulphate atau
 ke Tryptose Sulphite Agar
 Ink 37 ± 20 C, 20 ± 4 dan 44 ± 4 jam
(Anaerob)

PenegasanSulphite reducing clostridia

Hit koloni yang berwarna putih dengan halo berwarna hitam