SANTON TERMODIFIKASI DARI Garcinia Cylindrocarpa Kosterm.

BERSIFAT AKTIF ANTIMALARIA

Mahmiah dan Taslim Ersam Mahasiswa Pascasarjana Jurusan Kimia ITS Kelompok Penelitian Aktivitas Kimiawi Tumbuhan ITS

Utari Oemardy 1006775142

Metode Penelitian
Bahan Tumbuhan

Bahan yang digunakan terdiri dari kayu batang Garcinia cylindrocarpa yang diambil dari hutan SaumlakiKab. Maluku Tenggara Barat. Bahan Kimia Pelarut pelarut organik teknis dan p.a. (pro analisis) seperti nheksana, metilen klorida, kloroform, etil asetat, aseton, metanol, aquades, plat KLT, silika gel 60 7731, silikagel 60 7734, pereaksi penampak noda serium sulfat (Ce(SO4)2), kapas, kertas saring, aluminium foil, reagen geser UV yaitu NaOH, AlCl3 dan HCl, KBr, larutan aseton-d6 dan metanol (CD3OD) untuk NMR.

Lanjutan...............
Bahan Uji Antimalaria

Simpanan parasit P. falciparum (Strain 3D7), HEPES, RPMI 1640, natrium bikarbonat, hyposantin, gentamycin, air steril, darah manusia, larutan buffer fosfat, Natrium klorida, DMSO, klorokuin. Alat Peralatan yang digunakan pada penelitian ini adalah erlenmeyer, gelas kimia, gelas ukur, pipet kapiler, pipet tetes, spatula, pinset, bejana pengembang (chamber), maserator, lampu ultraviolet (UV) dengan 256 dan 366 nm, peralatan kromatografi cair vakum (KCV), rotary vacuum evaporator, neraca analitik, alat ukur titik leleh Fisher Johns, dan peralatan spektrofotometer UVVis 1700 Pharmastec Shimadzu , FT-IR Prestige-21 Shimadzu dan NMR Joel JMN ECA 500 MHz.

Ekstraksi dan Isolasi

Sampel batang Garcinia cylindrocarpa Kostern. sebanyak 3 kg diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan methanol pada suhu ruang selama 3x24 jam. Selanjutnya, hasil ekstraksi dimonitoring dengan kromatografi lapis tipis (KLT) untuk mengetahui adanya fraksi prospektif yang terkandung dalam ekstrak methanol. Ekstrak methanol kemudian dipekatkan menggunakan alat rotary vacuum evaporator dan dihasilkan ekstrak methanol pekat sebesar 130,7 g. Sebanyak 30 gram ekstrak pekat methanol batang Garcinia cylindrocarpa dilakukan proses pemisahan menggunakan metode Kromatografi Cair Vakum (KCV) menggunakan eluen campuran n-heksan dan etil asetat yang ditingkatkan kepolarannya. Dari hasil KVC tersebut dilakukan monitoring dengan KLT terhadap vial-vial yang diperoleh. Hasil monitoring menunjukkan terdapat 4 kelompok fraksi besar dengan harga Rf yang sama. Pada vial no. 11,12,13,dan 14 terbentuk kristal jarum berwarna kuning, yang selanjutnya dilakukan proses dekantasi untuk memisahkan endapan dari filtratnya. Kristal jarum berwarna kuning tersebut selanjutnya dicuci dengan campuran pelarut n-heksana dan etil asetat 10% dan dilakukakan uji kemurnian menggunakan tiga eluen yang berbeda kepolaran. Selanjutnya kristal jarum berwarna kuning sebanyak 22,5 mg disebut sebagai senyawa 1 dan siap dilakukan elusidasi struktur dan uji bioaktivitas sebagai antimalaria.

3 Kg kulit batang Garcinia cylindrocarpa

Ekstraksi secara Maserasi: +Metanol

Larutan ekstraktif
Dipekatkan dengan rotary vacum evaporator

Ekstrak pekat dalam Metanol sebanyak 130,7 g

Monitoring dengan KLT

30 g dipisahkan dengan KCV

Ditampung dalam vial-vial

Didapati kristal kuning dalam 4 vial

Monitoring dengan KLT

Dicuci dengan campuran pelarut n-heksan dan etil asetat 10%

22,5 mg kristal kuning

Uji kemurnian dengan 3 eluen berbeda

Elusidasi struktur: NMR, UV, IR

Uji antimalaria

Senyawa 1

Struktur Kimia Senyawa 1: 6-Hidroksi-1-metoksi-6,6dimetilpiran (2,3:3,4)-piran(2,3:7,8)santon

Uji Antimalaria
Uji bioaktivitas senyawa 1 sebagai antimalaria dilakukan secara in vitro dengan menggunakan Plasmodium falciparum strain 3D7 (sensitif klorokuin) yang dibiakkan secara aseptik dalam platwell 24 dan diinkubasi selama 48 jam. Hasil uji antimalaria senyawa 1 menunjukkan IC sebesar 0,208 g/mL. Bila dibandingkan dengan kloroquin yang memiliki IC50 50 sebesar 0,03 g/mL, senyawa 1 memiliki bioaktifitas sebagai antimalaria yang bersifat moderat (Fidock et al., 2000).

Daftar pustaka
Ersam, Taslim, Kelompok Penelitian Aktivitas Kimiawi Tumbuhan ITS, Mahasiswa Pascasarjana Jurusan Kimia ITS, Mahmiah. Santon Termodifikasi dari Garcinia Cylindrocarpa Kosterm. Bersifat Aktif Antimalaria. Surabaya: Institut Teksnologi Sepuluh November.