CANCER CHEMOPREVENTION RESEARCH CENTER Hal.

1 dari 3
FAKULTAS FARMASI UGM

Dokumen nomor : CCRC-02-009-00 Tanggal :

Mengganti nomor : - Tanggal : -

URAIAN DIBUAT OLEH DIPERIKSA OLEH DIPERIKSA OLEH DISETUJU OLEH

Jabatan Staf CCRC Staf CCRC Supervisor CCRC Pimpinan CCRC
Paraf

Nama Sendy Junedi Adam Hermawan Muthi Ikawati Edy Meiyanto

Tanggal

PROSEDUR TETAP

PREPARASI SAMPEL

DAFTAR ISI

HALAMAN
DAFTAR ISI 1
A. RIWAYAT REVISI DOKUMEN 2
B. TUJUAN 2
C. PENDAHULUAN 2
D. OPERASIONAL 2
I. Alat 2
II. Bahan 2
III. Prosedur Kerja 3
IV. Cara Pembuatan Seri Konsentrasi 3
 CANCER CHEMOPREVENTION RESEARCH CENTER Hal. 2 dari 3
FAKULTAS FARMASI UGM

Dokumen nomor : CCRC-02-009-00 Tanggal :

Mengganti nomor : - Tanggal : -

A. RIWAYAT REVISI DOKUMEN

No Tanggal Dibuat oleh Diperiksa oleh Diperiksa oleh Disetujui oleh
Dokumen
- Endah P Septi Riris Istighfari J Edy Meiyanto
Staff Supervisor Pimpinan
CCRC CCRC CCRC
Isi Menggunakan format lama
Belum ada penomoran dokumen
Belum ada prosedur pembuatan seri konsentrasi
No Tanggal Dibuat oleh Diperiksa oleh Diperiksa oleh Disetujui oleh
Dokumen
CCRC-02- Adam Aditya Muthi Edy Meiyanto
009-00 Hermawan Fitriasari Ikawati
Staff Staff Supervisor Pimpinan
CCRC CCRC CCRC CCRC
Isi Menggunakan format baru
Sudah ada penomoran dokumen
Sudah dicantumkan cara pembuatan seri konsentrasi

B. TUJUAN
Memberikan panduan secara bertahap dan detail mengenai cara preparasi sample.

C. PENDAHULUAN
Sampel yang akan diujikan ke dalam kultur sel harus memenuhi persyaratan utama yaitu larut
dalam media kultur dan kelarutanya tersebut dibantu oleh cosolvent seperti DMSO. Dalam
membuat seri konsentrasi sampel untuk pengujian perlu diperhatikan kelipatan konsentrasi agar
hasil regresi yang diperoleh yang baik yang sesuai dengan standar.

D. OPERASIONAL
I. Alat:
1. Mikropipet 20, 200, 1000 L
2. Tabung reaksi kecil
3. Rak tabung kecil
4. Vortex
5. Conical tube
6. Eppendorf
7. Timbangan analitik

II. Bahan:
1. MK (DMEM/RPMI)
2. DMSO
 CANCER CHEMOPREVENTION RESEARCH CENTER Hal. 3 dari 3
FAKULTAS FARMASI UGM

Dokumen nomor : CCRC-02-009-00 Tanggal :

Mengganti nomor : - Tanggal : -

III. Prosedur Kerja

No Prosedur Kerja Perhatian

1. Timbang sampel kurang lebih 5 mg dengan saksama -
di dalam eppendorf.
2. Uji kelarutan sampel dalam DMSO -
3. Tambahkan 50 l DMSO dan coba larutkan dengan -
bantuan vortex.
4. Jika belum larut, tambahkan 50 l DMSO lagi dan -
larutkan kembali.
5. Buat baru stok sampel dalam DMSO setiap kali akan -
digunakan untuk perlakuan (recentur paratus).
6. Buat seri kadar sampel dengan pengenceran stok -
dalam DMSO menggunakan MK. Jika terjadi
endapan pada pengenceran pertama, jangan
dilanjutkan dan pikirkan dahulu solusinya agar
sampel dapat larut, kemudian ulangi lagi pembuatan
seri kadar dari stok DMSO.

IV. Cara Pembuatan Seri Konsentrasi

1. Buat 7-8 seri konsentrasi sampel antara 1 1000 g/mL (ppm) dengan kelipatan antar
konsentrasi sesuai dengan rumus berikut :

Cara menghitung angka kelipatan (f)

f = n-1 (Dt/Dr)
n = banyaknya dosis
Dt = dosis tertinggi
Dr = dosis terendah
Misal: Akan dibuat 6 seri dosis, dengan rentang 1 1024 g/mL, maka
f = 6-1 (1024/1) = 4
Maka seri konsentrasi uji adalah 1, 4, 16, 64, 64, 256 dan 1000 g/mL

2. Volume akhir tiap seri konsentrasi untuk perlakuan dibuat 400 l (100 l/sumuran, triplo).